From 1e77c47f20f2f1439a63641c8fd6af480ad0e77c Mon Sep 17 00:00:00 2001 From: CI Date: Mon, 29 Jul 2024 13:51:23 +0000 Subject: [PATCH] Build branch qualimap with version qualimap (58d7dac) Build pipeline: viash-hub.biobox.qualimap-nmgj2 Source commit: https://github.com/viash-hub/biobox/commit/58d7dacfc28af316aebc8f11c3facc6c9671e94b Source message: Update src/qualimap/qualimap_rnaseq/script.sh Co-authored-by: Robrecht Cannoodt --- .gitignore | 18 + CHANGELOG.md | 107 + CONTRIBUTING.md | 383 + LICENSE | 21 + README.md | 72 + README.qmd | 62 + _viash.yaml | 13 + main.nf | 3 + nextflow.config | 6 + src/arriba/config.vsh.yaml | 385 + src/arriba/help.txt | 198 + src/arriba/script.sh | 54 + src/arriba/test.sh | 45 + src/arriba/test_data/A.bam | Bin 0 -> 296 bytes src/arriba/test_data/annotation.gtf | 6 + src/arriba/test_data/blacklist.tsv | 0 src/arriba/test_data/genome.fasta | 4 + src/arriba/test_data/script.sh | 10 + src/bcl_convert/config.vsh.yaml | 159 + src/bcl_convert/help.txt | 38 + 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.../lofreq/lofreq_indelqual/.config.vsh.yaml | 223 + .../lofreq/lofreq_indelqual/lofreq_indelqual | 1174 ++ target/executable/multiqc/.config.vsh.yaml | 468 + target/executable/multiqc/multiqc | 1944 +++ target/executable/pear/.config.vsh.yaml | 406 + target/executable/pear/pear | 1671 +++ target/executable/qualimap/.config.vsh.yaml | 298 + target/executable/qualimap/qualimap | 1403 +++ .../salmon/salmon_index/.config.vsh.yaml | 289 + .../salmon/salmon_index/salmon_index | 1388 +++ .../salmon/salmon_quant/.config.vsh.yaml | 1185 ++ .../salmon/salmon_quant/salmon_quant | 3887 ++++++ .../samtools_collate/.config.vsh.yaml | 276 + .../samtools_collate/samtools_collate | 1338 +++ .../samtools/samtools_faidx/.config.vsh.yaml | 255 + .../samtools/samtools_faidx/samtools_faidx | 1286 ++ .../samtools/samtools_fasta/.config.vsh.yaml | 445 + .../samtools/samtools_fasta/samtools_fasta | 1761 +++ .../samtools/samtools_fastq/.config.vsh.yaml | 445 + .../samtools/samtools_fastq/samtools_fastq | 1762 +++ .../samtools_flagstat/.config.vsh.yaml | 185 + .../samtools_flagstat/samtools_flagstat | 1075 ++ .../samtools_idxstats/.config.vsh.yaml | 195 + .../samtools_idxstats/samtools_idxstats | 1099 ++ .../samtools/samtools_index/.config.vsh.yaml | 201 + .../samtools/samtools_index/samtools_index | 1146 ++ .../samtools/samtools_sort/.config.vsh.yaml | 344 + .../samtools/samtools_sort/samtools_sort | 1542 +++ .../samtools/samtools_stats/.config.vsh.yaml | 406 + .../samtools/samtools_stats/samtools_stats | 1699 +++ .../samtools/samtools_view/.config.vsh.yaml | 677 ++ .../samtools/samtools_view/samtools_view | 2333 ++++ .../star/star_align_reads/.config.vsh.yaml | 2134 ++++ .../star/star_align_reads/star_align_reads | 5422 +++++++++ .../star_genome_generate/.config.vsh.yaml | 345 + .../star_genome_generate/star_genome_generate | 1462 +++ .../umi_tools_dedup/.config.vsh.yaml | 623 + .../umi_tools/umi_tools_dedup/umi_tools_dedup | 2167 ++++ target/nextflow/arriba/.config.vsh.yaml | 714 ++ 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435 + target/nextflow/busco/busco_run/main.nf | 3894 ++++++ .../nextflow/busco/busco_run/nextflow.config | 125 + .../busco/busco_run/nextflow_schema.json | 471 + target/nextflow/cutadapt/.config.vsh.yaml | 753 ++ target/nextflow/cutadapt/main.nf | 4412 +++++++ target/nextflow/cutadapt/nextflow.config | 125 + target/nextflow/cutadapt/nextflow_schema.json | 775 ++ target/nextflow/falco/.config.vsh.yaml | 330 + target/nextflow/falco/main.nf | 3696 ++++++ target/nextflow/falco/nextflow.config | 125 + target/nextflow/falco/nextflow_schema.json | 227 + target/nextflow/fastp/.config.vsh.yaml | 1091 ++ target/nextflow/fastp/main.nf | 4684 ++++++++ target/nextflow/fastp/nextflow.config | 125 + target/nextflow/fastp/nextflow_schema.json | 1131 ++ .../nextflow/featurecounts/.config.vsh.yaml | 657 + target/nextflow/featurecounts/main.nf | 4173 +++++++ target/nextflow/featurecounts/nextflow.config | 125 + .../featurecounts/nextflow_schema.json | 726 ++ target/nextflow/gffread/.config.vsh.yaml | 697 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target/executable/busco/busco_download_datasets/busco_download_datasets create mode 100644 target/executable/busco/busco_list_datasets/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/busco/busco_list_datasets/busco_list_datasets create mode 100644 target/executable/busco/busco_run/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/busco/busco_run/busco_run create mode 100644 target/executable/cutadapt/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/cutadapt/cutadapt create mode 100644 target/executable/falco/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/falco/falco create mode 100644 target/executable/fastp/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/fastp/fastp create mode 100644 target/executable/featurecounts/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/featurecounts/featurecounts create mode 100644 target/executable/gffread/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/gffread/gffread create mode 100644 target/executable/lofreq/lofreq_call/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/lofreq/lofreq_call/lofreq_call create mode 100644 target/executable/lofreq/lofreq_indelqual/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/lofreq/lofreq_indelqual/lofreq_indelqual create mode 100644 target/executable/multiqc/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/multiqc/multiqc create mode 100644 target/executable/pear/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/pear/pear create mode 100644 target/executable/qualimap/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/qualimap/qualimap create mode 100644 target/executable/salmon/salmon_index/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/salmon/salmon_index/salmon_index create mode 100644 target/executable/salmon/salmon_quant/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/salmon/salmon_quant/salmon_quant create mode 100644 target/executable/samtools/samtools_collate/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/samtools/samtools_collate/samtools_collate create mode 100644 target/executable/samtools/samtools_faidx/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/samtools/samtools_faidx/samtools_faidx create mode 100644 target/executable/samtools/samtools_fasta/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/samtools/samtools_fasta/samtools_fasta create mode 100644 target/executable/samtools/samtools_fastq/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/samtools/samtools_fastq/samtools_fastq create mode 100644 target/executable/samtools/samtools_flagstat/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/samtools/samtools_flagstat/samtools_flagstat create mode 100644 target/executable/samtools/samtools_idxstats/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/samtools/samtools_idxstats/samtools_idxstats create mode 100644 target/executable/samtools/samtools_index/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/samtools/samtools_index/samtools_index create mode 100644 target/executable/samtools/samtools_sort/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/samtools/samtools_sort/samtools_sort create mode 100644 target/executable/samtools/samtools_stats/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/samtools/samtools_stats/samtools_stats create mode 100644 target/executable/samtools/samtools_view/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/samtools/samtools_view/samtools_view create mode 100644 target/executable/star/star_align_reads/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/star/star_align_reads/star_align_reads create mode 100644 target/executable/star/star_genome_generate/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/star/star_genome_generate/star_genome_generate create mode 100644 target/executable/umi_tools/umi_tools_dedup/.config.vsh.yaml create mode 100755 target/executable/umi_tools/umi_tools_dedup/umi_tools_dedup create mode 100644 target/nextflow/arriba/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/arriba/main.nf create mode 100644 target/nextflow/arriba/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/arriba/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/bcl_convert/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/bcl_convert/main.nf create mode 100644 target/nextflow/bcl_convert/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/bcl_convert/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/bedtools/bedtools_getfasta/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/bedtools/bedtools_getfasta/main.nf create mode 100644 target/nextflow/bedtools/bedtools_getfasta/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/bedtools/bedtools_getfasta/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_download_datasets/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_download_datasets/main.nf create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_download_datasets/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_download_datasets/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_list_datasets/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_list_datasets/main.nf create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_list_datasets/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_list_datasets/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_run/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_run/main.nf create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_run/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/busco/busco_run/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/cutadapt/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/cutadapt/main.nf create mode 100644 target/nextflow/cutadapt/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/cutadapt/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/falco/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/falco/main.nf create mode 100644 target/nextflow/falco/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/falco/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/fastp/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/fastp/main.nf create mode 100644 target/nextflow/fastp/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/fastp/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/featurecounts/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/featurecounts/main.nf create mode 100644 target/nextflow/featurecounts/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/featurecounts/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/gffread/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/gffread/main.nf create mode 100644 target/nextflow/gffread/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/gffread/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/lofreq/lofreq_call/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/lofreq/lofreq_call/main.nf create mode 100644 target/nextflow/lofreq/lofreq_call/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/lofreq/lofreq_call/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/lofreq/lofreq_indelqual/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/lofreq/lofreq_indelqual/main.nf create mode 100644 target/nextflow/lofreq/lofreq_indelqual/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/lofreq/lofreq_indelqual/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/multiqc/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/multiqc/main.nf create mode 100644 target/nextflow/multiqc/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/multiqc/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/pear/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/pear/main.nf create mode 100644 target/nextflow/pear/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/pear/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/qualimap/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/qualimap/main.nf create mode 100644 target/nextflow/qualimap/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/qualimap/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/salmon/salmon_index/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/salmon/salmon_index/main.nf create mode 100644 target/nextflow/salmon/salmon_index/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/salmon/salmon_index/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/salmon/salmon_quant/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/salmon/salmon_quant/main.nf create mode 100644 target/nextflow/salmon/salmon_quant/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/salmon/salmon_quant/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_collate/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_collate/main.nf create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_collate/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_collate/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_faidx/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_faidx/main.nf create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_faidx/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_faidx/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_fasta/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_fasta/main.nf create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_fasta/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_fasta/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_fastq/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_fastq/main.nf create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_fastq/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_fastq/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_flagstat/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_flagstat/main.nf create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_flagstat/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_flagstat/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_idxstats/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_idxstats/main.nf create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_idxstats/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_idxstats/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_index/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_index/main.nf create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_index/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_index/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_sort/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_sort/main.nf create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_sort/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_sort/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_stats/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_stats/main.nf create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_stats/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_stats/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_view/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_view/main.nf create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_view/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/samtools/samtools_view/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/star/star_align_reads/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/star/star_align_reads/main.nf create mode 100644 target/nextflow/star/star_align_reads/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/star/star_align_reads/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/star/star_genome_generate/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/star/star_genome_generate/main.nf create mode 100644 target/nextflow/star/star_genome_generate/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/star/star_genome_generate/nextflow_schema.json create mode 100644 target/nextflow/umi_tools/umi_tools_dedup/.config.vsh.yaml create mode 100644 target/nextflow/umi_tools/umi_tools_dedup/main.nf create mode 100644 target/nextflow/umi_tools/umi_tools_dedup/nextflow.config create mode 100644 target/nextflow/umi_tools/umi_tools_dedup/nextflow_schema.json diff --git a/.gitignore b/.gitignore new file mode 100644 index 00000000..2a64eaac --- /dev/null +++ b/.gitignore @@ -0,0 +1,18 @@ +*.DS_Store +*__pycache__ + +# IDE ignores +.idea/ +.vscode/ + +# R specific ignores +.Rhistory +.Rproj.user +*.Rproj + +# viash specific ignores +target/ + +# nextflow specific ignores +.nextflow* +work diff --git a/CHANGELOG.md b/CHANGELOG.md new file mode 100644 index 00000000..4d2dbbab --- /dev/null +++ b/CHANGELOG.md @@ -0,0 +1,107 @@ +# biobox x.x.x + +## BUG FIXES + +* `pear`: fix component not exiting with the correct exitcode when PEAR fails. + +* `cutadapt`: fix `--par_quality_cutoff_r2` argument. + +* `cutadapt`: demultiplexing is now disabled by default. It can be re-enabled by using `demultiplex_mode`. + +* `multiqc`: update multiple separator to `;` (PR #81). + +## MINOR CHANGES + +* `busco` components: update BUSCO to `5.7.1`. + +## NEW FEATURES + +* `qualimap/qualimap_rnaseq`: RNA-seq QC analysis using qualimap (PR #74). + +# biobox 0.1.0 + +## BREAKING CHANGES + +* Change default `multiple_sep` to `;` (PR #25). This aligns with an upcoming breaking change in + Viash 0.9.0 in order to avoid issues with the current default separator `:` unintentionally + splitting up certain file paths. + + +## NEW FEATURES + +* `arriba`: Detect gene fusions from RNA-seq data (PR #1). + +* `fastp`: An ultra-fast all-in-one FASTQ preprocessor (PR #3). + +* `busco`: + - `busco/busco_run`: Assess genome assembly and annotation completeness with single copy orthologs (PR #6). + - `busco/busco_list_datasets`: Lists available busco datasets (PR #18). + - `busco/busco_download_datasets`: Download busco datasets (PR #19). + +* `cutadapt`: Remove adapter sequences from high-throughput sequencing reads (PR #7). + +* `featurecounts`: Assign sequence reads to genomic features (PR #11). + +* `bgzip`: Add bgzip functionality to compress and decompress files (PR #13). + +* `pear`: Paired-end read merger (PR #10). + +* `lofreq/call`: Call variants from a BAM file (PR #17). + +* `lofreq/indelqual`: Insert indel qualities into BAM file (PR #17). + +* `multiqc`: Aggregate results from bioinformatics analyses across many samples into a single report (PR #42). + +* `star`: + - `star/star_align_reads`: Align reads to a reference genome (PR #22). + - `star/star_genome_generate`: Generate a genome index for STAR alignment (PR #58). + +* `gffread`: Validate, filter, convert and perform other operations on GFF files (PR #29). + +* `salmon`: + - `salmon/salmon_index`: Create a salmon index for the transcriptome to use Salmon in the mapping-based mode (PR #24). + - `salmon/salmon_quant`: Transcript quantification from RNA-seq data (PR #24). + +* `samtools`: + - `samtools/samtools_flagstat`: Counts the number of alignments in SAM/BAM/CRAM files for each FLAG type (PR #31). + - `samtools/samtools_idxstats`: Reports alignment summary statistics for a SAM/BAM/CRAM file (PR #32). + - `samtools/samtools_index`: Index SAM/BAM/CRAM files (PR #35). + - `samtools/samtools_sort`: Sort SAM/BAM/CRAM files (PR #36). + - `samtools/samtools_stats`: Reports alignment summary statistics for a BAM file (PR #39). + - `samtools/samtools_faidx`: Indexes FASTA files to enable random access to fasta and fastq files (PR #41). + - `samtools/samtools_collate`: Shuffles and groups reads in SAM/BAM/CRAM files together by their names (PR #42). + - `samtools/samtools_view`: Views and converts SAM/BAM/CRAM files (PR #48). + - `samtools/samtools_fastq`: Converts a SAM/BAM/CRAM file to FASTQ (PR #52). + - `samtools/samtools_fastq`: Converts a SAM/BAM/CRAM file to FASTA (PR #53). + + +* `falco`: A C++ drop-in replacement of FastQC to assess the quality of sequence read data (PR #43). + +* `umitools`: + - `umitools_dedup`: Deduplicate reads based on the mapping co-ordinate and the UMI attached to the read (PR #54). + +* `bedtools`: + - `bedtools_getfasta`: extract sequences from a FASTA file for each of the + intervals defined in a BED/GFF/VCF file (PR #59). + +## MINOR CHANGES + +* Uniformize component metadata (PR #23). + +* Update to Viash 0.8.5 (PR #25). + +* Update to Viash 0.9.0-RC3 (PR #51). + +* Update to Viash 0.9.0-RC6 (PR #63). + +* Switch to viash-hub/toolbox actions (PR #64). + +## DOCUMENTATION + +* Update README (PR #64). + +## BUG FIXES + +* Add escaping character before leading hashtag in the description field of the config file (PR #50). + +* Format URL in biobase/bcl_convert description (PR #55). \ No newline at end of file diff --git a/CONTRIBUTING.md b/CONTRIBUTING.md new file mode 100644 index 00000000..7393bc7e --- /dev/null +++ b/CONTRIBUTING.md @@ -0,0 +1,383 @@ + +# Contributing guidelines + +We encourage contributions from the community. To contribute: + +1. **Fork the Repository**: Start by forking this repository to your account. +2. **Develop Your Component**: Create your Viash component, ensuring it aligns with our best practices (detailed below). +3. **Submit a Pull Request**: After testing your component, submit a pull request for review. + +## Procedure of adding a component + +### Step 1: Find a component to contribute + +* Find a tool to contribute to this repo. + +* Check whether it is already in the [Project board](https://github.com/orgs/viash-hub/projects/1). + +* Check whether there is a corresponding [Snakemake wrapper](https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers/blob/master/bio) or [nf-core module](https://github.com/nf-core/modules/tree/master/modules/nf-core) which we can use as inspiration. + +* Create an issue to show that you are working on this component. + + +### Step 2: Add config template + +Change all occurrences of `xxx` to the name of the component. + +Create a file at `src/xxx/config.vsh.yaml` with contents: + +```yaml +name: xxx +description: xxx +keywords: [tag1, tag2] +links: + homepage: yyy + documentation: yyy + issue_tracker: yyy + repository: yyy +references: + doi: 12345/12345678.yz +license: MIT/Apache-2.0/GPL-3.0/... +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: <...> + - name: Outputs + arguments: <...> + - name: Arguments + arguments: <...> +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - <...> +runners: + - type: executable + - type: nextflow +``` + +### Step 3: Fill in the metadata + +Fill in the relevant metadata fields in the config. Here is an example of the metadata of an existing component. + +```yaml +functionality: + name: arriba + description: Detect gene fusions from RNA-Seq data + keywords: [Gene fusion, RNA-Seq] + links: + homepage: https://arriba.readthedocs.io/en/latest/ + documentation: https://arriba.readthedocs.io/en/latest/ + repository: https://github.com/suhrig/arriba + issue_tracker: https://github.com/suhrig/arriba/issues + references: + doi: 10.1101/gr.257246.119 + bibtex: | + @article{ + ... a bibtex entry in case the doi is not available ... + } + license: MIT +``` + +### Step 4: Find a suitable container + +Google `biocontainer ` and find the container that is most suitable. Typically the link will be `https://quay.io/repository/biocontainers/xxx?tab=tags`. + +If no such container is found, you can create a custom container in the next step. + + +### Step 5: Create help file + +To help develop the component, we store the `--help` output of the tool in a file at `src/xxx/help.txt`. + +````bash +cat < src/xxx/help.txt +```sh +xxx --help +``` +EOF + +docker run quay.io/biocontainers/xxx:tag xxx --help >> src/xxx/help.txt +```` + +Notes: + +* This help file has no functional purpose, but it is useful for the developer to see the help output of the tool. + +* Some tools might not have a `--help` argument but instead have a `-h` argument. For example, for `arriba`, the help message is obtained by running `arriba -h`: + + ```bash + docker run quay.io/biocontainers/arriba:2.4.0--h0033a41_2 arriba -h + ``` + + +### Step 6: Create or fetch test data + +To help develop the component, it's interesting to have some test data available. In most cases, we can use the test data from the Snakemake wrappers. + +To make sure we can reproduce the test data in the future, we store the command to fetch the test data in a file at `src/xxx/test_data/script.sh`. + +```bash +cat < src/xxx/test_data/script.sh + +# clone repo +if [ ! -d /tmp/snakemake-wrappers ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers /tmp/snakemake-wrappers +fi + +# copy test data +cp -r /tmp/snakemake-wrappers/bio/xxx/test/* src/xxx/test_data +EOF +``` + +The test data should be suitable for testing this component. Ensure that the test data is small enough: ideally <1KB, preferably <10KB, if need be <100KB. + +### Step 7: Add arguments for the input files + +By looking at the help file, we add the input arguments to the config file. Here is an example of the input arguments of an existing component. + +For instance, in the [arriba help file](src/arriba/help.txt), we see the following: + + Usage: arriba [-c Chimeric.out.sam] -x Aligned.out.bam \ + -g annotation.gtf -a assembly.fa [-b blacklists.tsv] [-k known_fusions.tsv] \ + [-t tags.tsv] [-p protein_domains.gff3] [-d structural_variants_from_WGS.tsv] \ + -o fusions.tsv [-O fusions.discarded.tsv] \ + [OPTIONS] + + -x FILE File in SAM/BAM/CRAM format with main alignments as generated by STAR + (Aligned.out.sam). Arriba extracts candidate reads from this file. + +Based on this information, we can add the following input arguments to the config file. + +```yaml +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --bam + alternatives: -x + type: file + description: | + File in SAM/BAM/CRAM format with main alignments as generated by STAR + (Aligned.out.sam). Arriba extracts candidate reads from this file. + required: true + example: Aligned.out.bam +``` + +Check the [documentation](https://viash.io/reference/config/functionality/arguments) for more information on the format of input arguments. + +Several notes: + +* Argument names should be formatted in `--snake_case`. This means arguments like `--foo-bar` should be formatted as `--foo_bar`, and short arguments like `-f` should receive a longer name like `--foo`. + +* Input arguments can have `multiple: true` to allow the user to specify multiple files. + + + +### Step 8: Add arguments for the output files + +By looking at the help file, we now also add output arguments to the config file. + +For example, in the [arriba help file](src/arriba/help.txt), we see the following: + + + Usage: arriba [-c Chimeric.out.sam] -x Aligned.out.bam \ + -g annotation.gtf -a assembly.fa [-b blacklists.tsv] [-k known_fusions.tsv] \ + [-t tags.tsv] [-p protein_domains.gff3] [-d structural_variants_from_WGS.tsv] \ + -o fusions.tsv [-O fusions.discarded.tsv] \ + [OPTIONS] + + -o FILE Output file with fusions that have passed all filters. + + -O FILE Output file with fusions that were discarded due to filtering. + +Based on this information, we can add the following output arguments to the config file. + +```yaml +argument_groups: + - name: Outputs + arguments: + - name: --fusions + alternatives: -o + type: file + direction: output + description: | + Output file with fusions that have passed all filters. + required: true + example: fusions.tsv + - name: --fusions_discarded + alternatives: -O + type: file + direction: output + description: | + Output file with fusions that were discarded due to filtering. + required: false + example: fusions.discarded.tsv +``` + +Note: + +* Preferably, these outputs should not be directores but files. For example, if a tool outputs a directory `foo/` containing files `foo/bar.txt` and `foo/baz.txt`, there should be two output arguments `--bar` and `--baz` (as opposed to one output argument which outputs the whole `foo/` directory). + +### Step 9: Add arguments for the other arguments + +Finally, add all other arguments to the config file. There are a few exceptions: + +* Arguments related to specifying CPU and memory requirements are handled separately and should not be added to the config file. + +* Arguments related to printing the information such as printing the version (`-v`, `--version`) or printing the help (`-h`, `--help`) should not be added to the config file. + + +### Step 10: Add a Docker engine + +To ensure reproducibility of components, we require that all components are run in a Docker container. + +```yaml +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/xxx:0.1.0--py_0 +``` + +The container should have your tool installed, as well as `ps`. + +If you didn't find a suitable container in the previous step, you can create a custom container. For example: + +```yaml +engines: + - type: docker + image: python:3.10 + setup: + - type: python + packages: numpy +``` + +For more information on how to do this, see the [documentation](https://viash.io/guide/component/add-dependencies.html#steps-for-creating-a-custom-docker-platform). + +Here is a list of base containers we can recommend: + +* Bash: [`bash`](https://hub.docker.com/_/bash), [`ubuntu`](https://hub.docker.com/_/ubuntu) +* C#: [`ghcr.io/data-intuitive/dotnet-script`](https://github.com/data-intuitive/ghcr-dotnet-script/pkgs/container/dotnet-script) +* JavaScript: [`node`](https://hub.docker.com/_/node) +* Python: [`python`](https://hub.docker.com/_/python), [`nvcr.io/nvidia/pytorch`](https://catalog.ngc.nvidia.com/orgs/nvidia/containers/pytorch) +* R: [`eddelbuettel/r2u`](https://hub.docker.com/r/eddelbuettel/r2u), [`rocker/tidyverse`](https://hub.docker.com/r/rocker/tidyverse) +* Scala: [`sbtscala/scala-sbt`](https://hub.docker.com/r/sbtscala/scala-sbt) + +### Step 11: Write a runner script + +Next, we need to write a runner script that runs the tool with the input arguments. Create a Bash script named `src/xxx/script.sh` which runs the tool with the input arguments. + +```bash +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +xxx \ + --input "$par_input" \ + --output "$par_output" \ + $([ "$par_option" = "true" ] && echo "--option") +``` + +When building a Viash component, Viash will automatically replace the `## VIASH START` and `## VIASH END` lines (and anything in between) with environment variables based on the arguments specified in the config. + +As an example, this is what the Bash script for the `arriba` component looks like: + +```bash +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +arriba \ + -x "$par_bam" \ + -a "$par_genome" \ + -g "$par_gene_annotation" \ + -o "$par_fusions" \ + ${par_known_fusions:+-k "${par_known_fusions}"} \ + ${par_blacklist:+-b "${par_blacklist}"} \ + ${par_structural_variants:+-d "${par_structural_variants}"} \ + $([ "$par_skip_duplicate_marking" = "true" ] && echo "-u") \ + $([ "$par_extra_information" = "true" ] && echo "-X") \ + $([ "$par_fill_gaps" = "true" ] && echo "-I") +``` + + +### Step 12: Create test script + + +If the unit test requires test resources, these should be provided in the `test_resources` section of the component. + +```yaml +functionality: + # ... + test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +``` + +Create a test script at `src/xxx/test.sh` that runs the component with the test data. This script should run the component (available with `$meta_executable`) with the test data and check if the output is as expected. The script should exit with a non-zero exit code if the output is not as expected. For example: + +```bash +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +echo "> Run xxx with test data" +"$meta_executable" \ + --input "$meta_resources_dir/test_data/input.txt" \ + --output "output.txt" \ + --option + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "output.txt" ] && echo "Output file output.txt does not exist" && exit 1 +``` + + +For example, this is what the test script for the `arriba` component looks like: + +```bash +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +echo "> Run arriba with blacklist" +"$meta_executable" \ + --bam "$meta_resources_dir/test_data/A.bam" \ + --genome "$meta_resources_dir/test_data/genome.fasta" \ + --gene_annotation "$meta_resources_dir/test_data/annotation.gtf" \ + --blacklist "$meta_resources_dir/test_data/blacklist.tsv" \ + --fusions "fusions.tsv" \ + --fusions_discarded "fusions_discarded.tsv" \ + --interesting_contigs "1,2" + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "fusions.tsv" ] && echo "Output file fusions.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -f "fusions_discarded.tsv" ] && echo "Output file fusions_discarded.tsv does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "fusions.tsv" ] && echo "Output file fusions.tsv is empty" && exit 1 +[ ! -s "fusions_discarded.tsv" ] && echo "Output file fusions_discarded.tsv is empty" && exit 1 +``` + +### Step 12: Create a `/var/software_versions.txt` file + +For the sake of transparency and reproducibility, we require that the versions of the software used in the component are documented. + +For now, this is managed by creating a file `/var/software_versions.txt` in the `setup` section of the Docker engine. + +```yaml +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/xxx:0.1.0--py_0 + setup: + - type: docker + run: | + echo "xxx: \"0.1.0\"" > /var/software_versions.txt +``` diff --git a/LICENSE b/LICENSE new file mode 100644 index 00000000..968d811c --- /dev/null +++ b/LICENSE @@ -0,0 +1,21 @@ +MIT License + +Copyright (c) 2024 Data Intuitive + +Permission is hereby granted, free of charge, to any person obtaining a copy +of this software and associated documentation files (the "Software"), to deal +in the Software without restriction, including without limitation the rights +to use, copy, modify, merge, publish, distribute, sublicense, and/or sell +copies of the Software, and to permit persons to whom the Software is +furnished to do so, subject to the following conditions: + +The above copyright notice and this permission notice shall be included in all +copies or substantial portions of the Software. + +THE SOFTWARE IS PROVIDED "AS IS", WITHOUT WARRANTY OF ANY KIND, EXPRESS OR +IMPLIED, INCLUDING BUT NOT LIMITED TO THE WARRANTIES OF MERCHANTABILITY, +FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE AND NONINFRINGEMENT. IN NO EVENT SHALL THE +AUTHORS OR COPYRIGHT HOLDERS BE LIABLE FOR ANY CLAIM, DAMAGES OR OTHER +LIABILITY, WHETHER IN AN ACTION OF CONTRACT, TORT OR OTHERWISE, ARISING FROM, +OUT OF OR IN CONNECTION WITH THE SOFTWARE OR THE USE OR OTHER DEALINGS IN THE +SOFTWARE. diff --git a/README.md b/README.md new file mode 100644 index 00000000..4b497dcd --- /dev/null +++ b/README.md @@ -0,0 +1,72 @@ + + +# 🌱📦 biobox + +[![ViashHub](https://img.shields.io/badge/ViashHub-biobox-7a4baa.png)](https://web.viash-hub.com/packages/biobox) +[![GitHub](https://img.shields.io/badge/GitHub-viash--hub%2Fbiobox-blue.png)](https://github.com/viash-hub/biobox) +[![GitHub +License](https://img.shields.io/github/license/viash-hub/biobox.png)](https://github.com/viash-hub/biobox/blob/main/LICENSE) +[![GitHub +Issues](https://img.shields.io/github/issues/viash-hub/biobox.png)](https://github.com/viash-hub/biobox/issues) +[![Viash +version](https://img.shields.io/badge/Viash-v0.9.0--RC6-blue)](https://viash.io) + +A collection of bioinformatics tools for working with sequence data. + +## Objectives + +- **Reusability**: Facilitating the use of components across various + projects and contexts. +- **Reproducibility**: Ensuring that components are reproducible and can + be easily shared. +- **Best Practices**: Adhering to established standards in software + development and bioinformatics. + +## Contributing + +We encourage contributions from the community. To contribute: + +1. **Fork the Repository**: Start by forking this repository to your + account. +2. **Develop Your Component**: Create your Viash component, ensuring it + aligns with our best practices (detailed below). +3. **Submit a Pull Request**: After testing your component, submit a + pull request for review. + +## Contribution Guidelines + +The contribution guidelines describes which steps you should follow to +contribute a component to this repository. + +1. Find a component to contribute +2. Add config template +3. Fill in the metadata +4. Find a suitable container +5. Create help file +6. Create or fetch test data +7. Add arguments for the input files +8. Add arguments for the output files +9. Add arguments for the other arguments +10. Add a Docker engine +11. Write a runner script +12. Create test script +13. Create a `/var/software_versions.txt` file + +See the +[CONTRIBUTING](https://github.com/viash-hub/biobox/blob/main/CONTRIBUTING.md) +file for more details. + +## Support and Community + +For support, questions, or to join our community: + +- **Issues**: Submit questions or issues via the [GitHub issue + tracker](https://github.com/viash-hub/biobox/issues). +- **Discussions**: Join our discussions via [GitHub + Discussions](https://github.com/viash-hub/biobox/discussions). + +## License + +This repository is licensed under an MIT license. See the +[LICENSE](https://github.com/viash-hub/biobox/blob/main/LICENSE) file +for details. diff --git a/README.qmd b/README.qmd new file mode 100644 index 00000000..7d36430b --- /dev/null +++ b/README.qmd @@ -0,0 +1,62 @@ +--- +format: gfm +--- +```{r setup, include=FALSE} +project <- yaml::read_yaml("_viash.yaml") +license <- paste0(project$links$repository, "/blob/main/LICENSE") +contributing <- paste0(project$links$repository, "/blob/main/CONTRIBUTING.md") +``` +# 🌱📦 `r project$name` + +[![ViashHub](https://img.shields.io/badge/ViashHub-`r project$name`-7a4baa)](https://web.viash-hub.com/packages/`r project$name`) +[![GitHub](https://img.shields.io/badge/GitHub-viash--hub%2F`r project$name`-blue)](`r project$links$repository`) +[![GitHub License](https://img.shields.io/github/license/viash-hub/`r project$name`)](`r license`) +[![GitHub Issues](https://img.shields.io/github/issues/viash-hub/`r project$name`)](`r project$links$issue_tracker`) +[![Viash version](https://img.shields.io/badge/Viash-v`r gsub("-", "--", project$viash_version)`-blue)](https://viash.io) + +`r project$description` + +## Objectives + +- **Reusability**: Facilitating the use of components across various projects and contexts. +- **Reproducibility**: Ensuring that components are reproducible and can be easily shared. +- **Best Practices**: Adhering to established standards in software development and bioinformatics. + +## Contributing + +We encourage contributions from the community. To contribute: + +1. **Fork the Repository**: Start by forking this repository to your account. +2. **Develop Your Component**: Create your Viash component, ensuring it aligns with our best practices (detailed below). +3. **Submit a Pull Request**: After testing your component, submit a pull request for review. + +## Contribution Guidelines + +The contribution guidelines describes which steps you should follow to contribute a component to this repository. + +```{r echo=FALSE} +lines <- readr::read_lines("CONTRIBUTING.md") + +index_start <- grep("^### Step [0-9]*:", lines) + +index_end <- c(index_start[-1] - 1, length(lines)) + +name <- gsub("^### Step [0-9]*: *", "", lines[index_start]) + +knitr::asis_output( + paste(paste0(" 1. ", name, "\n"), collapse = "") +) +``` + +See the [CONTRIBUTING](`r contributing`) file for more details. + + +## Support and Community + +For support, questions, or to join our community: + +- **Issues**: Submit questions or issues via the [GitHub issue tracker](`r project$links$issue_tracker`). +- **Discussions**: Join our discussions via [GitHub Discussions](`r project$links$repository`/discussions). + +## License +This repository is licensed under an MIT license. See the [LICENSE](`r license`) file for details. diff --git a/_viash.yaml b/_viash.yaml new file mode 100644 index 00000000..9a240c24 --- /dev/null +++ b/_viash.yaml @@ -0,0 +1,13 @@ +name: biobox +description: | + A collection of bioinformatics tools for working with sequence data. +license: MIT +keywords: [bioinformatics, modules, sequencing] +links: + issue_tracker: https://github.com/viash-hub/biobox/issues + repository: https://github.com/viash-hub/biobox + +viash_version: 0.9.0-RC6 + +config_mods: | + .requirements.commands := ['ps'] diff --git a/main.nf b/main.nf new file mode 100644 index 00000000..5b3d280c --- /dev/null +++ b/main.nf @@ -0,0 +1,3 @@ +workflow { +print("This is a dummy placeholder for pipeline execution. Please use the corresponding nf files for running pipelines.") +} diff --git a/nextflow.config b/nextflow.config new file mode 100644 index 00000000..1dfb7ced --- /dev/null +++ b/nextflow.config @@ -0,0 +1,6 @@ +manifest { + name = "biobox" + version = "qualimap" + defaultBranch = "main" + nextflowVersion = "!>=20.12.1-edge" +} diff --git a/src/arriba/config.vsh.yaml b/src/arriba/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..8d72d7eb --- /dev/null +++ b/src/arriba/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,385 @@ +name: arriba +description: Detect gene fusions from RNA-Seq data +keywords: [Gene fusion, RNA-Seq] +links: + homepage: https://arriba.readthedocs.io/en/latest/ + documentation: https://arriba.readthedocs.io/en/latest/ + repository: https://github.com/suhrig/arriba +references: + doi: 10.1101/gr.257246.119 +license: MIT +requirements: + cpus: 1 + commands: [ arriba ] +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --bam + alternatives: -x + type: file + description: | + File in SAM/BAM/CRAM format with main alignments as generated by STAR + (Aligned.out.sam). Arriba extracts candidate reads from this file. + required: true + example: Aligned.out.bam + - name: --genome + alternatives: -a + type: file + description: | + FastA file with genome sequence (assembly). The file may be gzip-compressed. An + index with the file extension .fai must exist only if CRAM files are processed. + required: true + example: assembly.fa + - name: --gene_annotation + alternatives: -g + type: file + description: | + GTF file with gene annotation. The file may be gzip-compressed. + required: true + example: annotation.gtf + - name: --known_fusions + alternatives: -k + type: file + description: | + File containing known/recurrent fusions. Some cancer entities are often + characterized by fusions between the same pair of genes. In order to boost + sensitivity, a list of known fusions can be supplied using this parameter. The list + must contain two columns with the names of the fused genes, separated by tabs. + required: false + example: known_fusions.tsv + - name: --blacklist + alternatives: -b + type: file + description: | + File containing blacklisted events (recurrent artifacts and transcripts + observed in healthy tissue). + required: false + example: blacklist.tsv + - name: --structural_variants + alternatives: -d + type: file + description: | + Tab-separated file with coordinates of structural variants found using + whole-genome sequencing data. These coordinates serve to increase sensitivity + towards weakly expressed fusions and to eliminate fusions with low evidence. + required: false + example: structural_variants_from_WGS.tsv + - name: --tags + alternatives: -t + type: file + description: | + Tab-separated file containing fusions to annotate with tags in the 'tags' column. + The first two columns specify the genes; the third column specifies the tag. The + file may be gzip-compressed. + required: false + example: tags.tsv + - name: --protein_domains + alternatives: -p + type: file + description: | + File in GFF3 format containing coordinates of the protein domains of genes. The + protein domains retained in a fusion are listed in the column + 'retained_protein_domains'. The file may be gzip-compressed. + required: false + example: protein_domains.gff3 + - name: Outputs + arguments: + - name: --fusions + alternatives: -o + type: file + direction: output + description: | + Output file with fusions that have passed all filters. + required: true + example: fusions.tsv + - name: --fusions_discarded + alternatives: -O + type: file + direction: output + description: | + Output file with fusions that were discarded due to filtering. + required: false + example: fusions.discarded.tsv + - name: Arguments + arguments: + - name: --max_genomic_breakpoint_distance + alternatives: -D + type: long + description: | + When a file with genomic breakpoints obtained via + whole-genome sequencing is supplied via the --structural_variants + parameter, this parameter determines how far a + genomic breakpoint may be away from a + transcriptomic breakpoint to consider it as a + related event. For events inside genes, the + distance is added to the end of the gene; for + intergenic events, the distance threshold is + applied as is. Default: 100000. + required: false + - name: --strandedness + alternatives: -s + type: string + description: | + Whether a strand-specific protocol was used for library preparation, + and if so, the type of strandedness (auto/yes/no/reverse). When + unstranded data is processed, the strand can sometimes be inferred from + splice-patterns. But in unclear situations, stranded data helps + resolve ambiguities. Default: auto + choices: ["auto", "yes", "no", "reverse"] + required: false + - name: --interesting_contigs + alternatives: -i + type: string + description: | + List of interesting contigs. Fusions between genes + on other contigs are ignored. Contigs can be specified with or without the + prefix "chr". Asterisks (*) are treated as wild-cards. + Default: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 X Y AC_* NC_* + required: false + multiple: true + example: ["1", "2", "AC_*", "NC_*"] + - name: --viral_contigs + alternatives: -v + type: string + description: | + List of viral contigs. Asterisks (*) are treated as + wild-cards. + Default: AC_* NC_* + required: false + multiple: true + example: ["AC_*", "NC_*"] + - name: --disable_filters + alternatives: -f + type: string + description: | + List of filters to disable. By default all filters are + enabled. + choices: [ homologs, low_entropy, isoforms, + top_expressed_viral_contigs, viral_contigs, uninteresting_contigs, + non_coding_neighbors, mismatches, duplicates, no_genomic_support, + genomic_support, intronic, end_to_end, relative_support, + low_coverage_viral_contigs, merge_adjacent, mismappers, multimappers, + same_gene, long_gap, internal_tandem_duplication, small_insert_size, + read_through, inconsistently_clipped, intragenic_exonic, + marginal_read_through, spliced, hairpin, blacklist, min_support, + select_best, in_vitro, short_anchor, known_fusions, no_coverage, + homopolymer, many_spliced ] + required: false + multiple: true + - name: --max_e_value + alternatives: -E + type: double + description: | + Arriba estimates the number of fusions with a given number of supporting + reads which one would expect to see by random chance. If the expected number + of fusions (e-value) is higher than this threshold, the fusion is + discarded by the 'relative_support' filter. Note: Increasing this + threshold can dramatically increase the number of false positives and may + increase the runtime of resource-intensive steps. Fractional values are + possible. Default: 0.300000 + required: false + - name: --min_supporting_reads + alternatives: -S + type: integer + description: | + The 'min_support' filter discards all fusions with fewer than + this many supporting reads (split reads and discordant mates + combined). Default: 2 + required: false + example: 2 + - name: --max_mismappers + alternatives: -m + type: double + description: | + When more than this fraction of supporting reads turns out to be + mismappers, the 'mismappers' filter discards the fusion. Default: + 0.800000 + required: false + example: 0.8 + - name: --max_homolog_identity + alternatives: -L + type: double + description: | + Genes with more than the given fraction of sequence identity are + considered homologs and removed by the 'homologs' filter. + Default: 0.300000 + required: false + example: 0.3 + - name: --homopolymer_length + alternatives: -H + type: integer + description: | + The 'homopolymer' filter removes breakpoints adjacent to + homopolymers of the given length or more. Default: 6 + required: false + example: 6 + - name: --read_through_distance + alternatives: -R + type: integer + description: | + The 'read_through' filter removes read-through fusions + where the breakpoints are less than the given distance away + from each other. Default: 10000 + required: false + example: 10000 + - name : --min_anchor_length + alternatives: -A + type: integer + description: | + Alignment artifacts are often characterized by split reads coming + from only one gene and no discordant mates. Moreover, the split + reads only align to a short stretch in one of the genes. The + 'short_anchor' filter removes these fusions. This parameter sets + the threshold in bp for what the filter considers short. Default: 23 + required: false + example: 23 + - name: --many_spliced_events + alternatives: -M + type: integer + description: | + The 'many_spliced' filter recovers fusions between genes that + have at least this many spliced breakpoints. Default: 4 + required: false + example: 4 + - name: --max_kmer_content + alternatives: -K + type: double + description: | + The 'low_entropy' filter removes reads with repetitive 3-mers. If + the 3-mers make up more than the given fraction of the sequence, then + the read is discarded. Default: 0.600000 + required: false + example: 0.6 + - name: --max_mismatch_pvalue + alternatives: -V + type: double + description: | + The 'mismatches' filter uses a binomial model to calculate a + p-value for observing a given number of mismatches in a read. If + the number of mismatches is too high, the read is discarded. + Default: 0.010000 + required: false + example: 0.05 + - name: --fragment_length + alternatives: -F + type: integer + description: | + When paired-end data is given, the fragment length is estimated + automatically and this parameter has no effect. But when single-end + data is given, the mean fragment length should be specified to + effectively filter fusions that arise from hairpin structures. + Default: 200 + required: false + example: 200 + - name: --max_reads + alternatives: -U + type: integer + description: | + Subsample fusions with more than the given number of supporting reads. This + improves performance without compromising sensitivity, as long as the + threshold is high. Counting of supporting reads beyond the threshold is + inaccurate, obviously. Default: 300 + required: false + example: 300 + - name: --quantile + alternatives: -Q + type: double + description: | + Highly expressed genes are prone to produce artifacts during library + preparation. Genes with an expression above the given quantile are eligible + for filtering by the 'in_vitro' filter. Default: 0.998000 + required: false + example: 0.998 + - name: --exonic_fraction + alternatives: -e + type: double + description: | + The breakpoints of false-positive predictions of intragenic events + are often both in exons. True predictions are more likely to have at + least one breakpoint in an intron, because introns are larger. If the + fraction of exonic sequence between two breakpoints is smaller than + the given fraction, the 'intragenic_exonic' filter discards the + event. Default: 0.330000 + required: false + example: 0.33 + - name: --top_n + alternatives: -T + type: integer + description: | + Only report viral integration sites of the top N most highly expressed viral + contigs. Default: 5 + required: false + example: 5 + - name: --covered_fraction + alternatives: -C + type: double + description: | + Ignore virally associated events if the virus is not fully + expressed, i.e., less than the given fraction of the viral contig is + transcribed. Default: 0.050000 + required: false + example: 0.05 + - name: --max_itd_length + alternatives: -l + type: integer + description: | + Maximum length of internal tandem duplications. Note: Increasing + this value beyond the default can impair performance and lead to many + false positives. Default: 100 + required: false + example: 100 + - name: --min_itd_allele_fraction + alternatives: -z + type: double + description: | + Required fraction of supporting reads to report an internal + tandem duplication. Default: 0.070000 + required: false + example: 0.07 + - name: --min_itd_supporting_reads + alternatives: -Z + type: integer + description: | + Required absolute number of supporting reads to report an + internal tandem duplication. Default: 10 + required: false + example: 10 + - name: --skip_duplicate_marking + alternatives: -u + type: boolean_true + description: | + Instead of performing duplicate marking itself, Arriba relies on duplicate marking by a + preceding program using the BAM_FDUP flag. This makes sense when unique molecular + identifiers (UMI) are used. + - name: --extra_information + alternatives: -X + type: boolean_true + description: | + To reduce the runtime and file size, by default, the columns 'fusion_transcript', + 'peptide_sequence', and 'read_identifiers' are left empty in the file containing + discarded fusion candidates (see parameter -O). When this flag is set, this extra + information is reported in the discarded fusions file. + - name: --fill_gaps + alternatives: -I + type: boolean_true + description: | + If assembly of the fusion transcript sequence from the supporting reads is incomplete + (denoted as '...'), fill the gaps using the assembly sequence wherever possible. +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/arriba:2.4.0--h0033a41_2 + setup: + - type: docker + run: | + arriba -h | grep 'Version:' 2>&1 | sed 's/Version:\s\(.*\)/arriba: "\1"/' > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/arriba/help.txt b/src/arriba/help.txt new file mode 100644 index 00000000..7d8fc76d --- /dev/null +++ b/src/arriba/help.txt @@ -0,0 +1,198 @@ +```bash +arriba -h +``` + +Arriba gene fusion detector +--------------------------- +Version: 2.4.0 + +Arriba is a fast tool to search for aberrant transcripts such as gene fusions. +It is based on chimeric alignments found by the STAR RNA-Seq aligner. + +Usage: arriba [-c Chimeric.out.sam] -x Aligned.out.bam \ + -g annotation.gtf -a assembly.fa [-b blacklists.tsv] [-k known_fusions.tsv] \ + [-t tags.tsv] [-p protein_domains.gff3] [-d structural_variants_from_WGS.tsv] \ + -o fusions.tsv [-O fusions.discarded.tsv] \ + [OPTIONS] + + -c FILE File in SAM/BAM/CRAM format with chimeric alignments as generated by STAR + (Chimeric.out.sam). This parameter is only required, if STAR was run with the + parameter '--chimOutType SeparateSAMold'. When STAR was run with the parameter + '--chimOutType WithinBAM', it suffices to pass the parameter -x to Arriba and -c + can be omitted. + + -x FILE File in SAM/BAM/CRAM format with main alignments as generated by STAR + (Aligned.out.sam). Arriba extracts candidate reads from this file. + + -g FILE GTF file with gene annotation. The file may be gzip-compressed. + + -G GTF_FEATURES Comma-/space-separated list of names of GTF features. + Default: gene_name=gene_name|gene_id gene_id=gene_id + transcript_id=transcript_id feature_exon=exon feature_CDS=CDS + + -a FILE FastA file with genome sequence (assembly). The file may be gzip-compressed. An + index with the file extension .fai must exist only if CRAM files are processed. + + -b FILE File containing blacklisted events (recurrent artifacts and transcripts + observed in healthy tissue). + + -k FILE File containing known/recurrent fusions. Some cancer entities are often + characterized by fusions between the same pair of genes. In order to boost + sensitivity, a list of known fusions can be supplied using this parameter. The list + must contain two columns with the names of the fused genes, separated by tabs. + + -o FILE Output file with fusions that have passed all filters. + + -O FILE Output file with fusions that were discarded due to filtering. + + -t FILE Tab-separated file containing fusions to annotate with tags in the 'tags' column. + The first two columns specify the genes; the third column specifies the tag. The + file may be gzip-compressed. + + -p FILE File in GFF3 format containing coordinates of the protein domains of genes. The + protein domains retained in a fusion are listed in the column + 'retained_protein_domains'. The file may be gzip-compressed. + + -d FILE Tab-separated file with coordinates of structural variants found using + whole-genome sequencing data. These coordinates serve to increase sensitivity + towards weakly expressed fusions and to eliminate fusions with low evidence. + + -D MAX_GENOMIC_BREAKPOINT_DISTANCE When a file with genomic breakpoints obtained via + whole-genome sequencing is supplied via the -d + parameter, this parameter determines how far a + genomic breakpoint may be away from a + transcriptomic breakpoint to consider it as a + related event. For events inside genes, the + distance is added to the end of the gene; for + intergenic events, the distance threshold is + applied as is. Default: 100000 + + -s STRANDEDNESS Whether a strand-specific protocol was used for library preparation, + and if so, the type of strandedness (auto/yes/no/reverse). When + unstranded data is processed, the strand can sometimes be inferred from + splice-patterns. But in unclear situations, stranded data helps + resolve ambiguities. Default: auto + + -i CONTIGS Comma-/space-separated list of interesting contigs. Fusions between genes + on other contigs are ignored. Cfontigs can be specified with or without the + prefix "chr". Asterisks (*) are treated as wild-cards. + Default: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 X Y AC_* NC_* + + -v CONTIGS Comma-/space-separated list of viral contigs. Asterisks (*) are treated as + wild-cards. + Default: AC_* NC_* + + -f FILTERS Comma-/space-separated list of filters to disable. By default all filters are + enabled. Valid values: homologs, low_entropy, isoforms, + top_expressed_viral_contigs, viral_contigs, uninteresting_contigs, + non_coding_neighbors, mismatches, duplicates, no_genomic_support, + genomic_support, intronic, end_to_end, relative_support, + low_coverage_viral_contigs, merge_adjacent, mismappers, multimappers, + same_gene, long_gap, internal_tandem_duplication, small_insert_size, + read_through, inconsistently_clipped, intragenic_exonic, + marginal_read_through, spliced, hairpin, blacklist, min_support, + select_best, in_vitro, short_anchor, known_fusions, no_coverage, + homopolymer, many_spliced + + -E MAX_E-VALUE Arriba estimates the number of fusions with a given number of supporting + reads which one would expect to see by random chance. If the expected number + of fusions (e-value) is higher than this threshold, the fusion is + discarded by the 'relative_support' filter. Note: Increasing this + threshold can dramatically increase the number of false positives and may + increase the runtime of resource-intensive steps. Fractional values are + possible. Default: 0.300000 + + -S MIN_SUPPORTING_READS The 'min_support' filter discards all fusions with fewer than + this many supporting reads (split reads and discordant mates + combined). Default: 2 + + -m MAX_MISMAPPERS When more than this fraction of supporting reads turns out to be + mismappers, the 'mismappers' filter discards the fusion. Default: + 0.800000 + + -L MAX_HOMOLOG_IDENTITY Genes with more than the given fraction of sequence identity are + considered homologs and removed by the 'homologs' filter. + Default: 0.300000 + + -H HOMOPOLYMER_LENGTH The 'homopolymer' filter removes breakpoints adjacent to + homopolymers of the given length or more. Default: 6 + + -R READ_THROUGH_DISTANCE The 'read_through' filter removes read-through fusions + where the breakpoints are less than the given distance away + from each other. Default: 10000 + + -A MIN_ANCHOR_LENGTH Alignment artifacts are often characterized by split reads coming + from only one gene and no discordant mates. Moreover, the split + reads only align to a short stretch in one of the genes. The + 'short_anchor' filter removes these fusions. This parameter sets + the threshold in bp for what the filter considers short. Default: 23 + + -M MANY_SPLICED_EVENTS The 'many_spliced' filter recovers fusions between genes that + have at least this many spliced breakpoints. Default: 4 + + -K MAX_KMER_CONTENT The 'low_entropy' filter removes reads with repetitive 3-mers. If + the 3-mers make up more than the given fraction of the sequence, then + the read is discarded. Default: 0.600000 + + -V MAX_MISMATCH_PVALUE The 'mismatches' filter uses a binomial model to calculate a + p-value for observing a given number of mismatches in a read. If + the number of mismatches is too high, the read is discarded. + Default: 0.010000 + + -F FRAGMENT_LENGTH When paired-end data is given, the fragment length is estimated + automatically and this parameter has no effect. But when single-end + data is given, the mean fragment length should be specified to + effectively filter fusions that arise from hairpin structures. + Default: 200 + + -U MAX_READS Subsample fusions with more than the given number of supporting reads. This + improves performance without compromising sensitivity, as long as the + threshold is high. Counting of supporting reads beyond the threshold is + inaccurate, obviously. Default: 300 + + -Q QUANTILE Highly expressed genes are prone to produce artifacts during library + preparation. Genes with an expression above the given quantile are eligible + for filtering by the 'in_vitro' filter. Default: 0.998000 + + -e EXONIC_FRACTION The breakpoints of false-positive predictions of intragenic events + are often both in exons. True predictions are more likely to have at + least one breakpoint in an intron, because introns are larger. If the + fraction of exonic sequence between two breakpoints is smaller than + the given fraction, the 'intragenic_exonic' filter discards the + event. Default: 0.330000 + + -T TOP_N Only report viral integration sites of the top N most highly expressed viral + contigs. Default: 5 + + -C COVERED_FRACTION Ignore virally associated events if the virus is not fully + expressed, i.e., less than the given fraction of the viral contig is + transcribed. Default: 0.050000 + + -l MAX_ITD_LENGTH Maximum length of internal tandem duplications. Note: Increasing + this value beyond the default can impair performance and lead to many + false positives. Default: 100 + + -z MIN_ITD_ALLELE_FRACTION Required fraction of supporting reads to report an internal + tandem duplication. Default: 0.070000 + + -Z MIN_ITD_SUPPORTING_READS Required absolute number of supporting reads to report an + internal tandem duplication. Default: 10 + + -u Instead of performing duplicate marking itself, Arriba relies on duplicate marking by a + preceding program using the BAM_FDUP flag. This makes sense when unique molecular + identifiers (UMI) are used. + + -X To reduce the runtime and file size, by default, the columns 'fusion_transcript', + 'peptide_sequence', and 'read_identifiers' are left empty in the file containing + discarded fusion candidates (see parameter -O). When this flag is set, this extra + information is reported in the discarded fusions file. + + -I If assembly of the fusion transcript sequence from the supporting reads is incomplete + (denoted as '...'), fill the gaps using the assembly sequence wherever possible. + + -h Print help and exit. + + Code repository: https://github.com/suhrig/arriba + Get help/report bugs: https://github.com/suhrig/arriba/issues + User manual: https://arriba.readthedocs.io/ + Please cite: https://doi.org/10.1101/gr.257246.119 \ No newline at end of file diff --git a/src/arriba/script.sh b/src/arriba/script.sh new file mode 100644 index 00000000..5892db32 --- /dev/null +++ b/src/arriba/script.sh @@ -0,0 +1,54 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +# unset flags +[[ "$par_skip_duplicate_marking" == "false" ]] && unset par_skip_duplicate_marking +[[ "$par_extra_information" == "false" ]] && unset par_extra_information +[[ "$par_fill_gaps" == "false" ]] && unset par_fill_gaps + +# replace ';' with ',' +par_interesting_contigs=$(echo $par_interesting_contigs | tr ';' ',') +par_viral_contigs=$(echo $par_viral_contigs | tr ';' ',') +par_disable_filters=$(echo $par_disable_filters | tr ';' ',') + +# run arriba +arriba \ + -x "$par_bam" \ + -a "$par_genome" \ + -g "$par_gene_annotation" \ + -o "$par_fusions" \ + ${par_known_fusions:+-k "${par_known_fusions}"} \ + ${par_blacklist:+-b "${par_blacklist}"} \ + ${par_structural_variants:+-d "${par_structural_variants}"} \ + ${par_tags:+-t "${par_tags}"} \ + ${par_protein_domains:+-p "${par_protein_domains}"} \ + ${par_fusions_discarded:+-O "${par_fusions_discarded}"} \ + ${par_max_genomic_breakpoint_distance:+-D "${par_max_genomic_breakpoint_distance}"} \ + ${par_strandedness:+-s "${par_strandedness}"} \ + ${par_interesting_contigs:+-i "${par_interesting_contigs}"} \ + ${par_viral_contigs:+-v "${par_viral_contigs}"} \ + ${par_disable_filters:+-f "${par_disable_filters}"} \ + ${par_max_e_value:+-E "${par_max_e_value}"} \ + ${par_min_supporting_reads:+-S "${par_min_supporting_reads}"} \ + ${par_max_mismappers:+-m "${par_max_mismappers}"} \ + ${par_max_homolog_identity:+-L "${par_max_homolog_identity}"} \ + ${par_homopolymer_length:+-H "${par_homopolymer_length}"} \ + ${par_read_through_distance:+-R "${par_read_through_distance}"} \ + ${par_min_anchor_length:+-A "${par_min_anchor_length}"} \ + ${par_many_spliced_events:+-M "${par_many_spliced_events}"} \ + ${par_max_kmer_content:+-K "${par_max_kmer_content}"} \ + ${par_max_mismatch_pvalue:+-V "${par_max_mismatch_pvalue}"} \ + ${par_fragment_length:+-F "${par_fragment_length}"} \ + ${par_max_reads:+-U "${par_max_reads}"} \ + ${par_quantile:+-Q "${par_quantile}"} \ + ${par_exonic_fraction:+-e "${par_exonic_fraction}"} \ + ${par_top_n:+-T "${par_top_n}"} \ + ${par_covered_fraction:+-C "${par_covered_fraction}"} \ + ${par_max_itd_length:+-l "${par_max_itd_length}"} \ + ${par_min_itd_allele_fraction:+-z "${par_min_itd_allele_fraction}"} \ + ${par_min_itd_supporting_reads:+-Z "${par_min_itd_supporting_reads}"} \ + ${par_skip_duplicate_marking:+-u} \ + ${par_extra_information:+-X} \ + ${par_fill_gaps:+-I} diff --git a/src/arriba/test.sh b/src/arriba/test.sh new file mode 100644 index 00000000..7f1243d2 --- /dev/null +++ b/src/arriba/test.sh @@ -0,0 +1,45 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +dir_in="$meta_resources_dir/test_data" + +echo "> Run arriba with blacklist" +"$meta_executable" \ + --bam "$dir_in/A.bam" \ + --genome "$dir_in/genome.fasta" \ + --gene_annotation "$dir_in/annotation.gtf" \ + --blacklist "$dir_in/blacklist.tsv" \ + --fusions "fusions.tsv" \ + --fusions_discarded "fusions_discarded.tsv" \ + --interesting_contigs "1,2" + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "fusions.tsv" ] && echo "Output file fusions.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -f "fusions_discarded.tsv" ] && echo "Output file fusions_discarded.tsv does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "fusions.tsv" ] && echo "Output file fusions.tsv is empty" && exit 1 +[ ! -s "fusions_discarded.tsv" ] && echo "Output file fusions_discarded.tsv is empty" && exit 1 + +rm fusions.tsv fusions_discarded.tsv + +echo "> Run arriba without blacklist" +"$meta_executable" \ + --bam "$dir_in/A.bam" \ + --genome "$dir_in/genome.fasta" \ + --gene_annotation "$dir_in/annotation.gtf" \ + --fusions "fusions.tsv" \ + --fusions_discarded "fusions_discarded.tsv" \ + --interesting_contigs "1,2" \ + --disable_filters blacklist + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "fusions.tsv" ] && echo "Output file fusions.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -f "fusions_discarded.tsv" ] && echo "Output file fusions_discarded.tsv does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "fusions.tsv" ] && echo "Output file fusions.tsv is empty" && exit 1 +[ ! -s "fusions_discarded.tsv" ] && echo "Output file fusions_discarded.tsv is empty" && exit 1 + +echo "> Test successful" \ No newline at end of file diff --git a/src/arriba/test_data/A.bam b/src/arriba/test_data/A.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..57511ab3537e519b0b82cc84d30637c43db5801e GIT binary patch literal 296 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jW4GhIaUsBJcB_tGlD0s;8d9%?KKQQ<5<)c~_M+`fR5AZuNn@YW$`C3w~$m(~4>kgSYe=WVcgS$m0eJ(B*{v0Gy zWb`>`t;m5QABWctHzp`DoHAnC%-}Jhqp=%kuRNLqx)@fcG%)xnq;3Bwl9ZzHWI{{V zO6SacW@csY;x^769v(f91CGMtA3hhPefdz5R>D&zcH(ns+6U%G3CA^*WtEv_b7hr- z<7JJRWtp?vycRrkaF%R&I8EKy!|CXmh9BJaT~C`l92z7}mn%f(tw`?3vSeueGBM~E N7N1 +GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG +>2 +AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA diff --git a/src/arriba/test_data/script.sh b/src/arriba/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..e5bbcf2c --- /dev/null +++ b/src/arriba/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,10 @@ +# arriba test data + +# Test data was obtained from https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers/tree/master/bio/arriba/test + +if [ ! -d /tmp/snakemake-wrappers ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers /tmp/snakemake-wrappers +fi + +cp -r /tmp/snakemake-wrappers/bio/arriba/test/* src/arriba/test_data + diff --git a/src/bcl_convert/config.vsh.yaml b/src/bcl_convert/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..657fb1f0 --- /dev/null +++ b/src/bcl_convert/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,159 @@ +name: bcl_convert +description: | + Convert bcl files to fastq files using bcl-convert. + Information about upgrading from bcl2fastq via + [Upgrading from bcl2fastq to BCL Convert](https://emea.support.illumina.com/bulletins/2020/10/upgrading-from-bcl2fastq-to-bcl-convert.html) + and [BCL Convert Compatible Products](https://support.illumina.com/sequencing/sequencing_software/bcl-convert/compatibility.html) +argument_groups: + - name: Input arguments + arguments: + - name: "--bcl_input_directory" + alternatives: ["-i"] + type: file + required: true + description: Input run directory + example: bcl_dir + - name: "--sample_sheet" + alternatives: ["-s"] + type: file + description: Path to SampleSheet.csv file (default searched for in --bcl_input_directory) + example: bcl_dir/sample_sheet.csv + - name: --run_info + type: file + description: Path to RunInfo.xml file (default root of BCL input directory) + example: bcl_dir/RunInfo.xml + + - name: Lane and tile settings + arguments: + - name: "--bcl_only_lane" + type: integer + description: Convert only specified lane number (default all lanes) + example: 1 + - name: --first_tile_only + type: boolean + description: Only convert first tile of input (for testing & debugging) + example: true + - name: --tiles + type: string + description: Process only a subset of tiles by a regular expression + example: "s_[0-9]+_1" + - name: --exclude_tiles + type: string + description: Exclude set of tiles by a regular expression + example: "s_[0-9]+_1" + + - name: Resource arguments + arguments: + - name: --shared_thread_odirect_output + type: boolean + description: Use linux native asynchronous io (io_submit) for file output (Default=false) + example: true + - name: --bcl_num_parallel_tiles + type: integer + description: "\\# of tiles to process in parallel (default 1)" + example: 1 + - name: --bcl_num_conversion_threads + type: integer + description: "\\# of threads for conversion (per tile, default # cpu threads)" + example: 1 + - name: --bcl_num_compression_threads + type: integer + description: "\\# of threads for fastq.gz output compression (per tile, default # cpu threads, or HW+12)" + example: 1 + - name: --bcl_num_decompression_threads + type: integer + description: + "\\# of threads for bcl/cbcl input decompression (per tile, default half # cpu threads, or HW+8). + Only applies when preloading files" + example: 1 + + - name: Run arguments + arguments: + - name: --bcl_only_matched_reads + type: boolean + description: For pure BCL conversion, do not output files for 'Undetermined' [unmatched] reads (output by default) + example: true + - name: --no_lane_splitting + type: boolean + description: Do not split FASTQ file by lane (false by default) + example: true + - name: --num_unknown_barcodes_reported + type: integer + description: "\\# of Top Unknown Barcodes to output (1000 by default)" + example: 1000 + - name: --bcl_validate_sample_sheet_only + type: boolean + description: Only validate RunInfo.xml & SampleSheet files (produce no FASTQ files) + example: true + - name: --strict_mode + type: boolean + description: Abort if any files are missing (false by default) + example: true + - name: --sample_name_column_enabled + type: boolean + description: Use sample sheet 'Sample_Name' column when naming fastq files & subdirectories + example: true + + - name: Output arguments + arguments: + - name: "--output_directory" + alternatives: ["-o"] + type: file + direction: output + required: true + description: Output directory containig fastq files + example: fastq_dir + - name: --bcl_sampleproject_subdirectories + type: boolean + description: Output to subdirectories based upon sample sheet 'Sample_Project' column + example: true + - name: --fastq_gzip_compression_level + type: integer + description: Set fastq output compression level 0-9 (default 1) + example: 1 + - name: "--reports" + type: file + direction: output + required: false + description: Reports directory + example: reports_dir + - name: "--logs" + type: file + direction: output + required: false + description: Reports directory + example: logs_dir + +# bcl-convert arguments not taken into account +# --force +# --output-legacy-stats arg Also output stats in legacy (bcl2fastq2) format (false by default) +# --no-sample-sheet arg Enable legacy no-sample-sheet operation (No demux or trimming. No settings + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh + +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + +engines: + - type: docker + image: debian:trixie-slim + # https://support.illumina.com/sequencing/sequencing_software/bcl-convert/downloads.html + setup: + - type: apt + packages: [wget, gdb, which, hostname, alien, procps] + - type: docker + run: | + wget https://s3.amazonaws.com/webdata.illumina.com/downloads/software/bcl-convert/bcl-convert-4.2.7-2.el8.x86_64.rpm -O /tmp/bcl-convert.rpm && \ + alien -i /tmp/bcl-convert.rpm && \ + rm -rf /var/lib/apt/lists/* && \ + rm /tmp/bcl-convert.rpm + - type: docker + run: | + echo "bcl-convert: \"$(bcl-convert -V 2>&1 >/dev/null | sed -n '/Version/ s/^bcl-convert\ Version //p')\"" > /var/software_versions.txt + +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/bcl_convert/help.txt b/src/bcl_convert/help.txt new file mode 100644 index 00000000..edb73faf --- /dev/null +++ b/src/bcl_convert/help.txt @@ -0,0 +1,38 @@ +bcl-convert Version 00.000.000.4.2.7 +Copyright (c) 2014-2022 Illumina, Inc. + +Run BCL Conversion (BCL directory to *.fastq.gz) + bcl-convert --bcl-input-directory --output-directory [options] + +Options: + -h [ --help ] Print this help message + -V [ --version ] Print the version and exit + --output-directory arg Output BCL directory for BCL conversion (must be specified) + -f [ --force ] Force: allow destination diretory to already exist + --bcl-input-directory arg Input BCL directory for BCL conversion (must be specified) + --sample-sheet arg Path to SampleSheet.csv file (default searched for in --bcl-input-directory) + --bcl-only-lane arg Convert only specified lane number (default all lanes) + --strict-mode arg Abort if any files are missing (false by default) + --first-tile-only arg Only convert first tile of input (for testing & debugging) + --tiles arg Process only a subset of tiles by a regular expression + --exclude-tiles arg Exclude set of tiles by a regular expression + --bcl-sampleproject-subdirectories arg Output to subdirectories based upon sample sheet 'Sample_Project' column + --sample-name-column-enabled arg Use sample sheet 'Sample_Name' column when naming fastq files & subdirectories + --fastq-gzip-compression-level arg Set fastq output compression level 0-9 (default 1) + --shared-thread-odirect-output arg Use linux native asynchronous io (io_submit) for file output (Default=false) + --bcl-num-parallel-tiles arg # of tiles to process in parallel (default 1) + --bcl-num-conversion-threads arg # of threads for conversion (per tile, default # cpu threads) + --bcl-num-compression-threads arg # of threads for fastq.gz output compression (per tile, default # cpu threads, + or HW+12) + --bcl-num-decompression-threads arg # of threads for bcl/cbcl input decompression (per tile, default half # cpu + threads, or HW+8. Only applies when preloading files) + --bcl-only-matched-reads arg For pure BCL conversion, do not output files for 'Undetermined' [unmatched] + reads (output by default) + --run-info arg Path to RunInfo.xml file (default root of BCL input directory) + --no-lane-splitting arg Do not split FASTQ file by lane (false by default) + --num-unknown-barcodes-reported arg # of Top Unknown Barcodes to output (1000 by default) + --bcl-validate-sample-sheet-only arg Only validate RunInfo.xml & SampleSheet files (produce no FASTQ files) + --output-legacy-stats arg Also output stats in legacy (bcl2fastq2) format (false by default) + --no-sample-sheet arg Enable legacy no-sample-sheet operation (No demux or trimming. No settings + supported. False by default, not recommended + diff --git a/src/bcl_convert/script.sh b/src/bcl_convert/script.sh new file mode 100644 index 00000000..6a59acd5 --- /dev/null +++ b/src/bcl_convert/script.sh @@ -0,0 +1,40 @@ +#!/bin/bash + +set -eo pipefail + +$(which bcl-convert) \ + --bcl-input-directory "$par_bcl_input_directory" \ + --output-directory "$par_output_directory" \ + ${par_sample_sheet:+ --sample-sheet "$par_sample_sheet"} \ + ${par_run_info:+ --run-info "$par_run_info"} \ + ${par_bcl_only_lane:+ --bcl-only-lane "$par_bcl_only_lane"} \ + ${par_first_tile_only:+ --first-tile-only "$par_first_tile_only"} \ + ${par_tiles:+ --tiles "$par_tiles"} \ + ${par_exclude_tiles:+ --exclude-tiles "$par_exclude_tiles"} \ + ${par_shared_thread_odirect_output:+ --shared-thread-odirect-output "$par_shared_thread_odirect_output"} \ + ${par_bcl_num_parallel_tiles:+ --bcl-num-parallel-tiles "$par_bcl_num_parallel_tiles"} \ + ${par_bcl_num_conversion_threads:+ --bcl-num-conversion-threads "$par_bcl_num_conversion_threads"} \ + ${par_bcl_num_compression_threads:+ --bcl-num-compression-threads "$par_bcl_num_compression_threads"} \ + ${par_bcl_num_decompression_threads:+ --bcl-num-decompression-threads "$par_bcl_num_decompression_threads"} \ + ${par_bcl_only_matched_reads:+ --bcl-only-matched-reads "$par_bcl_only_matched_reads"} \ + ${par_no_lane_splitting:+ --no-lane-splitting "$par_no_lane_splitting"} \ + ${par_num_unknown_barcodes_reported:+ --num-unknown-barcodes-reported "$par_num_unknown_barcodes_reported"} \ + ${par_bcl_validate_sample_sheet_only:+ --bcl-validate-sample-sheet-only "$par_bcl_validate_sample_sheet_only"} \ + ${par_strict_mode:+ --strict-mode "$par_strict_mode"} \ + ${par_sample_name_column_enabled:+ --sample-name-column-enabled "$par_sample_name_column_enabled"} \ + ${par_bcl_sampleproject_subdirectories:+ --bcl-sampleproject-subdirectories "$par_bcl_sampleproject_subdirectories"} \ + ${par_fastq_gzip_compression_level:+ --fastq-gzip-compression-level "$par_fastq_gzip_compression_level"} + +if [ ! -z "$par_reports" ]; then + echo "Moving reports to their own location" + mv "${par_output_directory}/Reports" "$par_reports" +else + echo "Leaving reports alone" +fi + +if [ ! -z "$par_logs" ]; then + echo "Moving logs to their own location" + mv "${par_output_directory}/Logs" "$par_logs" +else + echo "Leaving logs alone" +fi diff --git a/src/bcl_convert/test.sh b/src/bcl_convert/test.sh new file mode 100644 index 00000000..b46bc9fe --- /dev/null +++ b/src/bcl_convert/test.sh @@ -0,0 +1,70 @@ +#!/bin/bash + +# Tests are sourced from: +# https://www.10xgenomics.com/support/software/cell-ranger/latest/analysis/inputs/cr-direct-demultiplexing-bcl-convert +# Test input files are fetched from: +# https://cf.10xgenomics.com/supp/spatial-exp/demultiplexing/iseq-DI.tar.gz +# https://cf.10xgenomics.com/supp/spatial-exp/demultiplexing/bcl_convert_samplesheet.csv + +set -eo pipefail + +echo ">> Fetching and preparing test data" +data_src="https://cf.10xgenomics.com/supp/spatial-exp/demultiplexing/iseq-DI.tar.gz" +sample_sheet_src="https://cf.10xgenomics.com/supp/spatial-exp/demultiplexing/bcl_convert_samplesheet.csv" +test_data_dir="test_data" + +mkdir $test_data_dir +wget -q $data_src -O $test_data_dir/data.tar.gz +wget -q $sample_sheet_src -O $test_data_dir/sample_sheet.csv +tar xzf $test_data_dir/data.tar.gz -C $test_data_dir +rm $test_data_dir/data.tar.gz + +echo ">> Execute and verify output" + +$meta_executable \ + --bcl_input_directory "$test_data_dir/iseq-DI" \ + --sample_sheet "$test_data_dir/sample_sheet.csv" \ + --output_directory fastq \ + --reports reports \ + --logs logs + +echo ">>> Checking whether the output dir exists" +[[ ! -d fastq ]] && echo "Output dir could not be found!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output fastq files are created" +[[ ! -f fastq/Undetermined_S0_L001_R1_001.fastq.gz ]] && echo "Output fastq files could not be found!" && exit 1 +[[ ! -f fastq/iseq-DI_S1_L001_R1_001.fastq.gz ]] && echo "Output fastq files could not be found!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether the report dir exists" +[[ ! -d reports ]] && echo "Reports dir could not be found!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether the log dir exists" +[[ ! -d logs ]] && echo "Logs dir could not be found!" && exit 1 + +# print final message +echo ">>> Test finished successfully" + +echo ">> Execute with additional arguments and verify output" + +$meta_executable \ + --bcl_input_directory "$test_data_dir/iseq-DI" \ + --sample_sheet "$test_data_dir/sample_sheet.csv" \ + --output_directory fastq1 \ + --bcl_only_matched_reads true \ + --bcl_num_compression_threads 1 \ + --no_lane_splitting false \ + --fastq_gzip_compression_level 9 + +echo ">> Checking whether the output dir exists" +[[ ! -d fastq1 ]] && echo "Output dir could not be found!" && exit 1 + +echo ">> Checking whether output fastq files are created" +[[ -f fastq1/Undetermined_S0_L001_R1_001.fastq.gz ]] && echo "Undetermined should not be generated!" && exit 1 +[[ ! -f fastq1/iseq-DI_S1_L001_R1_001.fastq.gz ]] && echo "Output fastq files could not be found!" && exit 1 + +# print final message +echo ">> Test finished successfully" + +# do not remove this +# as otherwise your test might exit with a different exit code +exit 0 diff --git a/src/bedtools/bedtools_getfasta/config.vsh.yaml b/src/bedtools/bedtools_getfasta/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..f1f49a87 --- /dev/null +++ b/src/bedtools/bedtools_getfasta/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,103 @@ +name: bedtools_getfasta +namespace: bedtools +description: Extract sequences from a FASTA file for each of the intervals defined in a BED/GFF/VCF file. +keywords: [sequencing, fasta, BED, GFF, VCF] +links: + documentation: https://bedtools.readthedocs.io/en/latest/content/tools/getfasta.html + repository: https://github.com/arq5x/bedtools2 +references: + doi: 10.1093/bioinformatics/btq033 +license: GPL-2.0 +requirements: + commands: [bedtools] + +argument_groups: + - name: Input arguments + arguments: + - name: --input_fasta + type: file + description: | + FASTA file containing sequences for each interval specified in the input BED file. + The headers in the input FASTA file must exactly match the chromosome column in the BED file. + - name: "--input_bed" + type: file + description: | + BED file containing intervals to extract from the FASTA file. + BED files containing a single region require a newline character + at the end of the line, otherwise a blank output file is produced. + - name: --rna + type: boolean_true + description: | + The FASTA is RNA not DNA. Reverse complementation handled accordingly. + + - name: Run arguments + arguments: + - name: "--strandedness" + type: boolean_true + alternatives: ["-s"] + description: | + Force strandedness. If the feature occupies the antisense strand, the output sequence will + be reverse complemented. By default strandedness is not taken into account. + + - name: Output arguments + arguments: + - name: --output + alternatives: [-o] + required: true + type: file + direction: output + description: | + Output file where the output from the 'bedtools getfasta' commend will + be written to. + - name: --tab + type: boolean_true + description: | + Report extract sequences in a tab-delimited format instead of in FASTA format. + - name: --bed_out + type: boolean_true + description: | + Report extract sequences in a tab-delimited BED format instead of in FASTA format. + - name: "--name" + type: boolean_true + description: | + Set the FASTA header for each extracted sequence to be the "name" and coordinate columns from the BED feature. + - name: "--name_only" + type: boolean_true + description: | + Set the FASTA header for each extracted sequence to be the "name" columns from the BED feature. + - name: "--split" + type: boolean_true + description: | + When --input is in BED12 format, create a separate fasta entry for each block in a BED12 record, + blocks being described in the 11th and 12th column of the BED. + - name: "--full_header" + type: boolean_true + description: | + Use full fasta header. By default, only the word before the first space or tab is used. + +# Arguments not taken into account: +# +# -fo [Specify an output file name. By default, output goes to stdout. +# + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh + +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + +engines: + - type: docker + image: debian:stable-slim + setup: + - type: apt + packages: [bedtools, procps] + - type: docker + run: | + echo "bedtools: \"$(bedtools --version | sed -n 's/^bedtools //p')\"" > /var/software_versions.txt + +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/bedtools/bedtools_getfasta/script.sh b/src/bedtools/bedtools_getfasta/script.sh new file mode 100644 index 00000000..8e88b318 --- /dev/null +++ b/src/bedtools/bedtools_getfasta/script.sh @@ -0,0 +1,22 @@ +#!/usr/bin/env bash +set -eo pipefail + +unset_if_false=( par_rna par_strandedness par_tab par_bed_out par_name par_name_only par_split par_full_header ) + +for par in ${unset_if_false[@]}; do + test_val="${!par}" + [[ "$test_val" == "false" ]] && unset $par +done + +bedtools getfasta \ + -fi "$par_input_fasta" \ + -bed "$par_input_bed" \ + ${par_rna:+-rna} \ + ${par_name:+-name} \ + ${par_name_only:+-nameOnly} \ + ${par_tab:+-tab} \ + ${par_bed_out:+-bedOut} \ + ${par_strandedness:+-s} \ + ${par_split:+-split} \ + ${par_full_header:+-fullHeader} > "$par_output" + diff --git a/src/bedtools/bedtools_getfasta/test.sh b/src/bedtools/bedtools_getfasta/test.sh new file mode 100644 index 00000000..a28e3a7e --- /dev/null +++ b/src/bedtools/bedtools_getfasta/test.sh @@ -0,0 +1,119 @@ +#!/usr/bin/env bash +set -eo pipefail + +TMPDIR=$(mktemp -d) +function clean_up { + [[ -d "$TMPDIR" ]] && rm -r "$TMPDIR" +} +trap clean_up EXIT + +# Create dummy test fasta file +cat > "$TMPDIR/test.fa" <chr1 +AAAAAAAACCCCCCCCCCCCCGCTACTGGGGGGGGGGGGGGGGGG +EOF + +TAB="$(printf '\t')" + +# Create dummy bed file +cat > "$TMPDIR/test.bed" < "$TMPDIR/expected.fasta" <chr1:5-10 +AAACC +EOF + +"$meta_executable" \ + --input_bed "$TMPDIR/test.bed" \ + --input_fasta "$TMPDIR/test.fa" \ + --output "$TMPDIR/output.fasta" + +cmp --silent "$TMPDIR/output.fasta" "$TMPDIR/expected.fasta" || { echo "files are different:"; exit 1; } + + +# Create expected bed file for --name +cat > "$TMPDIR/expected_with_name.fasta" <myseq::chr1:5-10 +AAACC +EOF + +"$meta_executable" \ + --input_bed "$TMPDIR/test.bed" \ + --input_fasta "$TMPDIR/test.fa" \ + --name \ + --output "$TMPDIR/output_with_name.fasta" + + +cmp --silent "$TMPDIR/output_with_name.fasta" "$TMPDIR/expected_with_name.fasta" || { echo "Files when using --name are different."; exit 1; } + +# Create expected bed file for --name_only +cat > "$TMPDIR/expected_with_name_only.fasta" <myseq +AAACC +EOF + +"$meta_executable" \ + --input_bed "$TMPDIR/test.bed" \ + --input_fasta "$TMPDIR/test.fa" \ + --name_only \ + --output "$TMPDIR/output_with_name_only.fasta" + +cmp --silent "$TMPDIR/output_with_name_only.fasta" "$TMPDIR/expected_with_name_only.fasta" || { echo "Files when using --name_only are different."; exit 1; } + + +# Create expected tab-delimited file for --tab +cat > "$TMPDIR/expected_tab.out" < "$TMPDIR/expected.bed" < "$TMPDIR/test_strandedness.bed" < "$TMPDIR/expected_strandedness.fasta" <forward(+) +CGCTA +>reverse(-) +TAGCG +EOF + +"$meta_executable" \ + --input_bed "$TMPDIR/test_strandedness.bed" \ + --input_fasta "$TMPDIR/test.fa" \ + -s \ + --name_only \ + --output "$TMPDIR/output_strandedness.fasta" + + +cmp --silent "$TMPDIR/expected_strandedness.fasta" "$TMPDIR/output_strandedness.fasta" || { echo "Files when using -s are different."; exit 1; } + diff --git a/src/busco/busco_download_datasets/config.vsh.yaml b/src/busco/busco_download_datasets/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..5297af2e --- /dev/null +++ b/src/busco/busco_download_datasets/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,47 @@ +name: busco_download_datasets +namespace: busco +description: Downloads available busco datasets +keywords: [lineage datasets] +links: + homepage: https://busco.ezlab.org/ + documentation: https://busco.ezlab.org/busco_userguide.html + repository: https://gitlab.com/ezlab/busco +references: + doi: 10.1007/978-1-4939-9173-0_14 +license: MIT +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --download + type: string + description: | + Download dataset. Possible values are a specific dataset name, "all", "prokaryota", "eukaryota", or "virus". + The full list of available datasets can be viewed [here](https://busco-data.ezlab.org/v5/data/lineages/) or by running the busco/busco_list_datasets component. + required: true + example: stramenopiles_odb10 + - name: Outputs + arguments: + - name: --download_path + direction: output + type: file + description: | + Local filepath for storing BUSCO dataset downloads + required: false + default: busco_downloads + example: busco_downloads +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/busco:5.7.1--pyhdfd78af_0 + setup: + - type: docker + run: | + busco --version | sed 's/BUSCO\s\(.*\)/busco: "\1"/' > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/busco/busco_download_datasets/script.sh b/src/busco/busco_download_datasets/script.sh new file mode 100644 index 00000000..6010c01f --- /dev/null +++ b/src/busco/busco_download_datasets/script.sh @@ -0,0 +1,14 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + + +if [ ! -d "$par_download_path" ]; then + mkdir -p "$par_download_path" +fi + +busco \ + --download_path "$par_download_path" \ + --download "$par_download" + diff --git a/src/busco/busco_download_datasets/test.sh b/src/busco/busco_download_datasets/test.sh new file mode 100644 index 00000000..c6baecea --- /dev/null +++ b/src/busco/busco_download_datasets/test.sh @@ -0,0 +1,15 @@ +echo "> Downloading busco stramenopiles_odb10 dataset" + +"$meta_executable" \ + --download stramenopiles_odb10 \ + --download_path downloads + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "downloads/file_versions.tsv" ] && echo "file_versions.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -f "downloads/lineages/stramenopiles_odb10/dataset.cfg" ] && echo "dataset.cfg does not exist" && exit 1 + +echo ">> Checking if output is empty" +[ ! -s "downloads/file_versions.tsv" ] && echo "file_versions.tsv is empty" && exit 1 +[ ! -s "downloads/lineages/stramenopiles_odb10/dataset.cfg" ] && echo "dataset.cfg is empty" && exit 1 + +rm -r downloads \ No newline at end of file diff --git a/src/busco/busco_list_datasets/config.vsh.yaml b/src/busco/busco_list_datasets/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..cac34cc6 --- /dev/null +++ b/src/busco/busco_list_datasets/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,39 @@ +name: busco_list_datasets +namespace: busco +description: Lists the available busco datasets +keywords: [lineage datasets] +links: + homepage: https://busco.ezlab.org/ + documentation: https://busco.ezlab.org/busco_userguide.html + repository: https://gitlab.com/ezlab/busco +references: + doi: 10.1007/978-1-4939-9173-0_14 +license: MIT +argument_groups: + - name: Outputs + arguments: + - name: --output + alternatives: ["-o"] + direction: output + type: file + description: | + Output file of the available busco datasets + required: false + default: busco_dataset_list.txt + example: file.txt +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/busco:5.7.1--pyhdfd78af_0 + setup: + - type: docker + run: | + busco --version | sed 's/BUSCO\s\(.*\)/busco: "\1"/' > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/busco/busco_list_datasets/script.sh b/src/busco/busco_list_datasets/script.sh new file mode 100644 index 00000000..6c80725c --- /dev/null +++ b/src/busco/busco_list_datasets/script.sh @@ -0,0 +1,6 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +busco --list-datasets | awk '/^#{40}/{flag=1; next} flag{print}' > $par_output \ No newline at end of file diff --git a/src/busco/busco_list_datasets/test.sh b/src/busco/busco_list_datasets/test.sh new file mode 100644 index 00000000..c303cd77 --- /dev/null +++ b/src/busco/busco_list_datasets/test.sh @@ -0,0 +1,15 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +"$meta_executable" \ + --output datasets.txt + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "datasets.txt" ] && echo "datasets.txt does not exist" && exit 1 + +echo ">> Checking if output is empty" +[ ! -s "datasets.txt" ] && echo "datasets.txt is empty" && exit 1 + +rm datasets.txt \ No newline at end of file diff --git a/src/busco/busco_run/config.vsh.yaml b/src/busco/busco_run/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..23ee95fb --- /dev/null +++ b/src/busco/busco_run/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,218 @@ +name: busco_run +namespace: busco +description: Assessment of genome assembly and annotation completeness with single copy orthologs +keywords: [Genome assembly, quality control] +links: + homepage: https://busco.ezlab.org/ + documentation: https://busco.ezlab.org/busco_userguide.html + repository: https://gitlab.com/ezlab/busco +references: + doi: 10.1007/978-1-4939-9173-0_14 +license: MIT +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + alternatives: ["-i"] + type: file + description: | + Input sequence file in FASTA format. Can be an assembled genome or transcriptome (DNA), or protein sequences from an annotated gene set. Also possible to use a path to a directory containing multiple input files. + required: true + example: file.fasta + - name: --mode + alternatives: ["-m"] + type: string + choices: [genome, geno, transcriptome, tran, proteins, prot] + required: true + description: | + Specify which BUSCO analysis mode to run. There are three valid modes: + - geno or genome, for genome assemblies (DNA) + - tran or transcriptome, for transcriptome assemblies (DNA) + - prot or proteins, for annotated gene sets (protein) + example: proteins + - name: --lineage_dataset + alternatives: ["-l"] + type: string + required: false + description: | + Specify a BUSCO lineage dataset that is most closely related to the assembly or gene set being assessed. + The full list of available datasets can be viewed [here](https://busco-data.ezlab.org/v5/data/lineages/) or by running the busco/busco_list_datasets component. + When unsure, the "--auto_lineage" flag can be set to automatically find the optimal lineage path. + BUSCO will automatically download the requested dataset if it is not already present in the download folder. + You can optionally provide a path to a local dataset instead of a name, e.g. path/to/dataset. + Datasets can be downloaded using the busco/busco_download_dataset component. + example: stramenopiles_odb10 + + - name: Outputs + arguments: + - name: --short_summary_json + required: false + direction: output + type: file + example: short_summary.json + description: | + Output file for short summary in JSON format. + - name: --short_summary_txt + required: false + direction: output + type: file + example: short_summary.txt + description: | + Output file for short summary in TXT format. + - name: --full_table + required: false + direction: output + type: file + example: full_table.tsv + description: | + Full table output in TSV format. + - name: --missing_busco_list + required: false + direction: output + type: file + example: missing_busco_list.tsv + description: | + Missing list output in TSV format. + - name: --output_dir + required: false + direction: output + type: file + example: output_dir/ + description: | + The full output directory, if so desired. + + - name: Resource and Run Settings + arguments: + - name: --force + type: boolean_true + description: | + Force rewriting of existing files. Must be used when output files with the provided name already exist. + - name: --quiet + alternatives: ["-q"] + type: boolean_true + description: | + Disable the info logs, displays only errors. + - name: --restart + alternatives: ["-r"] + type: boolean_true + description: | + Continue a run that had already partially completed. Restarting skips calls to tools that have completed but performs all pre- and post-processing steps. + - name: --tar + type: boolean_true + description: | + Compress some subdirectories with many files to save space. + + - name: Lineage Dataset Settings + arguments: + - name: --auto_lineage + type: boolean_true + description: | + Run auto-lineage pipelilne to automatically determine BUSCO lineage dataset that is most closely related to the assembly or gene set being assessed. + - name: --auto_lineage_euk + type: boolean_true + description: | + Run auto-placement just on eukaryota tree to find optimal lineage path. + - name: --auto_lineage_prok + type: boolean_true + description: | + Run auto_lineage just on prokaryota trees to find optimum lineage path. + - name: --datasets_version + type: string + required: false + description: | + Specify the version of BUSCO datasets + example: odb10 + + - name: Augustus Settings + arguments: + - name: --augustus + type: boolean_true + description: | + Use augustus gene predictor for eukaryote runs. + - name: --augustus_parameters + type: string + required: false + description: | + Additional parameters to be passed to Augustus (see Augustus documentation: https://github.com/Gaius-Augustus/Augustus/blob/master/docs/RUNNING-AUGUSTUS.md). + Parameters should be contained within a single string, without whitespace and seperated by commas. + example: "--PARAM1=VALUE1,--PARAM2=VALUE2" + - name: --augustus_species + type: string + required: false + description: | + Specify the augustus species + - name: --long + type: boolean_true + description: | + Optimize Augustus self-training mode. This adds considerably to the run time, but can improve results for some non-model organisms. + + - name: BBTools Settings + arguments: + - name: --contig_break + type: integer + required: false + description: | + Number of contiguous Ns to signify a break between contigs in BBTools analysis. + - name: --limit + type: integer + required: false + description: | + Number of candidate regions (contig or transcript) from the BLAST output to consider per BUSCO. + This option is only effective in pipelines using BLAST, i.e. the genome pipeline (see --augustus) or the prokaryota transcriptome pipeline. + - name: --scaffold_composition + type: boolean_true + description: | + Writes ACGTN content per scaffold to a file scaffold_composition.txt. + + - name: BLAST Settings + arguments: + - name: --e_value + type: double + required: false + description: | + E-value cutoff for BLAST searches. + + - name: Protein Gene Prediction settings + arguments: + - name: --miniprot + type: boolean_true + description: | + Use Miniprot gene predictor. + + - name: MetaEuk Settings + arguments: + - name: --metaeuk + type: boolean_true + description: | + Use Metaeuk gene predictor. + - name: --metaeuk_parameters + type: string + description: | + Pass additional arguments to Metaeuk for the first run (see Metaeuk documentation https://github.com/soedinglab/metaeuk). + All parameters should be contained within a single string with no white space, with each parameter separated by a comma. + example: "--max-overlap=15,--min-exon-aa=15" + - name: --metaeuk_rerun_parameters + type: string + description: | + Pass additional arguments to Metaeuk for the second run (see Metaeuk documentation https://github.com/soedinglab/metaeuk). + All parameters should be contained within a single string with no white space, with each parameter separated by a comma. + example: "--max-overlap=15,--min-exon-aa=15" + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/busco:5.7.1--pyhdfd78af_0 + setup: + - type: docker + run: | + busco --version | sed 's/BUSCO\s\(.*\)/busco: "\1"/' > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/busco/busco_run/help.txt b/src/busco/busco_run/help.txt new file mode 100644 index 00000000..6d83f9be --- /dev/null +++ b/src/busco/busco_run/help.txt @@ -0,0 +1,63 @@ +```bash +busco -h +``` + +usage: busco -i [SEQUENCE_FILE] -l [LINEAGE] -o [OUTPUT_NAME] -m [MODE] [OTHER OPTIONS] + +Welcome to BUSCO 5.7.1: the Benchmarking Universal Single-Copy Ortholog assessment tool. +For more detailed usage information, please review the README file provided with this distribution and the BUSCO user guide. Visit this page https://gitlab.com/ezlab/busco#how-to-cite-busco to see how to cite BUSCO + +optional arguments: + -i SEQUENCE_FILE, --in SEQUENCE_FILE + Input sequence file in FASTA format. Can be an assembled genome or transcriptome (DNA), or protein sequences from an annotated gene set. Also possible to use a path to a directory containing multiple input files. + -o OUTPUT, --out OUTPUT + Give your analysis run a recognisable short name. Output folders and files will be labelled with this name. The path to the output folder is set with --out_path. + -m MODE, --mode MODE Specify which BUSCO analysis mode to run. + There are three valid modes: + - geno or genome, for genome assemblies (DNA) + - tran or transcriptome, for transcriptome assemblies (DNA) + - prot or proteins, for annotated gene sets (protein) + -l LINEAGE, --lineage_dataset LINEAGE + Specify the name of the BUSCO lineage to be used. + --augustus Use augustus gene predictor for eukaryote runs + --augustus_parameters "--PARAM1=VALUE1,--PARAM2=VALUE2" + Pass additional arguments to Augustus. All arguments should be contained within a single string with no white space, with each argument separated by a comma. + --augustus_species AUGUSTUS_SPECIES + Specify a species for Augustus training. + --auto-lineage Run auto-lineage to find optimum lineage path + --auto-lineage-euk Run auto-placement just on eukaryote tree to find optimum lineage path + --auto-lineage-prok Run auto-lineage just on non-eukaryote trees to find optimum lineage path + -c N, --cpu N Specify the number (N=integer) of threads/cores to use. + --config CONFIG_FILE Provide a config file + --contig_break n Number of contiguous Ns to signify a break between contigs. Default is n=10. + --datasets_version DATASETS_VERSION + Specify the version of BUSCO datasets, e.g. odb10 + --download [dataset [dataset ...]] + Download dataset. Possible values are a specific dataset name, "all", "prokaryota", "eukaryota", or "virus". If used together with other command line arguments, make sure to place this last. + --download_base_url DOWNLOAD_BASE_URL + Set the url to the remote BUSCO dataset location + --download_path DOWNLOAD_PATH + Specify local filepath for storing BUSCO dataset downloads + -e N, --evalue N E-value cutoff for BLAST searches. Allowed formats, 0.001 or 1e-03 (Default: 1e-03) + -f, --force Force rewriting of existing files. Must be used when output files with the provided name already exist. + -h, --help Show this help message and exit + --limit N How many candidate regions (contig or transcript) to consider per BUSCO (default: 3) + --list-datasets Print the list of available BUSCO datasets + --long Optimization Augustus self-training mode (Default: Off); adds considerably to the run time, but can improve results for some non-model organisms + --metaeuk Use Metaeuk gene predictor + --metaeuk_parameters "--PARAM1=VALUE1,--PARAM2=VALUE2" + Pass additional arguments to Metaeuk for the first run. All arguments should be contained within a single string with no white space, with each argument separated by a comma. + --metaeuk_rerun_parameters "--PARAM1=VALUE1,--PARAM2=VALUE2" + Pass additional arguments to Metaeuk for the second run. All arguments should be contained within a single string with no white space, with each argument separated by a comma. + --miniprot Use Miniprot gene predictor + --skip_bbtools Skip BBTools for assembly statistics + --offline To indicate that BUSCO cannot attempt to download files + --opt-out-run-stats Opt out of data collection. Information on the data collected is available in the user guide. + --out_path OUTPUT_PATH + Optional location for results folder, excluding results folder name. Default is current working directory. + -q, --quiet Disable the info logs, displays only errors + -r, --restart Continue a run that had already partially completed. + --scaffold_composition + Writes ACGTN content per scaffold to a file scaffold_composition.txt + --tar Compress some subdirectories with many files to save space + -v, --version Show this version and exit \ No newline at end of file diff --git a/src/busco/busco_run/script.sh b/src/busco/busco_run/script.sh new file mode 100644 index 00000000..a0ef24de --- /dev/null +++ b/src/busco/busco_run/script.sh @@ -0,0 +1,72 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + + +[[ "$par_tar" == "false" ]] && unset par_tar +[[ "$par_force" == "false" ]] && unset par_force +[[ "$par_quiet" == "false" ]] && unset par_quiet +[[ "$par_restart" == "false" ]] && unset par_restart +[[ "$par_auto_lineage" == "false" ]] && unset par_auto_lineage +[[ "$par_auto_lineage_euk" == "false" ]] && unset par_auto_lineage_euk +[[ "$par_auto_lineage_prok" == "false" ]] && unset par_auto_lineage_prok +[[ "$par_augustus" == "false" ]] && unset par_augustus +[[ "$par_long" == "false" ]] && unset par_long +[[ "$par_scaffold_composition" == "false" ]] && unset par_scaffold_composition +[[ "$par_miniprot" == "false" ]] && unset par_miniprot + +tmp_dir=$(mktemp -d -p "$meta_temp_dir" busco_XXXXXXXXX) +prefix=$(openssl rand -hex 8) + +busco \ + --in "$par_input" \ + --mode "$par_mode" \ + --out "$prefix" \ + --out_path "$tmp_dir" \ + --opt-out-run-stats \ + ${meta_cpus:+--cpu "${meta_cpus}"} \ + ${par_lineage_dataset:+--lineage_dataset "$par_lineage_dataset"} \ + ${par_augustus:+--augustus} \ + ${par_augustus_parameters:+--augustus_parameters "$par_augustus_parameters"} \ + ${par_augustus_species:+--augustus_species "$par_augustus_species"} \ + ${par_auto_lineage:+--auto-lineage} \ + ${par_auto_lineage_euk:+--auto-lineage-euk} \ + ${par_auto_lineage_prok:+--auto-lineage-prok} \ + ${par_contig_break:+--contig_break $par_contig_break} \ + ${par_datasets_version:+--datasets_version "$par_datasets_version"} \ + ${par_e_value:+--evalue "$par_e_value"} \ + ${par_force:+--force} \ + ${par_limit:+--limit "$par_limit"} \ + ${par_long:+--long} \ + ${par_metaeuk:+--metaeuk} \ + ${par_metaeuk_parameters:+--metaeuk_parameters "$par_metaeuk_parameters"} \ + ${par_metaeuk_rerun_parameters:+--metaeuk_rerun_parameters "$par_metaeuk_rerun_parameters"} \ + ${par_miniprot:+--miniprot} \ + ${par_quiet:+--quiet} \ + ${par_restart:+--restart} \ + ${par_scaffold_composition:+--scaffold_composition} \ + ${par_tar:+--tar} \ + + +out_dir=$(find "$tmp_dir/$prefix" -maxdepth 1 -name 'run_*') + +if [[ -n "$par_short_summary_json" ]]; then + cp "$out_dir/short_summary.json" "$par_short_summary_json" +fi +if [[ -n "$par_short_summary_txt" ]]; then + cp "$out_dir/short_summary.txt" "$par_short_summary_txt" +fi +if [[ -n "$par_full_table" ]]; then + cp "$out_dir/full_table.tsv" "$par_full_table" +fi +if [[ -n "$par_missing_busco_list" ]]; then + cp "$out_dir/missing_busco_list.tsv" "$par_missing_busco_list" +fi +if [[ -n "$par_output_dir" ]]; then + if [[ -d "$par_output_dir" ]]; then + rm -r "$par_output_dir" + fi + cp -r -L "$out_dir" "$par_output_dir" +fi + diff --git a/src/busco/busco_run/test.sh b/src/busco/busco_run/test.sh new file mode 100644 index 00000000..12745a01 --- /dev/null +++ b/src/busco/busco_run/test.sh @@ -0,0 +1,88 @@ +test_dir="$meta_resources_dir/test_data" + +mkdir "run_prot_stramenopiles" +cd "run_prot_stramenopiles" + +echo "> Running busco with lineage dataset" + +"$meta_executable" \ + --input $test_dir/protein.fasta \ + --mode proteins \ + --lineage_dataset stramenopiles_odb10 \ + --output_dir output \ + --short_summary_json short_summary.json \ + --short_summary_txt short_summary.txt \ + --full_table full_table.tsv \ + --missing_busco_list missing_busco_list.tsv + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "output/full_table.tsv" ] && echo "full_table.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -f "output/missing_busco_list.tsv" ] && echo "missing_busco_list.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -f "output/short_summary.json" ] && echo "short_summary.json does not exist" && exit 1 +[ ! -f "output/short_summary.txt" ] && echo "short_summary.txt does not exist" && exit 1 +[ ! -f "full_table.tsv" ] && echo "full_table.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -f "missing_busco_list.tsv" ] && echo "missing_busco_list.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -f "short_summary.json" ] && echo "short_summary.json does not exist" && exit 1 +[ ! -f "short_summary.txt" ] && echo "short_summary.txt does not exist" && exit 1 + +echo ">> Checking if output is empty" +[ ! -s "output/full_table.tsv" ] && echo "full_table.tsv is empty" && exit 1 +[ ! -s "output/missing_busco_list.tsv" ] && echo "missing_busco_list.tsv is empty" && exit 1 +[ ! -s "output/short_summary.json" ] && echo "short_summary.json is empty" && exit 1 +[ ! -s "output/short_summary.txt" ] && echo "short_summary.txt is empty" && exit 1 +[ ! 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+MAFLDFVFPLSKDELLERSDSQYYVRDQVTTSELPEKLKGCFESLHDDGPLFILENFDTLYGLLAHFKSVDFNQLHKVYTKLLIKSITEFIPILENYFSKETPDDELQNKYLNVIKMTVYILTEFIISFESRLQKEYQKVVIDVRARKVKVRAAIKHKEKYNWDWDFHLSNGLNSIHQLLKAKINKLWDPPVVEEEFVNTIANCCYKIIEDPCIASVKHKELRIFIFQVIGYLIKKYNHGISCTVKIVQLLKNCDHLVSPLAQAVTMFIRNHGCKSLVREIVREISEMDDGNEAAGQGQDNSKMVAAFLNEIAAEGPEYVIPAMDELLLNLEKESYMMRNCTLTILTELLLQVYKKENLSSEAKDQRDEYLNSLMEHIYDVHTFVRTKVLQLFQKLVIEKALPLAFTLQLVDRAIGRLMDKSSNVVKYAVQLLRTMIVSNPFAAKLGVEELKKKLAEAKATLTELEKNLPETSAQLSLVDEWNNIHYPVLLKIIREILEDGMYGCFLFYFL +>1275837at2759_402676_1:000010 +MESMNDMFKKINAREKLVGWYHTGPQLRSSDLEINNLFKKYIPNPVLVIIDVQSKAVGLPTSAYFAVDEIKDDGTKSSLTFVHLPSSIEAEEAEEIGVEHLLRDTRDITAGTLATRVTEQVQSLRALEQRLDEIAVYLRKVVDGQLPINHTILGELQGVFNLLPNIFKTSNENDPLGLENGDERSFNINSNDQLMTVYLSSIVRSVIALHDLLDSLAASKAAEQEQDKLDLKQESTDSEKRATTAAVDEDPFMPN +>1284731at2759_42254_0:000010 +MAEAGAVAAEYPSGGRARAARTLLDQVVLPGEELLLPEQEDADGPGGAGERPLQARDPYLKWGVRRACCEIPYVPVRGDHVIGIVTAKSGDTFKVDVGGSEPASLSYLAFEGATKRNRPNVQVGDLIYGQFVVANKDMEPEMVCIDGCGRANGMGVIGQDGLLFKVTLGLIRKLLAPDCEIIQELGKLYPLEIVFGMNGRIWVKAKTIQQTLILANILEACEHMTTDQRKQIFSRLAES +>1228942at2759_45354_1:000010 +MNHDPFQWGRPRDEIYGHYDHKIAQASTSEFPSMHTQQPIITGTSVLGLKFDTGVVIAADHMGSYGSLLRFNNLERLICVGSETIVGVSGDISDFQHIERLLHELETEEEVYDTDGGHNLRAPNIHEYLSRVLYNRRLKMDPLWNAILVAGFNDDRTPFIRYVDLLGVTYGALALATGFGAHLAIPLLRKLVPYDLDYVKVKEADAREAVVNAMRVLYYRDARASDKYTLAVLSFKDGKVDVHFDQELKVTNQSWKFAEKVIGYGSKQQ +>759498at2759_502779_1:000010 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+MPTTVCTAKASYKKTPGQLELTETHLQWFADGKKAPSVRVLYAEAASLFCSKEGAAQIRLKLGLVGDDTGHNFTFTSPQSVAYKERETFKKELTNIISRNRSVPNVTTPRPPLNTSISSTTPAISNAPTPRSVVPPSRASTSRAPSVSSDGRTPIVPGSDPTSDFRLRKQVLVSNPELGALHRDLVMSGQITEAEFWEGREHLLLAQTATESQKRGRPGQLVDPRPETVEGGEVKIVITPQLVHDIFEEYPVVAKAYNDNVPNKLSEAEFWKRYFQSKLFNAHRASIRSSAAQHVVKDDKIFDKYLEKDDDELEPRRQRDEGINLFVNLGATREDHGETGNEQDITMQAGRQRGALPLIRKFNEHSERLLNSALGDEPTAKRRRIDAGKEDAYSQIDLDDLHDPEASAGIILEMQDRQRYFEGQMASAASAEAAAGKNLDIRAILGETKVNLHDWETNLAQLKINKKSGDAALLSMTENVSARLEIKMKKNDIPPELFSQMTTCQTAANEFLRQFWLSMYPPAADHQVLAPATPAQKAAKAAKMIGYLGKTHEKVDALIRTAQVEAVDAAKVEIVRAVCFVYIITVNFNANLQAMKPILDAVDRALAFYRSRKPPK +>1287401at2759_870435_1:000010 +MSSSIVGSLTRGCRTPSVNINPHPFFRCRTSLYHGIGKPPSWLHSRTQLWRTIGTSSSKHTPPSSASVSARRPTAIPSYNASREQMYKTRNRNLLMYTSAVVILGVGITYAAVPLYRMFCSATGFAGTPSVVSTSSGRFDPSRLTPDTDARRIRVHFNADRAEALPWKFFPQQKYVEVLPGESSLAFYKARNESKKDIIGIATYNVTPDRVAPYFSKVECFCFEEQKLLAGEEVDMPLLFFIDKDILDDPSCRGVNDVVLSYTFFKARRNAQGHLEPDAEEDVVQRSLGFEGYEHSPRAETKKVEGSKANS diff --git a/src/busco/busco_run/test_data/script.sh b/src/busco/busco_run/test_data/script.sh new file mode 100644 index 00000000..3c4eb763 --- /dev/null +++ b/src/busco/busco_run/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,12 @@ +# busco test data + +# Test data from https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers/tree/master/bio/busco/test + +if [ ! -d /tmp/snakemake-wrappers ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers /tmp/snakemake-wrappers +fi + +cp -r /tmp/snakemake-wrappers/bio/busco/test/protein.fasta src/busco/test_data + +# Test data from busco test data at https://gitlab.com/ezlab/busco/-/tree/master/test_data?ref_type=heads +wget -O src/busco/test_data/genome.fna "https://gitlab.com/ezlab/busco/-/raw/master/test_data/eukaryota/genome.fna?ref_type=heads&inline=false" \ No newline at end of file diff --git a/src/cutadapt/config.vsh.yaml b/src/cutadapt/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..b315d0ce --- /dev/null +++ b/src/cutadapt/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,481 @@ +name: cutadapt +description: | + Cutadapt removes adapter sequences from high-throughput sequencing reads. +keywords: [RNA-seq, scRNA-seq, high-throughput] +links: + homepage: https://cutadapt.readthedocs.io + documentation: https://cutadapt.readthedocs.io + repository: https://github.com/marcelm/cutadapt +references: + doi: 10.14806/ej.17.1.200 +license: MIT +argument_groups: + #################################################################### + - name: Specify Adapters for R1 + arguments: + - name: --adapter + alternatives: [-a] + type: string + multiple: true + description: | + Sequence of an adapter ligated to the 3' end (paired data: + of the first read). The adapter and subsequent bases are + trimmed. If a '$' character is appended ('anchoring'), the + adapter is only found if it is a suffix of the read. + required: false + - name: --front + alternatives: [-g] + type: string + multiple: true + description: | + Sequence of an adapter ligated to the 5' end (paired data: + of the first read). The adapter and any preceding bases + are trimmed. Partial matches at the 5' end are allowed. If + a '^' character is prepended ('anchoring'), the adapter is + only found if it is a prefix of the read. + required: false + - name: --anywhere + alternatives: [-b] + type: string + multiple: true + description: | + Sequence of an adapter that may be ligated to the 5' or 3' + end (paired data: of the first read). Both types of + matches as described under -a and -g are allowed. If the + first base of the read is part of the match, the behavior + is as with -g, otherwise as with -a. This option is mostly + for rescuing failed library preparations - do not use if + you know which end your adapter was ligated to! + required: false + + #################################################################### + - name: Specify Adapters using Fasta files for R1 + arguments: + - name: --adapter_fasta + type: file + multiple: true + description: | + Fasta file containing sequences of an adapter ligated to the 3' end (paired data: + of the first read). The adapter and subsequent bases are + trimmed. If a '$' character is appended ('anchoring'), the + adapter is only found if it is a suffix of the read. + required: false + - name: --front_fasta + type: file + description: | + Fasta file containing sequences of an adapter ligated to the 5' end (paired data: + of the first read). The adapter and any preceding bases + are trimmed. Partial matches at the 5' end are allowed. If + a '^' character is prepended ('anchoring'), the adapter is + only found if it is a prefix of the read. + required: false + - name: --anywhere_fasta + type: file + description: | + Fasta file containing sequences of an adapter that may be ligated to the 5' or 3' + end (paired data: of the first read). Both types of + matches as described under -a and -g are allowed. If the + first base of the read is part of the match, the behavior + is as with -g, otherwise as with -a. This option is mostly + for rescuing failed library preparations - do not use if + you know which end your adapter was ligated to! + required: false + + #################################################################### + - name: Specify Adapters for R2 + arguments: + - name: --adapter_r2 + alternatives: [-A] + type: string + multiple: true + description: | + Sequence of an adapter ligated to the 3' end (paired data: + of the first read). The adapter and subsequent bases are + trimmed. If a '$' character is appended ('anchoring'), the + adapter is only found if it is a suffix of the read. + required: false + - name: --front_r2 + alternatives: [-G] + type: string + multiple: true + description: | + Sequence of an adapter ligated to the 5' end (paired data: + of the first read). The adapter and any preceding bases + are trimmed. Partial matches at the 5' end are allowed. If + a '^' character is prepended ('anchoring'), the adapter is + only found if it is a prefix of the read. + required: false + - name: --anywhere_r2 + alternatives: [-B] + type: string + multiple: true + description: | + Sequence of an adapter that may be ligated to the 5' or 3' + end (paired data: of the first read). Both types of + matches as described under -a and -g are allowed. If the + first base of the read is part of the match, the behavior + is as with -g, otherwise as with -a. This option is mostly + for rescuing failed library preparations - do not use if + you know which end your adapter was ligated to! + required: false + + #################################################################### + - name: Specify Adapters using Fasta files for R2 + arguments: + - name: --adapter_r2_fasta + type: file + description: | + Fasta file containing sequences of an adapter ligated to the 3' end (paired data: + of the first read). The adapter and subsequent bases are + trimmed. If a '$' character is appended ('anchoring'), the + adapter is only found if it is a suffix of the read. + required: false + - name: --front_r2_fasta + type: file + description: | + Fasta file containing sequences of an adapter ligated to the 5' end (paired data: + of the first read). The adapter and any preceding bases + are trimmed. Partial matches at the 5' end are allowed. If + a '^' character is prepended ('anchoring'), the adapter is + only found if it is a prefix of the read. + required: false + - name: --anywhere_r2_fasta + type: file + description: | + Fasta file containing sequences of an adapter that may be ligated to the 5' or 3' + end (paired data: of the first read). Both types of + matches as described under -a and -g are allowed. If the + first base of the read is part of the match, the behavior + is as with -g, otherwise as with -a. This option is mostly + for rescuing failed library preparations - do not use if + you know which end your adapter was ligated to! + required: false + + #################################################################### + - name: Paired-end options + arguments: + - name: --pair_adapters + type: boolean_true + description: | + Treat adapters given with -a/-A etc. as pairs. Either both + or none are removed from each read pair. + - name: --pair_filter + type: string + choices: [any, both, first] + description: | + Which of the reads in a paired-end read have to match the + filtering criterion in order for the pair to be filtered. + - name: --interleaved + type: boolean_true + description: | + Read and/or write interleaved paired-end reads. + + #################################################################### + - name: Input parameters + arguments: + - name: --input + type: file + required: true + description: | + Input fastq file for single-end reads or R1 for paired-end reads. + - name: --input_r2 + type: file + required: false + description: | + Input fastq file for R2 in the case of paired-end reads. + - name: --error_rate + alternatives: [-E, --errors] + type: double + description: | + Maximum allowed error rate (if 0 <= E < 1), or absolute + number of errors for full-length adapter match (if E is an + integer >= 1). Error rate = no. of errors divided by + length of matching region. Default: 0.1 (10%). + example: 0.1 + - name: --no_indels + type: boolean_false + description: | + Allow only mismatches in alignments. + + - name: --times + type: integer + alternatives: [-n] + description: | + Remove up to COUNT adapters from each read. Default: 1. + example: 1 + - name: --overlap + alternatives: [-O] + type: integer + description: | + Require MINLENGTH overlap between read and adapter for an + adapter to be found. The default is 3. + example: 3 + - name: --match_read_wildcards + type: boolean_true + description: | + Interpret IUPAC wildcards in reads. + - name: --no_match_adapter_wildcards + type: boolean_false + description: | + Do not interpret IUPAC wildcards in adapters. + - name: --action + type: string + choices: + - trim + - retain + - mask + - lowercase + - none + description: | + What to do if a match was found. trim: trim adapter and + up- or downstream sequence; retain: trim, but retain + adapter; mask: replace with 'N' characters; lowercase: + convert to lowercase; none: leave unchanged. + The default is trim. + example: trim + - name: --revcomp + alternatives: [--rc] + type: boolean_true + description: | + Check both the read and its reverse complement for adapter + matches. If match is on reverse-complemented version, + output that one. + + #################################################################### + - name: "Demultiplexing options" + arguments: + - name: "--demultiplex_mode" + type: string + choices: ["single", "unique_dual", "combinatorial_dual"] + required: false + description: | + Enable demultiplexing and set the mode for it. + With mode 'unique_dual', adapters from the first and second read are used, + and the indexes from the reads are only used in pairs. This implies + --pair_adapters. + Enabling mode 'combinatorial_dual' allows all combinations of the sets of indexes + on R1 and R2. It is necessary to write each read pair to an output + file depending on the adapters found on both R1 and R2. + Mode 'single', uses indexes or barcodes located at the 5' + end of the R1 read (single). + + #################################################################### + - name: Read modifications + arguments: + - name: --cut + alternatives: [-u] + type: integer + multiple: true + description: | + Remove LEN bases from each read (or R1 if paired; use --cut_r2 + option for R2). If LEN is positive, remove bases from the + beginning. If LEN is negative, remove bases from the end. + Can be used twice if LENs have different signs. Applied + *before* adapter trimming. + - name: --cut_r2 + type: integer + multiple: true + description: | + Remove LEN bases from each read (for R2). If LEN is positive, remove bases from the + beginning. If LEN is negative, remove bases from the end. + Can be used twice if LENs have different signs. Applied + *before* adapter trimming. + - name: --nextseq_trim + type: string + description: | + NextSeq-specific quality trimming (each read). Trims also + dark cycles appearing as high-quality G bases. + - name: --quality_cutoff + alternatives: [-q] + type: string + description: | + Trim low-quality bases from 5' and/or 3' ends of each read + before adapter removal. Applied to both reads if data is + paired. If one value is given, only the 3' end is trimmed. + If two comma-separated cutoffs are given, the 5' end is + trimmed with the first cutoff, the 3' end with the second. + - name: --quality_cutoff_r2 + alternatives: [-Q] + type: string + description: | + Quality-trimming cutoff for R2. Default: same as for R1 + - name: --quality_base + type: integer + description: | + Assume that quality values in FASTQ are encoded as + ascii(quality + N). This needs to be set to 64 for some + old Illumina FASTQ files. The default is 33. + example: 33 + - name: --poly_a + type: boolean_true + description: Trim poly-A tails + - name: --length + alternatives: [-l] + type: integer + description: | + Shorten reads to LENGTH. Positive values remove bases at + the end while negative ones remove bases at the beginning. + This and the following modifications are applied after + adapter trimming. + - name: --trim_n + type: boolean_true + description: Trim N's on ends of reads. + - name: --length_tag + type: string + description: | + Search for TAG followed by a decimal number in the + description field of the read. Replace the decimal number + with the correct length of the trimmed read. For example, + use --length-tag 'length=' to correct fields like + 'length=123'. + example: "length=" + - name: --strip_suffix + type: string + description: | + Remove this suffix from read names if present. Can be + given multiple times. + - name: --prefix + alternatives: [-x] + type: string + description: | + Add this prefix to read names. Use {name} to insert the + name of the matching adapter. + - name: --suffix + alternatives: [-y] + type: string + description: | + Add this suffix to read names; can also include {name} + - name: --rename + type: string + description: | + Rename reads using TEMPLATE containing variables such as + {id}, {adapter_name} etc. (see documentation) + - name: --zero_cap + alternatives: [-z] + type: boolean_true + description: Change negative quality values to zero. + + #################################################################### + - name: Filtering of processed reads + description: | + Filters are applied after above read modifications. Paired-end reads are + always discarded pairwise (see also --pair_filter). + arguments: + - name: --minimum_length + alternatives: [-m] + type: string + description: | + Discard reads shorter than LEN. Default is 0. + When trimming paired-end reads, the minimum lengths for R1 and R2 can be specified separately by separating them with a colon (:). + If the colon syntax is not used, the same minimum length applies to both reads, as discussed above. + Also, one of the values can be omitted to impose no restrictions. + For example, with -m 17:, the length of R1 must be at least 17, but the length of R2 is ignored. + example: "0" + - name: --maximum_length + alternatives: [-M] + type: string + description: | + Discard reads longer than LEN. Default: no limit. + For paired reads, see the remark for --minimum_length + - name: --max_n + type: string + description: | + Discard reads with more than COUNT 'N' bases. If COUNT is + a number between 0 and 1, it is interpreted as a fraction + of the read length. + - name: --max_expected_errors + alternatives: [--max_ee] + type: long + description: | + Discard reads whose expected number of errors (computed + from quality values) exceeds ERRORS. + - name: --max_average_error_rate + alternatives: [--max_aer] + type: long + description: | + as --max_expected_errors (see above), but divided by + length to account for reads of varying length. + - name: --discard_trimmed + alternatives: [--discard] + type: boolean_true + description: | + Discard reads that contain an adapter. Use also -O to + avoid discarding too many randomly matching reads. + - name: --discard_untrimmed + alternatives: [--trimmed_only] + type: boolean_true + description: | + Discard reads that do not contain an adapter. + - name: --discard_casava + type: boolean_true + description: | + Discard reads that did not pass CASAVA filtering (header + has :Y:). + + #################################################################### + - name: Output parameters + arguments: + - name: --report + type: string + choices: [full, minimal] + description: | + Which type of report to print: 'full' (default) or 'minimal'. + example: full + - name: --json + type: boolean_true + description: | + Write report in JSON format to this file. + - name: --output + type: file + description: | + Glob pattern for matching the expected output files. + Should include `$output_dir`. + example: "fastq/*_001.fast[a,q]" + direction: output + required: true + must_exist: true + multiple: true + - name: --fasta + type: boolean_true + description: | + Output FASTA to standard output even on FASTQ input. + - name: --info_file + type: boolean_true + description: | + Write information about each read and its adapter matches + into info.txt in the output directory. + See the documentation for the file format. + # - name: -Z + # - name: --rest_file + # - name: --wildcard-file + # - name: --too_short_output + # - name: --too_long_output + # - name: --untrimmed_output + # - name: --untrimmed_paired_output + # - name: too_short_paired_output + # - name: too_long_paired_output + - name: Debug + arguments: + - type: boolean_true + name: --debug + description: Print debug information +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + +engines: + - type: docker + image: python:3.12 + setup: + - type: python + pip: + - cutadapt + - type: docker + run: | + cutadapt --version | sed 's/\(.*\)/cutadapt: "\1"/' > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/cutadapt/help.txt b/src/cutadapt/help.txt new file mode 100644 index 00000000..2280c3e2 --- /dev/null +++ b/src/cutadapt/help.txt @@ -0,0 +1,218 @@ +cutadapt version 4.6 + +Copyright (C) 2010 Marcel Martin and contributors + +Cutadapt removes adapter sequences from high-throughput sequencing reads. + +Usage: + cutadapt -a ADAPTER [options] [-o output.fastq] input.fastq + +For paired-end reads: + cutadapt -a ADAPT1 -A ADAPT2 [options] -o out1.fastq -p out2.fastq in1.fastq in2.fastq + +Replace "ADAPTER" with the actual sequence of your 3' adapter. IUPAC wildcard +characters are supported. All reads from input.fastq will be written to +output.fastq with the adapter sequence removed. Adapter matching is +error-tolerant. Multiple adapter sequences can be given (use further -a +options), but only the best-matching adapter will be removed. + +Input may also be in FASTA format. Compressed input and output is supported and +auto-detected from the file name (.gz, .xz, .bz2). Use the file name '-' for +standard input/output. Without the -o option, output is sent to standard output. + +Citation: + +Marcel Martin. Cutadapt removes adapter sequences from high-throughput +sequencing reads. EMBnet.Journal, 17(1):10-12, May 2011. +http://dx.doi.org/10.14806/ej.17.1.200 + +Run "cutadapt --help" to see all command-line options. +See https://cutadapt.readthedocs.io/ for full documentation. + +Options: + -h, --help Show this help message and exit + --version Show version number and exit + --debug Print debug log. Use twice to also print DP matrices + -j CORES, --cores CORES + Number of CPU cores to use. Use 0 to auto-detect. Default: + 1 + +Finding adapters: + Parameters -a, -g, -b specify adapters to be removed from each read (or from + R1 if data is paired-end. If specified multiple times, only the best matching + adapter is trimmed (but see the --times option). Use notation 'file:FILE' to + read adapter sequences from a FASTA file. + + -a ADAPTER, --adapter ADAPTER + Sequence of an adapter ligated to the 3' end (paired data: + of the first read). The adapter and subsequent bases are + trimmed. If a '$' character is appended ('anchoring'), the + adapter is only found if it is a suffix of the read. + -g ADAPTER, --front ADAPTER + Sequence of an adapter ligated to the 5' end (paired data: + of the first read). The adapter and any preceding bases + are trimmed. Partial matches at the 5' end are allowed. If + a '^' character is prepended ('anchoring'), the adapter is + only found if it is a prefix of the read. + -b ADAPTER, --anywhere ADAPTER + Sequence of an adapter that may be ligated to the 5' or 3' + end (paired data: of the first read). Both types of + matches as described under -a and -g are allowed. If the + first base of the read is part of the match, the behavior + is as with -g, otherwise as with -a. This option is mostly + for rescuing failed library preparations - do not use if + you know which end your adapter was ligated to! + -e E, --error-rate E, --errors E + Maximum allowed error rate (if 0 <= E < 1), or absolute + number of errors for full-length adapter match (if E is an + integer >= 1). Error rate = no. of errors divided by + length of matching region. Default: 0.1 (10%) + --no-indels Allow only mismatches in alignments. Default: allow both + mismatches and indels + -n COUNT, --times COUNT + Remove up to COUNT adapters from each read. Default: 1 + -O MINLENGTH, --overlap MINLENGTH + Require MINLENGTH overlap between read and adapter for an + adapter to be found. Default: 3 + --match-read-wildcards + Interpret IUPAC wildcards in reads. Default: False + -N, --no-match-adapter-wildcards + Do not interpret IUPAC wildcards in adapters. + --action {trim,retain,mask,lowercase,none} + What to do if a match was found. trim: trim adapter and + up- or downstream sequence; retain: trim, but retain + adapter; mask: replace with 'N' characters; lowercase: + convert to lowercase; none: leave unchanged. Default: trim + --rc, --revcomp Check both the read and its reverse complement for adapter + matches. If match is on reverse-complemented version, + output that one. Default: check only read + +Additional read modifications: + -u LEN, --cut LEN Remove LEN bases from each read (or R1 if paired; use -U + option for R2). If LEN is positive, remove bases from the + beginning. If LEN is negative, remove bases from the end. + Can be used twice if LENs have different signs. Applied + *before* adapter trimming. + --nextseq-trim 3'CUTOFF + NextSeq-specific quality trimming (each read). Trims also + dark cycles appearing as high-quality G bases. + -q [5'CUTOFF,]3'CUTOFF, --quality-cutoff [5'CUTOFF,]3'CUTOFF + Trim low-quality bases from 5' and/or 3' ends of each read + before adapter removal. Applied to both reads if data is + paired. If one value is given, only the 3' end is trimmed. + If two comma-separated cutoffs are given, the 5' end is + trimmed with the first cutoff, the 3' end with the second. + --quality-base N Assume that quality values in FASTQ are encoded as + ascii(quality + N). This needs to be set to 64 for some + old Illumina FASTQ files. Default: 33 + --poly-a Trim poly-A tails + --length LENGTH, -l LENGTH + Shorten reads to LENGTH. Positive values remove bases at + the end while negative ones remove bases at the beginning. + This and the following modifications are applied after + adapter trimming. + --trim-n Trim N's on ends of reads. + --length-tag TAG Search for TAG followed by a decimal number in the + description field of the read. Replace the decimal number + with the correct length of the trimmed read. For example, + use --length-tag 'length=' to correct fields like + 'length=123'. + --strip-suffix STRIP_SUFFIX + Remove this suffix from read names if present. Can be + given multiple times. + -x PREFIX, --prefix PREFIX + Add this prefix to read names. Use {name} to insert the + name of the matching adapter. + -y SUFFIX, --suffix SUFFIX + Add this suffix to read names; can also include {name} + --rename TEMPLATE Rename reads using TEMPLATE containing variables such as + {id}, {adapter_name} etc. (see documentation) + --zero-cap, -z Change negative quality values to zero. + +Filtering of processed reads: + Filters are applied after above read modifications. Paired-end reads are + always discarded pairwise (see also --pair-filter). + + -m LEN[:LEN2], --minimum-length LEN[:LEN2] + Discard reads shorter than LEN. Default: 0 + -M LEN[:LEN2], --maximum-length LEN[:LEN2] + Discard reads longer than LEN. Default: no limit + --max-n COUNT Discard reads with more than COUNT 'N' bases. If COUNT is + a number between 0 and 1, it is interpreted as a fraction + of the read length. + --max-expected-errors ERRORS, --max-ee ERRORS + Discard reads whose expected number of errors (computed + from quality values) exceeds ERRORS. + --max-average-error-rate ERROR_RATE, --max-aer ERROR_RATE + as --max-expected-errors (see above), but divided by + length to account for reads of varying length. + --discard-trimmed, --discard + Discard reads that contain an adapter. Use also -O to + avoid discarding too many randomly matching reads. + --discard-untrimmed, --trimmed-only + Discard reads that do not contain an adapter. + --discard-casava Discard reads that did not pass CASAVA filtering (header + has :Y:). + +Output: + --quiet Print only error messages. + --report {full,minimal} + Which type of report to print: 'full' or 'minimal'. + Default: full + --json FILE Dump report in JSON format to FILE + -o FILE, --output FILE + Write trimmed reads to FILE. FASTQ or FASTA format is + chosen depending on input. Summary report is sent to + standard output. Use '{name}' for demultiplexing (see + docs). Default: write to standard output + --fasta Output FASTA to standard output even on FASTQ input. + -Z Use compression level 1 for gzipped output files (faster, + but uses more space) + --info-file FILE Write information about each read and its adapter matches + into FILE. See the documentation for the file format. + -r FILE, --rest-file FILE + When the adapter matches in the middle of a read, write + the rest (after the adapter) to FILE. + --wildcard-file FILE When the adapter has N wildcard bases, write adapter bases + matching wildcard positions to FILE. (Inaccurate with + indels.) + --too-short-output FILE + Write reads that are too short (according to length + specified by -m) to FILE. Default: discard reads + --too-long-output FILE + Write reads that are too long (according to length + specified by -M) to FILE. Default: discard reads + --untrimmed-output FILE + Write reads that do not contain any adapter to FILE. + Default: output to same file as trimmed reads + +Paired-end options: + The -A/-G/-B/-U/-Q options work like their lowercase counterparts, but are + applied to R2 (second read in pair) + + -A ADAPTER 3' adapter to be removed from R2 + -G ADAPTER 5' adapter to be removed from R2 + -B ADAPTER 5'/3 adapter to be removed from R2 + -U LENGTH Remove LENGTH bases from R2 + -Q [5'CUTOFF,]3'CUTOFF + Quality-trimming cutoff for R2. Default: same as for R1 + -p FILE, --paired-output FILE + Write R2 to FILE. + --pair-adapters Treat adapters given with -a/-A etc. as pairs. Either both + or none are removed from each read pair. + --pair-filter {any,both,first} + Which of the reads in a paired-end read have to match the + filtering criterion in order for the pair to be filtered. + Default: any + --interleaved Read and/or write interleaved paired-end reads. + --untrimmed-paired-output FILE + Write second read in a pair to this FILE when no adapter + was found. Use with --untrimmed-output. Default: output to + same file as trimmed reads + --too-short-paired-output FILE + Write second read in a pair to this file if pair is too + short. + --too-long-paired-output FILE + Write second read in a pair to this file if pair is too + long. + diff --git a/src/cutadapt/script.sh b/src/cutadapt/script.sh new file mode 100644 index 00000000..20c92724 --- /dev/null +++ b/src/cutadapt/script.sh @@ -0,0 +1,258 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +par_adapter='AGATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCAC;GGATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCAC' +par_input='src/cutadapt/test_data/se/a.fastq' +par_report='full' +par_json='false' +par_fasta='false' +par_info_file='false' +par_debug='true' +## VIASH END + +function debug { + [[ "$par_debug" == "true" ]] && echo "DEBUG: $@" +} + +output_dir=$(dirname $par_output) +[[ ! -d $output_dir ]] && mkdir -p $output_dir + +# Init +########################################################### + +echo ">> Paired-end data or not?" + +mode="" +if [[ -z $par_input_r2 ]]; then + mode="se" + echo " Single end" + input="$par_input" +else + echo " Paired end" + mode="pe" + input="$par_input $par_input_r2" +fi + +# Adapter arguments +# - paired and single-end +# - string and fasta +########################################################### + +function add_flags { + local arg=$1 + local flag=$2 + local prefix=$3 + [[ -z $prefix ]] && prefix="" + + # This function should not be called if the input is empty + # but check for it just in case + if [[ -z $arg ]]; then + return + fi + + local output="" + IFS=';' read -r -a array <<< "$arg" + for a in "${array[@]}"; do + output="$output $flag $prefix$a" + done + echo $output +} + +debug ">> Parsing arguments dealing with adapters" +adapter_args=$(echo \ + ${par_adapter:+$(add_flags "$par_adapter" "--adapter")} \ + ${par_adapter_fasta:+$(add_flags "$par_adapter_fasta" "--adapter" "file:")} \ + ${par_front:+$(add_flags "$par_front" "--front")} \ + ${par_front_fasta:+$(add_flags "$par_front_fasta" "--front" "file:")} \ + ${par_anywhere:+$(add_flags "$par_anywhere" "--anywhere")} \ + ${par_anywhere_fasta:+$(add_flags "$par_anywhere_fasta" "--anywhere" "file:")} \ + ${par_adapter_r2:+$(add_flags "$par_adapter_r2" "-A")} \ + ${par_adapter_fasta_r2:+$(add_flags "$par_adapter_fasta_r2" "-A" "file:")} \ + ${par_front_r2:+$(add_flags "$par_front_r2" "-G")} \ + ${par_front_fasta_r2:+$(add_flags "$par_front_fasta_r2" "-G" "file:")} \ + ${par_anywhere_r2:+$(add_flags "$par_anywhere_r2" "-B")} \ + ${par_anywhere_fasta_r2:+$(add_flags "$par_anywhere_fasta_r2" "-B" "file:")} \ +) + +debug "Arguments to cutadapt:" +debug "$adapter_args" +debug + +# Paired-end options +########################################################### +echo ">> Parsing arguments for paired-end reads" +[[ "$par_pair_adapters" == "false" ]] && unset par_pair_adapters +[[ "$par_interleaved" == "false" ]] && unset par_interleaved + +paired_args=$(echo \ + ${par_pair_adapters:+--pair-adapters} \ + ${par_pair_filter:+--pair-filter "${par_pair_filter}"} \ + ${par_interleaved:+--interleaved} +) +debug "Arguments to cutadapt:" +debug $paired_args +debug + +# Input arguments +########################################################### +echo ">> Parsing input arguments" +[[ "$par_no_indels" == "true" ]] && unset par_no_indels +[[ "$par_match_read_wildcards" == "false" ]] && unset par_match_read_wildcards +[[ "$par_no_match_adapter_wildcards" == "true" ]] && unset par_no_match_adapter_wildcards +[[ "$par_revcomp" == "false" ]] && unset par_revcomp + +input_args=$(echo \ + ${par_error_rate:+--error-rate "${par_error_rate}"} \ + ${par_no_indels:+--no-indels} \ + ${par_times:+--times "${par_times}"} \ + ${par_overlap:+--overlap "${par_overlap}"} \ + ${par_match_read_wildcards:+--match-read-wildcards} \ + ${par_no_match_adapter_wildcards:+--no-match-adapter-wildcards} \ + ${par_action:+--action "${par_action}"} \ + ${par_revcomp:+--revcomp} \ +) +debug "Arguments to cutadapt:" +debug $input_args +debug + +# Read modifications +########################################################### +echo ">> Parsing read modification arguments" +[[ "$par_poly_a" == "false" ]] && unset par_poly_a +[[ "$par_trim_n" == "false" ]] && unset par_trim_n +[[ "$par_zero_cap" == "false" ]] && unset par_zero_cap + +mod_args=$(echo \ + ${par_cut:+--cut "${par_cut}"} \ + ${par_cut_r2:+--cut_r2 "${par_cut_r2}"} \ + ${par_nextseq_trim:+--nextseq-trim "${par_nextseq_trim}"} \ + ${par_quality_cutoff:+--quality-cutoff "${par_quality_cutoff}"} \ + ${par_quality_cutoff_r2:+-Q "${par_quality_cutoff_r2}"} \ + ${par_quality_base:+--quality-base "${par_quality_base}"} \ + ${par_poly_a:+--poly-a} \ + ${par_length:+--length "${par_length}"} \ + ${par_trim_n:+--trim-n} \ + ${par_length_tag:+--length-tag "${par_length_tag}"} \ + ${par_strip_suffix:+--strip-suffix "${par_strip_suffix}"} \ + ${par_prefix:+--prefix "${par_prefix}"} \ + ${par_suffix:+--suffix "${par_suffix}"} \ + ${par_rename:+--rename "${par_rename}"} \ + ${par_zero_cap:+--zero-cap} \ +) +debug "Arguments to cutadapt:" +debug $mod_args +debug + +# Filtering of processed reads arguments +########################################################### +echo ">> Filtering of processed reads arguments" +[[ "$par_discard_trimmed" == "false" ]] && unset par_discard_trimmed +[[ "$par_discard_untrimmed" == "false" ]] && unset par_discard_untrimmed +[[ "$par_discard_casava" == "false" ]] && unset par_discard_casava + +# Parse and transform the minimum and maximum length arguments +[[ -z $par_minimum_length ]] + +filter_args=$(echo \ + ${par_minimum_length:+--minimum-length "${par_minimum_length}"} \ + ${par_maximum_length:+--maximum-length "${par_maximum_length}"} \ + ${par_max_n:+--max-n "${par_max_n}"} \ + ${par_max_expected_errors:+--max-expected-errors "${par_max_expected_errors}"} \ + ${par_max_average_error_rate:+--max-average-error-rate "${par_max_average_error_rate}"} \ + ${par_discard_trimmed:+--discard-trimmed} \ + ${par_discard_untrimmed:+--discard-untrimmed} \ + ${par_discard_casava:+--discard-casava} \ +) +debug "Arguments to cutadapt:" +debug $filter_args +debug + +# Optional output arguments +########################################################### +echo ">> Optional arguments" +[[ "$par_json" == "false" ]] && unset par_json +[[ "$par_fasta" == "false" ]] && unset par_fasta +[[ "$par_info_file" == "false" ]] && unset par_info_file + +optional_output_args=$(echo \ + ${par_report:+--report "${par_report}"} \ + ${par_json:+--json "report.json"} \ + ${par_fasta:+--fasta} \ + ${par_info_file:+--info-file "info.txt"} \ +) + +debug "Arguments to cutadapt:" +debug $optional_output_args +debug + +# Output arguments +# We write the output to a directory rather than +# individual files. +########################################################### + +if [[ -z $par_fasta ]]; then + ext="fastq" +else + ext="fasta" +fi + +demultiplex_mode="$par_demultiplex_mode" +if [[ $mode == "se" ]]; then + if [[ "$demultiplex_mode" == "unique_dual" ]] || [[ "$demultiplex_mode" == "combinatorial_dual" ]]; then + echo "Demultiplexing dual indexes is not possible with single-end data." + exit 1 + fi + prefix="trimmed_" + if [[ ! -z "$demultiplex_mode" ]]; then + prefix="{name}_" + fi + output_args=$(echo \ + --output "$output_dir/${prefix}001.$ext" \ + ) +else + demultiplex_indicator_r1='{name}_' + demultiplex_indicator_r2=$demultiplex_indicator_r1 + if [[ "$demultiplex_mode" == "combinatorial_dual" ]]; then + demultiplex_indicator_r1='{name1}_{name2}_' + demultiplex_indicator_r2='{name1}_{name2}_' + fi + prefix_r1="trimmed_" + prefix_r2="trimmed_" + if [[ ! -z "$demultiplex_mode" ]]; then + prefix_r1=$demultiplex_indicator_r1 + prefix_r2=$demultiplex_indicator_r2 + fi + output_args=$(echo \ + --output "$output_dir/${prefix_r1}R1_001.$ext" \ + --paired-output "$output_dir/${prefix_r2}R2_001.$ext" \ + ) +fi + +debug "Arguments to cutadapt:" +debug $output_args +debug + +# Full CLI +# Set the --cores argument to 0 unless meta_cpus is set +########################################################### +echo ">> Running cutadapt" +par_cpus=0 +[[ ! -z $meta_cpus ]] && par_cpus=$meta_cpus + +cli=$(echo \ + $input \ + $adapter_args \ + $paired_args \ + $input_args \ + $mod_args \ + $filter_args \ + $optional_output_args \ + $output_args \ + --cores $par_cpus +) + +debug ">> Full CLI to be run:" +debug cutadapt $cli | sed -e 's/--/\r\n --/g' +debug + +cutadapt $cli diff --git a/src/cutadapt/test.sh b/src/cutadapt/test.sh new file mode 100644 index 00000000..1d6d9c18 --- /dev/null +++ b/src/cutadapt/test.sh @@ -0,0 +1,261 @@ +#!/bin/bash + +set -e +set -eo pipefail + +############################################# +# helper functions +assert_file_exists() { + [ -f "$1" ] || (echo "File '$1' does not exist" && exit 1) +} +assert_file_doesnt_exist() { + [ ! -f "$1" ] || (echo "File '$1' exists but shouldn't" && exit 1) +} +assert_file_empty() { + [ ! -s "$1" ] || (echo "File '$1' is not empty but should be" && exit 1) +} +assert_file_not_empty() { + [ -s "$1" ] || (echo "File '$1' is empty but shouldn't be" && exit 1) +} +assert_file_contains() { + grep -q "$2" "$1" || (echo "File '$1' does not contain '$2'" && exit 1) +} +assert_file_not_contains() { + grep -q "$2" "$1" && (echo "File '$1' contains '$2' but shouldn't" && exit 1) +} + +############################################# +mkdir test_multiple_output +cd test_multiple_output + +echo "#############################################" +echo "> Run cutadapt with multiple outputs" + +cat > example.fa <<'EOF' +>read1 +MYSEQUENCEADAPTER +>read2 +MYSEQUENCEADAP +>read3 +MYSEQUENCEADAPTERSOMETHINGELSE +>read4 +MYSEQUENCEADABTER +>read5 +MYSEQUENCEADAPTR +>read6 +MYSEQUENCEADAPPTER +>read7 +ADAPTERMYSEQUENCE +>read8 +PTERMYSEQUENCE +>read9 +SOMETHINGADAPTERMYSEQUENCE +EOF + +"$meta_executable" \ + --report minimal \ + --output "out_test/*.fasta" \ + --adapter ADAPTER \ + --input example.fa \ + --fasta \ + --demultiplex_mode single \ + --no_match_adapter_wildcards \ + --json + +echo ">> Checking output" +assert_file_exists "report.json" +assert_file_exists "out_test/1_001.fasta" +assert_file_exists "out_test/unknown_001.fasta" + +cd .. +echo + +############################################# +mkdir test_simple_single_end +cd test_simple_single_end + +echo "#############################################" +echo "> Run cutadapt on single-end data" + +cat > example.fa <<'EOF' +>read1 +MYSEQUENCEADAPTER +>read2 +MYSEQUENCEADAP +>read3 +MYSEQUENCEADAPTERSOMETHINGELSE +>read4 +MYSEQUENCEADABTER +>read5 +MYSEQUENCEADAPTR +>read6 +MYSEQUENCEADAPPTER +>read7 +ADAPTERMYSEQUENCE +>read8 +PTERMYSEQUENCE +>read9 +SOMETHINGADAPTERMYSEQUENCE +EOF + +"$meta_executable" \ + --report minimal \ + --output "out_test1/*.fasta" \ + --adapter ADAPTER \ + --input example.fa \ + --demultiplex_mode single \ + --fasta \ + --no_match_adapter_wildcards \ + --json + +echo ">> Checking output" +assert_file_exists "report.json" +assert_file_exists "out_test1/1_001.fasta" +assert_file_exists "out_test1/unknown_001.fasta" + +echo ">> Check if output is empty" +assert_file_not_empty "report.json" +assert_file_not_empty "out_test1/1_001.fasta" +assert_file_not_empty "out_test1/unknown_001.fasta" + +echo ">> Check contents" +for i in 1 2 3 7 9; do + assert_file_contains "out_test1/1_001.fasta" ">read$i" +done +for i in 4 5 6 8; do + assert_file_contains "out_test1/unknown_001.fasta" ">read$i" +done + +cd .. +echo + +############################################# +mkdir test_multiple_single_end +cd test_multiple_single_end + +echo "#############################################" +echo "> Run with a combination of inputs" + +cat > example.fa <<'EOF' +>read1 +ACGTACGTACGTAAAAA +>read2 +ACGTACGTACGTCCCCC +>read3 +ACGTACGTACGTGGGGG +>read4 +ACGTACGTACGTTTTTT +EOF + +cat > adapters1.fasta <<'EOF' +>adapter1 +CCCCC +EOF + +cat > adapters2.fasta <<'EOF' +>adapter2 +GGGGG +EOF + +"$meta_executable" \ + --report minimal \ + --output "out_test2/*.fasta" \ + --adapter AAAAA \ + --adapter_fasta adapters1.fasta \ + --adapter_fasta adapters2.fasta \ + --demultiplex_mode single \ + --input example.fa \ + --fasta \ + --json + +echo ">> Checking output" +assert_file_exists "report.json" +assert_file_exists "out_test2/1_001.fasta" +assert_file_exists "out_test2/adapter1_001.fasta" +assert_file_exists "out_test2/adapter2_001.fasta" +assert_file_exists "out_test2/unknown_001.fasta" + +echo ">> Check if output is empty" +assert_file_not_empty "report.json" +assert_file_not_empty "out_test2/1_001.fasta" +assert_file_not_empty "out_test2/adapter1_001.fasta" +assert_file_not_empty "out_test2/adapter2_001.fasta" +assert_file_not_empty "out_test2/unknown_001.fasta" + +echo ">> Check contents" +assert_file_contains "out_test2/1_001.fasta" ">read1" +assert_file_contains "out_test2/adapter1_001.fasta" ">read2" +assert_file_contains "out_test2/adapter2_001.fasta" ">read3" +assert_file_contains "out_test2/unknown_001.fasta" ">read4" + +cd .. +echo + +############################################# +mkdir test_simple_paired_end +cd test_simple_paired_end + +echo "#############################################" +echo "> Run cutadapt on paired-end data" + +cat > example_R1.fastq <<'EOF' +@read1 +ACGTACGTACGTAAAAA ++ +IIIIIIIIIIIIIIIII +@read2 +ACGTACGTACGTCCCCC ++ +IIIIIIIIIIIIIIIII +EOF + +cat > example_R2.fastq <<'EOF' +@read1 +ACGTACGTACGTGGGGG ++ +IIIIIIIIIIIIIIIII +@read2 +ACGTACGTACGTTTTTT ++ +IIIIIIIIIIIIIIIII +EOF + +"$meta_executable" \ + --report minimal \ + --output "out_test3/*.fastq" \ + --adapter AAAAA \ + --adapter_r2 GGGGG \ + --input example_R1.fastq \ + --input_r2 example_R2.fastq \ + --quality_cutoff 20 \ + --demultiplex_mode unique_dual \ + --json \ + ---cpus 1 + +echo ">> Checking output" +assert_file_exists "report.json" +assert_file_exists "out_test3/1_R1_001.fastq" +assert_file_exists "out_test3/1_R2_001.fastq" +assert_file_exists "out_test3/unknown_R1_001.fastq" +assert_file_exists "out_test3/unknown_R2_001.fastq" + +echo ">> Check if output is empty" +assert_file_not_empty "report.json" +assert_file_not_empty "out_test3/1_R1_001.fastq" +assert_file_not_empty "out_test3/1_R2_001.fastq" +assert_file_not_empty "out_test3/unknown_R1_001.fastq" + +echo ">> Check contents" +assert_file_contains "out_test3/1_R1_001.fastq" "@read1" +assert_file_contains "out_test3/1_R2_001.fastq" "@read1" +assert_file_contains "out_test3/unknown_R1_001.fastq" "@read2" +assert_file_contains "out_test3/unknown_R2_001.fastq" "@read2" + +cd .. +echo + +############################################# + +echo "#############################################" +echo "> Test successful" + diff --git a/src/falco/config.vsh.yaml b/src/falco/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..4d9cf656 --- /dev/null +++ b/src/falco/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,196 @@ +name: falco +description: A C++ drop-in replacement of FastQC to assess the quality of sequence read data +keywords: [qc, fastqc, sequencing] +links: + documentation: https://falco.readthedocs.io/en/latest/ + repository: https://github.com/smithlabcode/falco +references: + doi: 10.12688/f1000research.21142.2 +license: GPL-3.0 +requirements: + commands: [falco] + +# Notes: +# - falco as arguments similar to -subsample and we update those to --subsample +# - The outdir argument is not required +# - The input argument in falco is positional but we changed this to --input +argument_groups: + - name: Input arguments + arguments: + - name: --input + required: true + type: file + multiple: true + description: input fastq files + example: input1.fastq;input2.fastq + + - name: Run arguments + arguments: + - name: --nogroup + type: boolean_true + description: | + Disable grouping of bases for reads >50bp. + All reports will show data for every base in + the read. WARNING: When using this option, + your plots may end up a ridiculous size. You + have been warned! + - name: --contaminents + type: file + description: | + Specifies a non-default file which contains + the list of contaminants to screen + overrepresented sequences against. The file + must contain sets of named contaminants in + the form name[tab]sequence. Lines prefixed + with a hash will be ignored. Default: + https://github.com/smithlabcode/falco/blob/v1.2.2/Configuration/contaminant_list.txt + - name: --adapters + type: file + description: | + Specifies a non-default file which contains + the list of adapter sequences which will be + explicity searched against the library. The + file must contain sets of named adapters in + the form name[tab]sequence. Lines prefixed + with a hash will be ignored. Default: + https://github.com/smithlabcode/falco/blob/v1.2.2/Configuration/adapter_list.txt + - name: --limits + type: file + description: | + Specifies a non-default file which contains + a set of criteria which will be used to + determine the warn/error limits for the + various modules. This file can also be used + to selectively remove some modules from the + output all together. The format needs to + mirror the default limits.txt file found in + the Configuration folder. Default: + https://github.com/smithlabcode/falco/blob/v1.2.2/Configuration/limits.txt + - name: --subsample + alternatives: [-s] + type: integer + example: 10 + description: | + [Falco only] makes falco faster (but + possibly less accurate) by only processing + reads that are a multiple of this value (using + 0-based indexing to number reads). + - name: --bisulfite + alternatives: [-b] + type: boolean_true + description: | + [Falco only] reads are whole genome + bisulfite sequencing, and more Ts and fewer + Cs are therefore expected and will be + accounted for in base content. + - name: --reverse_complliment + alternatives: [-r] + type: boolean_true + description: | + [Falco only] The input is a + reverse-complement. All modules will be + tested by swapping A/T and C/G + + - name: Output arguments + arguments: + - name: --outdir + alternatives: [-o] + required: true + type: file + direction: output + description: | + Create all output files in the specified + output directory. FALCO-SPECIFIC: If the + directory does not exists, the program will + create it. + example: output + - name: --format + type: string + choices: [bam, sam, bam_mapped, sam_mapped, fastq, fq, fastq.gz, fq.gz] + alternatives: ["-f"] + description: | + Bypasses the normal sequence file format + detection and forces the program to use the + specified format. Validformats are bam, sam, + bam_mapped, sam_mapped, fastq, fq, fastq.gz + or fq.gz. + - name: --data_filename + alternatives: [-D] + type: file + direction: output + description: | + [Falco only] Specify filename for FastQC + data output (TXT). If not specified, it will + be called fastq_data.txt in either the input + file's directory or the one specified in the + --output flag. Only available when running + falco with a single input. + - name: --report_filename + alternatives: [-R] + type: file + direction: output + description: | + [Falco only] Specify filename for FastQC + report output (HTML). If not specified, it + will be called fastq_report.html in either + the input file's directory or the one + specified in the --output flag. Only + available when running falco with a single + input. + - name: --summary_filename + alternatives: [-S] + type: file + direction: output + description: | + [Falco only] Specify filename for the short + summary output (TXT). If not specified, it + will be called fastq_report.html in either + the input file's directory or the one + specified in the --output flag. Only + available when running falco with a single + input. + +# Arguments not taken into account: +# +# -skip-data [Falco only] Do not create FastQC data text +# file. +# -skip-report [Falco only] Do not create FastQC report +# HTML file. +# -skip-summary [Falco only] Do not create FastQC summary +# file +# -K, -add-call [Falco only] add the command call call to +# FastQC data output and FastQC report HTML +# (this may break the parse of fastqc_data.txt +# in programs that are very strict about the +# FastQC output format). + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh + +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + +engines: + - type: docker + image: debian:trixie-slim + setup: + - type: apt + packages: [wget, build-essential, g++, zlib1g-dev, procps] + - type: docker + run: | + wget https://github.com/smithlabcode/falco/releases/download/v1.2.2/falco-1.2.2.tar.gz -O /tmp/falco.tar.gz && \ + cd /tmp && \ + tar xvf falco.tar.gz && \ + cd falco-1.2.2 && \ + ./configure && \ + make all && \ + make install + - type: docker + run: | + echo "falco: \"$(falco -v | sed -n 's/^falco //p')\"" > /var/software_versions.txt + +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/falco/help.txt b/src/falco/help.txt new file mode 100644 index 00000000..eea77972 --- /dev/null +++ b/src/falco/help.txt @@ -0,0 +1,156 @@ +Usage: falco [OPTIONS] ... + +Options: + -h, --help Print this help file and exit + -v, --version Print the version of the program and exit + -o, --outdir Create all output files in the specified + output directory. FALCO-SPECIFIC: If the + directory does not exists, the program will + create it. If this option is not set then + the output file for each sequence file is + created in the same directory as the + sequence file which was processed. + --casava [IGNORED BY FALCO] Files come from raw + casava output. Files in the same sample + group (differing only by the group number) + will be analysed as a set rather than + individually. Sequences with the filter flag + set in the header will be excluded from the + analysis. Files must have the same names + given to them by casava (including being + gzipped and ending with .gz) otherwise they + won't be grouped together correctly. + --nano [IGNORED BY FALCO] Files come from nanopore + sequences and are in fast5 format. In this + mode you can pass in directories to process + and the program will take in all fast5 files + within those directories and produce a + single output file from the sequences found + in all files. + --nofilter [IGNORED BY FALCO] If running with --casava + then don't remove read flagged by casava as + poor quality when performing the QC + analysis. + --extract [ALWAYS ON IN FALCO] If set then the zipped + output file will be uncompressed in the same + directory after it has been created. By + default this option will be set if fastqc is + run in non-interactive mode. + -j, --java [IGNORED BY FALCO] Provides the full path to + the java binary you want to use to launch + fastqc. If not supplied then java is assumed + to be in your path. + --noextract [IGNORED BY FALCO] Do not uncompress the + output file after creating it. You should + set this option if you do not wish to + uncompress the output when running in + non-interactive mode. + --nogroup Disable grouping of bases for reads >50bp. + All reports will show data for every base in + the read. WARNING: When using this option, + your plots may end up a ridiculous size. You + have been warned! + --min_length [NOT YET IMPLEMENTED IN FALCO] Sets an + artificial lower limit on the length of the + sequence to be shown in the report. As long + as you set this to a value greater or equal + to your longest read length then this will + be the sequence length used to create your + read groups. This can be useful for making + directly comaparable statistics from + datasets with somewhat variable read + lengths. + -f, --format Bypasses the normal sequence file format + detection and forces the program to use the + specified format. Validformats are bam, sam, + bam_mapped, sam_mapped, fastq, fq, fastq.gz + or fq.gz. + -t, --threads [NOT YET IMPLEMENTED IN FALCO] Specifies the + number of files which can be processed + simultaneously. Each thread will be + allocated 250MB of memory so you shouldn't + run more threads than your available memory + will cope with, and not more than 6 threads + on a 32 bit machine [1] + -c, --contaminants Specifies a non-default file which contains + the list of contaminants to screen + overrepresented sequences against. The file + must contain sets of named contaminants in + the form name[tab]sequence. Lines prefixed + with a hash will be ignored. Default: + /tmp/falco-1.2.2/Configuration/contaminant_list.txt + -a, --adapters Specifies a non-default file which contains + the list of adapter sequences which will be + explicity searched against the library. The + file must contain sets of named adapters in + the form name[tab]sequence. Lines prefixed + with a hash will be ignored. Default: + /tmp/falco-1.2.2/Configuration/adapter_list.txt + -l, --limits Specifies a non-default file which contains + a set of criteria which will be used to + determine the warn/error limits for the + various modules. This file can also be used + to selectively remove some modules from the + output all together. The format needs to + mirror the default limits.txt file found in + the Configuration folder. Default: + /tmp/falco-1.2.2/Configuration/limits.txt + -k, --kmers [IGNORED BY FALCO AND ALWAYS SET TO 7] + Specifies the length of Kmer to look for in + the Kmer content module. Specified Kmer + length must be between 2 and 10. Default + length is 7 if not specified. + -q, --quiet Supress all progress messages on stdout and + only report errors. + -d, --dir [IGNORED: FALCO DOES NOT CREATE TMP FILES] + Selects a directory to be used for temporary + files written when generating report images. + Defaults to system temp directory if not + specified. + -s, -subsample [Falco only] makes falco faster (but + possibly less accurate) by only processing + reads that are multiple of this value (using + 0-based indexing to number reads). [1] + -b, -bisulfite [Falco only] reads are whole genome + bisulfite sequencing, and more Ts and fewer + Cs are therefore expected and will be + accounted for in base content. + -r, -reverse-complement [Falco only] The input is a + reverse-complement. All modules will be + tested by swapping A/T and C/G + -skip-data [Falco only] Do not create FastQC data text + file. + -skip-report [Falco only] Do not create FastQC report + HTML file. + -skip-summary [Falco only] Do not create FastQC summary + file + -D, -data-filename [Falco only] Specify filename for FastQC + data output (TXT). If not specified, it will + be called fastq_data.txt in either the input + file's directory or the one specified in the + --output flag. Only available when running + falco with a single input. + -R, -report-filename [Falco only] Specify filename for FastQC + report output (HTML). If not specified, it + will be called fastq_report.html in either + the input file's directory or the one + specified in the --output flag. Only + available when running falco with a single + input. + -S, -summary-filename [Falco only] Specify filename for the short + summary output (TXT). If not specified, it + will be called fastq_report.html in either + the input file's directory or the one + specified in the --output flag. Only + available when running falco with a single + input. + -K, -add-call [Falco only] add the command call call to + FastQC data output and FastQC report HTML + (this may break the parse of fastqc_data.txt + in programs that are very strict about the + FastQC output format). + +Help options: + -?, -help print this help message + -about print about message + diff --git a/src/falco/script.sh b/src/falco/script.sh new file mode 100644 index 00000000..43f5efe5 --- /dev/null +++ b/src/falco/script.sh @@ -0,0 +1,24 @@ +#!/bin/bash + +set -eo pipefail + +[[ "$par_nogroup" == "false" ]] && unset par_nogroup +[[ "$par_bisulfite" == "false" ]] && unset par_bisulfite +[[ "$par_reverse_compliment" == "false" ]] && unset par_reverse_compliment + +IFS=";" read -ra input <<< $par_input + +$(which falco) \ + ${par_nogroup:+--nogroup} \ + ${par_contaminants:+--contaminants "$par_contaminants"} \ + ${par_adapters:+--adapters "$par_adapters"} \ + ${par_limits:+--limits "$par_limits"} \ + ${par_subsample:+-subsample $par_subsample} \ + ${par_bisulfite:+-bisulfite} \ + ${par_reverse_compliment:+-reverse-compliment} \ + ${par_outdir:+--outdir "$par_outdir"} \ + ${par_format:+--format "$par_format"} \ + ${par_data_filename:+-data-filename "$par_data_filename"} \ + ${par_report_filename:+-report-filename "$par_report_filename"} \ + ${par_summary_filename:+-summary-filename "$par_summary_filename"} \ + ${input[*]} diff --git a/src/falco/test.sh b/src/falco/test.sh new file mode 100644 index 00000000..3f1dc47a --- /dev/null +++ b/src/falco/test.sh @@ -0,0 +1,79 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +echo "> Prepare test data" + +# We use data from this repo: https://github.com/hartwigmedical/testData +echo ">> Fetching and preparing test data" +fastq1="https://github.com/hartwigmedical/testdata/raw/master/100k_reads_hiseq/TESTX/TESTX_H7YRLADXX_S1_L001_R1_001.fastq.gz" +fastq2="https://github.com/hartwigmedical/testdata/raw/master/100k_reads_hiseq/TESTX/TESTX_H7YRLADXX_S1_L001_R2_001.fastq.gz" +TMPDIR=$(mktemp -d "$meta_temp_dir/$meta_functionality_name-XXXXXX") +function clean_up { + [[ -d "$TMPDIR" ]] && rm -r "$TMPDIR" +} +trap clean_up EXIT + +test_data_dir="$TMPDIR/test_data" + +mkdir $test_data_dir +wget -q $fastq1 -O $test_data_dir/R1.fastq.gz +wget -q $fastq2 -O $test_data_dir/R2.fastq.gz + +echo ">> Run falco on test data, output to dir" +echo ">>> Run falco" +$meta_executable \ + --input "$test_data_dir/R1.fastq.gz;$test_data_dir/R2.fastq.gz" \ + --outdir "$TMPDIR/output1" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -d "$TMPDIR/output1" ] && echo "Output directory not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output1/R1.fastq.gz_fastqc_report.html" ] && echo "Report not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output1/R1.fastq.gz_summary.txt" ] && echo "Summary not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output1/R1.fastq.gz_fastqc_data.txt" ] && echo "fastqc_data not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output1/R2.fastq.gz_fastqc_report.html" ] && echo "Report not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output1/R2.fastq.gz_summary.txt" ] && echo "Summary not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output1/R2.fastq.gz_fastqc_data.txt" ] && echo "fastqc_data not created" && exit 1 + +echo ">>> cleanup" +rm -rf "$TMPDIR/output1" + +echo ">> Run falco on test data, output to individual files" +echo ">>> Please note this is only possible for 1 input fastq file!" +echo ">>> Run falco" +$meta_executable \ + --input "$test_data_dir/R1.fastq.gz" \ + --data_filename "$TMPDIR/output2/data.txt" \ + --report_filename "$TMPDIR/output2/report.html" \ + --summary_filename "$TMPDIR/output2/summary.txt" \ + --outdir "$TMPDIR/output2/" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -d "$TMPDIR/output2" ] && echo "Output directory not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output2/report.html" ] && echo "Report not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output2/summary.txt" ] && echo "Summary not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output2/data.txt" ] && echo "fastqc_data not created" && exit 1 + +echo ">>> cleanup" +rm -rf $TMPDIR/output2/ + +echo ">> Run falco on test data, subsample" +echo ">>> Run falco" +$meta_executable \ + --input "$test_data_dir/R1.fastq.gz" \ + --data_filename "$TMPDIR/output3/data.txt" \ + --report_filename "$TMPDIR/output3/report.html" \ + --summary_filename "$TMPDIR/output3/summary.txt" \ + --subsample 100 \ + --outdir "$TMPDIR/output3" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -d "$TMPDIR/output3" ] && echo "Output directory not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output3/report.html" ] && echo "Report not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output3/summary.txt" ] && echo "Summary not created" && exit 1 +[ ! -f "$TMPDIR/output3/data.txt" ] && echo "fastqc_data not created" && exit 1 + +echo ">>> cleanup" +rm -rf "$TMPDIR/output3/" + +echo "All tests succeeded!" diff --git a/src/fastp/config.vsh.yaml b/src/fastp/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..b7d9062a --- /dev/null +++ b/src/fastp/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,576 @@ +name: fastp +description: | + An ultra-fast all-in-one FASTQ preprocessor (QC/adapters/trimming/filtering/splitting/merging...). + + Features: + + - comprehensive quality profiling for both before and after filtering data (quality curves, base contents, KMER, Q20/Q30, GC Ratio, duplication, adapter contents...) + - filter out bad reads (too low quality, too short, or too many N...) + - cut low quality bases for per read in its 5' and 3' by evaluating the mean quality from a sliding window (like Trimmomatic but faster). + - trim all reads in front and tail + - cut adapters. Adapter sequences can be automatically detected, which means you don't have to input the adapter sequences to trim them. + - correct mismatched base pairs in overlapped regions of paired end reads, if one base is with high quality while the other is with ultra low quality + - trim polyG in 3' ends, which is commonly seen in NovaSeq/NextSeq data. Trim polyX in 3' ends to remove unwanted polyX tailing (i.e. polyA tailing for mRNA-Seq data) + - preprocess unique molecular identifier (UMI) enabled data, shift UMI to sequence name. + - report JSON format result for further interpreting. + - visualize quality control and filtering results on a single HTML page (like FASTQC but faster and more informative). + - split the output to multiple files (0001.R1.gz, 0002.R1.gz...) to support parallel processing. Two modes can be used, limiting the total split file number, or limitting the lines of each split file. + - support long reads (data from PacBio / Nanopore devices). + - support reading from STDIN and writing to STDOUT + - support interleaved input + - support ultra-fast FASTQ-level deduplication +keywords: [RNA-Seq, Trimming, Quality control] +links: + repository: https://github.com/OpenGene/fastp + documentation: https://github.com/OpenGene/fastp/blob/master/README.md +references: + doi: "10.1093/bioinformatics/bty560" +license: MIT +argument_groups: + - name: Inputs + description: | + `fastp` supports both single-end (SE) and paired-end (PE) input. + + - for SE data, you only have to specify read1 input by `-i` or `--in1`. + - for PE data, you should also specify read2 input by `-I` or `--in2`. + arguments: + - name: --in1 + alternatives: [-i] + type: file + description: Input FastQ file. Must be single-end or paired-end R1. Can be gzipped. + required: true + example: in.R1.fq.gz + - name: --in2 + alternatives: [-I] + type: file + description: Input FastQ file. Must be paired-end R2. Can be gzipped. + required: false + example: in.R2.fq.gz + - name: Outputs + description: | + + - for SE data, you only have to specify read1 output by `-o` or `--out1`. + - for PE data, you should also specify read2 output by `-O` or `--out2`. + - if you don't specify the output file names, no output files will be written, but the QC will still be done for both data before and after filtering. + - the output will be gzip-compressed if its file name ends with `.gz` + arguments: + - name: --out1 + alternatives: [-o] + type: file + description: The single-end or paired-end R1 reads that pass QC. Will be gzipped if its file name ends with `.gz`. + required: true + example: out.R1.fq.gz + direction: output + - name: --out2 + alternatives: [-O] + type: file + description: The paired-end R2 reads that pass QC. Will be gzipped if its file name ends with `.gz`. + required: false + example: out.R2.fq.gz + direction: output + - name: --unpaired1 + type: file + description: Store the reads that `read1` passes filters but its paired `read2` doesn't. + required: false + example: unpaired.R1.fq.gz + direction: output + - name: --unpaired2 + type: file + description: Store the reads that `read2` passes filters but its paired `read1` doesn't. + required: false + example: unpaired.R2.fq.gz + direction: output + - name: --failed_out + type: file + description: | + Store the reads that fail filters. + + If one read failed and is written to --failed_out, its failure reason will be appended to its read name. For example, failed_quality_filter, failed_too_short etc. + For PE data, if unpaired reads are not stored (by giving --unpaired1 or --unpaired2), the failed pair of reads will be put together. If one read passes the filters but its pair doesn't, the failure reason will be paired_read_is_failing. + required: false + example: failed.fq.gz + direction: output + - name: --overlapped_out + type: file + description: | + For each read pair, output the overlapped region if it has no any mismatched base. + direction: output + - name: Report output arguments + arguments: + - name: --json + alternatives: [-j] + type: file + description: | + The json format report file name + example: out.json + direction: output + - name: --html + type: file + description: | + The html format report file name + example: out.html + direction: output + - name: --report_title + type: string + description: | + The title of the html report, default is "fastp report". + example: fastp report + - name: Adapter trimming + description: | + Adapter trimming is enabled by default, but you can disable it by `-A` or `--disable_adapter_trimming`. Adapter sequences can be automatically detected for both PE/SE data. + + - For SE data, the adapters are evaluated by analyzing the tails of first ~1M reads. This evaluation may be inacurrate, and you can specify the adapter sequence by `-a` or `--adapter_sequence` option. If adapter sequence is specified, the auto detection for SE data will be disabled. + - For PE data, the adapters can be detected by per-read overlap analysis, which seeks for the overlap of each pair of reads. This method is robust and fast, so normally you don't have to input the adapter sequence even you know it. But you can still specify the adapter sequences for read1 by `--adapter_sequence`, and for read2 by `--adapter_sequence_r2`. If `fastp` fails to find an overlap (i.e. due to low quality bases), it will use these sequences to trim adapters for read1 and read2 respectively. + - For PE data, the adapter sequence auto-detection is disabled by default since the adapters can be trimmed by overlap analysis. However, you can specify `--detect_adapter_for_pe` to enable it. + - For PE data, `fastp` will run a little slower if you specify the sequence adapters or enable adapter auto-detection, but usually result in a slightly cleaner output, since the overlap analysis may fail due to sequencing errors or adapter dimers. + - The most widely used adapter is the Illumina TruSeq adapters. If your data is from the TruSeq library, you can add `--adapter_sequence=AGATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCA --adapter_sequence_r2=AGATCGGAAGAGCGTCGTGTAGGGAAAGAGTGT` to your command lines, or enable auto detection for PE data by specifing `detect_adapter_for_pe`. + - `fastp` contains some built-in known adapter sequences for better auto-detection. If you want to make some adapters to be a part of the built-in adapters, please file an issue. + + You can also specify --adapter_fasta to give a FASTA file to tell fastp to trim multiple adapters in this FASTA file. Here is a sample of such adapter FASTA file: + + ``` + >Illumina TruSeq Adapter Read 1 + AGATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCA + >Illumina TruSeq Adapter Read 2 + AGATCGGAAGAGCGTCGTGTAGGGAAAGAGTGT + >polyA + AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA + ``` + + The adapter sequence in this file should be at least 6bp long, otherwise it will be skipped. And you can give whatever you want to trim, rather than regular sequencing adapters (i.e. polyA). + + `fastp` first trims the auto-detected adapter or the adapter sequences given by `--adapter_sequence | --adapter_sequence_r2`, then trims the adapters given by `--adapter_fasta` one by one. + + The sequence distribution of trimmed adapters can be found at the HTML/JSON reports. + arguments: + - name: --disable_adapter_trimming + alternatives: [-A] + type: boolean_true + description: | + Disable adapter trimming. + - name: --detect_adapter_for_pe + type: boolean_true + description: | + By default, the auto-detection for adapter is for SE data input only, turn on this option to enable it for PE data. + - name: --adapter_sequence + alternatives: [-a] + type: string + description: | + The adapter sequences to be trimmed. For SE data, if not specified, the adapters will be auto-detected. For PE data, this is used if R1/R2 are found not overlapped + - name: --adapter_sequence_r2 + type: string + description: | + The adapter sequences to be trimmed for R2. This is used for PE data if R1/R2 are found overlapped. + - name: --adapter_fasta + type: file + description: | + A FASTA file containing all the adapter sequences to be trimmed. For SE data, if not specified, the adapters will be auto-detected. For PE data, this is used if R1/R2 are found not overlapped. + - name: Base trimming + arguments: + - name: --trim_front1 + alternatives: [-f] + type: integer + description: | + Trimming how many bases in front for read1, default is 0. + example: 0 + - name: --trim_tail1 + alternatives: [-t] + type: integer + description: | + Trimming how many bases in tail for read1, default is 0. + example: 0 + - name: --max_len1 + alternatives: [-b] + type: integer + min: 0 + description: | + If read1 is longer than max_len1, then trim read1 at its tail to make it as long as max_len1. Default 0 means no limitation. + - name: --trim_front2 + alternatives: [-F] + type: integer + description: | + Trimming how many bases in front for read2, default is 0. + example: 0 + - name: --trim_tail2 + alternatives: [-T] + type: integer + description: | + Trimming how many bases in tail for read2, default is 0. + example: 0 + - name: --max_len2 + alternatives: [-B] + type: integer + min: 0 + description: | + If read2 is longer than max_len2, then trim read2 at its tail to make it as long as max_len2. Default 0 means no limitation. + - name: Merging mode + description: Allows merging paired-end reads into a single longer read if they are overlapping. + arguments: + - name: --merge + alternatives: [-m] + type: boolean_true + description: | + For paired-end input, merge each pair of reads into a single read if they are overlapped. The merged reads will be written to the file given by --merged_out, the unmerged reads will be written to the files specified by --out1 and --out2. The merging mode is disabled by default. + - name: --merged_out + type: file + description: | + In the merging mode, specify the file name to store merged output, or specify --stdout to stream the merged output. + direction: output + example: merged.fq.gz + - name: --include_unmerged + type: boolean_true + description: | + In the merging mode, write the unmerged or unpaired reads to the file specified by --merge. Disabled by default. + - name: Additional input arguments + description: Affects how the input is read. + arguments: + - name: --interleaved_in + type: boolean_true + description: | + Indicate that is an interleaved FASTQ which contains both read1 and read2. Disabled by default. + - name: --fix_mgi_id + type: boolean_true + description: | + The MGI FASTQ ID format is not compatible with many BAM operation tools, enable this option to fix it. + - name: --phred64 + alternatives: ["-6"] + type: boolean_true + description: | + Indicate the input is using phred64 scoring (it'll be converted to phred33, so the output will still be phred33) + - name: Additional output arguments + description: Affects how the output is written. + arguments: + - name: --compression + alternatives: ["-z"] + type: integer + description: | + Compression level for gzip output (1 ~ 9). 1 is fastest, 9 is smallest, default is 4. + example: 4 + min: 1 + max: 9 + - name: --dont_overwrite + type: boolean_true + description: | + Don't overwrite existing files. Overwritting is allowed by default. + - name: Logging arguments + arguments: + - name: --verbose + alternatives: [-V] + type: boolean_true + description: Output verbose log information (i.e. when every 1M reads are processed). + - name: Processing arguments + arguments: + - name: --reads_to_process + type: long + description: | + Specify how many reads/pairs to be processed. Default 0 means process all reads. + example: 1000000 + min: 0 + - name: Deduplication arguments + arguments: + - name: --dedup + type: boolean_true + description: | + Enable deduplication to drop the duplicated reads/pairs + - name: --dup_calc_accuracy + type: integer + description: | + Accuracy level to calculate duplication (1~6). Higher level uses more memory (1G, 2G, 4G, 8G, 16G, 24G). Default 1 for no-dedup mode, and 3 for dedup mode. + example: 3 + min: 1 + max: 6 + - name: --dont_eval_duplication + type: boolean_true + description: | + Don't evaluate duplication rate to save time and use less memory. + - name: PolyG tail trimming arguments + arguments: + - name: --trim_poly_g + alternatives: [-g] + type: boolean_true + description: | + Force polyG tail trimming, by default trimming is automatically enabled for Illumina NextSeq/NovaSeq data + - name: --poly_g_min_len + type: integer + description: | + The minimum length to detect polyG in the read tail. 10 by default. + example: 10 + min: 1 + - name: --disable_trim_poly_g + alternatives: [-G] + type: boolean_true + description: | + Disable polyG tail trimming, by default trimming is automatically enabled for Illumina NextSeq/NovaSeq data + - name: PolyX tail trimming arguments + arguments: + - name: --trim_poly_x + alternatives: [-x] + type: boolean_true + description: | + Enable polyX trimming in 3' ends. + - name: --poly_x_min_len + type: integer + description: | + The minimum length to detect polyX in the read tail. 10 by default. + example: 10 + min: 1 + - name: Cut arguments + arguments: + - name: --cut_front + alternatives: ["-5"] + type: integer + description: | + Move a sliding window from front (5') to tail, drop the bases in the window if its mean quality < threshold, stop otherwise. + - name: --cut_tail + alternatives: ["-3"] + type: integer + description: | + Move a sliding window from tail (3') to front, drop the bases in the window if its mean quality < threshold, stop otherwise. + - name: --cut_right + alternatives: ["-r"] + type: integer + description: | + Move a sliding window from front to tail, if meet one window with mean quality < threshold, drop the bases in the window and the right part, and then stop. + - name: --cut_window_size + alternatives: ["-W"] + type: integer + description: | + The window size option shared by cut_front, cut_tail or cut_sliding. Range: 1~1000, default: 4. + example: 4 + min: 1 + - name: --cut_mean_quality + alternatives: ["-M"] + type: integer + description: | + The mean quality requirement option shared by cut_front, cut_tail or cut_sliding. Range: 1~36 default: 20 (Q20) + example: 20 + min: 0 + - name: --cut_front_window_size + type: integer + description: | + The window size option of cut_front, default to cut_window_size if not specified. + example: 4 + min: 1 + - name: --cut_front_mean_quality + type: integer + description: | + The mean quality requirement option of cut_front, default to cut_mean_quality if not specified. + example: 20 + min: 0 + - name: --cut_tail_window_size + type: integer + description: | + The window size option of cut_tail, default to cut_window_size if not specified. + example: 4 + min: 1 + - name: --cut_tail_mean_quality + type: integer + description: | + The mean quality requirement option of cut_tail, default to cut_mean_quality if not specified. + example: 20 + min: 0 + - name: --cut_right_window_size + type: integer + description: | + The window size option of cut_right, default to cut_window_size if not specified. + example: 4 + min: 1 + - name: --cut_right_mean_quality + type: integer + description: | + The mean quality requirement option of cut_right, default to cut_mean_quality if not specified. + example: 20 + min: 0 + - name: Quality filtering arguments + arguments: + - name: --disable_quality_filtering + alternatives: [-Q] + type: boolean_true + description: | + Quality filtering is enabled by default. If this option is specified, quality filtering is disabled. + - name: --qualified_quality_phred + alternatives: [-q] + type: integer + description: | + The quality value that a base is qualified. Default 15 means phred quality >=Q15 is qualified. + example: 15 + min: 0 + - name: --unqualified_percent_limit + alternatives: [-u] + type: integer + description: | + How many percents of bases are allowed to be unqualified (0~100). Default 40 means 40%. + example: 40 + min: 0 + max: 100 + - name: --n_base_limit + alternatives: [-n] + type: integer + description: | + If one read's number of N base is >n_base_limit, then this read/pair is discarded. Default is 5. + example: 5 + min: 0 + - name: --average_qual + alternatives: [-e] + type: integer + description: | + If one read's average quality score =1000), a sequential number prefix will be added to output name ( 0001.out.fq, 0002.out.fq...), disabled by default. + # - name: --split_prefix_digits + # type: integer + # description: | + # The digits for the sequential number padding (1~10), default is 4, so the filename will be padded as 0001.xxx, 0 to disable padding. + # example: 4 +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/fastp:0.23.4--hadf994f_2 + setup: + - type: docker + run: | + fastp --version 2>&1 | sed 's# #: "#;s#$#"#' > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/fastp/help.txt b/src/fastp/help.txt new file mode 100644 index 00000000..d34917b2 --- /dev/null +++ b/src/fastp/help.txt @@ -0,0 +1,93 @@ +```bash +fastp --help +``` + +usage: fastp [options] ... +options: + -i, --in1 read1 input file name (string [=]) + -o, --out1 read1 output file name (string [=]) + -I, --in2 read2 input file name (string [=]) + -O, --out2 read2 output file name (string [=]) + --unpaired1 for PE input, if read1 passed QC but read2 not, it will be written to unpaired1. Default is to discard it. (string [=]) + --unpaired2 for PE input, if read2 passed QC but read1 not, it will be written to unpaired2. If --unpaired2 is same as --unpaired1 (default mode), both unpaired reads will be written to this same file. (string [=]) + --overlapped_out for each read pair, output the overlapped region if it has no any mismatched base. (string [=]) + --failed_out specify the file to store reads that cannot pass the filters. (string [=]) + -m, --merge for paired-end input, merge each pair of reads into a single read if they are overlapped. The merged reads will be written to the file given by --merged_out, the unmerged reads will be written to the files specified by --out1 and --out2. The merging mode is disabled by default. + --merged_out in the merging mode, specify the file name to store merged output, or specify --stdout to stream the merged output (string [=]) + --include_unmerged in the merging mode, write the unmerged or unpaired reads to the file specified by --merge. Disabled by default. + -6, --phred64 indicate the input is using phred64 scoring (it'll be converted to phred33, so the output will still be phred33) + -z, --compression compression level for gzip output (1 ~ 9). 1 is fastest, 9 is smallest, default is 4. (int [=4]) + --stdin input from STDIN. If the STDIN is interleaved paired-end FASTQ, please also add --interleaved_in. + --stdout stream passing-filters reads to STDOUT. This option will result in interleaved FASTQ output for paired-end output. Disabled by default. + --interleaved_in indicate that is an interleaved FASTQ which contains both read1 and read2. Disabled by default. + --reads_to_process specify how many reads/pairs to be processed. Default 0 means process all reads. (int [=0]) + --dont_overwrite don't overwrite existing files. Overwritting is allowed by default. + --fix_mgi_id the MGI FASTQ ID format is not compatible with many BAM operation tools, enable this option to fix it. + -V, --verbose output verbose log information (i.e. when every 1M reads are processed). + -A, --disable_adapter_trimming adapter trimming is enabled by default. If this option is specified, adapter trimming is disabled + -a, --adapter_sequence the adapter for read1. For SE data, if not specified, the adapter will be auto-detected. For PE data, this is used if R1/R2 are found not overlapped. (string [=auto]) + --adapter_sequence_r2 the adapter for read2 (PE data only). This is used if R1/R2 are found not overlapped. If not specified, it will be the same as (string [=auto]) + --adapter_fasta specify a FASTA file to trim both read1 and read2 (if PE) by all the sequences in this FASTA file (string [=]) + --detect_adapter_for_pe by default, the auto-detection for adapter is for SE data input only, turn on this option to enable it for PE data. + -f, --trim_front1 trimming how many bases in front for read1, default is 0 (int [=0]) + -t, --trim_tail1 trimming how many bases in tail for read1, default is 0 (int [=0]) + -b, --max_len1 if read1 is longer than max_len1, then trim read1 at its tail to make it as long as max_len1. Default 0 means no limitation (int [=0]) + -F, --trim_front2 trimming how many bases in front for read2. If it's not specified, it will follow read1's settings (int [=0]) + -T, --trim_tail2 trimming how many bases in tail for read2. If it's not specified, it will follow read1's settings (int [=0]) + -B, --max_len2 if read2 is longer than max_len2, then trim read2 at its tail to make it as long as max_len2. Default 0 means no limitation. If it's not specified, it will follow read1's settings (int [=0]) + -D, --dedup enable deduplication to drop the duplicated reads/pairs + --dup_calc_accuracy accuracy level to calculate duplication (1~6), higher level uses more memory (1G, 2G, 4G, 8G, 16G, 24G). Default 1 for no-dedup mode, and 3 for dedup mode. (int [=0]) + --dont_eval_duplication don't evaluate duplication rate to save time and use less memory. + -g, --trim_poly_g force polyG tail trimming, by default trimming is automatically enabled for Illumina NextSeq/NovaSeq data + --poly_g_min_len the minimum length to detect polyG in the read tail. 10 by default. (int [=10]) + -G, --disable_trim_poly_g disable polyG tail trimming, by default trimming is automatically enabled for Illumina NextSeq/NovaSeq data + -x, --trim_poly_x enable polyX trimming in 3' ends. + --poly_x_min_len the minimum length to detect polyX in the read tail. 10 by default. (int [=10]) + -5, --cut_front move a sliding window from front (5') to tail, drop the bases in the window if its mean quality < threshold, stop otherwise. + -3, --cut_tail move a sliding window from tail (3') to front, drop the bases in the window if its mean quality < threshold, stop otherwise. + -r, --cut_right move a sliding window from front to tail, if meet one window with mean quality < threshold, drop the bases in the window and the right part, and then stop. + -W, --cut_window_size the window size option shared by cut_front, cut_tail or cut_sliding. Range: 1~1000, default: 4 (int [=4]) + -M, --cut_mean_quality the mean quality requirement option shared by cut_front, cut_tail or cut_sliding. Range: 1~36 default: 20 (Q20) (int [=20]) + --cut_front_window_size the window size option of cut_front, default to cut_window_size if not specified (int [=4]) + --cut_front_mean_quality the mean quality requirement option for cut_front, default to cut_mean_quality if not specified (int [=20]) + --cut_tail_window_size the window size option of cut_tail, default to cut_window_size if not specified (int [=4]) + --cut_tail_mean_quality the mean quality requirement option for cut_tail, default to cut_mean_quality if not specified (int [=20]) + --cut_right_window_size the window size option of cut_right, default to cut_window_size if not specified (int [=4]) + --cut_right_mean_quality the mean quality requirement option for cut_right, default to cut_mean_quality if not specified (int [=20]) + -Q, --disable_quality_filtering quality filtering is enabled by default. If this option is specified, quality filtering is disabled + -q, --qualified_quality_phred the quality value that a base is qualified. Default 15 means phred quality >=Q15 is qualified. (int [=15]) + -u, --unqualified_percent_limit how many percents of bases are allowed to be unqualified (0~100). Default 40 means 40% (int [=40]) + -n, --n_base_limit if one read's number of N base is >n_base_limit, then this read/pair is discarded. Default is 5 (int [=5]) + -e, --average_qual if one read's average quality score =1000), a sequential number prefix will be added to output name ( 0001.out.fq, 0002.out.fq...), disabled by default (long [=0]) + -d, --split_prefix_digits the digits for the sequential number padding (1~10), default is 4, so the filename will be padded as 0001.xxx, 0 to disable padding (int [=4]) + --cut_by_quality5 DEPRECATED, use --cut_front instead. + --cut_by_quality3 DEPRECATED, use --cut_tail instead. + --cut_by_quality_aggressive DEPRECATED, use --cut_right instead. + --discard_unmerged DEPRECATED, no effect now, see the introduction for merging. + -?, --help print this message diff --git a/src/fastp/script.sh b/src/fastp/script.sh new file mode 100644 index 00000000..4bb37c87 --- /dev/null +++ b/src/fastp/script.sh @@ -0,0 +1,105 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +# disable flags +[[ "$par_disable_adapter_trimming" == "false" ]] && unset par_disable_adapter_trimming +[[ "$par_detect_adapter_for_pe" == "false" ]] && unset par_detect_adapter_for_pe +[[ "$par_merge" == "false" ]] && unset par_merge +[[ "$par_include_unmerged" == "false" ]] && unset par_include_unmerged +[[ "$par_interleaved_in" == "false" ]] && unset par_interleaved_in +[[ "$par_fix_mgi_id" == "false" ]] && unset par_fix_mgi_id +[[ "$par_phred64" == "false" ]] && unset par_phred64 +[[ "$par_dont_overwrite" == "false" ]] && unset par_dont_overwrite +[[ "$par_verbose" == "false" ]] && unset par_verbose +[[ "$par_dedup" == "false" ]] && unset par_dedup +[[ "$par_dont_eval_duplication" == "false" ]] && unset par_dont_eval_duplication +[[ "$par_trim_poly_g" == "false" ]] && unset par_trim_poly_g +[[ "$par_disable_trim_poly_g" == "false" ]] && unset par_disable_trim_poly_g +[[ "$par_trim_poly_x" == "false" ]] && unset par_trim_poly_x +[[ "$par_disable_quality_filtering" == "false" ]] && unset par_disable_quality_filtering +[[ "$par_disable_length_filtering" == "false" ]] && unset par_disable_length_filtering +[[ "$par_low_complexity_filter" == "false" ]] && unset par_low_complexity_filter +[[ "$par_umi" == "false" ]] && unset par_umi +[[ "$par_overrepresentation_analysis" == "false" ]] && unset par_overrepresentation_analysis + +# run command +fastp \ + -i "$par_in1" \ + -o "$par_out1" \ + ${par_in2:+--in2 "${par_in2}"} \ + ${par_out2:+--out2 "${par_out2}"} \ + ${par_unpaired1:+--unpaired1 "${par_unpaired1}"} \ + ${par_unpaired2:+--unpaired2 "${par_unpaired2}"} \ + ${par_failed_out:+--failed_out "${par_failed_out}"} \ + ${par_overlapped_out:+--overlapped_out "${par_overlapped_out}"} \ + ${par_json:+--json "${par_json}"} \ + ${par_html:+--html "${par_html}"} \ + ${par_report_title:+--report_title "${par_report_title}"} \ + ${par_disable_adapter_trimming:+--disable_adapter_trimming} \ + ${par_detect_adapter_for_pe:+--detect_adapter_for_pe} \ + ${par_adapter_sequence:+--adapter_sequence "${par_adapter_sequence}"} \ + ${par_adapter_sequence_r2:+--adapter_sequence_r2 "${par_adapter_sequence_r2}"} \ + ${par_adapter_fasta:+--adapter_fasta "${par_adapter_fasta}"} \ + ${par_trim_front1:+--trim_front1 "${par_trim_front1}"} \ + ${par_trim_tail1:+--trim_tail1 "${par_trim_tail1}"} \ + ${par_max_len1:+--max_len1 "${par_max_len1}"} \ + ${par_trim_front2:+--trim_front2 "${par_trim_front2}"} \ + ${par_trim_tail2:+--trim_tail2 "${par_trim_tail2}"} \ + ${par_max_len2:+--max_len2 "${par_max_len2}"} \ + ${par_merge:+--merge} \ + ${par_merged_out:+--merged_out "${par_merged_out}"} \ + ${par_include_unmerged:+--include_unmerged} \ + ${par_interleaved_in:+--interleaved_in} \ + ${par_fix_mgi_id:+--fix_mgi_id} \ + ${par_phred64:+--phred64} \ + ${par_compression:+--compression "${par_compression}"} \ + ${par_dont_overwrite:+--dont_overwrite} \ + ${par_verbose:+--verbose} \ + ${par_reads_to_process:+--reads_to_process "${par_reads_to_process}"} \ + ${par_dedup:+--dedup} \ + ${par_dup_calc_accuracy:+--dup_calc_accuracy "${par_dup_calc_accuracy}"} \ + ${par_dont_eval_duplication:+--dont_eval_duplication} \ + ${par_trim_poly_g:+--trim_poly_g} \ + ${par_poly_g_min_len:+--poly_g_min_len "${par_poly_g_min_len}"} \ + ${par_disable_trim_poly_g:+--disable_trim_poly_g} \ + ${par_trim_poly_x:+--trim_poly_x} \ + ${par_poly_x_min_len:+--poly_x_min_len "${par_poly_x_min_len}"} \ + ${par_cut_front:+--cut_front "${par_cut_front}"} \ + ${par_cut_tail:+--cut_tail "${par_cut_tail}"} \ + ${par_cut_right:+--cut_right "${par_cut_right}"} \ + ${par_cut_window_size:+--cut_window_size "${par_cut_window_size}"} \ + ${par_cut_mean_quality:+--cut_mean_quality "${par_cut_mean_quality}"} \ + ${par_cut_front_window_size:+--cut_front_window_size "${par_cut_front_window_size}"} \ + ${par_cut_front_mean_quality:+--cut_front_mean_quality "${par_cut_front_mean_quality}"} \ + ${par_cut_tail_window_size:+--cut_tail_window_size "${par_cut_tail_window_size}"} \ + ${par_cut_tail_mean_quality:+--cut_tail_mean_quality "${par_cut_tail_mean_quality}"} \ + ${par_cut_right_window_size:+--cut_right_window_size "${par_cut_right_window_size}"} \ + ${par_cut_right_mean_quality:+--cut_right_mean_quality "${par_cut_right_mean_quality}"} \ + ${par_disable_quality_filtering:+--disable_quality_filtering} \ + ${par_qualified_quality_phred:+--qualified_quality_phred "${par_qualified_quality_phred}"} \ + ${par_unqualified_percent_limit:+--unqualified_percent_limit "${par_unqualified_percent_limit}"} \ + ${par_n_base_limit:+--n_base_limit "${par_n_base_limit}"} \ + ${par_average_qual:+--average_qual "${par_average_qual}"} \ + ${par_disable_length_filtering:+--disable_length_filtering} \ + ${par_length_required:+--length_required "${par_length_required}"} \ + ${par_length_limit:+--length_limit "${par_length_limit}"} \ + ${par_low_complexity_filter:+--low_complexity_filter} \ + ${par_complexity_threshold:+--complexity_threshold "${par_complexity_threshold}"} \ + ${par_filter_by_index1:+--filter_by_index1 "${par_filter_by_index1}"} \ + ${par_filter_by_index2:+--filter_by_index2 "${par_filter_by_index2}"} \ + ${par_filter_by_index_threshold:+--filter_by_index_threshold "${par_filter_by_index_threshold}"} \ + ${par_correction:+--correction} \ + ${par_overlap_len_require:+--overlap_len_require "${par_overlap_len_require}"} \ + ${par_overlap_diff_limit:+--overlap_diff_limit "${par_overlap_diff_limit}"} \ + ${par_overlap_diff_percent_limit:+--overlap_diff_percent_limit "${par_overlap_diff_percent_limit}"} \ + ${par_umi:+--umi} \ + ${par_umi_loc:+--umi_loc "${par_umi_loc}"} \ + ${par_umi_len:+--umi_len "${par_umi_len}"} \ + ${par_umi_prefix:+--umi_prefix "${par_umi_prefix}"} \ + ${par_umi_skip:+--umi_skip "${par_umi_skip}"} \ + ${par_umi_delim:+--umi_delim "${par_umi_delim}"} \ + ${par_overrepresentation_analysis:+--overrepresentation_analysis} \ + ${par_overrepresentation_sampling:+--overrepresentation_sampling "${par_overrepresentation_sampling}"} \ + ${meta_cpus:+--thread "${meta_cpus}"} diff --git a/src/fastp/test.sh b/src/fastp/test.sh new file mode 100644 index 00000000..1b1f6f0c --- /dev/null +++ b/src/fastp/test.sh @@ -0,0 +1,74 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +## VIASH START +meta_executable="target/docker/fastp/fastp" +meta_resources_dir="src/fastp" +## VIASH END + +######################################################################################### +mkdir fastp_se +cd fastp_se + +echo "> Run fastp on SE" +"$meta_executable" \ + --in1 "$meta_resources_dir/test_data/se/a.fastq" \ + --out1 "trimmed.fastq" \ + --failed_out "failed.fastq" \ + --json "report.json" \ + --html "report.html" \ + --adapter_sequence ACGGCTAGCTA + +echo ">> Check if output exists" +[ ! -f "trimmed.fastq" ] && echo ">> trimmed.fastq does not exist" && exit 1 +[ ! -f "failed.fastq" ] && echo ">> failed.fastq does not exist" && exit 1 +[ ! -f "report.json" ] && echo ">> report.json does not exist" && exit 1 +[ ! -f "report.html" ] && echo ">> report.html does not exist" && exit 1 + +######################################################################################### +cd .. +mkdir fastp_pe_minimal +cd fastp_pe_minimal + +echo ">> Run fastp on PE with minimal parameters" +"$meta_executable" \ + --in1 "$meta_resources_dir/test_data/pe/a.1.fastq" \ + --in2 "$meta_resources_dir/test_data/pe/a.2.fastq" \ + --out1 "trimmed_1.fastq" \ + --out2 "trimmed_2.fastq" + +echo ">> Check if output exists" +[ ! -f "trimmed_1.fastq" ] && echo ">> trimmed_1.fastq does not exist" && exit 1 +[ ! -f "trimmed_2.fastq" ] && echo ">> trimmed_2.fastq does not exist" && exit 1 + +######################################################################################### +cd .. +mkdir fastp_pe_many +cd fastp_pe_many + +echo ">> Run fastp on PE with many parameters" +"$meta_executable" \ + --in1 "$meta_resources_dir/test_data/pe/a.1.fastq" \ + --in2 "$meta_resources_dir/test_data/pe/a.2.fastq" \ + --out1 "trimmed_1.fastq" \ + --out2 "trimmed_2.fastq" \ + --failed_out "failed.fastq" \ + --json "report.json" \ + --html "report.html" \ + --adapter_sequence ACGGCTAGCTA \ + --adapter_sequence_r2 AGATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCAC \ + --merge \ + --merged_out "merged.fastq" + +echo ">> Check if output exists" +[ ! -f "trimmed_1.fastq" ] && echo ">> trimmed_1.fastq does not exist" && exit 1 +[ ! -f "trimmed_2.fastq" ] && echo ">> trimmed_2.fastq does not exist" && exit 1 +[ ! -f "failed.fastq" ] && echo ">> failed.fastq does not exist" && exit 1 +[ ! -f "report.json" ] && echo ">> report.json does not exist" && exit 1 +[ ! -f "report.html" ] && echo ">> report.html does not exist" && exit 1 +[ ! -f "merged.fastq" ] && echo ">> merged.fastq does not exist" && exit 1 + +######################################################################################### + +echo "> Test successful" \ No newline at end of file diff --git a/src/fastp/test_data/pe/a.1.fastq b/src/fastp/test_data/pe/a.1.fastq new file mode 100644 index 00000000..42735560 --- /dev/null +++ b/src/fastp/test_data/pe/a.1.fastq @@ -0,0 +1,4 @@ +@1 +ACGGCAT ++ +!!!!!!! diff --git a/src/fastp/test_data/pe/a.2.fastq b/src/fastp/test_data/pe/a.2.fastq new file mode 100644 index 00000000..42735560 --- /dev/null +++ b/src/fastp/test_data/pe/a.2.fastq @@ -0,0 +1,4 @@ +@1 +ACGGCAT ++ +!!!!!!! diff --git a/src/fastp/test_data/script.sh b/src/fastp/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..725eef6d --- /dev/null +++ b/src/fastp/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,10 @@ +# fastp test data + +# Test data was obtained from https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers/tree/master/bio/fastp/test + +if [ ! -d /tmp/snakemake-wrappers ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers /tmp/snakemake-wrappers +fi + +cp -r /tmp/snakemake-wrappers/bio/fastp/test/reads/* src/fastp/test_data + diff --git a/src/fastp/test_data/se/a.fastq b/src/fastp/test_data/se/a.fastq new file mode 100644 index 00000000..42735560 --- /dev/null +++ b/src/fastp/test_data/se/a.fastq @@ -0,0 +1,4 @@ +@1 +ACGGCAT ++ +!!!!!!! diff --git a/src/featurecounts/config.vsh.yaml b/src/featurecounts/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..8697b1fe --- /dev/null +++ b/src/featurecounts/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,336 @@ +name: featurecounts +description: | + featureCounts is a read summarization program for counting reads generated from either RNA or genomic DNA sequencing experiments by implementing highly efficient chromosome hashing and feature blocking techniques. It works with either single or paired-end reads and provides a wide range of options appropriate for different sequencing applications. +keywords: ["Read counting", "Genomic features"] +links: + homepage: https://subread.sourceforge.net/ + documentation: https://subread.sourceforge.net/SubreadUsersGuide.pdf + repository: https://github.com/ShiLab-Bioinformatics/subread +references: + doi: "10.1093/bioinformatics/btt656" +license: GPL-3.0 +requirements: + commands: [ featureCounts ] + +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --annotation + alternatives: ["-a"] + type: file + description: | + Name of an annotation file. GTF/GFF format by default. See '--format' option for more format information. + required: true + example: annotation.gtf + - name: --input + alternatives: ["-i"] + type: file + multiple: true + description: | + A list of SAM or BAM format files separated by semi-colon (;). They can be either name or location sorted. Location-sorted paired-end reads are automatically sorted by read names. + required: true + example: input_file1.bam + + - name: Outputs + arguments: + - name: --counts + alternatives: ["-o"] + type: file + direction: output + description: | + Name of output file including read counts in tab delimited format. + required: true + example: features.tsv + - name: --summary + type: file + direction: output + description: | + Summary statistics of counting results in tab delimited format. + required: false + example: summary.tsv + - name: --junctions + type: file + direction: output + description: | + Count number of reads supporting each exon-exon junction. Junctions were identified from those exon-spanning reads in the input (containing 'N' in CIGAR string). + example: junctions.txt + required: false + + - name: Annotation + arguments: + - name: --format + alternatives: ["-F"] + type: string + description: | + Specify format of the provided annotation file. Acceptable formats include 'GTF' (or compatible GFF format) and 'SAF'. 'GTF' by default. + choices: [GTF, GFF, SAF] + example: "GTF" + required: false + - name: --feature_type + alternatives: ["-t"] + type: string + description: | + Specify feature type(s) in a GTF annotation. If multiple types are provided, they should be separated by ';' with no space in between. 'exon' by default. Rows in the annotation with a matched feature will be extracted and used for read mapping. + example: "exon" + required: false + multiple: true + - name: --attribute_type + alternatives: ["-g"] + type: string + description: | + Specify attribute type in GTF annotation. 'gene_id' by default. Meta-features used for read counting will be extracted from annotation using the provided value. + example: "gene_id" + required: false + - name: --extra_attributes + type: string + description: | + Extract extra attribute types from the provided GTF annotation and include them in the counting output. These attribute types will not be used to group features. If more than one attribute type is provided they should be separated by semicolon (;). + required: false + multiple: true + - name: --chrom_alias + alternatives: ["-A"] + type: file + description: | + Provide a chromosome name alias file to match chr names in annotation with those in the reads. This should be a two-column comma-delimited text file. Its first column should include chr names in the annotation and its second column should include chr names in the reads. Chr names are case sensitive. No column header should be included in the file. + required: false + example: chrom_alias.csv + + - name: Level of summarization + arguments: + - name: --feature_level + alternatives: ["-f"] + type: boolean_true + description: | + Perform read counting at feature level (eg. counting reads for exons rather than genes). + + - name: Overlap between reads and features + arguments: + - name: --overlapping + alternatives: ["-O"] + type: boolean_true + description: | + Assign reads to all their overlapping meta-features (or features if '--feature_level' is specified). + - name: --min_overlap + type: integer + description: | + Minimum number of overlapping bases in a read that is required for read assignment. 1 by default. Number of overlapping bases is counted from both reads if paired end. If a negative value is provided, then a gap of up to specified size will be allowed between read and the feature that the read is assigned to. + required: false + example: 1 + - name: --frac_overlap + type: double + description: | + Minimum fraction of overlapping bases in a read that is required for read assignment. Value should be within range [0,1]. 0 by default. Number of overlapping bases is counted from both reads if paired end. Both this option and '--min_overlap' option need to be satisfied for read assignment. + required: false + min: 0 + max: 1 + example: 0 + - name: --frac_overlap_feature + type: double + description: | + Minimum fraction of overlapping bases in a feature that is required for read assignment. Value should be within range [0,1]. 0 by default. + required: false + min: 0 + max: 1 + example: 0 + - name: --largest_overlap + type: boolean_true + description: | + Assign reads to a meta-feature/feature that has the largest number of overlapping bases. + - name: --non_overlap + type: integer + description: | + Maximum number of non-overlapping bases in a read (or a read pair) that is allowed when being assigned to a feature. No limit is set by default. + required: false + - name: --non_overlap_feature + type: integer + description: | + Maximum number of non-overlapping bases in a feature that is allowed in read assignment. No limit is set by default. + required: false + - name: --read_extension5 + type: integer + description: | + Reads are extended upstream by bases from their 5' end. + required: false + - name: --read_extension3 + type: integer + description: | + Reads are extended upstream by bases from their 3' end. + required: false + - name: --read2pos + type: integer + description: | + Reduce reads to their 5' most base or 3' most base. Read counting is then performed based on the single base the read is reduced to. + required: false + choices: [3, 5] + + - name: Multi-mapping reads + arguments: + - name: --multi_mapping + alternatives: ["-M"] + type: boolean_true + description: | + Multi-mapping reads will also be counted. For a multi-mapping read, all its reported alignments will be counted. The 'NH' tag in BAM/SAM input is used to detect multi-mapping reads. + + - name: Fractional counting + arguments: + - name: --fraction + type: boolean_true + description: | + Assign fractional counts to features. This option must be used together with '--multi_mapping' or '--overlapping' or both. When '--multi_mapping' is specified, each reported alignment from a multi-mapping read (identified via 'NH' tag) will carry a fractional count of 1/x, instead of 1 (one), where x is the total number of alignments reported for the same read. When '--overlapping' is specified, each overlapping feature will receive a fractional count of 1/y, where y is the total number of features overlapping with the read. When both '--multi_mapping' and '--overlapping' are specified, each alignment will carry a fractional count of 1/(x*y). + + - name: Read filtering + arguments: + - name: --min_map_quality + alternatives: ["-Q"] + type: integer + description: | + The minimum mapping quality score a read must satisfy in order to be counted. For paired-end reads, at least one end should satisfy this criteria. 0 by default. + required: false + example: 0 + - name: --split_only + type: boolean_true + description: | + Count split alignments only (ie. alignments with CIGAR string containing 'N'). An example of split alignments is exon-spanning reads in RNA-seq data. + - name: --non_split_only + type: boolean_true + description: | + If specified, only non-split alignments (CIGAR strings do not contain letter 'N') will be counted. All the other alignments will be ignored. + - name: --primary + type: boolean_true + description: | + Count primary alignments only. Primary alignments are identified using bit 0x100 in SAM/BAM FLAG field. + - name: --ignore_dup + type: boolean_true + description: | + Ignore duplicate reads in read counting. Duplicate reads are identified using bit Ox400 in BAM/SAM FLAG field. The whole read pair is ignored if one of the reads is a duplicate read for paired end data. + + - name: Strandedness + arguments: + - name: --strand + alternatives: ["-s"] + type: integer + description: | + Perform strand-specific read counting. A single integer value (applied to all input files) should be provided. Possible values include: 0 (unstranded), 1 (stranded) and 2 (reversely stranded). Default value is 0 (ie. unstranded read counting carried out for all input files). + choices: [0, 1, 2] + example: 0 + required: false + + - name: Exon-exon junctions + arguments: + - name: --ref_fasta + alternatives: ["-G"] + type: file + description: | + Provide the name of a FASTA-format file that contains the reference sequences used in read mapping that produced the provided SAM/BAM files. + required: false + example: reference.fasta + + - name: Parameters specific to paired end reads + arguments: + - name: --paired + alternatives: ["-p"] + type: boolean_true + description: | + Specify that input data contain paired-end reads. To perform fragment counting (ie. counting read pairs), the '--countReadPairs' parameter should also be specified in addition to this parameter. + - name: --count_read_pairs + type: boolean_true + description: | + Count read pairs (fragments) instead of reads. This option is only applicable for paired-end reads. + - name: --both_aligned + alternatives: ["-B"] + type: boolean_true + description: | + Count read pairs (fragments) instead of reads. This option is only applicable for paired-end reads. + - name: --check_pe_dist + alternatives: ["-P"] + type: boolean_true + description: | + Check validity of paired-end distance when counting read pairs. Use '--min_length' and '--max_length' to set thresholds. + - name: --min_length + alternatives: ["-d"] + type: integer + description: | + Minimum fragment/template length, 50 by default. + required: false + example: 50 + - name: --max_length + alternatives: ["-D"] + type: integer + description: | + Maximum fragment/template length, 600 by default. + required: false + example: 600 + - name: --same_strand + alternatives: ["-C"] + type: boolean_true + description: | + Do not count read pairs that have their two ends mapping to different chromosomes or mapping to same chromosome but on different strands. + - name: --donotsort + type: boolean_true + description: | + Do not sort reads in BAM/SAM input. Note that reads from the same pair are required to be located next to each other in the input. + + - name: Read groups + arguments: + - name: --by_read_group + type: boolean_true + description: | + Assign reads by read group. "RG" tag is required to be present in the input BAM/SAM files. + + - name: Long reads + arguments: + - name: --long_reads + type: boolean_true + description: | + Count long reads such as Nanopore and PacBio reads. Long read counting can only run in one thread and only reads (not read-pairs) can be counted. There is no limitation on the number of 'M' operations allowed in a CIGAR string in long read counting. + + - name: Assignment results for each read + arguments: + - name: --detailed_results + type: file + direction: output + description: | + Directory to save the detailed assignment results. Use `--detailed_results_format` to determine the format of the detailed results. + example: detailed_results/ + required: false + - name: --detailed_results_format + alternatives: ["-R"] + type: string + description: | + Output detailed assignment results for each read or read-pair. Results are saved to a file that is in one of the following formats: CORE, SAM and BAM. See documentaiton for more info about these formats. + required: false + choices: [CORE, SAM, BAM] + + - name: Miscellaneous + arguments: + - name: --max_M_op + type: integer + description: | + Maximum number of 'M' operations allowed in a CIGAR string. 10 by default. Both 'X' and '=' are treated as 'M' and adjacent 'M' operations are merged in the CIGAR string. + required: false + example: 10 + - name: --verbose + type: boolean_true + description: | + Output verbose information for debugging, such as un-matched chromosome/contig names. + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh + +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data + +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/subread:2.0.6--he4a0461_0 + setup: + - type: docker + run: | + featureCounts -v 2>&1 | sed 's/featureCounts v\([0-9.]*\)/featureCounts: \1/' > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/featurecounts/help.txt b/src/featurecounts/help.txt new file mode 100644 index 00000000..9ad33331 --- /dev/null +++ b/src/featurecounts/help.txt @@ -0,0 +1,242 @@ +```bash +featureCounts +``` + +Version 2.0.3 + +Usage: featureCounts [options] -a -o input_file1 [input_file2] ... + +## Mandatory arguments: + + -a Name of an annotation file. GTF/GFF format by default. See + -F option for more format information. Inbuilt annotations + (SAF format) is available in 'annotation' directory of the + package. Gzipped file is also accepted. + + -o Name of output file including read counts. A separate file + including summary statistics of counting results is also + included in the output ('.summary'). Both files + are in tab delimited format. + + input_file1 [input_file2] ... A list of SAM or BAM format files. They can be + either name or location sorted. If no files provided, + input is expected. Location-sorted paired-end reads + are automatically sorted by read names. + +## Optional arguments: +# Annotation + + -F Specify format of the provided annotation file. Acceptable + formats include 'GTF' (or compatible GFF format) and + 'SAF'. 'GTF' by default. For SAF format, please refer to + Users Guide. + + -t Specify feature type(s) in a GTF annotation. If multiple + types are provided, they should be separated by ',' with + no space in between. 'exon' by default. Rows in the + annotation with a matched feature will be extracted and + used for read mapping. + + -g Specify attribute type in GTF annotation. 'gene_id' by + default. Meta-features used for read counting will be + extracted from annotation using the provided value. + + --extraAttributes Extract extra attribute types from the provided GTF + annotation and include them in the counting output. These + attribute types will not be used to group features. If + more than one attribute type is provided they should be + separated by comma. + + -A Provide a chromosome name alias file to match chr names in + annotation with those in the reads. This should be a two- + column comma-delimited text file. Its first column should + include chr names in the annotation and its second column + should include chr names in the reads. Chr names are case + sensitive. No column header should be included in the + file. + +# Level of summarization + + -f Perform read counting at feature level (eg. counting + reads for exons rather than genes). + +# Overlap between reads and features + + -O Assign reads to all their overlapping meta-features (or + features if -f is specified). + + --minOverlap Minimum number of overlapping bases in a read that is + required for read assignment. 1 by default. Number of + overlapping bases is counted from both reads if paired + end. If a negative value is provided, then a gap of up + to specified size will be allowed between read and the + feature that the read is assigned to. + + --fracOverlap Minimum fraction of overlapping bases in a read that is + required for read assignment. Value should be within range + [0,1]. 0 by default. Number of overlapping bases is + counted from both reads if paired end. Both this option + and '--minOverlap' option need to be satisfied for read + assignment. + + --fracOverlapFeature Minimum fraction of overlapping bases in a + feature that is required for read assignment. Value + should be within range [0,1]. 0 by default. + + --largestOverlap Assign reads to a meta-feature/feature that has the + largest number of overlapping bases. + + --nonOverlap Maximum number of non-overlapping bases in a read (or a + read pair) that is allowed when being assigned to a + feature. No limit is set by default. + + --nonOverlapFeature Maximum number of non-overlapping bases in a feature + that is allowed in read assignment. No limit is set by + default. + + --readExtension5 Reads are extended upstream by bases from their + 5' end. + + --readExtension3 Reads are extended upstream by bases from their + 3' end. + + --read2pos <5:3> Reduce reads to their 5' most base or 3' most base. Read + counting is then performed based on the single base the + read is reduced to. + +# Multi-mapping reads + + -M Multi-mapping reads will also be counted. For a multi- + mapping read, all its reported alignments will be + counted. The 'NH' tag in BAM/SAM input is used to detect + multi-mapping reads. + +# Fractional counting + + --fraction Assign fractional counts to features. This option must + be used together with '-M' or '-O' or both. When '-M' is + specified, each reported alignment from a multi-mapping + read (identified via 'NH' tag) will carry a fractional + count of 1/x, instead of 1 (one), where x is the total + number of alignments reported for the same read. When '-O' + is specified, each overlapping feature will receive a + fractional count of 1/y, where y is the total number of + features overlapping with the read. When both '-M' and + '-O' are specified, each alignment will carry a fractional + count of 1/(x*y). + +# Read filtering + + -Q The minimum mapping quality score a read must satisfy in + order to be counted. For paired-end reads, at least one + end should satisfy this criteria. 0 by default. + + --splitOnly Count split alignments only (ie. alignments with CIGAR + string containing 'N'). An example of split alignments is + exon-spanning reads in RNA-seq data. + + --nonSplitOnly If specified, only non-split alignments (CIGAR strings do + not contain letter 'N') will be counted. All the other + alignments will be ignored. + + --primary Count primary alignments only. Primary alignments are + identified using bit 0x100 in SAM/BAM FLAG field. + + --ignoreDup Ignore duplicate reads in read counting. Duplicate reads + are identified using bit Ox400 in BAM/SAM FLAG field. The + whole read pair is ignored if one of the reads is a + duplicate read for paired end data. + +# Strandness + + -s Perform strand-specific read counting. A single integer + value (applied to all input files) or a string of comma- + separated values (applied to each corresponding input + file) should be provided. Possible values include: + 0 (unstranded), 1 (stranded) and 2 (reversely stranded). + Default value is 0 (ie. unstranded read counting carried + out for all input files). + +# Exon-exon junctions + + -J Count number of reads supporting each exon-exon junction. + Junctions were identified from those exon-spanning reads + in the input (containing 'N' in CIGAR string). Counting + results are saved to a file named '.jcounts' + + -G Provide the name of a FASTA-format file that contains the + reference sequences used in read mapping that produced the + provided SAM/BAM files. This optional argument can be used + with '-J' option to improve read counting for junctions. + +# Parameters specific to paired end reads + + -p Specify that input data contain paired-end reads. To + perform fragment counting (ie. counting read pairs), the + '--countReadPairs' parameter should also be specified in + addition to this parameter. + + --countReadPairs Count read pairs (fragments) instead of reads. This option + is only applicable for paired-end reads. + + -B Only count read pairs that have both ends aligned. + + -P Check validity of paired-end distance when counting read + pairs. Use -d and -D to set thresholds. + + -d Minimum fragment/template length, 50 by default. + + -D Maximum fragment/template length, 600 by default. + + -C Do not count read pairs that have their two ends mapping + to different chromosomes or mapping to same chromosome + but on different strands. + + --donotsort Do not sort reads in BAM/SAM input. Note that reads from + the same pair are required to be located next to each + other in the input. + +# Number of CPU threads + + -T Number of the threads. 1 by default. + +# Read groups + + --byReadGroup Assign reads by read group. "RG" tag is required to be + present in the input BAM/SAM files. + + +# Long reads + + -L Count long reads such as Nanopore and PacBio reads. Long + read counting can only run in one thread and only reads + (not read-pairs) can be counted. There is no limitation on + the number of 'M' operations allowed in a CIGAR string in + long read counting. + +# Assignment results for each read + + -R Output detailed assignment results for each read or read- + pair. Results are saved to a file that is in one of the + following formats: CORE, SAM and BAM. See Users Guide for + more info about these formats. + + --Rpath Specify a directory to save the detailed assignment + results. If unspecified, the directory where counting + results are saved is used. + +# Miscellaneous + + --tmpDir Directory under which intermediate files are saved (later + removed). By default, intermediate files will be saved to + the directory specified in '-o' argument. + + --maxMOp Maximum number of 'M' operations allowed in a CIGAR + string. 10 by default. Both 'X' and '=' are treated as 'M' + and adjacent 'M' operations are merged in the CIGAR + string. + + --verbose Output verbose information for debugging, such as un- + matched chromosome/contig names. + + -v Output version of the program. \ No newline at end of file diff --git a/src/featurecounts/script.sh b/src/featurecounts/script.sh new file mode 100644 index 00000000..2e54feb3 --- /dev/null +++ b/src/featurecounts/script.sh @@ -0,0 +1,94 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +## VIASH START +## VIASH END + +# create temporary directory +tmp_dir=$(mktemp -d -p "$meta_temp_dir" "${meta_functionality_name}_XXXXXX") +mkdir -p "$tmp_dir/temp" + +# create detailed_results directory if variable is set and directory does not exist +if [[ ! -z "$par_detailed_results" ]] && [[ ! -d "$par_detailed_results" ]]; then + mkdir -p "$par_detailed_results" +fi + +# replace comma with semicolon +par_feature_type=$(echo $par_feature_type | tr ',' ';') +par_extra_attributes=$(echo $par_extra_attributes | tr ',' ';') + +# unset flag variables +[[ "$par_feature_level" == "false" ]] && unset par_feature_level +[[ "$par_overlapping" == "false" ]] && unset par_overlapping +[[ "$par_largest_overlap" == "false" ]] && unset par_largest_overlap +[[ "$par_multi_mapping" == "false" ]] && unset par_multi_mapping +[[ "$par_fraction" == "false" ]] && unset par_fraction +[[ "$par_split_only" == "false" ]] && unset par_split_only +[[ "$par_non_split_only" == "false" ]] && unset par_non_split_only +[[ "$par_primary" == "false" ]] && unset par_primary +[[ "$par_ignore_dup" == "false" ]] && unset par_ignore_dup +[[ "$par_paired" == "false" ]] && unset par_paired +[[ "$par_count_read_pairs" == "false" ]] && unset par_count_read_pairs +[[ "$par_both_aligned" == "false" ]] && unset par_both_aligned +[[ "$par_check_pe_dist" == "false" ]] && unset par_check_pe_dist +[[ "$par_same_strand" == "false" ]] && unset par_same_strand +[[ "$par_donotsort" == "false" ]] && unset par_donotsort +[[ "$par_by_read_group" == "false" ]] && unset par_by_read_group +[[ "$par_long_reads" == "false" ]] && unset par_long_reads +[[ "$par_verbose" == "false" ]] && unset par_verbose + +IFS=";" read -ra input <<< $par_input + +featureCounts \ + ${par_format:+-F "${par_format}"} \ + ${par_feature_type:+-t "${par_feature_type}"} \ + ${par_attribute_type:+-g "${par_attribute_type}"} \ + ${par_extra_attributes:+--extraAttributes "${extra_attributes}"} \ + ${par_chrom_alias:+-A "${par_chrom_alias}"} \ + ${par_feature_level:+-f} \ + ${par_overlapping:+-O} \ + ${par_min_overlap:+--minOverlap "${par_min_overlap}"} \ + ${par_frac_overlap:+--fracOverlap "${par_frac_overlap}"} \ + ${par_frac_overlap_feature:+--fracOverlapFeature "${par_frac_overlap_feature}"} \ + ${par_largest_overlap:+--largestOverlap} \ + ${par_non_overlap:+--nonOverlap "${par_non_overlap}"} \ + ${par_non_overlap_feature:+--nonOverlapFeature "${par_non_overlap_feature}"} \ + ${par_read_extension5:+--readExtension5 "${par_read_extension5}"} \ + ${par_read_extension3:+--readExtension3 "${par_read_extension3}"} \ + ${par_read2pos:+--read2pos "${par_read2pos}"} \ + ${par_multi_mapping:+-M} \ + ${par_fraction:+--fraction} \ + ${par_min_map_quality:+-Q "${par_min_map_quality}"} \ + ${par_split_only:+--splitOnly} \ + ${par_non_split_only:+--nonSplitOnly} \ + ${par_primary:+--primary} \ + ${par_ignore_dup:+--ignoreDup} \ + ${par_strand:+-s "${par_strand}"} \ + ${par_junctions:+-J} \ + ${par_ref_fasta:+-G "${par_ref_fasta}"} \ + ${par_paired:+-p} \ + ${par_count_read_pairs:+--countReadPairs} \ + ${par_both_aligned:+-B} \ + ${par_check_pe_dist:+-P} \ + ${par_min_length:+-d "${par_min_length}"} \ + ${par_max_length:+-D "${par_max_length}"} \ + ${par_same_strand:+-C} \ + ${par_donotsort:+--donotsort} \ + ${par_by_read_group:+--byReadGroup} \ + ${par_long_reads:+-L} \ + ${par_detailed_results:+--Rpath "${par_detailed_results}"} \ + ${par_detailed_results_format:+-R "${par_detailed_results_format}"} \ + ${par_max_M_op:+--maxMOp "${par_max_M_op}"} \ + ${par_verbose:+--verbose} \ + ${meta_cpus:+-T "${meta_cpus}"} \ + --tmpDir "$tmp_dir/temp" \ + -a "$par_annotation" \ + -o "$tmp_dir/output.txt" \ + "${input[*]}" + +[[ ! -z "$par_counts" ]] && mv "$tmp_dir/output.txt" "$par_counts" +[[ ! -z "$par_summary" ]] && mv "$tmp_dir/output.txt.summary" "$par_summary" +if [[ ! -z "$par_junctions" ]] && [[ -e "$tmp_dir/output.txt.jcounts" ]]; then + mv "$tmp_dir/output.txt.jcounts" "$par_junctions" +fi diff --git a/src/featurecounts/test.sh b/src/featurecounts/test.sh new file mode 100644 index 00000000..3349d016 --- /dev/null +++ b/src/featurecounts/test.sh @@ -0,0 +1,59 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +dir_in="$meta_resources_dir/test_data" + +echo "> Run featureCounts (with junctions)" +"$meta_executable" \ + --input "$dir_in/a.bam" \ + --annotation "$dir_in/annotation.gtf" \ + --counts "features.tsv" \ + --summary "summary.tsv" \ + --junctions "junction_counts.txt" \ + --ref_fasta "$dir_in/genome.fasta" \ + --overlapping \ + --frac_overlap 0.2 \ + --paired \ + --strand 0 \ + --detailed_results detailed_results \ + --detailed_results_format SAM + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "features.tsv" ] && echo "Output file features.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -f "summary.tsv" ] && echo "Output file summary.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -f "junction_counts.txt" ] && echo "Output file junction_counts.txt does not exist" && exit 1 +[ ! -d "detailed_results" ] && echo "Output directory detailed_results does not exist" && exit 1 +[ ! -f "detailed_results/a.bam.featureCounts.sam" ] && echo "Output file detailed_results/a.bam.featureCounts.sam does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "features.tsv" ] && echo "Output file features.tsv is empty" && exit 1 +[ ! -s "summary.tsv" ] && echo "Output file summary.tsv is empty" && exit 1 +[ ! -s "junction_counts.txt" ] && echo "Output file junction_counts.txt is empty" && exit 1 +[ ! -s "detailed_results/a.bam.featureCounts.sam" ] && echo "Output file detailed_results/a.bam.featureCounts.sam is empty" && exit 1 + +echo "> Run featureCounts (without junctions)" +"$meta_executable" \ + --input "$dir_in/a.bam" \ + --annotation "$dir_in/annotation.gtf" \ + --counts "features.tsv" \ + --summary "summary.tsv" \ + --overlapping \ + --frac_overlap 0.2 \ + --paired \ + --strand 0 \ + --detailed_results detailed_results \ + --detailed_results_format SAM + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "features.tsv" ] && echo "Output file features.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -f "summary.tsv" ] && echo "Output file summary.tsv does not exist" && exit 1 +[ ! -d "detailed_results" ] && echo "Output directory detailed_results does not exist" && exit 1 +[ ! -f "detailed_results/a.bam.featureCounts.sam" ] && echo "Output file detailed_results/a.bam.featureCounts.sam does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "features.tsv" ] && echo "Output file features.tsv is empty" && exit 1 +[ ! -s "summary.tsv" ] && echo "Output file summary.tsv is empty" && exit 1 +[ ! -s "detailed_results/a.bam.featureCounts.sam" ] && echo "Output file detailed_results/a.bam.featureCounts.sam is empty" && exit 1 + +echo "> Test successful" \ No newline at end of file diff --git a/src/featurecounts/test_data/a.bam b/src/featurecounts/test_data/a.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..57511ab3537e519b0b82cc84d30637c43db5801e GIT binary patch literal 296 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jW4GhIaUsBJcB_tGlD0s;8d9%?KKQQ<5<)c~_M+`fR5AZuNn@YW$`C3w~$m(~4>kgSYe=WVcgS$m0eJ(B*{v0Gy zWb`>`t;m5QABWctHzp`DoHAnC%-}Jhqp=%kuRNLqx)@fcG%)xnq;3Bwl9ZzHWI{{V zO6SacW@csY;x^769v(f91CGMtA3hhPefdz5R>D&zcH(ns+6U%G3CA^*WtEv_b7hr- z<7JJRWtp?vycRrkaF%R&I8EKy!|CXmh9BJaT~C`l92z7}mn%f(tw`?3vSeueGBM~E N7N1 +GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG +>2 +AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA diff --git a/src/featurecounts/test_data/script.sh b/src/featurecounts/test_data/script.sh new file mode 100644 index 00000000..28472b0e --- /dev/null +++ b/src/featurecounts/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,9 @@ +# featureCounts test data + +# Test data was obtained from https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers/tree/master/bio/subread/featurecounts/test + +if [ ! -d /tmp/snakemake-wrappers ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers /tmp/snakemake-wrappers +fi + +cp -r /tmp/snakemake-wrappers/bio/subread/featurecounts/test/* src/subread/featurecounts/test_data \ No newline at end of file diff --git a/src/gffread/config.vsh.yaml b/src/gffread/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..d2c41a87 --- /dev/null +++ b/src/gffread/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,397 @@ +name: gffread +description: Validate, filter, convert and perform various other operations on GFF files. +keywords: [gff, conversion, validation, filtering] +links: + homepage: https://ccb.jhu.edu/software/stringtie/gff.shtml#gffread + documentation: https://ccb.jhu.edu/software/stringtie/gff.shtml#gffread + repository: https://github.com/gpertea/gffread +references: + doi: 10.12688/f1000research.23297.2 +license: MIT +requirements: + commands: [ gffread ] +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + type: file + direction: input + description: | + A reference file in either the GFF3, GFF2 or GTF format. + required: true + example: annotation.gff + - name: --chr_mapping + alternatives: -m + type: file + direction: input + description: | + is a name mapping table for converting reference sequence names, + having this 2-column format: . + - name: --seq_info + alternatives: -s + type: file + direction: input + description: | + is a tab-delimited file providing this info for each of the mapped + sequences: (useful for --description option with + mRNA/EST/protein mappings). + - name: --genome + alternatives: -g + type: file + description: | + Full path to a multi-fasta file with the genomic sequences for all input mappings, + OR a directory with single-fasta files (one per genomic sequence, with file names + matching sequence names). + example: genome.fa + - name: Outputs + arguments: + - name: --outfile + alternatives: -o + type: file + direction: output + required: true + description: | + Write the output records into . + default: output.gff + - name: --force_exons + type: boolean_true + description: | + Make sure that the lowest level GFF features are considered "exon" features. + - name: --gene2exon + type: boolean_true + description: | + For single-line genes not parenting any transcripts, add an exon feature spanning + the entire gene (treat it as a transcript). + - name: --t_adopt + type: boolean_true + description: | + Try to find a parent gene overlapping/containing a transcript that does not have + any explicit gene Parent. + - name: --decode + alternatives: -D + type: boolean_true + description: | + Decode url encoded characters within attributes. + - name: --merge_exons + alternatives: -Z + type: boolean_true + description: | + Merge very close exons into a single exon (when intron size<4). + - name: --junctions + alternatives: -j + type: boolean_true + description: | + Output the junctions and the corresponding transcripts. + - name: --spliced_exons + alternatives: -w + type: file + direction: output + must_exist: false + description: | + Write a fasta file with spliced exons for each transcript. + example: exons.fa + - name: --w_add + type: integer + description: | + For the --spliced_exons option, extract additional bases both upstream and + downstream of the transcript boundaries. + - name: --w_nocds + type: boolean_true + description: | + For --spliced_exons, disable the output of CDS info in the FASTA file. + - name: --spliced_cds + alternatives: -x + type: file + must_exist: false + example: cds.fa + description: | + Write a fasta file with spliced CDS for each GFF transcript. + - name: --tr_cds + alternatives: -y + type: file + must_exist: false + example: tr_cds.fa + description: | + Write a protein fasta file with the translation of CDS for each record. + - name: --w_coords + alternatives: -W + type: boolean_true + description: | + For --spliced_exons, --spliced_cds and -tr_cds options, write in the FASTA defline + all the exon coordinates projected onto the spliced sequence. + - name: --stop_dot + alternatives: -S + type: boolean_true + description: | + For --tr_cds option, use '*' instead of '.' as stop codon translation. + - name: --id_version + alternatives: -L + type: boolean_true + description: | + Ensembl GTF to GFF3 conversion, adds version to IDs. + - name: --trackname + alternatives: -t + type: string + description: | + Use in the 2nd column of each GFF/GTF output line. + - name: --gtf_output + alternatives: -T + type: boolean_true + description: | + Main output will be GTF instead of GFF3. + - name: --bed + type: boolean_true + description: | + Output records in BED format instead of default GFF3. + - name: --tlf + type: boolean_true + description: | + Output "transcript line format" which is like GFF but with exons and CDS related + features stored as GFF attributes in the transcript feature line, like this: + exoncount=N;exons=;CDSphase=;CDS= + is a comma-delimited list of exon_start-exon_end coordinates; + is CDS_start:CDS_end coordinates or a list like . + - name: --table + type: string + multiple: true + multiple_sep: "," + description: | + Output a simple tab delimited format instead of GFF, with columns having the values + of GFF attributes given in ; special pseudo-attributes (prefixed by @) are + recognized: + @id, @geneid, @chr, @start, @end, @strand, @numexons, @exons, @cds, @covlen, @cdslen + If any of --spliced_exons/--tr_cds/--spliced_cds FASTA output files are enabled, the + same fields (excluding @id) are appended to the definition line of corresponding FASTA + records. + - name: --expose_dups + type: boolean_true + alternatives: [-E, -v] + description: | + Expose (warn about) duplicate transcript IDs and other potential problems with the + given GFF/GTF records. + - name: Options + arguments: + - name: --ids + type: file + description: | + Discard records/transcripts if their IDs are not listed in . + - name: --nids + type: file + description: | + Discard records/transcripts if their IDs are listed in . + - name: --maxintron + alternatives: -i + type: integer + description: | + Discard transcripts having an intron larger than . + - name: --minlen + alternatives: -l + type: integer + description: | + Discard transcripts shorter than bases. + - name: --range + alternatives: -r + type: string + description: | + Only show transcripts overlapping coordinate range .. (on chromosome/contig + , strand if provided). + - name: --strict_range + alternatives: -R + type: boolean_true + description: | + For --range option, discard all transcripts that are not fully contained within the given + range. + - name: --jmatch + type: string + description: | + Only output transcripts matching the given junction. + - name: --no_single_exon + alternatives: -U + type: boolean_true + description: | + Discard single-exon transcripts. + - name: --coding + alternatives: -C + type: boolean_true + description: | + Coding only: discard mRNAs that have no CDS features. + - name: --nc + type: boolean_true + description: | + Non-coding only: discard mRNAs that have CDS features. + - name: --ignore_locus + type: boolean_true + description: | + Discard locus features and attributes found in the input. + - name: --description + alternatives: -A + type: boolean_true + description: | + Use the description field from and add it as the value for a 'descr' + attribute to the GFF record. + + - name: Sorting + arguments: + - name: --sort_alpha + type: boolean_true + description: | + Chromosomes (reference sequences) are sorted alphabetically. + - name: --sort_by + type: file + must_exist: true + description: | + Sort the reference sequences by the order in which their names are given in the + file. + - name: Misc options + arguments: + - name: --keep_attrs + alternatives: -F + type: boolean_true + description: | + Keep all GFF attributes (for non-exon features). + - name: --keep_exon_attrs + type: boolean_true + description: | + For -F option, do not attempt to reduce redundant exon/CDS attributes. + - name: --no_exon_attrs + alternatives: -G + type: boolean_true + description: | + Do not keep exon attributes, move them to the transcript feature (for GFF3 output). + - name: --attrs + type: string + description: | + Only output the GTF/GFF attributes listed in which is a comma delimited + list of attribute names to. + - name: --keep_genes + type: boolean_true + description: | + In transcript-only mode (default), also preserve gene records. + - name: --keep_comments + type: boolean_true + description: | + For GFF3 input/output, try to preserve comments. + - name: --process_other + alternatives: -O + type: boolean_true + description: | + process other non-transcript GFF records (by default non-transcript records are ignored). + - name: --rm_stop_codons + alternatives: -V + type: boolean_true + description: | + Discard any mRNAs with CDS having in-frame stop codons (requires --genome). + - name: --adj_cds_start + alternatives: -H + type: boolean_true + description: | + For --rm_stop_codons option, check and adjust the starting CDS phase if the original phase + leads to a translation with an in-frame stop codon. + - name: --opposite_strand + alternatives: -B + type: boolean_true + description: | + For -V option, single-exon transcripts are also checked on the opposite strand (requires + --genome). + - name: --coding_status + alternatives: -P + type: boolean_true + description: | + Add transcript level GFF attributes about the coding status of each transcript, including + partialness or in-frame stop codons (requires --genome). + - name: --add_hasCDS + type: boolean_true + description: | + Add a "hasCDS" attribute with value "true" for transcripts that have CDS features. + - name: --adj_stop + type: boolean_true + description: | + Stop codon adjustment: enables --coding_status and performs automatic adjustment of the CDS stop + coordinate if premature or downstream. + - name: --rm_noncanon + alternatives: -N + type: boolean_true + description: | + Discard multi-exon mRNAs that have any intron with a non-canonical splice site consensus + (i.e. not GT-AG, GC-AG or AT-AC). + - name: --complete_cds + alternatives: -J + type: boolean_true + description: | + Discard any mRNAs that either lack initial START codon or the terminal STOP codon, or + have an in-frame stop codon (i.e. only print mRNAs with a complete CDS). + - name: --no_pseudo + type: boolean_true + description: | + Filter out records matching the 'pseudo' keyword. + - name: --in_bed + type: boolean_true + description: | + Input should be parsed as BED format (automatic if the input filename ends with .bed*). + - name: --in_tlf + type: boolean_true + description: | + Input GFF-like one-line-per-transcript format without exon/CDS features (see --tlf option + below); automatic if the input filename ends with .tlf). + - name: --stream + type: boolean_true + description: | + Fast processing of input GFF/BED transcripts as they are received (no sorting, exons must + be grouped by transcript in the input data). + + - name: Clustering + arguments: + - name: --merge + alternatives: -M + type: boolean_true + description: | + Cluster the input transcripts into loci, discarding "redundant" transcripts (those with + the same exact introns and fully contained or equal boundaries). + - name: --dupinfo + alternatives: -d + type: file + description: | + For --merge option, write duplication info to file . + - name: --cluster_only + type: boolean_true + description: | + Same as --merge but without discarding any of the "duplicate" transcripts, only create + "locus" features. + - name: --rm_redundant + alternatives: -K + type: boolean_true + description: | + For --merge option: also discard as redundant the shorter, fully contained transcripts (intron + chains matching a part of the container). + - name: --no_boundary + alternatives: -Q + type: boolean_true + description: | + For --merge option, no longer require boundary containment when assessing redundancy (can be + combined with --rm_redundant); only introns have to match for multi-exon transcripts, and >=80% + overlap for single-exon transcripts. + - name: --no_overlap + alternatives: -Y + type: boolean_true + description: | + For --merge option, enforce --no_boundary but also discard overlapping single-exon transcripts, + even on the opposite strand (can be combined with --rm_redudant). + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: +- type: docker + image: quay.io/biocontainers/gffread:0.12.7--hdcf5f25_3 + setup: + - type: docker + run: | + echo "gffread: \"$(gffread --version 2>&1)\"" > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/gffread/help.txt b/src/gffread/help.txt new file mode 100644 index 00000000..f9991c71 --- /dev/null +++ b/src/gffread/help.txt @@ -0,0 +1,140 @@ +```sh +gffread --help +``` + +gffread v0.12.7. Usage: +gffread [-g | ] [-s ] + [-o ] [-t ] [-r []:- [-R]] + [--jmatch :-] [--no-pseudo] + [-CTVNJMKQAFPGUBHZWTOLE] [-w ] [-x ] [-y ] + [-j ][--ids | --nids ] [--attrs ] [-i ] + [--stream] [--bed | --gtf | --tlf] [--table ] [--sort-by ] + [] + + Filter, convert or cluster GFF/GTF/BED records, extract the sequence of + transcripts (exon or CDS) and more. + By default (i.e. without -O) only transcripts are processed, discarding any + other non-transcript features. Default output is a simplified GFF3 with only + the basic attributes. + +Options: + --ids discard records/transcripts if their IDs are not listed in + --nids discard records/transcripts if their IDs are listed in + -i discard transcripts having an intron larger than + -l discard transcripts shorter than bases + -r only show transcripts overlapping coordinate range .. + (on chromosome/contig , strand if provided) + -R for -r option, discard all transcripts that are not fully + contained within the given range + --jmatch only output transcripts matching the given junction + -U discard single-exon transcripts + -C coding only: discard mRNAs that have no CDS features + --nc non-coding only: discard mRNAs that have CDS features + --ignore-locus : discard locus features and attributes found in the input + -A use the description field from and add it + as the value for a 'descr' attribute to the GFF record + -s is a tab-delimited file providing this info + for each of the mapped sequences: + + (useful for -A option with mRNA/EST/protein mappings) +Sorting: (by default, chromosomes are kept in the order they were found) + --sort-alpha : chromosomes (reference sequences) are sorted alphabetically + --sort-by : sort the reference sequences by the order in which their + names are given in the file +Misc options: + -F keep all GFF attributes (for non-exon features) + --keep-exon-attrs : for -F option, do not attempt to reduce redundant + exon/CDS attributes + -G do not keep exon attributes, move them to the transcript feature + (for GFF3 output) + --attrs only output the GTF/GFF attributes listed in + which is a comma delimited list of attribute names to + --keep-genes : in transcript-only mode (default), also preserve gene records + --keep-comments: for GFF3 input/output, try to preserve comments + -O process other non-transcript GFF records (by default non-transcript + records are ignored) + -V discard any mRNAs with CDS having in-frame stop codons (requires -g) + -H for -V option, check and adjust the starting CDS phase + if the original phase leads to a translation with an + in-frame stop codon + -B for -V option, single-exon transcripts are also checked on the + opposite strand (requires -g) + -P add transcript level GFF attributes about the coding status of each + transcript, including partialness or in-frame stop codons (requires -g) + --add-hasCDS : add a "hasCDS" attribute with value "true" for transcripts + that have CDS features + --adj-stop stop codon adjustment: enables -P and performs automatic + adjustment of the CDS stop coordinate if premature or downstream + -N discard multi-exon mRNAs that have any intron with a non-canonical + splice site consensus (i.e. not GT-AG, GC-AG or AT-AC) + -J discard any mRNAs that either lack initial START codon + or the terminal STOP codon, or have an in-frame stop codon + (i.e. only print mRNAs with a complete CDS) + --no-pseudo: filter out records matching the 'pseudo' keyword + --in-bed: input should be parsed as BED format (automatic if the input + filename ends with .bed*) + --in-tlf: input GFF-like one-line-per-transcript format without exon/CDS + features (see --tlf option below); automatic if the input + filename ends with .tlf) + --stream: fast processing of input GFF/BED transcripts as they are received + ((no sorting, exons must be grouped by transcript in the input data) +Clustering: + -M/--merge : cluster the input transcripts into loci, discarding + "redundant" transcripts (those with the same exact introns + and fully contained or equal boundaries) + -d : for -M option, write duplication info to file + --cluster-only: same as -M/--merge but without discarding any of the + "duplicate" transcripts, only create "locus" features + -K for -M option: also discard as redundant the shorter, fully contained + transcripts (intron chains matching a part of the container) + -Q for -M option, no longer require boundary containment when assessing + redundancy (can be combined with -K); only introns have to match for + multi-exon transcripts, and >=80% overlap for single-exon transcripts + -Y for -M option, enforce -Q but also discard overlapping single-exon + transcripts, even on the opposite strand (can be combined with -K) +Output options: + --force-exons: make sure that the lowest level GFF features are considered + "exon" features + --gene2exon: for single-line genes not parenting any transcripts, add an + exon feature spanning the entire gene (treat it as a transcript) + --t-adopt: try to find a parent gene overlapping/containing a transcript + that does not have any explicit gene Parent + -D decode url encoded characters within attributes + -Z merge very close exons into a single exon (when intron size<4) + -g full path to a multi-fasta file with the genomic sequences + for all input mappings, OR a directory with single-fasta files + (one per genomic sequence, with file names matching sequence names) + -j output the junctions and the corresponding transcripts + -w write a fasta file with spliced exons for each transcript + --w-add for the -w option, extract additional bases + both upstream and downstream of the transcript boundaries + --w-nocds for -w, disable the output of CDS info in the FASTA file + -x write a fasta file with spliced CDS for each GFF transcript + -y write a protein fasta file with the translation of CDS for each record + -W for -w, -x and -y options, write in the FASTA defline all the exon + coordinates projected onto the spliced sequence; + -S for -y option, use '*' instead of '.' as stop codon translation + -L Ensembl GTF to GFF3 conversion, adds version to IDs + -m is a name mapping table for converting reference + sequence names, having this 2-column format: + + -t use in the 2nd column of each GFF/GTF output line + -o write the output records into instead of stdout + -T main output will be GTF instead of GFF3 + --bed output records in BED format instead of default GFF3 + --tlf output "transcript line format" which is like GFF + but with exons and CDS related features stored as GFF + attributes in the transcript feature line, like this: + exoncount=N;exons=;CDSphase=;CDS= + is a comma-delimited list of exon_start-exon_end coordinates; + is CDS_start:CDS_end coordinates or a list like + --table output a simple tab delimited format instead of GFF, with columns + having the values of GFF attributes given in ; special + pseudo-attributes (prefixed by @) are recognized: + @id, @geneid, @chr, @start, @end, @strand, @numexons, @exons, + @cds, @covlen, @cdslen + If any of -w/-y/-x FASTA output files are enabled, the same fields + (excluding @id) are appended to the definition line of corresponding + FASTA records + -v,-E expose (warn about) duplicate transcript IDs and other potential + problems with the given GFF/GTF records \ No newline at end of file diff --git a/src/gffread/script.sh b/src/gffread/script.sh new file mode 100644 index 00000000..9c4a2b8f --- /dev/null +++ b/src/gffread/script.sh @@ -0,0 +1,119 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +# unset flags +[[ "$par_coding" == "false" ]] && unset par_coding +[[ "$par_strict_range" == "false" ]] && unset par_strict_range +[[ "$par_no_single_exon" == "false" ]] && unset par_no_single_exon +[[ "$par_no_exon_attrs" == "false" ]] && unset par_no_exon_attrs +[[ "$par_nc" == "false" ]] && unset par_nc +[[ "$par_ignore_locus" == "false" ]] && unset par_ignore_locus +[[ "$par_description" == "false" ]] && unset par_description +[[ "$par_sort_alpha" == "false" ]] && unset par_sort_alpha +[[ "$par_keep_genes" == "false" ]] && unset par_keep_genes +[[ "$par_keep_attrs" == "false" ]] && unset par_keep_attrs +[[ "$par_keep_exon_attrs" == "false" ]] && unset par_keep_exon_attrs +[[ "$par_keep_comments" == "false" ]] && unset par_keep_comments +[[ "$par_process_other" == "false" ]] && unset par_process_other +[[ "$par_rm_stop_codons" == "false" ]] && unset par_rm_stop_codons +[[ "$par_adj_cds_start" == "false" ]] && unset par_adj_cds_start +[[ "$par_opposite_strand" == "false" ]] && unset par_opposite_strand +[[ "$par_coding_status" == "false" ]] && unset par_coding_status +[[ "$par_add_hasCDS" == "false" ]] && unset par_add_hasCDS +[[ "$par_adj_stop" == "false" ]] && unset par_adj_stop +[[ "$par_rm_noncanon" == "false" ]] && unset par_rm_noncanon +[[ "$par_complete_cds" == "false" ]] && unset par_complete_cds +[[ "$par_no_pseudo" == "false" ]] && unset par_no_pseudo +[[ "$par_in_bed" == "false" ]] && unset par_in_bed +[[ "$par_in_tlf" == "false" ]] && unset par_in_tlf +[[ "$par_stream" == "false" ]] && unset par_stream +[[ "$par_merge" == "false" ]] && unset par_merge +[[ "$par_rm_redundant" == "false" ]] && unset par_rm_redundant +[[ "$par_no_boundary" == "false" ]] && unset par_no_boundary +[[ "$par_no_overlap" == "false" ]] && unset par_no_overlap +[[ "$par_force_exons" == "false" ]] && unset par_force_exons +[[ "$par_gene2exon" == "false" ]] && unset par_gene2exon +[[ "$par_t_adopt" == "false" ]] && unset par_t_adopt +[[ "$par_decode" == "false" ]] && unset par_decode +[[ "$par_merge_exons" == "false" ]] && unset par_merge_exons +[[ "$par_junctions" == "false" ]] && unset par_junctions +[[ "$par_w_nocds" == "false" ]] && unset par_w_nocds +[[ "$par_tr_cds" == "false" ]] && unset par_tr_cds +[[ "$par_w_coords" == "false" ]] && unset par_w_coords +[[ "$par_stop_dot" == "false" ]] && unset par_stop_dot +[[ "$par_id_version" == "false" ]] && unset par_id_version +[[ "$par_gtf_output" == "false" ]] && unset par_gtf_output +[[ "$par_bed" == "false" ]] && unset par_bed +[[ "$par_tlf" == "false" ]] && unset par_tlf +[[ "$par_expose_dups" == "false" ]] && unset par_expose_dups +[[ "$par_cluster_only" == "false" ]] && unset par_cluster_only + + +$(which gffread) \ + "$par_input" \ + ${par_chr_mapping:+-m "$par_chr_mapping"} \ + ${par_seq_info:+-s "$par_seq_info"} \ + -o "$par_outfile" \ + ${par_force_exons:+--force-exons} \ + ${par_gene2exon:+--gene2exon} \ + ${par_t_adopt:+--t-adopt} \ + ${par_decode:+-D} \ + ${par_merge_exons:+-Z} \ + ${par_genome:+-g "$par_genome"} \ + ${par_junctions:+-j} \ + ${par_spliced_exons:+-w "$par_spliced_exons"} \ + ${par_w_add:+--w-add "$par_w_add"} \ + ${par_w_nocds:+--w-nocds} \ + ${par_spliced_cds:+-x "$par_spliced_cds"} \ + ${par_tr_cds:+-y "$par_tr_cds"} \ + ${par_w_coords:+-W} \ + ${par_stop_dot:+-S} \ + ${par_id_version:+-L} \ + ${par_trackname:+-t "$par_trackname"} \ + ${par_gtf_output:+-T} \ + ${par_bed:+--bed} \ + ${par_tlf:+--tlf} \ + ${par_table:+--table "$par_table"} \ + ${par_expose_dups:+-E} \ + ${par_ids:+--ids "$par_ids"} \ + ${par_nids:+--nids "$par_nids"} \ + ${par_maxintron:+-i "$par_maxintron"} \ + ${par_minlen:+-l "$par_minlen"} \ + ${par_range:+-r "$par_range"} \ + ${par_strict_range:+-R} \ + ${par_jmatch:+--jmatch "$par_jmatch"} \ + ${par_no_single_exon:+-U} \ + ${par_coding:+-C} \ + ${par_nc:+--nc} \ + ${par_ignore_locus:+--ignore-locus} \ + ${par_description:+-A} \ + ${par_sort_alpha:+--sort-alpha} \ + ${par_sort_by:+--sort-by "$par_sort_by"} \ + ${par_keep_attrs:+-F} \ + ${par_keep_exon_attrs:+--keep-exon-attrs} \ + ${par_no_exon_attrs:+-G} \ + ${par_attrs:+--attrs "$par_attrs"} \ + ${par_keep_genes:+--keep-genes} \ + ${par_keep_comments:+--keep-comments} \ + ${par_process_other:+-O} \ + ${par_rm_stop_codons:+-V} \ + ${par_adj_cds_start:+-H} \ + ${par_opposite_strand:+-B} \ + ${par_coding_status:+-P} \ + ${par_add_hasCDS:+--add-hasCDS} \ + ${par_adj_stop:+--adj-stop} \ + ${par_rm_noncanon:+-N} \ + ${par_complete_cds:+-J} \ + ${par_no_pseudo:+--no-pseudo} \ + ${par_in_bed:+--in-bed} \ + ${par_in_tlf:+--in-tlf} \ + ${par_stream:+--stream} \ + ${par_merge:+-M} \ + ${par_dupinfo:+-d "$par_dupinfo"} \ + ${par_cluster_only:+--cluster-only} \ + ${par_rm_redundant:+-K} \ + ${par_no_boundary:+-Q} \ + ${par_no_overlap:+-Y} + diff --git a/src/gffread/test.sh b/src/gffread/test.sh new file mode 100755 index 00000000..326fce50 --- /dev/null +++ b/src/gffread/test.sh @@ -0,0 +1,111 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +set -e + +test_output_dir="${meta_resources_dir}/test_data/test_output" +test_dir="${meta_resources_dir}/test_data" +expected_output_dir="${meta_resources_dir}/test_data/output" + +mkdir -p "$test_output_dir" + + +################################################################################ + +echo "> Test 1 - Read annotation file, output GFF" + +"$meta_executable" \ + --expose_dups \ + --outfile "$test_output_dir/ann_simple.gff" \ + --input "$test_dir/sequence.gff3" + + +echo ">> Check if output exists" +[ ! -f "$test_output_dir/ann_simple.gff" ] \ + && echo "Output file test_output/ann_simple.gff does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "$test_output_dir/ann_simple.gff" ] \ + && echo "Output file test_output/ann_simple.gff is empty" && exit 1 + +echo ">> Compare output to expected output" + +# compare file expect lines starting with "#" +diff <(grep -v "^#" "$expected_output_dir/ann_simple.gff") \ + <(grep -v "^#" "$test_output_dir/ann_simple.gff") || \ + (echo "Output file ann_simple.gff does not match expected output" && exit 1) + +################################################################################ + +echo "> Test 2 - Read annotation file, output GTF" + +"$meta_executable" \ + --gtf_output \ + --outfile "$test_output_dir/annotation.gtf" \ + --input "$test_dir/sequence.gff3" + +echo ">> Check if output exists" +[ ! -f "$test_output_dir/annotation.gtf" ] \ + && echo "Output file test_output/annotation.gtf does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "$test_output_dir/annotation.gtf" ] \ + && echo "Output file test_output/annotation.gtf is empty" && exit 1 + +echo ">> Compare output to expected output" +diff "$expected_output_dir/annotation.gtf" "$test_output_dir/annotation.gtf" || \ + (echo "Output file annotation.gtf does not match expected output" && exit 1) + +################################################################################ + +echo "> Test 3 - Generate fasta file from annotation file" + + +"$meta_executable" \ + --genome "$test_dir/sequence.fasta" \ + --spliced_exons "$test_output_dir/transcripts.fa" \ + --outfile "$test_output_dir/output.gff" \ + --input "$test_dir/sequence.gff3" + +echo ">> Check if output exists" +[ ! -f "$test_output_dir/transcripts.fa" ] \ + && echo "Output file transcripts.fa does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "$test_output_dir/transcripts.fa" ] \ + && echo "Output file transcripts.fa is empty" && exit 1 + +echo ">> Compare output to expected output" +diff "$expected_output_dir/transcripts.fa" "$test_output_dir/transcripts.fa" || \ + (echo "Output file transcripts.fa does not match expected output" && exit 1) + +################################################################################ + +echo "> Test 4 - Generate table from GFF annotation file" + +"$meta_executable" \ + --table @id,@chr,@start,@end,@strand,@exons,Name,gene,product \ + --outfile "$test_output_dir/annotation.tbl" \ + --input "$test_dir/sequence.gff3" + +echo ">> Check if output exists" +[ ! -f "$test_output_dir/annotation.tbl" ] \ + && echo "Output file test_output/annotation.tbl does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "$test_output_dir/annotation.tbl" ] \ + && echo "Output file test_output/annotation.tbl is empty" && exit 1 + +echo ">> Compare output to expected output" +diff "$expected_output_dir/annotation.tbl" "$test_output_dir/annotation.tbl" || \ + (echo "Output file annotation.tbl does not match expected output" && exit 1) + +################################################################################ + +rm -r "$test_output_dir" + +echo "> All tests successful" + +exit 0 diff --git a/src/gffread/test_data/README.md b/src/gffread/test_data/README.md new file mode 100644 index 00000000..f1638b95 --- /dev/null +++ b/src/gffread/test_data/README.md @@ -0,0 +1,38 @@ +## GffRead usage examples + +GffRead can be used to simply read an annotation file in a GFF format, and print it in either GFF3 (default) or +GTF2 format (with the -T option), while discarding any non-trasncript features and optional attributes. +It can also report some potential issues found in the input GFF records. The command line for such a quick GFF/GTF +file cleanup would be: +``` +gffread -E annotation.gff -o ann_simple.gff +``` + +This will create a minimalist GFF3 re-formatting of the transcript records found in the input file (`annotation.gff` in this example). +The -E option directs GffRead to "expose" (display warnings about) any potential formatting issues +encountered while parsing the input file. + +In order to obtain the GTF2 version of the same transcript records, the `-T` option should be added: +``` +gffread annotation.gff -T -o annotation.gtf +``` + +GffRead can be used to generate a FASTA file with the DNA sequences for all transcripts in a GFF file. For this operation +a fasta file with the genomic sequences has to be provided as well. This can be accomplished with a command line like this: +``` +gffread -w transcripts.fa -g genome.fa annotation.gff +``` +The file `genome.fa` in this example would be a multi-fasta file with the chromosome/contig sequences of the target genome. +This also requires that every contig or chromosome name found in the 1st column of the input GFF file +(`annotation.gff` in this example) must have a corresponding sequence entry in the `genome.fa` file. + + +``` +gffread --table @id,@chr,@start,@end,@strand,@exons,Name,gene,product \ + -o annotation.tbl annotation.gff +``` +This shows how the `--table` option can make a tab delimited table out of a GFF3 input. + +The `output` directory contains all the output files that should be generated by the above examples. + + diff --git a/src/gffread/test_data/output/ann_simple.gff b/src/gffread/test_data/output/ann_simple.gff new file mode 100644 index 00000000..c8e5e933 --- /dev/null +++ b/src/gffread/test_data/output/ann_simple.gff @@ -0,0 +1,5 @@ +##gff-version 3 +# gffread v0.12.7 +# gffread -E -o output/ann_simple.gff sequence.gff3 +NM_141699.3 RefSeq gene 22 795 . + . ID=gene-Dmel_CG16905;gene_name=eloF +NM_141699.3 RefSeq CDS 22 795 . + 0 Parent=gene-Dmel_CG16905 diff --git a/src/gffread/test_data/output/annotation.gtf b/src/gffread/test_data/output/annotation.gtf new file mode 100644 index 00000000..7e203137 --- /dev/null +++ b/src/gffread/test_data/output/annotation.gtf @@ -0,0 +1,2 @@ +NM_141699.3 RefSeq transcript 22 795 . + . transcript_id "gene-Dmel_CG16905"; gene_id "gene-Dmel_CG16905"; gene_name "eloF" +NM_141699.3 RefSeq CDS 22 795 . + 0 transcript_id "gene-Dmel_CG16905"; gene_name "eloF"; diff --git a/src/gffread/test_data/output/annotation.tbl b/src/gffread/test_data/output/annotation.tbl new file mode 100644 index 00000000..15a5c0fd --- /dev/null +++ b/src/gffread/test_data/output/annotation.tbl @@ -0,0 +1 @@ +gene-Dmel_CG16905 NM_141699.3 22 795 + 22-795 eloF eloF elongase F diff --git a/src/gffread/test_data/output/transcripts.fa b/src/gffread/test_data/output/transcripts.fa new file mode 100644 index 00000000..889ebec9 --- /dev/null +++ b/src/gffread/test_data/output/transcripts.fa @@ -0,0 +1,13 @@ +>gene-Dmel_CG16905 CDS=1-774 +ATGTTCGCTCCGATAGATCCTGTAAAGATACCCGTTGTAAGCAATCCATGGATAACCATGGGCACATTGA +TTGGCTATCTGCTGTTTGTGCTCAAGCTGGGCCCCAAAATCATGGAGCACCGAAAGCCCTTCCATTTGAA +TGGCGTCATCAGGATCTACAACATATTCCAGATCCTTTACAATGGTCTAATACTCGTTTTAGGAGTTCAC +TTCCTGTTTGTCCTGAAAGCCTACCAAATCAGTTGCATTGTTAGCCTGCCGATGGATCACAAATATAAGG +ATAGAGAGCGTTTGATTTGCACTTTGTACCTGGTGAACAAATTCGTAGACCTTGTGGAAACCATTTTCTT +TGTGCTCCGCAAAAAGGACAGACAGATATCCTTCCTGCACGTCTTCCATCATTTTGCGATGGCATTTTTT +GGATATCTCTACTACTGCTTCCACGGATACGGTGGCGTTGCCTTTCCACAGTGCCTGCTAAACACCGCCG +TCCACGTGATTATGTACGCCTACTACTATCTATCCTCGATCAGCAAGGAGGTGCAGAGAAGTCTCTGGTG +GAAGAAATACATCACAATTGCTCAGCTGGTCCAGTTCGCCATTATTCTGCTCCACTGTACCATCACGCTG +GCACAGCCCAACTGCGCGGTCAACAGACCCTTGACCTACGGATGCGGATCGCTTTCAGCGTTTTTTGCAG +TGATATTTAGCCAATTTTATTACCACAACTACATAAAGCCAGGAAAGAAGTCAGCGAAACAAAACAAAAA +TTAA diff --git a/src/gffread/test_data/script.sh b/src/gffread/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..0c6e725c --- /dev/null +++ b/src/gffread/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,9 @@ +#!/bin/bash + +# clone repo +if [ ! -d /tmp/gffread_source ]; then + git clone --depth 2 --single-branch --branch master https://github.com/gpertea/gffread.git /tmp/gffread_source +fi + +# copy test data +cp -r /tmp/gffread_source/examples/* src/gffread/test_data diff --git a/src/gffread/test_data/sequence.fasta b/src/gffread/test_data/sequence.fasta new file mode 100644 index 00000000..31ec0f04 --- /dev/null +++ b/src/gffread/test_data/sequence.fasta @@ -0,0 +1,16 @@ +>NM_141699.3 Drosophila melanogaster elongase F (eloF), mRNA +CACAACTCGATTAGATTCGCCATGTTCGCTCCGATAGATCCTGTAAAGATACCCGTTGTAAGCAATCCAT +GGATAACCATGGGCACATTGATTGGCTATCTGCTGTTTGTGCTCAAGCTGGGCCCCAAAATCATGGAGCA +CCGAAAGCCCTTCCATTTGAATGGCGTCATCAGGATCTACAACATATTCCAGATCCTTTACAATGGTCTA +ATACTCGTTTTAGGAGTTCACTTCCTGTTTGTCCTGAAAGCCTACCAAATCAGTTGCATTGTTAGCCTGC +CGATGGATCACAAATATAAGGATAGAGAGCGTTTGATTTGCACTTTGTACCTGGTGAACAAATTCGTAGA +CCTTGTGGAAACCATTTTCTTTGTGCTCCGCAAAAAGGACAGACAGATATCCTTCCTGCACGTCTTCCAT +CATTTTGCGATGGCATTTTTTGGATATCTCTACTACTGCTTCCACGGATACGGTGGCGTTGCCTTTCCAC +AGTGCCTGCTAAACACCGCCGTCCACGTGATTATGTACGCCTACTACTATCTATCCTCGATCAGCAAGGA +GGTGCAGAGAAGTCTCTGGTGGAAGAAATACATCACAATTGCTCAGCTGGTCCAGTTCGCCATTATTCTG +CTCCACTGTACCATCACGCTGGCACAGCCCAACTGCGCGGTCAACAGACCCTTGACCTACGGATGCGGAT +CGCTTTCAGCGTTTTTTGCAGTGATATTTAGCCAATTTTATTACCACAACTACATAAAGCCAGGAAAGAA +GTCAGCGAAACAAAACAAAAATTAACTAAATTTAAACTAAATCATGAGTACAAAGCCTAAAGATTCGTGA +AGCAACAATAGCCACAGCCTATTTTTGAATATTTCATATATGATTTTATGGGGTAAATGAATTAAAAAAC +ATTTGTTTTCTTGGCGTCAAACT + diff --git a/src/gffread/test_data/sequence.gff3 b/src/gffread/test_data/sequence.gff3 new file mode 100644 index 00000000..c6a77a7a --- /dev/null +++ b/src/gffread/test_data/sequence.gff3 @@ -0,0 +1,9 @@ +##gff-version 3 +#!gff-spec-version 1.21 +#!processor NCBI annotwriter +##sequence-region NM_141699.3 1 933 +##species https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Taxonomy/Browser/wwwtax.cgi?id=7227 +NM_141699.3 RefSeq region 1 933 . + . ID=NM_141699.3:1..933;Dbxref=taxon:7227;Name=3R;chromosome=3R;gbkey=Src;genome=chromosome;genotype=y[1]%3B Gr22b[1] Gr22d[1] cn[1] CG33964[R4.2] bw[1] sp[1]%3B LysC[1] MstProx[1] GstD5[1] Rh6[1];mol_type=mRNA +NM_141699.3 RefSeq gene 1 933 . + . ID=gene-Dmel_CG16905;Dbxref=FLYBASE:FBgn0037762,GeneID:41211;Name=eloF;cyt_map=85E10-85E10;description=elongase F;gbkey=Gene;gen_map=3-49 cM;gene=eloF;gene_synonym=CG16905,Dmel\CG16905,EloF;locus_tag=Dmel_CG16905 +NM_141699.3 RefSeq CDS 22 795 . + 0 ID=cds-NP_649956.1;Parent=gene-Dmel_CG16905;Dbxref=FLYBASE:FBpp0081622,GeneID:41211,GenBank:NP_649956.1,FLYBASE:FBgn0037762;Name=NP_649956.1;gbkey=CDS;gene=eloF;locus_tag=Dmel_CG16905;orig_transcript_id=gnl|FlyBase|CG16905-RA;product=elongase F;protein_id=NP_649956.1 + diff --git a/src/lofreq/call/config.vsh.yaml b/src/lofreq/call/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..c547de9d --- /dev/null +++ b/src/lofreq/call/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,250 @@ +name: lofreq_call +namespace: lofreq +description: | + Call variants from a BAM file. + + LoFreq* (i.e. LoFreq version 2) is a fast and sensitive variant-caller for inferring SNVs and indels from next-generation sequencing data. It makes full use of base-call qualities and other sources of errors inherent in sequencing (e.g. mapping or base/indel alignment uncertainty), which are usually ignored by other methods or only used for filtering. + + LoFreq* can run on almost any type of aligned sequencing data (e.g. Illumina, IonTorrent or Pacbio) since no machine- or sequencing-technology dependent thresholds are used. It automatically adapts to changes in coverage and sequencing quality and can therefore be applied to a variety of data-sets e.g. viral/quasispecies, bacterial, metagenomics or somatic data. + + LoFreq* is very sensitive; most notably, it is able to predict variants below the average base-call quality (i.e. sequencing error rate). Each variant call is assigned a p-value which allows for rigorous false positive control. Even though it uses no approximations or heuristics, it is very efficient due to several runtime optimizations and also provides a (pseudo-)parallel implementation. LoFreq* is generic and fast enough to be applied to high-coverage data and large genomes. On a single processor it takes a minute to analyze Dengue genome sequencing data with nearly 4000X coverage, roughly one hour to call SNVs on a 600X coverage E.coli genome and also roughly an hour to run on a 100X coverage human exome dataset. +keywords: [ "variant calling", "low frequancy variant calling", "lofreq", "lofreq/call"] +links: + homepage: https://csb5.github.io/lofreq/ + documentation: https://csb5.github.io/lofreq/commands/ +references: + doi: 10.1093/nar/gks918 +license: "MIT" +requirements: + commands: [ lofreq ] +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + type: file + description: | + Input BAM file. + required: true + example: "normal.bam" + - name: --input_bai + type: file + description: | + Index file for the input BAM file. + required: true + example: "normal.bai" + - name: --ref + alternatives: -f + type: file + description: | + Indexed reference fasta file (gzip supported). Default: none. + required: true + example: "reference.fasta" + - name: Outputs + arguments: + - name: --out + alternatives: -o + type: file + description: | + Vcf output file. Default: stdout. + required: true + direction: output + example: "output.vcf" + - name: Arguments + arguments: + - name: --region + alternatives: -r + type: string + description: | + Limit calls to this region (chrom:start-end). Default: none. + required: false + example: "chr1:1000-2000" + - name: --bed + alternatives: -l + type: file + description: | + List of positions (chr pos) or regions (BED). Default: none. + required: false + example: "regions.bed" + - name: --min_bq + alternatives: -q + type: integer + description: | + Skip any base with baseQ smaller than INT. Default: 6. + required: false + example: 6 + - name: --min_alt_bq + alternatives: -Q + type: integer + description: | + Skip alternate bases with baseQ smaller than INT. Default: 6. + required: false + example: 6 + - name: --def_alt_bq + alternatives: -R + type: integer + description: | + Overwrite baseQs of alternate bases (that passed bq filter) with this value (-1: use median ref-bq; 0: keep). Default: 0. + required: false + example: 0 + - name: --min_jq + alternatives: -j + type: integer + description: | + Skip any base with joinedQ smaller than INT. Default: 0. + example: 0 + - name: --min_alt_jq + alternatives: -J + type: integer + description: | + Skip alternate bases with joinedQ smaller than INT. Default: 0. + required: false + example: 0 + - name: --def_alt_jq + alternatives: -K + type: integer + description: | + Overwrite joinedQs of alternate bases (that passed jq filter) with this value (-1: use median ref-bq; 0: keep). Default: 0. + required: false + example: 0 + - name: --no_baq + alternatives: -B + type: boolean_true + description: | + Disable use of base-alignment quality (BAQ). + - name: --no_idaq + alternatives: -A + type: boolean_true + description: | + Don't use IDAQ values (NOT recommended under ANY circumstances other than debugging). + - name: --del_baq + alternatives: -D + type: boolean_true + description: | + Delete pre-existing BAQ values, i.e. compute even if already present in BAM. + - name: --no_ext_baq + alternatives: -e + type: boolean_true + description: | + Use 'normal' BAQ (samtools default) instead of extended BAQ (both computed on the fly if not already present in lb tag). + - name: --min_mq + alternatives: -m + type: integer + description: | + Skip reads with mapping quality smaller than INT. Default: 0. + required: false + example: 0 + - name: --max_mq + alternatives: -M + type: integer + description: | + Cap mapping quality at INT. Default: 255. + required: false + example: 255 + - name: --no_mq + alternatives: -N + type: boolean_true + description: | + Don't merge mapping quality in LoFreq's model. + - name: --call_indels + type: boolean_true + description: | + Enable indel calls (note: preprocess your file to include indel alignment qualities!). + - name: --only_indels + type: boolean_true + description: | + Only call indels; no SNVs. + - name: --src_qual + alternatives: -s + type: boolean_true + description: | + Enable computation of source quality. + - name: --ign_vcf + alternatives: -S + type: file + description: | + Ignore variants in this vcf file for source quality computation. Multiple files can be given separated by commas. + required: false + example: "variants.vcf" + - name: --def_nm_q + alternatives: -T + type: integer + description: | + If >= 0, then replace non-match base qualities with this default value. Default: -1. + required: false + example: -1 + - name: --sig + alternatives: -a + type: double + description: | + P-Value cutoff / significance level. Default: 0.010000. + required: false + example: 0.01 + - name: --bonf + alternatives: -b + type: string + description: | + Bonferroni factor. 'dynamic' (increase per actually performed test) or INT. Default: Dynamic. + required: false + example: "dynamic" + - name: --min_cov + alternatives: -C + type: integer + description: | + Test only positions having at least this coverage. Default: 1. + (note: without --no-default-filter default filters (incl. coverage) kick in after predictions are done). + required: false + example: 1 + - name: --max_depth + alternatives: -d + type: integer + description: | + Cap coverage at this depth. Default: 1000000. + required: false + example: 1000000 + - name: --illumina_13 + type: boolean_true + description: | + Assume the quality is Illumina-1.3-1.7/ASCII+64 encoded. + - name: --use_orphan + type: boolean_true + description: | + Count anomalous read pairs (i.e. where mate is not aligned properly). + - name: --plp_summary_only + type: boolean_true + description: | + No variant calling. Just output pileup summary per column. + - name: --no_default_filter + type: boolean_true + description: | + Don't run default 'lofreq filter' automatically after calling variants. + - name: --force_overwrite + type: boolean_true + description: | + Overwrite any existing output. + - name: --verbose + type: boolean_true + description: | + Be verbose. + - name: --debug + type: boolean_true + description: | + Enable debugging. +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/lofreq:2.1.5--py38h794fc9e_10 + setup: + - type: docker + run: | + version=$(lofreq version | grep 'version' | sed 's/version: //') && \ + echo "lofreq: $version" > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/lofreq/call/help.txt b/src/lofreq/call/help.txt new file mode 100644 index 00000000..16178f07 --- /dev/null +++ b/src/lofreq/call/help.txt @@ -0,0 +1,49 @@ +lofreq call: call variants from BAM file + +Usage: lofreq call [options] in.bam + +Options: +- Reference: + -f | --ref FILE Indexed reference fasta file (gzip supported) [null] +- Output: + -o | --out FILE Vcf output file [- = stdout] +- Regions: + -r | --region STR Limit calls to this region (chrom:start-end) [null] + -l | --bed FILE List of positions (chr pos) or regions (BED) [null] +- Base-call quality: + -q | --min-bq INT Skip any base with baseQ smaller than INT [6] + -Q | --min-alt-bq INT Skip alternate bases with baseQ smaller than INT [6] + -R | --def-alt-bq INT Overwrite baseQs of alternate bases (that passed bq filter) with this value (-1: use median ref-bq; 0: keep) [0] + -j | --min-jq INT Skip any base with joinedQ smaller than INT [0] + -J | --min-alt-jq INT Skip alternate bases with joinedQ smaller than INT [0] + -K | --def-alt-jq INT Overwrite joinedQs of alternate bases (that passed jq filter) with this value (-1: use median ref-bq; 0: keep) [0] +- Base-alignment (BAQ) and indel-aligment (IDAQ) qualities: + -B | --no-baq Disable use of base-alignment quality (BAQ) + -A | --no-idaq Don't use IDAQ values (NOT recommended under ANY circumstances other than debugging) + -D | --del-baq Delete pre-existing BAQ values, i.e. compute even if already present in BAM + -e | --no-ext-baq Use 'normal' BAQ (samtools default) instead of extended BAQ (both computed on the fly if not already present in lb tag) +- Mapping quality: + -m | --min-mq INT Skip reads with mapping quality smaller than INT [0] + -M | --max-mq INT Cap mapping quality at INT [255] + -N | --no-mq Don't merge mapping quality in LoFreq's model +- Indels: + --call-indels Enable indel calls (note: preprocess your file to include indel alignment qualities!) + --only-indels Only call indels; no SNVs +- Source quality: + -s | --src-qual Enable computation of source quality + -S | --ign-vcf FILE Ignore variants in this vcf file for source quality computation. Multiple files can be given separated by commas + -T | --def-nm-q INT If >= 0, then replace non-match base qualities with this default value [-1] +- P-values: + -a | --sig P-Value cutoff / significance level [0.010000] + -b | --bonf Bonferroni factor. 'dynamic' (increase per actually performed test) or INT ['dynamic'] +- Misc.: + -C | --min-cov INT Test only positions having at least this coverage [1] + (note: without --no-default-filter default filters (incl. coverage) kick in after predictions are done) + -d | --max-depth INT Cap coverage at this depth [1000000] + --illumina-1.3 Assume the quality is Illumina-1.3-1.7/ASCII+64 encoded + --use-orphan Count anomalous read pairs (i.e. where mate is not aligned properly) + --plp-summary-only No variant calling. Just output pileup summary per column + --no-default-filter Don't run default 'lofreq filter' automatically after calling variants + --force-overwrite Overwrite any existing output + --verbose Be verbose + --debug Enable debugging \ No newline at end of file diff --git a/src/lofreq/call/script.sh b/src/lofreq/call/script.sh new file mode 100644 index 00000000..863fe986 --- /dev/null +++ b/src/lofreq/call/script.sh @@ -0,0 +1,57 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +# Unset all parameters that are set to "false" +[[ "$par_no_baq" == "false" ]] && unset par_no_baq +[[ "$par_no_idaq" == "false" ]] && unset par_no_idaq +[[ "$par_del_baq" == "false" ]] && unset par_del_baq +[[ "$par_no_ext_baq" == "false" ]] && unset par_no_ext_baq +[[ "$par_no_mq" == "false" ]] && unset par_no_mq +[[ "$par_call_indels" == "false" ]] && unset par_call_indels +[[ "$par_only_indels" == "false" ]] && unset par_only_indels +[[ "$par_src_qual" == "false" ]] && unset par_src_qual +[[ "$par_illumina_13" == "false" ]] && unset par_illumina_13 +[[ "$par_use_orphan" == "false" ]] && unset par_use_orphan +[[ "$par_plp_summary_only" == "false" ]] && unset par_plp_summary_only +[[ "$par_no_default_filter" == "false" ]] && unset par_no_default_filter +[[ "$par_force_overwrite" == "false" ]] && unset par_force_overwrite +[[ "$par_verbose" == "false" ]] && unset par_verbose +[[ "$par_debug" == "false" ]] && unset par_debug + +# Run lofreq call +lofreq call \ + -f "$par_ref" \ + -o "$par_out" \ + ${par_region:+-r "${par_region}"} \ + ${par_bed:+-l "${par_bed}"} \ + ${par_min_bq:+-q "${par_min_bq}"} \ + ${par_min_alt_bq:+-Q "${par_min_alt_bq}"} \ + ${par_def_alt_bq:+-R "${par_def_alt_bq}"} \ + ${par_min_jq:+-j "${par_min_jq}"} \ + ${par_alt_jq:+-K "${par_alt_jq}"} \ + ${par_no_baq:+-B} \ + ${par_no_idaq:+-A} \ + ${par_del_baq:+-D} \ + ${par_no_ext_baq:+-e} \ + ${par_min_mq:+-m "${par_min_mq}"} \ + ${par_max_mq:+-M "${par_max_mq}"} \ + ${par_no_mq:+-N} \ + ${par_call_indels:+--call-indels} \ + ${par_only_indels:+--only-indels} \ + ${par_src_qual:+-s} \ + ${par_ign_vcf:+-S "${par_ign_vcf}"} \ + ${par_def_nm_q:+-T "${par_def_nm_q}"} \ + ${par_sig:+-a "${par_sig}"} \ + ${par_bonf:+-b "${par_bonf}"} \ + ${par_min_cov:+-C "${par_min_cov}"} \ + ${par_max_depth:+-d "${par_max_depth}"} \ + ${par_illumina_13:+--illumina-1.3} \ + ${par_use_orphan:+--use-orphan} \ + ${par_plp_summary_only:+--plp-summary-only} \ + ${par_no_default_filter:+--no-default-filter} \ + ${par_force_overwrite:+--force-overwrite} \ + ${par_verbose:+--verbose} \ + ${par_debug:+--debug} \ + "$par_input" \ No newline at end of file diff --git a/src/lofreq/call/test.sh b/src/lofreq/call/test.sh new file mode 100644 index 00000000..d8556398 --- /dev/null +++ b/src/lofreq/call/test.sh @@ -0,0 +1,20 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +dir_in="${meta_resources_dir%/}/test_data" + +echo "> Run lofreq call" +"$meta_executable" \ + --input "$dir_in/a.bam" \ + --input_bai "$dir_in/a.bai" \ + --ref "$dir_in/genome.fasta" \ + --out "output.vcf" \ + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "output.vcf" ] && echo "Output file output.vcf does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "output.vcf" ] && echo "Output file output.vcf is empty" && exit 1 + +echo "> Test successful" \ No newline at end of file diff --git a/src/lofreq/call/test_data/a.bai b/src/lofreq/call/test_data/a.bai new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..fd401327b0a9780b8f7ffbe9b4adb8d57f48407b GIT binary patch literal 48 RcmZ>A^kigVAPm@`N&qIR0N4Nk literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/lofreq/call/test_data/a.bam b/src/lofreq/call/test_data/a.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..109b5faccdff138c776f7d96a8bf2eb551d0c2d9 GIT binary patch literal 352 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jWj~GfPoaQ=YAmFOJ!(iRthKAQ^lO8c|y0lH9N!RP(-z&?s zzBT3^xNja7yP~vE^4(lxV}pA}Z+fd+bRNm}DvQqlVtHKkuFEOW!~GXtbNyXsP|t=jE_Lg^LyVvQ>{N1XF1V5!nlUdidBWeAm8Q#h6{hPJ{N>-_ zpKwFHg=bBiz0zX-_qCP(PqVMx&-~EQ>0dr01A{!87ZVtaQxg(?@U!~x$T{)w?BjXk zk>sG(tk^uEJBgW@#e&V+*o9%EX4|ni9jUn;7dtW+3pP(+k2I4Kd>-N>-P_5`Zgqg3&Uc8Gy^j@NI?VuE3}7c literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/lofreq/call/test_data/genome.fasta b/src/lofreq/call/test_data/genome.fasta new file mode 100644 index 00000000..e2015391 --- /dev/null +++ b/src/lofreq/call/test_data/genome.fasta @@ -0,0 +1,8 @@ +>SheilaA +GCTAGCTCAGAAAAAAAAAA +>SheilaB +GCTAGCTCAGAAAAAAAAAA +>SheilaC +GCTAGCTCAGAAAAAAAAAA +>SheilaD +GCTAGCTCAGAAAAAAAAAA diff --git a/src/lofreq/call/test_data/genome.fasta.fai b/src/lofreq/call/test_data/genome.fasta.fai new file mode 100644 index 00000000..e42bfe2c --- /dev/null +++ b/src/lofreq/call/test_data/genome.fasta.fai @@ -0,0 +1,4 @@ +SheilaA 20 9 20 21 +SheilaB 20 39 20 21 +SheilaC 20 69 20 21 +SheilaD 20 99 20 21 diff --git a/src/lofreq/call/test_data/script.sh b/src/lofreq/call/test_data/script.sh new file mode 100644 index 00000000..9a90bf48 --- /dev/null +++ b/src/lofreq/call/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,10 @@ +# pear test data + +# Test data was obtained from https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers/tree/master/bio/lofreq/call/test/data + +if [ ! -d /tmp/snakemake-wrappers ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers /tmp/snakemake-wrappers +fi + +cp -r /tmp/snakemake-wrappers/bio/lofreq/call/test/data/* src/lofreq/call/test_data + diff --git a/src/lofreq/indelqual/config.vsh.yaml b/src/lofreq/indelqual/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..0524458e --- /dev/null +++ b/src/lofreq/indelqual/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,82 @@ +name: lofreq_indelqual +namespace: lofreq +description: | + Insert indel qualities into BAM file (required for indel predictions). + + The preferred way of inserting indel qualities should be via GATK's BQSR (>=2) If that's not possible, use this subcommand. + The command has two modes: 'uniform' and 'dindel': + - 'uniform' will assign a given value uniformly, whereas + - 'dindel' will insert indel qualities based on Dindel (PMID 20980555). + Both will overwrite any existing values. + Do not realign your BAM file afterwards! +keywords: [ "bam", "indel", "qualities", "indelqual", "lofreq", "lofreq/indelqual"] +links: + homepage: https://csb5.github.io/lofreq/ + documentation: https://csb5.github.io/lofreq/commands/ +references: + doi: 10.1093/nar/gks918 +license: "MIT" +requirements: + commands: [ lofreq ] +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + type: file + description: | + Input BAM file. + required: true + example: "normal.bam" + - name: --ref + alternatives: -f + type: file + description: | + Reference sequence used for mapping (Only required for --dindel). + required: false + example: "reference.fasta" + - name: Outputs + arguments: + - name: --out + alternatives: -o + type: file + description: | + Output BAM file. + required: true + direction: output + example: "output.bam" + - name: Arguments + arguments: + - name: --uniform + alternatives: -u + type: string + description: | + Add this indel quality uniformly to all bases. Use two comma separated values to specify insertion and deletion quality separately. (clashes with --dindel). + required: false + example: "50,50" + - name: --dindel + type: boolean_true + description: | + Add Dindel's indel qualities (Illumina specific) (clashes with -u; needs --ref). + - name: --verbose + type: boolean_true + description: | + Be verbose. +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/lofreq:2.1.5--py38h794fc9e_10 + setup: + - type: docker + run: | + version=$(lofreq version | grep 'version' | sed 's/version: //') && \ + echo "lofreq: $version" > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/lofreq/indelqual/help.txt b/src/lofreq/indelqual/help.txt new file mode 100644 index 00000000..d520f1ad --- /dev/null +++ b/src/lofreq/indelqual/help.txt @@ -0,0 +1,21 @@ +lofreq indelqual: Insert indel qualities into BAM file (required for indel predictions) + +Usage: lofreq indelqual [options] in.bam +Options: + -u | --uniform INT[,INT] Add this indel quality uniformly to all bases. + Use two comma separated values to specify + insertion and deletion quality separately. + (clashes with --dindel) + --dindel Add Dindel's indel qualities (Illumina specific) + (clashes with -u; needs --ref) + -f | --ref Reference sequence used for mapping + (Only required for --dindel) + -o | --out FILE Output BAM file [- = stdout = default] + --verbose Be verbose + +The preferred way of inserting indel qualities should be via GATK's BQSR (>=2) If that's not possible, use this subcommand. +The command has two modes: 'uniform' and 'dindel': +- 'uniform' will assign a given value uniformly, whereas +- 'dindel' will insert indel qualities based on Dindel (PMID 20980555). +Both will overwrite any existing values. +Do not realign your BAM file afterwards! \ No newline at end of file diff --git a/src/lofreq/indelqual/script.sh b/src/lofreq/indelqual/script.sh new file mode 100644 index 00000000..341886ba --- /dev/null +++ b/src/lofreq/indelqual/script.sh @@ -0,0 +1,17 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +# Unset all parameters that are set to "false" +[[ "$par_dindel" == "false" ]] && unset par_dindel +[[ "$par_verbose" == "false" ]] && unset par_verbose + +# run lofreq indelqual +lofreq indelqual \ + -o "$par_out" \ + ${par_uniform:+-u "${par_uniform}"} \ + ${par_dindel:+--dindel} \ + ${par_ref:+-f "${par_ref}"} \ + ${par_verbose:+--verbose} \ + "$par_input" diff --git a/src/lofreq/indelqual/test.sh b/src/lofreq/indelqual/test.sh new file mode 100644 index 00000000..9e7f6fe3 --- /dev/null +++ b/src/lofreq/indelqual/test.sh @@ -0,0 +1,46 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +dir_in="${meta_resources_dir%/}/test_data" + +############################################# +mkdir uniform +cd uniform + +echo "> Run lofreq indelqual uniform" +"$meta_executable" \ + --input "$dir_in/test.bam" \ + -u 15 \ + --out "uniform.bam" \ + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "uniform.bam" ] && echo "Output file uniform.bam does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "uniform.bam" ] && echo "Output file uniform.bam is empty" && exit 1 + +cd .. + +############################################# +mkdir dindel +cd dindel + +echo "> run lofreq indelqual dindel" +"$meta_executable" \ + --input "$dir_in/test.bam" \ + --ref "$dir_in/test.fa" \ + --dindel \ + --out "dindel.bam" + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "dindel.bam" ] && echo "Output file dindel.bam does not exist" && exit 1 + +echo ">> Check if output is empty" +[ ! -s "dindel.bam" ] && echo "Output file dindel.bam is empty" && exit 1 + +cd .. + +############################################# + +echo "> Test successful" diff --git a/src/lofreq/indelqual/test_data/script.sh b/src/lofreq/indelqual/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..ba348067 --- /dev/null +++ b/src/lofreq/indelqual/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,44 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +TMPDIR=$(mktemp -d) +trap "rm -rf $TMPDIR" EXIT + +### Step 1: Generate Test Reference FASTA File (`test.fa`) + +cat > $TMPDIR/test.fa <chr1 +AACTCTCCGTGCTGTCCGGGGTCACTGTGATGCCAGTGCCGTCGACGGACCACAGGAGCGCCGCCAATTACGATTTATA +GGCGGCCCGGCCGATTATATCTTTGGCGGTCCCCTAGGCTCTCTAGGGGCCCGCACTGAAGAGGGCAACTCTGCAAGGA +CACGAATCTGACTCCTTAATAAAGGTGTGAAATCTGTCCGGTCGTCTCCTAATATGGGGCTTCATCATCTCAGGCGAAA +TCAGCGCCCGACGGGCCATAGTAAGCGGTGTTGTGGCATAGGTGCAGGTGGCCACCGATTATAACAGGATGACATACGC +GGAATTCGGGGTATGATGCTCTCCCGACACTTTGAGACAATAAATAGTTTAGTGTCCTGATGGTCTAAACCGAAGTCAT +TCAAAATAGCTAAGTGTAGTCTTCCCGTTCTAGGGATAGTCTAGGACATGCCCTATATTGGTTTTCTCTTACCGCGGAC +TACTCCCGCGCCCTCGGAGGTGTCTCAATTCATCCATGTTGATCCTTCAAATCGGGGCAGCGACGGGGGCACGGAGGGG +GTACGATAACCGCTAAATTGACCACCACCATCGATGATTCTACCATCTCTATCCATCCAACCCTTTTTTTGTTTATTTC +CTCTATGGGTTACAGCTA +EOF + +### Step 2: Index the Reference FASTA File + +samtools faidx $TMPDIR/test.fa + +### Step 3: Generate Test Reads with `wgsim` + +wgsim -N 100 -1 70 -2 70 $TMPDIR/test.fa $TMPDIR/reads1.fq $TMPDIR/reads2.fq + +### Step 4: Align Reads to Generate BAM File + +bwa index $TMPDIR/test.fa + +bwa mem $TMPDIR/test.fa $TMPDIR/reads1.fq $TMPDIR/reads2.fq > $TMPDIR/aligned_reads.sam + +### Step 5: Convert SAM to BAM, Sort, and Index + +samtools view -Sb $TMPDIR/aligned_reads.sam > $TMPDIR/test.bam + +### Step 6: Copy output + +cp $TMPDIR/test.bam src/lofreq/indelqual/test_data/test.bam +cp $TMPDIR/test.fa src/lofreq/indelqual/test_data/test.fa \ No newline at end of file diff --git a/src/lofreq/indelqual/test_data/test.bam b/src/lofreq/indelqual/test_data/test.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..2d326400e7e1e6890e5914898f8d3dbaa4e87af6 GIT binary patch literal 7341 zcmV;e98%*SiwFb&00000{{{d;LjnNE0CRHmWn^GvU~mWyp}epUv0=6Z(ax|<^M7}5YwejC zIwN>7r3)dDxXNuC#V830^1;MpCyUv{#4m`S)M$_|7(&#vQHV)z?`?Z;3y6w>iJ>Sl zARwq|YJyzwJm<_gbN>X*T8cc>4C z#bOtf^>nug!q9W_&)d&clXLZZmeJ%~h5tM^K@V2*?!k9x}e3{f$)Etp?MuFe1G58U3Zvkpez1#a`*#&66I3RZtAr#3bUfL+XI#0J8To zVb~~ww%m7%+A5OJKRBg`<0fCJ6i@XhzU^37kN4o;x3BiHSYt&`1`Pb~ZAP!u6z!(r z!t?i2FPP4|cJFt)z+WuHr`D@lkA zZs+gIx(gPwvcuYr^Akik*l;iRK$bW6HS1ta%g)2w8&EtHV z2%a#f_llUNLvNZE(=I5>psQzXyO{eOmP)&KhGF*RPYUN%MFCu&<*H$0;MR!9?7D@w+t(!)jlY=Jq365R@HHwTTU-T4eytK$0ot8R!R;8xJ0NUo z13&c9VS#OKx9jlbng-a`?hm^|=P=d(${l8#6Sf0pbA|zd)w0S`@EuDvu6jy1_iGjH0KSgLRaO@D z8g*rW!aDG0yII(_`#sLBoUsstl{9HmX$Ff0C8fcggEfBq>fk+!Y{fDt0~G$9 ztNgm%&D}=ciX_<8J3}$ws>g-%s+s{@U*ML?#$Zb| z1bsPW26m-xG1#a(@bB}?MrFmeh*r{-I#2UI>@iB&V|a=;bjAQzYTYFGR#jUrvWxz4|Xn6$NtW#!S z@zggBa<~uwro0H6_Ca!L^wO`fV4&-6!rV4^30k70yA7NMW!NF?3ul8b+=;%>83w5!rd1Me^lHyV;n=D~0PhYa5jzSF5BFo? zA(o3X6e1B+XllYFayjw3b2xW_ZuVQx#->ZBb zODSzk`vurzW3iM-6wXu@jx!Q+w{oO)(=G@{Rs{lR|H-u7j-j%q`_BO zQIKbZW4}%@S%7ytFDBYi*fpv(9cTTU+8N3j;@h!)pmezr1#>shT5(#L;&s++!WhE>aJY`JKwMCMd#zw&&ty4u+rlctDNsz zuXG%9rAw41wxH|f2LFB+{yoQot`&BSiF~vA76Q>~k{EimK{`Hi+enWi6em??ZKU62 z@bQ2*=RubhWvr-$)dvU1?pz8@Oe!rgVb0{wk93K=0{?CrTqDk}GC9AZU4+p{J|s5T zDTc8)cUd^IDh^=#))1{&Il>mZMa0V}t?m|`agf=#X1R&ijWnY{a^5fW=f2jUC2xa2 z_;3RbA6LtsqM$6aoj@vASh3YO*x&6T4#t+to&CKIv?OiPtcp>LqRmQ5e{UCW+1m`# z0m=!lI9iE%^(YNfer{`yeA=(lr~TM1`}K()6aVWGy=nB8LClgTQt33Ntp(npDusy| z2$N?+nCuFKx_RtTs(7Uuu&0G{t3fgFy`5{mokbnnXm?8GZsty9NIy44ag}N%33k0+ zVNjU+@b5cUh594Txgt^d`wjy;v(2e298Y1ct6Up;xFDQaRTE&F9SapmGly~HB?4?;XIgIOFsb#tE5!*8ryNA`4S{zi4qvf_p*OD_#;y&lKjwrLbq%#n+GrT06SXB@p`}R;5vQoem znyMuskClWDLAP@&j#Z`4nlWkIV<@HkG5)=QD|(S^i!70z9wiA&cSnaY{knC=VV1@- z!im*73XuH^x4a`1*t#x)!*u7>`@M(%OHg-hD^*sUQII-tj^gEJRVCV_7L&;b4I1*o z5sh5>03L^n%S66gw9RmWc0fAfjAnca{sluC0%XOIhFB?tn(s_XK88Tv83hSX(v4IQ zk__*};6UCr5qeiRzs*;P)E7;%em-cJeDL&vU(g@79C?*#Rnw=1Gpi0{A~vt=9L#+j zRQEBYyv{gCbh2z9Gt^RCmQTHAqDQ{JaYS3#G=|T%S+p0C}w$lK{&B$uz+kBIc9-g==R36p^?~4+S6{}`Vu@ekU9t42)4y#$$ zfHaz-$#Rr!L~oLqt3h%}>)vCb8f1nUA8o{jpmsbPh|QOPQHh1$mmTRU0#&&OxF;zf z(N(-6?Jr=nThDj(eoi0e`qIPPmORXL#zBgu(I#0nu{JLBq;PIkQGoB$+@aW6j1Q9V z?V1nqy)zb~DC;WG%B9cthyHnkdxyEFBmR~(Cv#7k7|pY;LU))AQA)cP+{%o)6=xiv zD6379G*N>C$T(G1<$`c@)zJgukN6{FD~_%DfKFi|Z9H1}XG1>`o@0Ff>hOFd&kCt* zn$V_#vJ7EomzQarWt77^NPw`n`Ph8_eFOl^9ig036`hG@C-z^kc zt+bO0U7^d}2xs~(A}poR8t=~vw@Ec#cjDjI_;|{aT(C$CRvzv(ckD~t0NXWcn z+N_!a=}-EY@giqej2BEe{~S-{$$+!iWJqa~!NW-*tacfByW|XoM37aXb>f~7POLuL zg@68xr}8$6m%_9;OR?TN(ZgVv4tymKgA-vmuursTi(zc222%R{)NS5dWQ`__OTv-W z@E6eji-*5f3_-_ROSi!(Mv`nY>qOnh41T@BY|jsqXwkOFhVfZ)t!R@0|CP6vDheCo zbP9s=cP(zbBAi+E?7()zFd1m&&<5q_i$lx1R`p>zbG*9(!Q{XuS*!Mn3FStE7lD8O z2Yj4*|9t`5>K@`I(*j5kH! zY!C+QrTVV4O)KJEIC8PF-ld;3mF;*e8#_Vm0mBvH%&IWnEDp-sIYbeJAc8#=fqx3i zw9e2cWa}o*nnd&H>}FjsB<>#my_~E2YMaMvUOgo@t6xWT(n76MuRdH54y;N9z+T|C z*9uYB-AO&47YSm}@xg)o;E4X1j_1pj3{kv9bo_#FVAY$$zpwe>U~nxErkCJK>EVF2 zRfMeb5* zmurtNmopSvJE=01W_p#8v3%SRX}uo*a=t(T9*?bgS&sZk8w)|ZL&ETe7DOeEA+c2=XBR(sqC68{aNey$ymP8H>+O~4z0#s0C#TKtZoGv6GmT0aSCEu z$jW*n_ZXDqv*K3u0tfUMMeI(e{VS4k?kTFhXG@Do_q}#^wa8S;1|Gge70!3H2=an( zbX8LTkuSWruIfPT-k=S?43ZMS8W zXsrdNB>!gE7YMJxzswiLZ}U87pXQ(#NuRvyn;J{T<`Fh$7{~qBMsWPA^>m*WPOa_? z1iIV!#&{b^y9fhkj)aSWk@a!x6yN!RXYDu<&iVu~t z>?N|=^onp`)u#j4m-*+atPsQXSxEKlevAvY2s(qH3!YE{YbYx%YiAPqra>ZG(fGnn zw|rQ^Ltyg%$CA^T(S0<;2VmS8+95^<1?FxS(^(&fGLEkrgfX88Z!pqqn`bN8 z5%v#BY~LIyxkTJ@#7(SySLkWs%&I)TDlY%EbC~*6^pj|OL9;Us<_U3DrELvk%KkCS zBB4}RB$O@Liao0G8Er9$Ul42Y^`e$|CR$==C`8$Flx}d+o@iTVpB4_T$^`&FFKiRC zz(^kbAb3OMew)xS-JzSLmHtf|7RH<0I@BaSBy0;*%MaO#x%HD4ayUaF(>bqMPUpKff%~hWL7fYa$NKMY(Z<5qcX|3Emotv>x`XKn9FR4` ztbmomGww%_1mlc?bQW+*g`~y;$#Or}AA5N1Itb)O@lE1tNd{_ip);EGk1om<8{FwZ znk{EDnaJ&H*K5fnW7HIzyuo?9W*9o_nPqhIPVZS6tt8jn5e@)*B|m1GqH7A^mzQZq>_JpM<6B z9kzv2j9J0NkjJL?XC?el`pNX7@6 z7Y2g``@R?aF=b5lefLFE3PC#yCw>~ZKJAM9Gs1yYLj_=8;SXG`5Ms?b6vwe!2#IG9 z5<7z+FQ~EiDA0P7Akl}UqS-Z#q-4_E7DV#w0}{R2&Dcna?~PB(JEI}f*&BU2`;u^E z(p8`U(<;~ACNX<;yJ7sdz`rLMN1jU`Ss@&`x)(|N2!c4)oAJmbTa#}+N|&qX zx6+;T)k?RW68LJRb&CZYTAh;zxbN_I(GH?7N1!E$dMH7-1zA;zb(7|;28n!Fl1LJf zL|5#=<;#&o7oAF?JHBk|!v=BODv85RVS5u(4sTwaQP3SiNZ%pEN+{PGjMmRigtfm* z*pV>Iok7_l@4rYw2Tx`rn}3~gkURt$aM=nKY6<0{aBkIXT`#WwwX>Y~J@D4;7c7fq zqwU&a*7qKRNZ@1I|Hw<&nXsg_*Yx$UYIgSGtePeMFy7=Ooys39a=jMx?p`3r%D&m3 z;LQai2`q|u6&Wtyn_iCys^j&MAuZ& zG#Ba)@;8Wb_WI(4ti<8Rg9%0< z5rZTH<_v{6_;izKSqamT=Pjk*uLy$!`7)Ai@IyVvyjzSvMs~_!8XUMR99b0ypz-p9 z9m7!f^+WMZhQqI_kTqND24AeA(#oY{rIb&L(=||q;7cqhQU35tq?B@5IIyXd!sngr z5W6-Uw0*A^e`|-$Q1Xgzlf;{JxzWa*n6CSVi0ge5;j#W2=T=d{3v?uKe5Bu;YuOAq zv`C$?ka4;Q#hO2SN;tEsB*4ZuC)hdqsJAt5)4ui-?wcR#WdRpY;QdtW*aRW zV@umy&o-K^FB^0E&_tg_xd{V&V_2TK!W5Y_TVC`_wjcr0lwchr1 +AACTCTCCGTGCTGTCCGGGGTCACTGTGATGCCAGTGCCGTCGACGGACCACAGGAGCGCCGCCAATTACGATTTATA +GGCGGCCCGGCCGATTATATCTTTGGCGGTCCCCTAGGCTCTCTAGGGGCCCGCACTGAAGAGGGCAACTCTGCAAGGA +CACGAATCTGACTCCTTAATAAAGGTGTGAAATCTGTCCGGTCGTCTCCTAATATGGGGCTTCATCATCTCAGGCGAAA +TCAGCGCCCGACGGGCCATAGTAAGCGGTGTTGTGGCATAGGTGCAGGTGGCCACCGATTATAACAGGATGACATACGC +GGAATTCGGGGTATGATGCTCTCCCGACACTTTGAGACAATAAATAGTTTAGTGTCCTGATGGTCTAAACCGAAGTCAT +TCAAAATAGCTAAGTGTAGTCTTCCCGTTCTAGGGATAGTCTAGGACATGCCCTATATTGGTTTTCTCTTACCGCGGAC +TACTCCCGCGCCCTCGGAGGTGTCTCAATTCATCCATGTTGATCCTTCAAATCGGGGCAGCGACGGGGGCACGGAGGGG +GTACGATAACCGCTAAATTGACCACCACCATCGATGATTCTACCATCTCTATCCATCCAACCCTTTTTTTGTTTATTTC +CTCTATGGGTTACAGCTA diff --git a/src/multiqc/config.vsh.yaml b/src/multiqc/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..df5e38e1 --- /dev/null +++ b/src/multiqc/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,225 @@ +name: "multiqc" +description: | + MultiQC aggregates results from bioinformatics analyses across many samples into a single report. + It searches a given directory for analysis logs and compiles a HTML report. It's a general use tool, perfect for summarising the output from numerous bioinformatics tools. +info: + keywords: [QC, html report, aggregate analysis] + links: + homepage: https://multiqc.info/ + documentation: https://multiqc.info/docs/ + repository: https://github.com/MultiQC/MultiQC + references: + doi: 10.1093/bioinformatics/btw354 + licence: GPL v3 or later + +argument_groups: + - name: "Input" + arguments: + - name: "--input" + type: file + multiple: true + required: true + example: data/results/ + description: | + File paths to be searched for analysis results to be included in the report. + + - name: "Ouput" + arguments: + - name: "--output_report" + type: file + direction: output + must_exist: false + example: multiqc_report.html + description: | + Filepath of the generated report. + - name: "--output_data" + type: file + required: false + direction: output + example: multiqc_data + must_exist: false + description: | + Output directory for parsed data files. If not provided, parsed data will not be published. + - name: "--output_plots" + type: file + required: false + direction: output + must_exist: false + example: multiqc_plots + description: | + Output directory for generated plots. If not provided, plots will not be published. + + - name: "Modules and analyses to run" + arguments: + - name: "--include_modules" + type: string + multiple: true + example: [fastqc, cutadapt] + description: Use only these module + - name: "--exclude_modules" + type: string + multiple: true + example: [fastqc, cutadapt] + description: Do not use only these modules + - name: "--ignore_analysis" + type: string + multiple: true + example: [run_one/*, run_two/*] + - name: "--ignore_samples" + type: string + multiple: true + example: [sample_1*, sample_3*] + - name: "--ignore_symlinks" + type: boolean_true + description: Ignore symlinked directories and files + + - name: "Sample name handling" + arguments: + - name: "--dirs" + type: boolean_true + description: Prepend directory to sample names to avoid clashing filenames + - name: "--dirs_depth" + type: integer + description: Prepend n directories to sample names. Negative number to take from start of path. + - name: "--full_names" + type: boolean_true + description: Do not clean the sample names (leave as full file name) + - name: "--fn_as_s_name" + type: boolean_true + description: Use the log filename as the sample name + - name: "--replace_names" + type: file + example: replace_names.tsv + description: TSV file to rename sample names during report generation + + - name: "Report Customisation" + arguments: + - name: "--title" + type: string + description: | + Report title. Printed as page header, used for filename if not otherwise specified. + - name: "--comment" + type: string + description: | + Custom comment, will be printed at the top of the report. + - name: "--template" + type: string + choices: [default, gathered, geo, highcharts, sections, simple] + description: | + Report template to use. + - name: "--sample_names" + type: file + description: | + TSV file containing alternative sample names for renaming buttons in the report. + example: sample_names.tsv + - name: "--sample_filters" + type: file + description: | + TSV file containing show/hide patterns for the report + example: sample_filters.tsv + - name: "--custom_css_file" + type: file + description: | + Custom CSS file to add to the final report + example: custom_style_sheet.css + - name: "--profile_runtime" + type: boolean_true + description: | + Add analysis of how long MultiQC takes to run to the report + + - name: "MultiQC behaviour" + arguments: + - name: "--verbose" + type: boolean_true + description: | + Increase output verbosity. + - name: "--quiet" + type: boolean_true + description: | + Only show log warnings + - name: "--strict" + type: boolean_true + description: | + Don't catch exceptions, run additional code checks to help development. + - name: "--development" + type: boolean_true + description: | + Development mode. Do not compress and minimise JS, export uncompressed plot data. + - name: "--require_logs" + type: boolean_true + description: | + Require all explicitly requested modules to have log files. If not, MultiQC will exit with an error. + - name: "--no_megaqc_upload" + type: boolean_true + description: | + Don't upload generated report to MegaQC, even if MegaQC options are found. + - name: "--no_ansi" + type: boolean_true + description: | + Disable coloured log output. + - name: "--cl_config" + type: string + required: false + description: | + YAML formatted string that allows to customize MultiQC behaviour like input file detection. + example: "qualimap_config: { general_stats_coverage: [20,40,200] }" + + - name: "Output format" + arguments: + - name: "--flat" + type: boolean_true + description: | + Use only flat plots (static images). + - name: "--interactive" + type: boolean_true + description: | + Use only interactive plots (in-browser Javascript). + - name: "--data_dir" + type: boolean_true + description: | + Force the parsed data directory to be created. + - name: "--no_data_dir" + type: boolean_true + description: | + Prevent the parsed data directory from being created. + - name: "--zip_data_dir" + type: boolean_true + description: | + Compress the data directory. + - name: "--data_format" + type: string + choices: [tsv, csv, json, yaml] + description: | + Output parsed data in a different format than the default 'txt'. + - name: "--pdf" + type: boolean_true + description: | + Creates PDF report with the 'simple' template. Requires Pandoc to be installed. + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh + +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data + +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/multiqc:1.21--pyhdfd78af_0 + setup: + - type: docker + run: | + multiqc --version | sed 's/multiqc, version\s\(.*\)/multiqc: "\1"/' > /var/software_versions.txt + test_setup: + - type: apt + packages: + - jq + +runners: + - type: executable + - type: nextflow + + diff --git a/src/multiqc/help.txt b/src/multiqc/help.txt new file mode 100644 index 00000000..9509e720 --- /dev/null +++ b/src/multiqc/help.txt @@ -0,0 +1,67 @@ + ```bash +multiqc --help +``` + +/// MultiQC 🔍 | v1.20 + + Usage: multiqc [OPTIONS] [ANALYSIS DIRECTORY] + + MultiQC aggregates results from bioinformatics analyses across many samples into a single report. + It searches a given directory for analysis logs and compiles a HTML report. It's a general use tool, perfect for summarising the output from numerous bioinformatics tools. + To run, supply with one or more directory to scan for analysis results. For example, to run in the current working directory, use 'multiqc .' + +╭─ Main options ────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╮ +│ --force -f Overwrite any existing reports │ +│ --config -c Specific config file to load, after those in MultiQC dir / home dir / working dir. (PATH) │ +│ --cl-config Specify MultiQC config YAML on the command line (TEXT) │ +│ --filename -n Report filename. Use 'stdout' to print to standard out. (TEXT) │ +│ --outdir -o Create report in the specified output directory. (TEXT) │ +│ --ignore -x Ignore analysis files (GLOB EXPRESSION) │ +│ --ignore-samples Ignore sample names (GLOB EXPRESSION) │ +│ --ignore-symlinks Ignore symlinked directories and files │ +│ --file-list -l Supply a file containing a list of file paths to be searched, one per row │ +╰───────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╯ +╭─ Choosing modules to run ─────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╮ +│ --module -m Use only this module. Can specify multiple times. (MODULE NAME) │ +│ --exclude -e Do not use this module. Can specify multiple times. (MODULE NAME) │ +╰───────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╯ +╭─ Sample handling ─────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╮ +│ --dirs -d Prepend directory to sample names │ +│ --dirs-depth -dd Prepend n directories to sample names. Negative number to take from start of path. (INTEGER) │ +│ --fullnames -s Do not clean the sample names (leave as full file name) │ +│ --fn_as_s_name Use the log filename as the sample name │ +│ --replace-names TSV file to rename sample names during report generation (PATH) │ +╰───────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╯ +╭─ Report customisation ────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╮ +│ --title -i Report title. Printed as page header, used for filename if not otherwise specified. (TEXT) │ +│ --comment -b Custom comment, will be printed at the top of the report. (TEXT) │ +│ --template -t Report template to use. (default|gathered|geo|highcharts|sections|simple) │ +│ --sample-names TSV file containing alternative sample names for renaming buttons in the report (PATH) │ +│ --sample-filters TSV file containing show/hide patterns for the report (PATH) │ +│ --custom-css-file Custom CSS file to add to the final report (PATH) │ +╰───────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╯ +╭─ Output files ────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╮ +│ --flat -fp Use only flat plots (static images) │ +│ --interactive -ip Use only interactive plots (in-browser Javascript) │ +│ --export -p Export plots as static images in addition to the report │ +│ --data-dir Force the parsed data directory to be created. │ +│ --no-data-dir Prevent the parsed data directory from being created. │ +│ --data-format -k Output parsed data in a different format. (tsv|csv|json|yaml) │ +│ --zip-data-dir -z Compress the data directory. │ +│ --no-report Do not generate a report, only export data and plots │ +│ --pdf Creates PDF report with the 'simple' template. Requires Pandoc to be installed. │ +╰───────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╯ +╭─ MultiQC behaviour ───────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╮ +│ --verbose -v Increase output verbosity. (INTEGER RANGE) │ +│ --quiet -q Only show log warnings │ +│ --strict Don't catch exceptions, run additional code checks to help development. │ +│ --development,--dev Development mode. Do not compress and minimise JS, export uncompressed plot data │ +│ --require-logs Require all explicitly requested modules to have log files. If not, MultiQC will exit with an error. │ +│ --profile-runtime Add analysis of how long MultiQC takes to run to the report │ +│ --no-megaqc-upload Don't upload generated report to MegaQC, even if MegaQC options are found │ +│ --no-ansi Disable coloured log output │ +│ --version Show the version and exit. │ +│ --help -h Show this message and exit. │ +╰───────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────────╯ + + See http://multiqc.info for more details. \ No newline at end of file diff --git a/src/multiqc/script.sh b/src/multiqc/script.sh new file mode 100755 index 00000000..a35ad159 --- /dev/null +++ b/src/multiqc/script.sh @@ -0,0 +1,129 @@ +#!/bin/bash + +# disable flags +[[ "$par_ignore_symlinks" == "false" ]] && unset par_ignore_symlinks +[[ "$par_dirs" == "false" ]] && unset par_dirs +[[ "$par_full_names" == "false" ]] && unset par_full_names +[[ "$par_fn_as_s_name" == "false" ]] && unset par_fn_as_s_name +[[ "$par_profile_runtime" == "false" ]] && unset par_profile_runtime +[[ "$par_verbose" == "false" ]] && unset par_verbose +[[ "$par_quiet" == "false" ]] && unset par_quiet +[[ "$par_strict" == "false" ]] && unset par_strict +[[ "$par_development" == "false" ]] && unset par_development +[[ "$par_require_logs" == "false" ]] && unset par_require_logs +[[ "$par_no_megaqc_upload" == "false" ]] && unset par_no_megaqc_upload +[[ "$par_no_ansi" == "false" ]] && unset par_no_ansi +[[ "$par_flat" == "false" ]] && unset par_flat +[[ "$par_interactive" == "false" ]] && unset par_interactive +[[ "$par_static_plot_export" == "false" ]] && unset par_static_plot_export +[[ "$par_data_dir" == "false" ]] && unset par_data_dir +[[ "$par_no_data_dir" == "false" ]] && unset par_no_data_dir +[[ "$par_zip_data_dir" == "false" ]] && unset par_zip_data_dir +[[ "$par_pdf" == "false" ]] && unset par_pdf + + +# handle inputs +out_dir=$(dirname "$par_output_report") +output_report_file=$(basename "$par_output_report") +report_name="${output_report_file%.*}" + +# handle outputs +[[ -z "$par_output_report" ]] && no_report=true +[[ -z "$par_output_data" ]] && no_data_dir=true +[[ ! -z "$par_output_data" ]] && data_dir=true +[[ ! -z "$par_output_plots" ]] && export=true + +# handle multiples +IFS=";" read -ra inputs <<< $par_input + +if [[ -n "$par_include_modules" ]]; then + include_modules="" + IFS=";" read -ra incl_modules <<< $par_include_modules + for i in "${incl_modules[@]}"; do + include_modules+="--include $i " + done + unset IFS +fi + +if [[ -n "$par_exclude_modules" ]]; then + exclude_modules="" + IFS=";" read -ra excl_modules <<< $par_exclude_modules + for i in "${excl_modules[@]}"; do + exclude_modules+="--exclude $i" + done + unset IFS +fi + +if [[ -n "$par_ignore_analysis" ]]; then + ignore="" + IFS=";" read -ra ignore_analysis <<< $par_ignore_analysis + for i in "${ignore_analysis[@]}"; do + ignore+="--ignore $i " + done + unset IFS +fi + +if [[ -n "$par_ignore_samples" ]]; then + ignore_samples="" + IFS=";" read -ra ign_samples <<< $par_ignore_samples + for i in "${ign_samples[@]}"; do + ignore_samples+="--ignore-samples $i" + done + unset IFS +fi + +# run multiqc +multiqc \ + ${par_output_report:+--filename "$report_name"} \ + ${out_dir:+--outdir "$out_dir"} \ + ${no_report:+--no-report} \ + ${no_data_dir:+--no-data-dir} \ + ${data_dir:+--data-dir} \ + ${export:+--export} \ + ${par_title:+--title "$par_title"} \ + ${par_comment:+--comment "$par_comment"} \ + ${par_template:+--template "$par_template"} \ + ${par_sample_names:+--sample-names "$par_sample_names"} \ + ${par_sample_filters:+--sample-filters "$par_sample_filters"} \ + ${par_custom_css_file:+--custom-css-file "$par_custom_css_file"} \ + ${par_profile_runtime:+--profile-runtime} \ + ${par_dirs:+--dirs} \ + ${par_dirs_depth:+--dirs-depth "$par_dirs_depth"} \ + ${par_full_names:+--full-names} \ + ${par_fn_as_s_name:+--fn-as-s-name} \ + ${par_ignore_names:+--ignore-names "$par_ignore_names"} \ + ${par_ignore_symlinks:+--ignore-symlinks} \ + ${ignore_samples} \ + ${ignore} \ + ${exclude_modules} \ + ${include_modules} \ + ${par_include_modules:+--include-modules "$par_include_modules"} \ + ${par_data_format:+--data-format "$par_data_format"} \ + ${par_cl_config:+--cl-config "$par_cl_config"} \ + ${par_zip_data_dir:+--zip-data-dir} \ + ${par_pdf:+--pdf} \ + ${par_interactive:+--interactive} \ + ${par_flat:+--flat} \ + ${par_verbose:+--verbose} \ + ${par_quiet:+--quiet} \ + ${par_strict:+--strict} \ + ${par_no_megaqc_upload:+--no-megaqc-upload} \ + ${par_no_ansi:+--no-ansi} \ + ${par_profile_runtime:+--profile-runtime} \ + ${par_require_logs:+--require-logs} \ + ${par_development:+--development} \ + --force \ + "${inputs[@]}" + +# Move outputs +if [[ -n "$par_output_data" ]] && [[ -d "${out_dir}/${report_name}_data" ]]; then + mv "${out_dir}/${report_name}_data" "$par_output_data" +elif [[ -n "$par_output_data" ]] && [[ ! -d "${out_dir}/${report_name}_data" ]]; then + echo "WARNING: Data could not be saved because data folder was not generated by multiqc. This could be due to filtering out of modules or samples." +fi + +if [[ -n "$par_output_plots" ]] && [[ -d "${out_dir}/${report_name}_plots" ]]; then + mv "${out_dir}/${report_name}_plots" "$par_output_plots" +elif [[ -n "$par_output_plots" ]] && [[ ! -d "${out_dir}/${report_name}_plots" ]]; then + echo "WARNING: Plots could not be saved because plots folder was not generated by multiqc. This could be due to filtering out of modules or samples." +fi diff --git a/src/multiqc/test.sh b/src/multiqc/test.sh new file mode 100644 index 00000000..a2844f54 --- /dev/null +++ b/src/multiqc/test.sh @@ -0,0 +1,44 @@ +#!/bin/bash + +echo ">>> Testing input/output handling" + +"$meta_executable" \ + --input "$meta_resources_dir/test_data/" \ + --output_report test1.html \ + --output_data data1 \ + --output_plots plots1 \ + --quiet + +[ ! -f test1.html ] && echo "MultiQC report does not exist!" && exit 1 +[ ! -d data1 ] && echo "MultiQC data directory does not exist!" && exit 1 +[ ! -d plots1 ] && echo "MultiQC plots directory does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Testing module exclusion" + +"$meta_executable" \ + --input "$meta_resources_dir/test_data/" \ + --output_report test2.html \ + --output_data data2 \ + --output_plots plots2 \ + --exclude_modules samtools \ + --quiet + +[ -f test2.html ] && echo "MultiQC report should not exist!" && exit 1 +[ -d data2 ] && echo "MultiQC data directory should not exist!" && exit 1 +[ -d plots2 ] && echo "MultiQC plots directory should not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Testing sample exclusion" + +"$meta_executable" \ + --input "$meta_resources_dir/test_data/" \ + --output_report test3.html \ + --output_data data3 \ + --ignore_samples a \ + --quiet + +key_to_check=".report_general_stats_data[0].a" +json_file="data3/multiqc_data.json" +[[ $(jq -r "$key_to_check" "$json_file") != null ]] && echo "$key_to_check should not be present in $json_file" && exit 1 + +echo "All tests succeeded!" +exit 0 \ No newline at end of file diff --git a/src/multiqc/test_data/a.txt b/src/multiqc/test_data/a.txt new file mode 100644 index 00000000..1be51d70 --- /dev/null +++ b/src/multiqc/test_data/a.txt @@ -0,0 +1,1504 @@ +# This file was produced by samtools stats (1.3+htslib-1.3) and can be plotted using plot-bamstats +# This file contains statistics for all reads. +# The command line was: stats mapped/a.bam +# CHK, Checksum [2]Read Names [3]Sequences [4]Qualities +# CHK, CRC32 of reads which passed filtering followed by addition (32bit overflow) +CHK db35d7d5 ec933459 1f587026 +# Summary Numbers. Use `grep ^SN | cut -f 2-` to extract this part. +SN raw total sequences: 21838387 +SN filtered sequences: 0 +SN sequences: 21838387 +SN is sorted: 1 +SN 1st fragments: 21838387 +SN last fragments: 0 +SN reads mapped: 21231961 +SN reads mapped and paired: 0 # paired-end technology bit set + both mates mapped +SN reads unmapped: 606426 +SN reads properly paired: 0 # proper-pair bit set +SN reads paired: 0 # paired-end technology bit set +SN reads duplicated: 3096782 # PCR or optical duplicate bit set +SN reads MQ0: 4882153 # mapped and MQ=0 +SN reads QC failed: 0 +SN non-primary alignments: 0 +SN total length: 1090509989 # ignores clipping +SN bases mapped: 1060219802 # ignores clipping +SN bases mapped (cigar): 1060219787 # more accurate +SN bases trimmed: 0 +SN bases duplicated: 154717551 +SN mismatches: 6032903 # from NM fields +SN error rate: 5.690238e-03 # mismatches / bases mapped (cigar) +SN average length: 49 +SN maximum length: 50 +SN average quality: 37.0 +SN insert size average: 0.0 +SN insert size standard deviation: 0.0 +SN inward oriented pairs: 0 +SN outward oriented pairs: 0 +SN pairs with other orientation: 0 +SN pairs on different chromosomes: 0 +# First Fragment Qualitites. Use `grep ^FFQ | cut -f 2-` to extract this part. +# Columns correspond to qualities and rows to cycles. First column is the cycle number. +FFQ 1 0 0 51315 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 382312 0 0 0 0 0 0 178198 0 0 0 0 1338772 0 0 0 0 0 19887790 0 0 0 0 0 0 0 0 +FFQ 2 0 0 5115 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 275192 0 0 0 0 0 0 147400 0 0 0 0 1284560 0 0 0 0 0 20126120 0 0 0 0 0 0 0 0 +FFQ 3 0 0 5128 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 191502 0 0 0 0 0 0 150841 0 0 0 0 1285815 0 0 0 0 0 20205101 0 0 0 0 0 0 0 0 +FFQ 4 0 0 5145 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 146549 0 0 0 0 0 0 39295 0 0 0 0 471059 0 0 0 0 0 1708658 0 0 0 19467681 0 0 0 0 +FFQ 5 0 0 5171 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 182896 0 0 0 0 0 0 41859 0 0 0 0 541845 0 0 0 0 0 1799240 0 0 0 19267376 0 0 0 0 +FFQ 6 0 0 5207 0 0 0 4751 0 0 0 0 0 0 0 0 177726 0 0 0 0 0 0 50754 0 0 0 0 533328 0 0 0 0 0 1789862 0 0 0 19276759 0 0 0 0 +FFQ 7 0 0 5265 0 0 0 5303 0 0 0 0 0 0 0 0 189482 0 0 0 0 0 0 50374 0 0 0 0 545491 0 0 0 0 0 1801670 0 0 0 19240802 0 0 0 0 +FFQ 8 0 0 5321 0 0 0 5251 0 0 0 0 0 0 0 0 189946 0 0 0 0 0 0 50759 0 0 0 0 544729 0 0 0 0 0 1805074 0 0 0 19237307 0 0 0 0 +FFQ 9 0 0 5412 0 0 0 5572 0 0 0 0 0 0 0 0 194980 0 0 0 0 0 0 50487 0 0 0 0 546813 0 0 0 0 0 1809993 0 0 0 19225130 0 0 0 0 +FFQ 10 0 0 5522 0 0 0 5109 0 0 0 0 0 0 0 0 187331 0 0 0 0 0 0 52119 0 0 0 0 547170 0 0 0 0 0 1806426 0 0 0 19234710 0 0 0 0 +FFQ 11 0 0 5659 0 0 0 5437 0 0 0 0 0 0 0 0 188095 0 0 0 0 0 0 53798 0 0 0 0 550305 0 0 0 0 0 1815355 0 0 0 19219738 0 0 0 0 +FFQ 12 0 0 5842 0 0 0 5812 0 0 0 0 0 0 0 0 191987 0 0 0 0 0 0 54137 0 0 0 0 551697 0 0 0 0 0 1820134 0 0 0 19208778 0 0 0 0 +FFQ 13 0 0 6054 0 0 0 5991 0 0 0 0 0 0 0 0 190425 0 0 0 0 0 0 55749 0 0 0 0 554090 0 0 0 0 0 1824863 0 0 0 19201215 0 0 0 0 +FFQ 14 0 0 6305 0 0 0 6562 0 0 0 0 0 0 0 0 194459 0 0 0 0 0 0 56577 0 0 0 0 553776 0 0 0 0 0 1736245 0 0 0 6044499 0 0 13239964 0 +FFQ 15 0 0 6575 0 0 0 6948 0 0 0 0 0 0 0 0 200015 0 0 0 0 0 0 58113 0 0 0 0 558164 0 0 0 0 0 1741159 0 0 0 6049860 0 0 13217553 0 +FFQ 16 0 0 6884 0 0 0 7121 0 0 0 0 0 0 0 0 201645 0 0 0 0 0 0 59457 0 0 0 0 560449 0 0 0 0 0 1751983 0 0 0 6029168 0 0 13221680 0 +FFQ 17 0 0 7255 0 0 0 7367 0 0 0 0 0 0 0 0 199780 0 0 0 0 0 0 63085 0 0 0 0 565569 0 0 0 0 0 1761217 0 0 0 6046012 0 0 13188102 0 +FFQ 18 0 0 7720 0 0 0 8336 0 0 0 0 0 0 0 0 200938 0 0 0 0 0 0 65311 0 0 0 0 558465 0 0 0 0 0 1759662 0 0 0 6058023 0 0 13179932 0 +FFQ 19 0 0 8413 0 0 0 8308 0 0 0 0 0 0 0 0 201721 0 0 0 0 0 0 69098 0 0 0 0 563047 0 0 0 0 0 1769492 0 0 0 5699288 0 0 13519020 0 +FFQ 20 0 0 8973 0 0 0 9516 0 0 0 0 0 0 0 0 201161 0 0 0 0 0 0 74284 0 0 0 0 562610 0 0 0 0 0 1778241 0 0 0 5767457 0 0 13436145 0 +FFQ 21 0 0 9857 0 0 0 10500 0 0 0 0 0 0 0 0 200349 0 0 0 0 0 0 80072 0 0 0 0 557657 0 0 0 0 0 1780395 0 0 0 5847132 0 0 13352425 0 +FFQ 22 0 0 11063 0 0 0 12270 0 0 0 0 0 0 0 0 204602 0 0 0 0 0 0 89896 0 0 0 0 558198 0 0 0 0 0 1791483 0 0 0 5932912 0 0 13237963 0 +FFQ 23 0 0 12768 0 0 0 14297 0 0 0 0 0 0 0 0 207883 0 0 0 0 0 0 99992 0 0 0 0 556435 0 0 0 0 0 1802873 0 0 0 6033565 0 0 13110574 0 +FFQ 24 0 0 14914 0 0 0 16397 0 0 0 0 0 0 0 0 207240 0 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Use `grep ^LFQ | cut -f 2-` to extract this part. +# Columns correspond to qualities and rows to cycles. First column is the cycle number. +LFQ 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 11 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 12 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 13 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 14 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 15 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 16 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 17 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 18 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 19 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 21 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 22 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 23 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 24 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 25 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 26 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 27 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 28 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 29 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 30 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 31 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 32 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 33 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 34 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 35 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 36 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 37 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 38 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 39 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 40 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 41 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 42 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 43 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 44 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 45 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 46 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 47 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 48 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 49 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 50 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 51 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +# GC Content of first fragments. Use `grep ^GCF | cut -f 2-` to extract this part. +GCF 0.75 865 +GCF 1.76 1418 +GCF 2.76 1432 +GCF 3.77 2552 +GCF 4.27 2584 +GCF 5.03 2582 +GCF 5.78 4188 +GCF 6.78 4242 +GCF 7.79 6900 +GCF 8.79 6990 +GCF 9.80 12077 +GCF 10.30 12202 +GCF 11.06 12248 +GCF 11.81 20918 +GCF 12.31 21159 +GCF 13.07 21223 +GCF 13.82 35416 +GCF 14.32 35417 +GCF 14.82 35899 +GCF 15.33 35912 +GCF 16.08 58403 +GCF 16.83 59262 +GCF 17.34 59292 +GCF 17.84 92651 +GCF 18.34 92652 +GCF 18.84 93563 +GCF 19.35 93799 +GCF 20.10 141217 +GCF 20.85 142627 +GCF 21.36 143006 +GCF 21.86 205422 +GCF 22.36 205429 +GCF 22.86 207354 +GCF 23.37 207906 +GCF 23.87 290147 +GCF 24.37 290170 +GCF 24.87 292864 +GCF 25.38 293730 +GCF 25.88 405518 +GCF 26.38 405534 +GCF 26.88 408551 +GCF 27.39 408580 +GCF 27.89 570253 +GCF 28.39 570499 +GCF 28.89 570545 +GCF 29.40 575537 +GCF 29.90 829159 +GCF 30.40 829379 +GCF 30.90 829405 +GCF 31.41 836277 +GCF 31.91 1143374 +GCF 32.66 1143659 +GCF 33.42 1146746 +GCF 33.92 1501224 +GCF 34.42 1501256 +GCF 34.92 1501488 +GCF 35.43 1507360 +GCF 35.93 1778503 +GCF 36.43 1778542 +GCF 36.93 1778582 +GCF 37.44 1783301 +GCF 37.94 1767410 +GCF 38.44 1767928 +GCF 38.94 1768071 +GCF 39.45 1769688 +GCF 39.95 1656761 +GCF 40.45 1657229 +GCF 40.95 1657212 +GCF 41.46 1658172 +GCF 41.96 1509858 +GCF 42.46 1509735 +GCF 42.96 1509702 +GCF 43.47 1509894 +GCF 43.97 1444340 +GCF 44.47 1444607 +GCF 44.97 1444566 +GCF 45.48 1444635 +GCF 45.98 1405845 +GCF 46.48 1405793 +GCF 46.98 1405225 +GCF 47.49 1405190 +GCF 47.99 1360256 +GCF 48.49 1360229 +GCF 49.25 1359649 +GCF 50.25 1272600 +GCF 51.01 1271785 +GCF 51.51 1271790 +GCF 52.01 1115634 +GCF 52.51 1115609 +GCF 53.02 1114429 +GCF 53.52 1114416 +GCF 54.02 921342 +GCF 54.52 921028 +GCF 55.03 921029 +GCF 55.53 919941 +GCF 56.03 716231 +GCF 56.78 715994 +GCF 57.54 715097 +GCF 58.04 532571 +GCF 58.54 527473 +GCF 59.05 527469 +GCF 59.55 526587 +GCF 60.05 376831 +GCF 60.55 372736 +GCF 61.06 372536 +GCF 61.56 371968 +GCF 62.06 252936 +GCF 62.56 249647 +GCF 63.07 249528 +GCF 63.57 249527 +GCF 64.07 163481 +GCF 64.57 161228 +GCF 65.08 161158 +GCF 65.58 161154 +GCF 66.08 101911 +GCF 66.83 100650 +GCF 67.59 100609 +GCF 68.09 60847 +GCF 68.59 59897 +GCF 69.10 59890 +GCF 69.60 59865 +GCF 70.10 36290 +GCF 70.60 35728 +GCF 71.11 35725 +GCF 71.61 35692 +GCF 72.36 23067 +GCF 73.12 22797 +GCF 73.62 22799 +GCF 74.12 15342 +GCF 74.62 15317 +GCF 75.13 15185 +GCF 75.63 15186 +GCF 76.13 10477 +GCF 76.63 10474 +GCF 77.14 10363 +GCF 77.64 10359 +GCF 78.14 7327 +GCF 78.64 7313 +GCF 79.40 7302 +GCF 80.15 5084 +GCF 80.65 5086 +GCF 81.16 5049 +GCF 81.66 5047 +GCF 82.16 3472 +GCF 82.66 3470 +GCF 83.42 3464 +GCF 84.17 2302 +GCF 84.67 2303 +GCF 85.43 2287 +GCF 86.18 1488 +GCF 86.68 1487 +GCF 87.19 1486 +GCF 87.69 1480 +GCF 88.44 841 +GCF 89.20 842 +GCF 89.70 837 +GCF 90.70 472 +GCF 91.71 471 +GCF 92.71 248 +GCF 93.72 244 +GCF 94.97 126 +GCF 96.98 54 +GCF 98.99 21 +# GC Content of last fragments. Use `grep ^GCL | cut -f 2-` to extract this part. +# ACGT content per cycle. Use `grep ^GCC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%]; and N and O counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +GCC 1 27.19 22.69 22.08 28.04 0.21 0.00 +GCC 2 27.70 22.16 21.57 28.57 0.00 0.00 +GCC 3 29.07 20.57 19.82 30.54 0.00 0.00 +GCC 4 28.81 20.73 20.29 30.17 0.00 0.00 +GCC 5 29.23 20.17 19.74 30.86 0.00 0.00 +GCC 6 29.00 20.47 19.91 30.62 0.00 0.00 +GCC 7 28.88 20.46 19.88 30.78 0.00 0.00 +GCC 8 28.85 20.74 20.02 30.39 0.00 0.00 +GCC 9 28.51 21.15 20.49 29.85 0.00 0.00 +GCC 10 28.05 21.54 20.95 29.46 0.00 0.00 +GCC 11 28.15 21.56 20.88 29.41 0.00 0.00 +GCC 12 28.32 21.33 20.59 29.77 0.00 0.00 +GCC 13 28.46 21.18 20.45 29.91 0.00 0.00 +GCC 14 28.36 21.04 20.35 30.25 0.00 0.00 +GCC 15 28.47 20.86 20.15 30.51 0.00 0.00 +GCC 16 28.29 21.14 20.36 30.21 0.00 0.00 +GCC 17 28.23 21.10 20.54 30.12 0.00 0.00 +GCC 18 28.35 20.96 20.66 30.02 0.00 0.00 +GCC 19 28.06 21.42 21.18 29.34 0.00 0.00 +GCC 20 28.15 21.29 21.01 29.55 0.00 0.00 +GCC 21 28.09 21.28 21.33 29.31 0.00 0.00 +GCC 22 28.07 21.26 21.17 29.51 0.00 0.00 +GCC 23 28.22 21.06 20.72 30.01 0.00 0.00 +GCC 24 28.13 21.20 20.87 29.80 0.00 0.00 +GCC 25 28.32 20.89 20.58 30.21 0.00 0.00 +GCC 26 28.13 21.20 20.74 29.92 0.00 0.00 +GCC 27 27.96 21.34 20.88 29.81 0.00 0.00 +GCC 28 28.06 21.17 20.89 29.88 0.00 0.00 +GCC 29 27.79 21.60 21.33 29.29 0.00 0.00 +GCC 30 27.84 21.56 21.24 29.35 0.00 0.00 +GCC 31 27.84 21.59 21.14 29.43 0.00 0.00 +GCC 32 27.82 21.68 21.19 29.31 0.00 0.00 +GCC 33 28.14 21.20 20.82 29.84 0.00 0.00 +GCC 34 28.00 21.30 20.78 29.92 0.00 0.00 +GCC 35 28.14 21.19 20.64 30.03 0.00 0.00 +GCC 36 28.22 21.16 20.67 29.95 0.00 0.00 +GCC 37 28.12 21.36 20.65 29.87 0.00 0.00 +GCC 38 28.15 21.52 20.76 29.58 0.00 0.00 +GCC 39 27.94 21.78 21.08 29.19 0.00 0.00 +GCC 40 27.79 21.80 21.18 29.23 0.00 0.00 +GCC 41 27.65 21.89 21.45 29.01 0.00 0.00 +GCC 42 27.94 21.65 21.15 29.26 0.01 0.00 +GCC 43 27.90 21.51 20.95 29.65 0.00 0.00 +GCC 44 27.87 21.68 21.03 29.42 0.00 0.00 +GCC 45 28.27 21.39 20.69 29.66 0.00 0.00 +GCC 46 28.12 21.20 20.68 30.00 0.01 0.00 +GCC 47 28.06 21.43 21.00 29.51 0.00 0.00 +GCC 48 28.08 21.47 20.96 29.48 0.00 0.00 +GCC 49 27.53 21.94 21.68 28.85 0.02 0.00 +GCC 50 28.35 21.19 20.97 29.49 0.00 0.00 +# Insert sizes. Use `grep ^IS | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: insert size, pairs total, inward oriented pairs, outward oriented pairs, other pairs +# Read lengths. Use `grep ^RL | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: read length, count +RL 30 83 +RL 31 94 +RL 32 117 +RL 33 130 +RL 34 144 +RL 35 156 +RL 36 178 +RL 37 205 +RL 38 263 +RL 39 348 +RL 40 525 +RL 41 789 +RL 42 714 +RL 43 456 +RL 44 584 +RL 45 1226 +RL 46 18767 +RL 47 95161 +RL 48 496687 +RL 50 21221760 +# Indel distribution. Use `grep ^ID | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: length, number of insertions, number of deletions +ID 1 64125 118566 +ID 2 11857 15129 +ID 3 1458 1538 +# Indels per cycle. Use `grep ^IC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle, number of insertions (fwd), .. (rev) , number of deletions (fwd), .. (rev) +IC 1 0 0 0 1 +IC 2 0 203 0 212 +IC 3 0 552 0 878 +IC 4 0 892 0 1911 +IC 5 0 1594 0 2256 +IC 6 0 1567 0 2393 +IC 7 0 1533 0 2675 +IC 8 0 1585 0 2765 +IC 9 0 1556 0 2857 +IC 10 0 1643 0 3115 +IC 11 0 1682 0 2944 +IC 12 0 1707 0 3030 +IC 13 0 1811 0 3124 +IC 14 0 1723 0 3116 +IC 15 0 1838 0 3290 +IC 16 0 1687 0 3202 +IC 17 0 1841 0 3250 +IC 18 0 1850 0 3390 +IC 19 0 1873 0 3484 +IC 20 0 1785 0 3497 +IC 21 0 1763 0 3457 +IC 22 0 1782 0 3406 +IC 23 0 1841 0 3383 +IC 24 0 1828 0 3277 +IC 25 0 1809 0 3322 +IC 26 0 1830 0 3369 +IC 27 0 1890 0 3294 +IC 28 0 1825 0 3385 +IC 29 0 1864 0 3340 +IC 30 0 1899 0 3649 +IC 31 0 1958 0 3771 +IC 32 0 2052 0 3555 +IC 33 0 2086 0 3636 +IC 34 0 1962 0 3649 +IC 35 0 1945 0 3550 +IC 36 0 1972 0 3423 +IC 37 0 1836 0 3536 +IC 38 0 1845 0 3515 +IC 39 0 1883 0 3451 +IC 40 0 1806 0 3300 +IC 41 0 1850 0 3304 +IC 42 0 1710 0 3148 +IC 43 0 1825 0 2849 +IC 44 0 1639 0 2612 +IC 45 0 1708 0 1439 +IC 46 0 1072 0 765 +IC 47 0 659 0 340 +IC 48 0 288 0 118 +IC 49 0 91 0 0 +# Coverage distribution. Use `grep ^COV | cut -f 2-` to extract this part. +COV [1-1] 1 609977704 +COV [2-2] 2 115063033 +COV [3-3] 3 16119927 +COV [4-4] 4 2001769 +COV [5-5] 5 294243 +COV [6-6] 6 82570 +COV [7-7] 7 41437 +COV [8-8] 8 27141 +COV [9-9] 9 19572 +COV [10-10] 10 15755 +COV [11-11] 11 12467 +COV [12-12] 12 10784 +COV [13-13] 13 8648 +COV [14-14] 14 7758 +COV [15-15] 15 6163 +COV [16-16] 16 5267 +COV [17-17] 17 4349 +COV [18-18] 18 3615 +COV [19-19] 19 3296 +COV [20-20] 20 2835 +COV [21-21] 21 2708 +COV [22-22] 22 2026 +COV [23-23] 23 1585 +COV [24-24] 24 1605 +COV [25-25] 25 1606 +COV [26-26] 26 1387 +COV [27-27] 27 1529 +COV [28-28] 28 1270 +COV [29-29] 29 1185 +COV [30-30] 30 1228 +COV [31-31] 31 1101 +COV [32-32] 32 1125 +COV [33-33] 33 1032 +COV [34-34] 34 935 +COV [35-35] 35 880 +COV [36-36] 36 985 +COV [37-37] 37 1009 +COV [38-38] 38 915 +COV [39-39] 39 838 +COV [40-40] 40 828 +COV [41-41] 41 837 +COV [42-42] 42 894 +COV [43-43] 43 903 +COV [44-44] 44 902 +COV [45-45] 45 780 +COV [46-46] 46 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Use `grep ^GCD | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: GC%, unique sequence percentiles, 10th, 25th, 50th, 75th and 90th depth percentile +GCD 0.0 0.006 0.000 0.002 0.002 0.005 0.005 +GCD 1.0 0.007 0.007 0.007 0.007 0.007 0.007 +GCD 2.0 0.012 0.002 0.002 0.002 0.005 0.007 +GCD 3.0 0.014 0.005 0.005 0.007 0.020 0.020 +GCD 4.0 0.016 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002 +GCD 6.0 0.020 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002 +GCD 8.0 0.022 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002 +GCD 10.0 0.024 0.002 0.002 0.002 0.007 0.007 +GCD 11.0 0.025 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 +GCD 11.6 0.025 0.047 0.047 0.047 0.047 0.047 +GCD 12.0 0.031 0.002 0.002 0.002 0.005 0.007 +GCD 13.0 0.032 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 +GCD 14.0 0.033 0.002 0.002 0.002 0.005 0.005 +GCD 15.0 0.035 0.010 0.010 0.010 0.017 0.017 +GCD 16.0 0.039 0.002 0.002 0.005 0.005 0.005 +GCD 17.0 0.041 0.007 0.007 0.007 0.007 0.007 +GCD 18.0 0.045 0.002 0.002 0.005 0.010 0.010 +GCD 19.0 0.048 0.002 0.002 0.002 0.005 0.012 +GCD 20.0 0.052 0.002 0.002 0.002 0.002 0.007 +GCD 21.0 0.054 0.002 0.002 0.005 0.007 0.007 +GCD 22.0 0.062 0.002 0.002 0.005 0.007 0.010 +GCD 23.0 0.068 0.002 0.005 0.005 0.007 0.017 +GCD 24.0 0.080 0.002 0.002 0.002 0.002 0.005 +GCD 25.0 0.089 0.002 0.005 0.007 0.010 0.012 +GCD 26.0 0.105 0.002 0.002 0.002 0.005 0.007 +GCD 27.0 0.112 0.007 0.007 0.007 0.419 0.691 +GCD 28.0 0.124 0.002 0.002 0.007 0.020 0.093 +GCD 29.0 0.134 0.005 0.005 0.007 0.010 0.012 +GCD 30.0 0.149 0.002 0.002 0.005 0.012 0.022 +GCD 31.0 0.171 0.005 0.005 0.010 0.120 0.255 +GCD 32.0 0.225 0.002 0.005 0.120 0.228 0.262 +GCD 33.0 0.344 0.012 0.142 0.225 0.262 0.292 +GCD 34.0 0.721 0.022 0.194 0.240 0.272 0.296 +GCD 35.0 1.791 0.167 0.223 0.255 0.282 0.304 +GCD 36.0 4.174 0.194 0.235 0.265 0.292 0.316 +GCD 37.0 8.546 0.208 0.245 0.277 0.304 0.331 +GCD 38.0 15.513 0.218 0.255 0.287 0.316 0.345 +GCD 39.0 24.259 0.228 0.267 0.299 0.328 0.358 +GCD 40.0 34.137 0.238 0.277 0.311 0.343 0.372 +GCD 41.0 44.039 0.247 0.289 0.323 0.355 0.387 +GCD 42.0 53.383 0.260 0.299 0.336 0.368 0.402 +GCD 43.0 61.865 0.274 0.314 0.348 0.382 0.417 +GCD 44.0 69.571 0.289 0.326 0.363 0.394 0.431 +GCD 45.0 76.519 0.304 0.341 0.375 0.409 0.446 +GCD 46.0 82.424 0.316 0.353 0.387 0.424 0.468 +GCD 47.0 87.213 0.326 0.365 0.402 0.441 0.488 +GCD 48.0 90.973 0.338 0.375 0.409 0.451 0.505 +GCD 49.0 93.667 0.353 0.390 0.424 0.463 0.517 +GCD 50.0 95.910 0.345 0.392 0.429 0.470 0.524 +GCD 51.0 97.447 0.365 0.404 0.439 0.480 0.537 +GCD 52.0 98.546 0.365 0.402 0.441 0.483 0.537 +GCD 53.0 99.252 0.370 0.412 0.446 0.485 0.539 +GCD 54.0 99.662 0.365 0.412 0.448 0.492 0.561 +GCD 55.0 99.840 0.387 0.426 0.461 0.502 0.573 +GCD 56.0 99.930 0.020 0.402 0.446 0.485 0.554 +GCD 57.0 99.966 0.279 0.387 0.426 0.492 0.581 +GCD 58.0 99.982 0.002 0.005 0.470 0.980 1.063 +GCD 59.0 99.988 0.397 0.461 0.475 0.987 1.333 +GCD 60.0 99.989 0.002 0.002 0.002 0.211 0.211 +GCD 61.0 99.992 0.005 0.005 0.485 0.502 0.527 +GCD 62.0 99.995 0.002 0.002 0.002 0.434 0.434 +GCD 63.0 99.997 0.892 0.892 1.105 2.472 2.472 +GCD 64.0 99.998 1.034 1.034 1.034 1.098 1.098 +GCD 65.0 99.999 12.870 12.870 12.870 12.870 12.870 +GCD 66.0 100.000 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002 diff --git a/src/multiqc/test_data/b.txt b/src/multiqc/test_data/b.txt new file mode 100644 index 00000000..5df6122a --- /dev/null +++ b/src/multiqc/test_data/b.txt @@ -0,0 +1,1505 @@ +# This file was produced by samtools stats (1.3+htslib-1.3) and can be plotted using plot-bamstats +# This file contains statistics for all reads. +# The command line was: stats mapped/b.bam +# CHK, Checksum [2]Read Names [3]Sequences [4]Qualities +# CHK, CRC32 of reads which passed filtering followed by addition (32bit overflow) +CHK ee6a9cbf ecd7f501 51869fe3 +# Summary Numbers. Use `grep ^SN | cut -f 2-` to extract this part. +SN raw total sequences: 18576178 +SN filtered sequences: 0 +SN sequences: 18576178 +SN is sorted: 1 +SN 1st fragments: 18576178 +SN last fragments: 0 +SN reads mapped: 18166869 +SN reads mapped and paired: 0 # paired-end technology bit set + both mates mapped +SN reads unmapped: 409309 +SN reads properly paired: 0 # proper-pair bit set +SN reads paired: 0 # paired-end technology bit set +SN reads duplicated: 1674761 # PCR or optical duplicate bit set +SN reads MQ0: 3360997 # mapped and MQ=0 +SN reads QC failed: 0 +SN non-primary alignments: 0 +SN total length: 927580112 # ignores clipping +SN bases mapped: 907135249 # ignores clipping +SN bases mapped (cigar): 907135242 # more accurate +SN bases trimmed: 0 +SN bases duplicated: 83676902 +SN mismatches: 4228623 # from NM fields +SN error rate: 4.661513e-03 # mismatches / bases mapped (cigar) +SN average length: 49 +SN maximum length: 50 +SN average quality: 37.1 +SN insert size average: 0.0 +SN insert size standard deviation: 0.0 +SN inward oriented pairs: 0 +SN outward oriented pairs: 0 +SN pairs with other orientation: 0 +SN pairs on different chromosomes: 0 +# First Fragment Qualitites. Use `grep ^FFQ | cut -f 2-` to extract this part. +# Columns correspond to qualities and rows to cycles. First column is the cycle number. +FFQ 1 0 0 43365 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 316667 0 0 0 0 0 0 145075 0 0 0 0 1091864 0 0 0 0 0 16979207 0 0 0 0 0 0 0 0 +FFQ 2 0 0 2631 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 226851 0 0 0 0 0 0 117493 0 0 0 0 1044416 0 0 0 0 0 17184787 0 0 0 0 0 0 0 0 +FFQ 3 0 0 2642 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 150819 0 0 0 0 0 0 121280 0 0 0 0 1043537 0 0 0 0 0 17257900 0 0 0 0 0 0 0 0 +FFQ 4 0 0 2652 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 118535 0 0 0 0 0 0 32499 0 0 0 0 385005 0 0 0 0 0 1401276 0 0 0 16636211 0 0 0 0 +FFQ 5 0 0 2664 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 149178 0 0 0 0 0 0 33908 0 0 0 0 445421 0 0 0 0 0 1485286 0 0 0 16459721 0 0 0 0 +FFQ 6 0 0 2681 0 0 0 3389 0 0 0 0 0 0 0 0 146379 0 0 0 0 0 0 40576 0 0 0 0 438297 0 0 0 0 0 1478793 0 0 0 16466063 0 0 0 0 +FFQ 7 0 0 2719 0 0 0 4001 0 0 0 0 0 0 0 0 156176 0 0 0 0 0 0 40734 0 0 0 0 447501 0 0 0 0 0 1488746 0 0 0 16436301 0 0 0 0 +FFQ 8 0 0 2759 0 0 0 3952 0 0 0 0 0 0 0 0 156255 0 0 0 0 0 0 40576 0 0 0 0 446114 0 0 0 0 0 1486214 0 0 0 16440308 0 0 0 0 +FFQ 9 0 0 2822 0 0 0 4334 0 0 0 0 0 0 0 0 159441 0 0 0 0 0 0 40893 0 0 0 0 448307 0 0 0 0 0 1489379 0 0 0 16431002 0 0 0 0 +FFQ 10 0 0 2897 0 0 0 3878 0 0 0 0 0 0 0 0 153155 0 0 0 0 0 0 41101 0 0 0 0 447304 0 0 0 0 0 1484804 0 0 0 16443039 0 0 0 0 +FFQ 11 0 0 2982 0 0 0 4003 0 0 0 0 0 0 0 0 151436 0 0 0 0 0 0 42075 0 0 0 0 447020 0 0 0 0 0 1486604 0 0 0 16442058 0 0 0 0 +FFQ 12 0 0 3101 0 0 0 4242 0 0 0 0 0 0 0 0 155412 0 0 0 0 0 0 42911 0 0 0 0 449860 0 0 0 0 0 1491835 0 0 0 16428817 0 0 0 0 +FFQ 13 0 0 3240 0 0 0 4244 0 0 0 0 0 0 0 0 154472 0 0 0 0 0 0 44402 0 0 0 0 451953 0 0 0 0 0 1495686 0 0 0 16422181 0 0 0 0 +FFQ 14 0 0 3399 0 0 0 4705 0 0 0 0 0 0 0 0 158387 0 0 0 0 0 0 44832 0 0 0 0 452013 0 0 0 0 0 1422645 0 0 0 5009192 0 0 11481005 0 +FFQ 15 0 0 3574 0 0 0 4943 0 0 0 0 0 0 0 0 162629 0 0 0 0 0 0 45939 0 0 0 0 455281 0 0 0 0 0 1429083 0 0 0 5018020 0 0 11456709 0 +FFQ 16 0 0 3789 0 0 0 5204 0 0 0 0 0 0 0 0 164703 0 0 0 0 0 0 47268 0 0 0 0 459688 0 0 0 0 0 1438944 0 0 0 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Use `grep ^LFQ | cut -f 2-` to extract this part. +# Columns correspond to qualities and rows to cycles. First column is the cycle number. +LFQ 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 11 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 12 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 13 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 14 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 15 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 16 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 17 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 18 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 19 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 21 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 22 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 23 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 24 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 25 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 26 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 27 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 28 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 29 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 30 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 31 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 32 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 33 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 34 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 35 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 36 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 37 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 38 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 39 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 40 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 41 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 42 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 43 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 44 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 45 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 46 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 47 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 48 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 49 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 50 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +LFQ 51 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 +# GC Content of first fragments. Use `grep ^GCF | cut -f 2-` to extract this part. +GCF 0.75 1080 +GCF 1.76 1554 +GCF 2.26 1567 +GCF 3.02 1566 +GCF 3.77 2850 +GCF 4.77 2881 +GCF 5.78 4731 +GCF 6.28 4791 +GCF 7.04 4792 +GCF 7.79 8136 +GCF 8.29 8231 +GCF 9.05 8233 +GCF 9.80 14137 +GCF 10.30 14252 +GCF 10.80 14293 +GCF 11.31 14294 +GCF 11.81 24969 +GCF 12.31 25354 +GCF 13.07 25452 +GCF 13.82 43286 +GCF 14.32 43288 +GCF 14.82 43868 +GCF 15.33 43887 +GCF 15.83 72345 +GCF 16.33 72346 +GCF 16.83 73323 +GCF 17.34 73346 +GCF 17.84 115892 +GCF 18.34 115893 +GCF 18.84 117007 +GCF 19.35 117404 +GCF 19.85 176022 +GCF 20.35 176024 +GCF 20.85 177820 +GCF 21.36 178297 +GCF 21.86 256493 +GCF 22.36 256500 +GCF 22.86 258736 +GCF 23.37 259378 +GCF 23.87 358005 +GCF 24.37 358006 +GCF 24.87 361025 +GCF 25.38 362008 +GCF 25.88 484259 +GCF 26.38 484258 +GCF 26.88 487623 +GCF 27.39 487628 +GCF 27.89 641238 +GCF 28.39 641467 +GCF 28.89 641483 +GCF 29.40 645895 +GCF 29.90 848565 +GCF 30.40 848762 +GCF 30.90 848764 +GCF 31.41 854323 +GCF 31.91 1093044 +GCF 32.66 1093138 +GCF 33.42 1096936 +GCF 33.92 1331028 +GCF 34.42 1331031 +GCF 34.92 1331203 +GCF 35.43 1335750 +GCF 35.93 1505123 +GCF 36.43 1505127 +GCF 36.93 1505175 +GCF 37.44 1508624 +GCF 37.94 1493366 +GCF 38.44 1493657 +GCF 38.94 1493818 +GCF 39.45 1494636 +GCF 39.95 1420236 +GCF 40.45 1420377 +GCF 40.95 1420370 +GCF 41.46 1419738 +GCF 41.96 1313182 +GCF 42.46 1313001 +GCF 42.96 1312999 +GCF 43.47 1313043 +GCF 43.97 1231538 +GCF 44.47 1231204 +GCF 44.97 1231192 +GCF 45.48 1231260 +GCF 45.98 1148968 +GCF 46.48 1148953 +GCF 46.98 1148367 +GCF 47.49 1148340 +GCF 47.99 1059806 +GCF 48.49 1059813 +GCF 49.25 1058887 +GCF 50.25 954205 +GCF 51.01 953262 +GCF 51.51 953251 +GCF 52.01 808649 +GCF 52.51 808641 +GCF 53.02 807799 +GCF 53.52 807784 +GCF 54.02 649395 +GCF 54.52 649184 +GCF 55.03 649178 +GCF 55.53 648304 +GCF 56.03 490867 +GCF 56.53 490638 +GCF 57.04 490632 +GCF 57.54 489794 +GCF 58.04 359200 +GCF 58.54 355526 +GCF 59.05 355524 +GCF 59.55 355031 +GCF 60.05 247759 +GCF 60.55 244574 +GCF 61.06 244459 +GCF 61.56 243954 +GCF 62.06 164265 +GCF 62.56 162114 +GCF 63.07 162022 +GCF 63.57 162018 +GCF 64.07 103863 +GCF 64.57 102491 +GCF 65.08 102446 +GCF 65.58 102445 +GCF 66.08 64175 +GCF 66.83 63383 +GCF 67.59 63356 +GCF 68.09 37977 +GCF 68.59 37240 +GCF 69.10 37235 +GCF 69.60 37220 +GCF 70.10 22861 +GCF 70.60 22555 +GCF 71.11 22552 +GCF 71.61 22533 +GCF 72.11 14370 +GCF 72.61 14369 +GCF 73.37 14229 +GCF 74.12 9740 +GCF 74.62 9736 +GCF 75.13 9636 +GCF 75.63 9635 +GCF 76.13 6719 +GCF 76.63 6701 +GCF 77.14 6630 +GCF 77.64 6632 +GCF 78.14 4609 +GCF 78.64 4605 +GCF 79.40 4595 +GCF 80.15 3154 +GCF 80.65 3156 +GCF 81.41 3128 +GCF 82.16 2097 +GCF 82.66 2096 +GCF 83.42 2082 +GCF 84.17 1523 +GCF 84.67 1522 +GCF 85.43 1519 +GCF 86.68 822 +GCF 87.69 821 +GCF 88.44 544 +GCF 89.20 543 +GCF 89.70 535 +GCF 90.70 303 +GCF 91.71 304 +GCF 92.71 169 +GCF 93.72 167 +GCF 94.97 74 +GCF 96.98 47 +GCF 98.99 19 +# GC Content of last fragments. Use `grep ^GCL | cut -f 2-` to extract this part. +# ACGT content per cycle. Use `grep ^GCC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%]; and N and O counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +GCC 1 29.99 19.73 19.50 30.79 0.22 0.00 +GCC 2 29.97 19.73 19.48 30.83 0.00 0.00 +GCC 3 29.53 20.19 19.82 30.46 0.00 0.00 +GCC 4 29.46 20.23 19.95 30.36 0.00 0.00 +GCC 5 29.50 20.16 19.89 30.46 0.00 0.00 +GCC 6 29.32 20.45 20.06 30.17 0.00 0.00 +GCC 7 29.42 20.32 19.92 30.34 0.00 0.00 +GCC 8 29.44 20.26 19.90 30.41 0.00 0.00 +GCC 9 29.45 20.23 19.91 30.41 0.00 0.00 +GCC 10 29.35 20.34 19.98 30.33 0.00 0.00 +GCC 11 29.39 20.25 19.92 30.43 0.00 0.00 +GCC 12 29.40 20.32 19.93 30.35 0.00 0.00 +GCC 13 29.45 20.28 19.86 30.42 0.00 0.00 +GCC 14 29.41 20.26 19.85 30.48 0.00 0.00 +GCC 15 29.40 20.31 19.91 30.38 0.00 0.00 +GCC 16 29.24 20.40 20.03 30.33 0.00 0.00 +GCC 17 29.29 20.29 20.02 30.39 0.00 0.00 +GCC 18 29.20 20.38 20.15 30.27 0.00 0.00 +GCC 19 29.21 20.39 20.14 30.25 0.00 0.00 +GCC 20 29.21 20.36 20.21 30.23 0.00 0.00 +GCC 21 29.18 20.39 20.26 30.17 0.00 0.00 +GCC 22 29.16 20.41 20.19 30.24 0.00 0.00 +GCC 23 29.12 20.41 20.23 30.24 0.00 0.00 +GCC 24 29.12 20.47 20.20 30.21 0.00 0.00 +GCC 25 29.13 20.47 20.20 30.20 0.00 0.00 +GCC 26 29.11 20.47 20.26 30.16 0.00 0.00 +GCC 27 29.07 20.49 20.26 30.19 0.00 0.00 +GCC 28 28.99 20.56 20.38 30.07 0.00 0.00 +GCC 29 29.09 20.48 20.30 30.13 0.00 0.00 +GCC 30 29.06 20.49 20.37 30.08 0.00 0.00 +GCC 31 29.00 20.58 20.36 30.06 0.00 0.00 +GCC 32 29.01 20.56 20.34 30.09 0.00 0.00 +GCC 33 29.00 20.59 20.31 30.10 0.00 0.00 +GCC 34 28.97 20.65 20.30 30.09 0.00 0.00 +GCC 35 29.00 20.59 20.26 30.14 0.00 0.00 +GCC 36 28.96 20.66 20.30 30.08 0.00 0.00 +GCC 37 28.98 20.73 20.26 30.03 0.00 0.00 +GCC 38 28.96 20.75 20.30 29.99 0.00 0.00 +GCC 39 28.98 20.73 20.34 29.94 0.00 0.00 +GCC 40 28.93 20.76 20.39 29.92 0.00 0.00 +GCC 41 28.97 20.69 20.35 29.99 0.00 0.00 +GCC 42 28.96 20.68 20.36 29.99 0.01 0.00 +GCC 43 28.93 20.73 20.36 29.98 0.00 0.00 +GCC 44 29.02 20.71 20.33 29.94 0.00 0.00 +GCC 45 29.04 20.69 20.30 29.98 0.00 0.00 +GCC 46 29.00 20.71 20.38 29.91 0.01 0.00 +GCC 47 29.01 20.70 20.39 29.89 0.00 0.00 +GCC 48 28.93 20.78 20.47 29.82 0.00 0.00 +GCC 49 28.54 21.12 20.84 29.50 0.02 0.00 +GCC 50 29.58 20.06 19.83 30.53 0.00 0.00 +# Insert sizes. Use `grep ^IS | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: insert size, pairs total, inward oriented pairs, outward oriented pairs, other pairs +# Read lengths. Use `grep ^RL | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: read length, count +RL 30 24 +RL 31 25 +RL 32 22 +RL 33 22 +RL 34 39 +RL 35 43 +RL 36 36 +RL 37 31 +RL 38 43 +RL 39 96 +RL 40 283 +RL 41 427 +RL 42 370 +RL 43 104 +RL 44 176 +RL 45 629 +RL 46 16825 +RL 47 88923 +RL 48 437342 +RL 50 18030718 +# Indel distribution. Use `grep ^ID | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: length, number of insertions, number of deletions +ID 1 55991 87210 +ID 2 11097 13144 +ID 3 1413 1466 +# Indels per cycle. Use `grep ^IC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle, number of insertions (fwd), .. (rev) , number of deletions (fwd), .. (rev) +IC 2 0 135 0 131 +IC 3 0 500 0 654 +IC 4 0 799 0 1454 +IC 5 0 1390 0 1639 +IC 6 0 1371 0 1820 +IC 7 0 1345 0 1970 +IC 8 0 1321 0 2059 +IC 9 0 1429 0 2103 +IC 10 0 1477 0 2217 +IC 11 0 1488 0 2270 +IC 12 0 1593 0 2376 +IC 13 0 1586 0 2410 +IC 14 0 1602 0 2512 +IC 15 0 1664 0 2466 +IC 16 0 1631 0 2573 +IC 17 0 1711 0 2657 +IC 18 0 1651 0 2522 +IC 19 0 1667 0 2561 +IC 20 0 1661 0 2595 +IC 21 0 1644 0 2607 +IC 22 0 1725 0 2630 +IC 23 0 1690 0 2566 +IC 24 0 1725 0 2682 +IC 25 0 1625 0 2561 +IC 26 0 1624 0 2554 +IC 27 0 1636 0 2528 +IC 28 0 1694 0 2587 +IC 29 0 1729 0 2622 +IC 30 0 1712 0 2609 +IC 31 0 1846 0 2834 +IC 32 0 1834 0 2772 +IC 33 0 1820 0 2755 +IC 34 0 1850 0 2757 +IC 35 0 1754 0 2768 +IC 36 0 1744 0 2569 +IC 37 0 1665 0 2504 +IC 38 0 1622 0 2483 +IC 39 0 1559 0 2523 +IC 40 0 1544 0 2495 +IC 41 0 1518 0 2378 +IC 42 0 1406 0 2210 +IC 43 0 1353 0 2026 +IC 44 0 1295 0 1795 +IC 45 0 1290 0 1168 +IC 46 0 779 0 587 +IC 47 0 529 0 202 +IC 48 0 192 0 59 +IC 49 0 76 0 0 +# Coverage distribution. Use `grep ^COV | cut -f 2-` to extract this part. +COV [1-1] 1 582941672 +COV [2-2] 2 97104308 +COV [3-3] 3 11593609 +COV [4-4] 4 1244538 +COV [5-5] 5 189629 +COV [6-6] 6 63129 +COV [7-7] 7 34669 +COV [8-8] 8 22305 +COV [9-9] 9 16271 +COV [10-10] 10 12620 +COV [11-11] 11 9896 +COV [12-12] 12 8348 +COV [13-13] 13 6759 +COV [14-14] 14 5217 +COV [15-15] 15 4028 +COV [16-16] 16 3370 +COV [17-17] 17 2988 +COV [18-18] 18 2649 +COV [19-19] 19 2532 +COV [20-20] 20 2332 +COV [21-21] 21 2037 +COV [22-22] 22 2291 +COV [23-23] 23 2356 +COV [24-24] 24 2209 +COV [25-25] 25 2242 +COV [26-26] 26 2173 +COV [27-27] 27 1819 +COV [28-28] 28 1955 +COV [29-29] 29 1860 +COV [30-30] 30 1861 +COV [31-31] 31 1704 +COV [32-32] 32 1602 +COV [33-33] 33 1596 +COV [34-34] 34 1526 +COV [35-35] 35 1392 +COV [36-36] 36 1437 +COV [37-37] 37 1401 +COV [38-38] 38 1429 +COV [39-39] 39 1317 +COV [40-40] 40 1334 +COV [41-41] 41 1242 +COV [42-42] 42 1199 +COV [43-43] 43 1198 +COV [44-44] 44 1031 +COV [45-45] 45 1130 +COV [46-46] 46 1146 +COV [47-47] 47 1000 +COV [48-48] 48 1025 +COV [49-49] 49 1051 +COV [50-50] 50 1080 +COV [51-51] 51 1077 +COV [52-52] 52 1071 +COV [53-53] 53 1005 +COV [54-54] 54 965 +COV [55-55] 55 931 +COV [56-56] 56 1060 +COV [57-57] 57 1035 +COV [58-58] 58 965 +COV [59-59] 59 938 +COV [60-60] 60 1023 +COV [61-61] 61 1011 +COV [62-62] 62 995 +COV [63-63] 63 966 +COV [64-64] 64 881 +COV [65-65] 65 818 +COV [66-66] 66 810 +COV [67-67] 67 772 +COV [68-68] 68 780 +COV [69-69] 69 717 +COV [70-70] 70 566 +COV [71-71] 71 587 +COV [72-72] 72 557 +COV [73-73] 73 515 +COV [74-74] 74 530 +COV [75-75] 75 531 +COV [76-76] 76 435 +COV [77-77] 77 418 +COV [78-78] 78 443 +COV [79-79] 79 433 +COV [80-80] 80 361 +COV [81-81] 81 358 +COV [82-82] 82 351 +COV [83-83] 83 339 +COV [84-84] 84 274 +COV [85-85] 85 303 +COV [86-86] 86 243 +COV [87-87] 87 299 +COV [88-88] 88 258 +COV [89-89] 89 275 +COV [90-90] 90 235 +COV [91-91] 91 229 +COV [92-92] 92 208 +COV [93-93] 93 234 +COV [94-94] 94 205 +COV [95-95] 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It is fully parallelized and can run with as low as just a few kilobytes of memory. + + PEAR evaluates all possible paired-end read overlaps and without requiring the target fragment size as input. In addition, it implements a statistical test for minimizing false-positive results. Together with a highly optimized implementation, it can merge millions of paired end reads within a couple of minutes on a standard desktop computer. +keywords: [ "pair-end", "read", "merge" ] +links: + homepage: https://cme.h-its.org/exelixis/web/software/pear + repository: https://github.com/tseemann/PEAR + documentation: https://cme.h-its.org/exelixis/web/software/pear/doc.html +references: + doi: 10.1093/bioinformatics/btt593 +license: "CC-BY-NC-SA-3.0" +requirements: + commands: [ pear , gzip ] +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --forward_fastq + alternatives: -f + type: file + description: Forward paired-end FASTQ file + required: true + example: "forward.fastq" + - name: --reverse_fastq + alternatives: -r + type: file + description: Reverse paired-end FASTQ file + required: true + example: "reverse.fastq" + - name: Outputs + arguments: + - name: --assembled + type: file + description: The output file containing assembled reads. Can be compressed with gzip. + required: true + direction: output + - name: --unassembled_forward + type: file + description: The output file containing forward reads that could not be assembled. Can be compressed with gzip. + required: true + direction: output + - name: --unassembled_reverse + type: file + description: The output file containing reverse reads that could not be assembled. Can be compressed with gzip. + required: true + direction: output + - name: --discarded + type: file + description: The output file containing reads that were discarded due to too low quality or too many uncalled bases. Can be compressed with gzip. + required: true + direction: output + - name: Arguments + arguments: + - name: --p_value + alternatives: -p + type: double + description: | + Specify a p-value for the statistical test. If the computed p-value of a possible assembly exceeds the specified p-value then paired-end read will not be assembled. Valid options are: 0.0001, 0.001, 0.01, 0.05 and 1.0. Setting 1.0 disables the test. + example: 0.01 + required: false + - name: --min_overlap + alternatives: -v + type: integer + description: | + Specify the minimum overlap size. The minimum overlap may be set to 1 when the statistical test is used. However, further restricting the minimum overlap size to a proper value may reduce false-positive assembles. + required: false + example: 10 + - name: --max_assembly_length + alternatives: -m + type: integer + description: | + Specify the maximum possible length of the assembled sequences. Setting this value to 0 disables the restriction and assembled sequences may be arbitrary long. + required: false + example: 0 + - name: --min_assembly_length + alternatives: -n + type: integer + description: | + Specify the minimum possible length of the assembled sequences. Setting this value to 0 disables the restriction and assembled sequences may be arbitrary short. + required: false + example: 0 + - name: --min_trim_length + alternatives: -t + type: integer + description: | + Specify the minimum length of reads after trimming the low quality part (see option -q) + required: false + example: 1 + - name: --quality_threshold + alternatives: -q + type: integer + description: | + Specify the quality threshold for trimming the low quality part of a read. If the quality scores of two consecutive bases are strictly less than the specified threshold, the rest of the read will be trimmed. + required: false + example: 0 + - name: --max_uncalled_base + alternatives: -u + type: double + description: | + Specify the maximal proportion of uncalled bases in a read. Setting this value to 0 will cause PEAR to discard all reads containing uncalled bases. The other extreme setting is 1 which causes PEAR to process all reads independent on the number of uncalled bases. + example: 1.0 + required: false + - name: --test_method + alternatives: -g + type: integer + description: | + Specify the type of statistical test. Two options are available. 1: Given the minimum allowed overlap, test using the highest OES. Note that due to its discrete nature, this test usually yields a lower p-value for the assembled read than the cut- off (specified by -p). For example, setting the cut-off to 0.05 using this test, the assembled reads might have an actual p-value of 0.02. + 2. Use the acceptance probability (m.a.p). This test methods computes the same probability as test method 1. However, it assumes that the minimal overlap is the observed overlap with the highest OES, instead of the one specified by -v. Therefore, this is not a valid statistical test and the 'p-value' is in fact the maximal probability for accepting the assembly. Nevertheless, we observed in practice that for the case the actual overlap sizes are relatively small, test 2 can correctly assemble more reads with only slightly higher false-positive rate. + required: false + example: 1 + - name: --emperical_freqs + alternatives: -e + type: boolean_true + description: | + Disable empirical base frequencies. + - name: --score_method + alternatives: -s + type: integer + description: | + Specify the scoring method. 1. OES with +1 for match and -1 for mismatch. 2: Assembly score (AS). Use +1 for match and -1 for mismatch multiplied by base quality scores. 3: Ignore quality scores and use +1 for a match and -1 for a mismatch. + required: false + example: 2 + - name: --phred_base + alternatives: -b + type: integer + description: | + Base PHRED quality score. + required: false + example: 33 + - name: --cap + alternatives: -c + type: integer + description: | + Specify the upper bound for the resulting quality score. If set to zero, capping is disabled. + required: false + example: 40 + - name: --nbase + alternatives: -z + type: boolean_true + description: | + When merging a base-pair that consists of two non-equal bases out of which none is degenerate, set the merged base to N and use the highest quality score of the two bases +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/pear:0.9.6--h9d449c0_10 + setup: + - type: docker + run: | + version=$(pear -h | grep 'PEAR v' | sed 's/PEAR v//' | sed 's/ .*//') && \ + echo "pear: $version" > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/pear/help.txt b/src/pear/help.txt new file mode 100644 index 00000000..d8e42285 --- /dev/null +++ b/src/pear/help.txt @@ -0,0 +1,91 @@ +```bash +pear -h +``` + + ____ _____ _ ____ +| _ \| ____| / \ | _ \ +| |_) | _| / _ \ | |_) | +| __/| |___ / ___ \| _ < +|_| |_____/_/ \_\_| \_\ +PEAR v0.9.6 [January 15, 2015] - [+bzlib +zlib] + +Citation - PEAR: a fast and accurate Illumina Paired-End reAd mergeR +Zhang et al (2014) Bioinformatics 30(5): 614-620 | doi:10.1093/bioinformatics/btt593 + +License: Creative Commons Licence +Bug-reports and requests to: Tomas.Flouri@h-its.org and Jiajie.Zhang@h-its.org + + +Usage: pear +Standard (mandatory): + -f, --forward-fastq Forward paired-end FASTQ file. + -r, --reverse-fastq Reverse paired-end FASTQ file. + -o, --output Output filename. +Optional: + -p, --p-value Specify a p-value for the statistical test. If the computed + p-value of a possible assembly exceeds the specified p-value + then paired-end read will not be assembled. Valid options + are: 0.0001, 0.001, 0.01, 0.05 and 1.0. Setting 1.0 disables + the test. (default: 0.01) + -v, --min-overlap Specify the minimum overlap size. The minimum overlap may be + set to 1 when the statistical test is used. However, further + restricting the minimum overlap size to a proper value may + reduce false-positive assembles. (default: 10) + -m, --max-assembly-length Specify the maximum possible length of the assembled + sequences. Setting this value to 0 disables the restriction + and assembled sequences may be arbitrary long. (default: 0) + -n, --min-assembly-length Specify the minimum possible length of the assembled + sequences. Setting this value to 0 disables the restriction + and assembled sequences may be arbitrary short. (default: + 50) + -t, --min-trim-length Specify the minimum length of reads after trimming the low + quality part (see option -q). (default: 1) + -q, --quality-threshold Specify the quality score threshold for trimming the low + quality part of a read. If the quality scores of two + consecutive bases are strictly less than the specified + threshold, the rest of the read will be trimmed. (default: + 0) + -u, --max-uncalled-base Specify the maximal proportion of uncalled bases in a read. + Setting this value to 0 will cause PEAR to discard all reads + containing uncalled bases. The other extreme setting is 1 + which causes PEAR to process all reads independent on the + number of uncalled bases. (default: 1) + -g, --test-method Specify the type of statistical test. Two options are + available. (default: 1) + 1: Given the minimum allowed overlap, test using the highest + OES. Note that due to its discrete nature, this test usually + yields a lower p-value for the assembled read than the cut- + off (specified by -p). For example, setting the cut-off to + 0.05 using this test, the assembled reads might have an + actual p-value of 0.02. + + 2. Use the acceptance probability (m.a.p). This test methods + computes the same probability as test method 1. However, it + assumes that the minimal overlap is the observed overlap + with the highest OES, instead of the one specified by -v. + Therefore, this is not a valid statistical test and the + 'p-value' is in fact the maximal probability for accepting + the assembly. Nevertheless, we observed in practice that for + the case the actual overlap sizes are relatively small, test + 2 can correctly assemble more reads with only slightly + higher false-positive rate. + -e, --empirical-freqs Disable empirical base frequencies. (default: use empirical + base frequencies) + -s, --score-method Specify the scoring method. (default: 2) + 1. OES with +1 for match and -1 for mismatch. + 2: Assembly score (AS). Use +1 for match and -1 for mismatch + multiplied by base quality scores. + 3: Ignore quality scores and use +1 for a match and -1 for a + mismatch. + -b, --phred-base Base PHRED quality score. (default: 33) + -y, --memory Specify the amount of memory to be used. The number may be + followed by one of the letters K, M, or G denoting + Kilobytes, Megabytes and Gigabytes, respectively. Bytes are + assumed in case no letter is specified. + -c, --cap Specify the upper bound for the resulting quality score. If + set to zero, capping is disabled. (default: 40) + -j, --threads Number of threads to use + -z, --nbase When merging a base-pair that consists of two non-equal + bases out of which none is degenerate, set the merged base + to N and use the highest quality score of the two bases + -h, --help This help screen. \ No newline at end of file diff --git a/src/pear/script.sh b/src/pear/script.sh new file mode 100644 index 00000000..9eff147b --- /dev/null +++ b/src/pear/script.sh @@ -0,0 +1,65 @@ +#!/bin/bash + +set -eo pipefail + +## VIASH START +## VIASH END + +[[ "$par_emperical_freqs" == "false" ]] && unset par_emperical_freqs +[[ "$par_nbase" == "false" ]] && unset par_nbase + +if [[ "${par_forward_fastq##*.}" == "gz" ]]; then + gunzip $par_forward_fastq + par_forward_fastq=${par_forward_fastq%.*} +fi +if [[ "${par_reverse_fastq##*.}" == "gz" ]]; then + gunzip $par_reverse_fastq + par_reverse_fastq=${par_reverse_fastq%.*} +fi + +output_dir=$(mktemp -d -p "$meta_temp_dir" "pear.XXXXXX") + +pear \ + -f "$par_forward_fastq" \ + -r "$par_reverse_fastq" \ + -o "$output_dir" \ + ${par_p_value:+-p "${par_p_value}"} \ + ${par_min_overlap:+-v "${par_min_overlap}"} \ + ${par_max_assembly_length:+-m "${par_max_assembly_length}"} \ + ${par_min_assembly_length:+-n "${par_min_assembly_length}"} \ + ${par_min_trim_length:+-t "${par_min_trim_length}"} \ + ${par_quality_threshold:+-q "${par_quality_threshold}"} \ + ${par_max_uncalled_base:+-u "${par_max_uncalled_base}"} \ + ${par_test_method:+-g "${par_test_method}"} \ + ${par_score_method:+-s "${par_score_method}"} \ + ${par_phred_base:+-b "${par_phred_base}"} \ + ${meta_memory_mb:+--memory "${meta_memory_mb}M"} \ + ${par_cap:+-c "${par_cap}"} \ + ${meta_cpus:+-j "${meta_cpus}"} \ + ${par_emperical_freqs:+-e} \ + ${par_nbase:+-z} + + +if [[ "${par_assembled##*.}" == "gz" ]]; then + gzip -9 -c ${output_dir}.assembled.fastq > ${par_assembled} +else + mv ${output_dir}.assembled.fastq ${par_assembled} +fi + +if [[ "${par_unassembled_forward##*.}" == "gz" ]]; then + gzip -9 -c ${output_dir}.unassembled.forward.fastq > ${par_unassembled_forward} +else + mv ${output_dir}.unassembled.forward.fastq ${par_unassembled_forward} +fi + +if [[ "${par_unassembled_reverse##*.}" == "gz" ]]; then + gzip -9 -c ${output_dir}.unassembled.reverse.fastq > ${par_unassembled_reverse} +else + mv ${output_dir}.unassembled.reverse.fastq ${par_unassembled_reverse} +fi + +if [[ "${par_discarded##*.}" == "gz" ]]; then + gzip -9 -c ${output_dir}.discarded.fastq > ${par_discarded} +else + mv ${output_dir}.discarded.fastq ${par_discarded} +fi diff --git a/src/pear/test.sh b/src/pear/test.sh new file mode 100644 index 00000000..67870bf4 --- /dev/null +++ b/src/pear/test.sh @@ -0,0 +1,23 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +dir_in="${meta_resources_dir%/}/test_data" + +echo "> Run PEAR" +"$meta_executable" \ + --forward_fastq "$dir_in/a.1.fastq" \ + --reverse_fastq "$dir_in/a.2.fastq" \ + --assembled "test.assembled.fastq.gz" \ + --unassembled_forward "test.unassembled.forward.fastq.gz" \ + --unassembled_reverse "test.unassembled.reverse.fastq.gz" \ + --discarded "test.discarded.fastq.gz" \ + --p_value 0.01 + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "test.assembled.fastq.gz" ] && echo "Output file test.assembled.fastq.gz does not exist" && exit 1 +[ ! -f "test.unassembled.forward.fastq.gz" ] && echo "Output file test.unassembled.forward.fastq.gz does not exist" && exit 1 +[ ! -f "test.unassembled.reverse.fastq.gz" ] && echo "Output file test.unassembled.reverse.fastq.gz does not exist" && exit 1 +[ ! -f "test.discarded.fastq.gz" ] && echo "Output file ftest.discarded.fastq.gz does not exist" && exit 1 + +echo "> Test successful" \ No newline at end of file diff --git a/src/pear/test_data/a.1.fastq b/src/pear/test_data/a.1.fastq new file mode 100644 index 00000000..42735560 --- /dev/null +++ b/src/pear/test_data/a.1.fastq @@ -0,0 +1,4 @@ +@1 +ACGGCAT ++ +!!!!!!! diff --git a/src/pear/test_data/a.2.fastq b/src/pear/test_data/a.2.fastq new file mode 100644 index 00000000..42735560 --- /dev/null +++ b/src/pear/test_data/a.2.fastq @@ -0,0 +1,4 @@ +@1 +ACGGCAT ++ +!!!!!!! diff --git a/src/pear/test_data/script.sh b/src/pear/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..016910a8 --- /dev/null +++ b/src/pear/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,10 @@ +# pear test data + +# Test data was obtained from https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers/tree/master/bio/fastp/test + +if [ ! -d /tmp/snakemake-wrappers ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers /tmp/snakemake-wrappers +fi + +cp -r /tmp/snakemake-wrappers/bio/fastp/test/reads/pe/* src/pear/test_data + diff --git a/src/qualimap/qualimap_rnaseq/config.vsh.yaml b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..a7cc9278 --- /dev/null +++ b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,111 @@ +name: "qualimap" +info: + migration_info: + git_repo: https://github.com/nf-core/rnaseq.git + paths: [modules/nf-core/qualimap/rnaseq/main.nf] + last_sha: 54721c6946daf6d602d7069dc127deef9cbe6b33 +description: | + Qualimap RNA-seq QC RNA-seq QC reports quality control metrics and bias estimations + which are specific for whole transcriptome sequencing, including reads genomic + origin, junction analysis, transcript coverage and 5’-3’ bias computation. + +argument_groups: +- name: "Input" + arguments: + - name: "--input" + type: file + required: true + example: alignment.bam + description: Path to the sequence alignment file in BAM format, produced by a splicing-aware aligner. + - name: "--gtf" + type: file + required: true + example: annotations.gtf + description: Path to genomic annotations in Ensembl GTF format. + +- name: "Output" + arguments: + - name: "--output" + direction: output + type: file + required: true + example: rnaseq_qc_results.txt + description: Text file containing the RNAseq QC results. + - name: "--output_counts" + type: file + required: false + direction: output + description: Output file for computed counts. + - name: "--output_report" + type: file + direction: output + required: false + example: report.html + description: Report output file. Supported formats are PDF or HTML. + +- name: "Optional" + arguments: + - name: "--pr_bases" + type: integer + required: false + default: 100 + min: 1 + description: Number of upstream/downstream nucleotide bases to compute 5'-3' bias (default = 100). + - name: "--tr_bias" + type: integer + required: false + default: 1000 + min: 1 + description: Number of top highly expressed transcripts to compute 5'-3' bias (default = 1000). + - name: "--algorithm" + type: string + required: false + choices: ["uniquely-mapped-reads", "proportional"] + default: uniquely-mapped-reads + description: Counting algorithm (uniquely-mapped-reads (default) or proportional). + - name: "--sequencing_protocol" + type: string + required: false + choices: ["non-strand-specific", "strand-specific-reverse", "strand-specific-forward"] + default: non-strand-specific + description: Sequencing library protocol (strand-specific-forward, strand-specific-reverse or non-strand-specific (default)). + - name: "--paired" + type: boolean_true + description: Setting this flag for paired-end experiments will result in counting fragments instead of reads. + - name: "--sorted" + type: boolean_true + description: Setting this flag indicates that the input file is already sorted by name. If flag is not set, additional sorting by name will be performed. Only requiredfor paired-end analysis. + - name: "--java_memory_size" + type: string + required: false + default: 4G + description: maximum Java heap memory size, default = 4G. + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - path: test_data/ + +engines: +- type: docker + image: ubuntu:22.04 + setup: + - type: apt + packages: [ r-base, unzip, wget, openjdk-8-jdk, libxml2-dev, libcurl4-openssl-dev ] + - type: docker + run: | + wget https://bitbucket.org/kokonech/qualimap/downloads/qualimap_v2.3.zip && \ + unzip qualimap_v2.3.zip && \ + cp -a qualimap_v2.3/. usr/bin && \ + unset DISPLAY && \ + mkdir -p tmp && \ + export _JAVA_OPTIONS=-Djava.io.tmpdir=./tmp + - type: r + bioc: [ NOISeqr ] + cran: [ optparse ] +runners: +- type: executable +- type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/qualimap/qualimap_rnaseq/help.txt b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/help.txt new file mode 100644 index 00000000..c6493ed9 --- /dev/null +++ b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/help.txt @@ -0,0 +1,52 @@ +QualiMap v.2.3 +Built on 2023-05-19 16:57 + +usage: qualimap [options] + +To launch GUI leave empty. + +Available tools: + + bamqc Evaluate NGS mapping to a reference genome + rnaseq Evaluate RNA-seq alignment data + counts Counts data analysis (further RNA-seq data evaluation) + multi-bamqc Compare QC reports from multiple NGS mappings + clustering Cluster epigenomic signals + comp-counts Compute feature counts + +Special arguments: + + --java-mem-size Use this argument to set Java memory heap size. Example: + qualimap bamqc -bam very_large_alignment.bam --java-mem-size=4G + +usage: qualimap rnaseq [-a ] -bam -gtf [-npb ] [-ntb + ] [-oc ] [-outdir ] [-outfile ] [-outformat ] + [-p ] [-pe] [-s] + -a,--algorithm Counting algorithm: + uniquely-mapped-reads(default) or + proportional. + -bam Input mapping file in BAM format. + -gtf Annotations file in Ensembl GTF format. + -npb,--num-pr-bases Number of upstream/downstream nucleotide bases + to compute 5'-3' bias (default is 100). + -ntb,--num-tr-bias Number of top highly expressed transcripts to + compute 5'-3' bias (default is 1000). + -oc Output file for computed counts. If only name + of the file is provided, then the file will be + saved in the output folder. + -outdir Output folder for HTML report and raw data. + -outfile Output file for PDF report (default value is + report.pdf). + -outformat Format of the output report (PDF, HTML or both + PDF:HTML, default is HTML). + -p,--sequencing-protocol Sequencing library protocol: + strand-specific-forward, + strand-specific-reverse or non-strand-specific + (default) + -pe,--paired Setting this flag for paired-end experiments + will result in counting fragments instead of + reads + -s,--sorted This flag indicates that the input file is + already sorted by name. If not set, additional + sorting by name will be performed. Only + required for paired-end analysis. \ No newline at end of file diff --git a/src/qualimap/qualimap_rnaseq/script.sh b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/script.sh new file mode 100644 index 00000000..3481e129 --- /dev/null +++ b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/script.sh @@ -0,0 +1,50 @@ +#!/bin/bash + +set -eo pipefail + +tmp_dir=$(mktemp -d -p "$meta_temp_dir" qualimap_XXXXXXXXX) + +# Handle output parameters +if [ -n "$par_output_report" ]; then + outfile=$(basename "$par_output_report") + report_extension="${outfile##*.}" +fi + +if [ -n "$par_output_counts" ]; then + counts=$(basename "$par_output_counts") +fi + +# disable flags +[[ "$par_paired" == "false" ]] && unset par_paired +[[ "$par_sorted" == "false" ]] && unset par_sorted + +# Run qualimap +qualimap rnaseq \ + --java-mem-size=$par_java_memory_size \ + --algorithm $par_algorithm \ + --num-pr-bases $par_pr_bases \ + --num-tr-bias $par_tr_bias \ + --sequencing-protocol $par_sequencing_protocol \ + -bam $par_input \ + -gtf $par_gtf \ + -outdir "$tmp_dir" \ + ${par_output_report:+-outformat $report_extension} \ + ${par_paired:+--paired} \ + ${par_sorted:+--sorted} \ + ${par_output_report:+-outfile "$outfile"} \ + ${par_output_counts:+-oc "$counts"} + +# Move output files +mv "$tmp_dir/rnaseq_qc_results.txt" "$par_output" + +if [ -n "$par_output_report" ] && [ $report_extension = "html" ]; then + mv "$tmp_dir/qualimapReport.html" "$par_output_report" +fi + +if [ -n "$par_output_report" ] && [ $report_extension = "pdf" ]; then + mv "$tmp_dir/$outfile" "$par_output_report" +fi + +if [ -n "$par_output_counts" ]; then + mv "$tmp_dir/$counts" "$par_output_counts" +fi diff --git a/src/qualimap/qualimap_rnaseq/test.sh b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/test.sh new file mode 100644 index 00000000..2a946ed3 --- /dev/null +++ b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/test.sh @@ -0,0 +1,74 @@ +set -e + +test_dir="$meta_resources_dir/test_data" + +mkdir "run_qualimap_rnaseq_html" +cd "run_qualimap_rnaseq_html" + +echo "> Running qualimap with html output report" + +"$meta_executable" \ + --input $test_dir/a.bam \ + --gtf $test_dir/annotation.gtf \ + --output_report report.html \ + --output_counts counts.txt \ + --output output.txt + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "report.html" ] && echo "report.html does not exist" && exit 1 +[ ! -f "counts.txt" ] && echo "counts.txt does not exist" && exit 1 +[ ! -f "output.txt" ] && echo "output.txt does not exist" && exit 1 + +echo ">> Checking if output is empty" +[ ! -s "report.html" ] && echo "report.html is empty" && exit 1 +[ ! -s "counts.txt" ] && echo "counts.txt is empty" && exit 1 +[ ! -s "output.txt" ] && echo "output.txt is empty" && exit 1 + +cd .. +rm -r run_qualimap_rnaseq_html + +mkdir "run_qualimap_rnaseq_pdf" +cd "run_qualimap_rnaseq_pdf" + +echo "> Running qualimap with pdf output report" + +"$meta_executable" \ + --input $test_dir/a.bam \ + --gtf $test_dir/annotation.gtf \ + --output_report report.pdf \ + --output_counts counts.txt \ + --output output.txt + +echo ">> Checking output" +[ ! -f "report.pdf" ] && echo "report.pdf does not exist" && exit 1 +[ ! -f "counts.txt" ] && echo "counts.txt does not exist" && exit 1 +[ ! -f "output.txt" ] && echo "output.txt does not exist" && exit 1 + +echo ">> Checking if output is empty" +[ ! -s "report.pdf" ] && echo "report.pdf is empty" && exit 1 +[ ! -s "counts.txt" ] && echo "counts.txt is empty" && exit 1 +[ ! -s "output.txt" ] && echo "output.txt is empty" && exit 1 + +cd .. +rm -r run_qualimap_rnaseq_pdf + +mkdir "run_qualimap_rnaseq" +cd "run_qualimap_rnaseq" + +echo "> Running qualimap without report and counts output" + +"$meta_executable" \ + --input $test_dir/a.bam \ + --gtf $test_dir/annotation.gtf \ + --output output.txt + +echo ">> Checking output" +[ -f "report.pdf" ] && echo "report.pdf exists" && exit 1 +[ -f "counts.txt" ] && echo "counts.txt exists" && exit 1 +[ ! -f "output.txt" ] && echo "output.txt does not exist" && exit 1 + +echo ">> Checking if output is empty" +[ ! -s "output.txt" ] && echo "output.txt is empty" && exit 1 + +cd .. +rm -r run_qualimap_rnaseq \ No newline at end of file diff --git a/src/qualimap/qualimap_rnaseq/test_data/a.bam b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/test_data/a.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..c8ea1065e89ca06cf12711850c36f85fba0d31b3 GIT binary patch literal 2447 zcmV;A32^owiwFb&00000{{{d;LjnL`0CRHmWi(=7U~uqo;SBS$GSoBU4EDE5&d)DO z$;?YEN#$|~4&)5>vr5h=GBV)w@v|~B0Rlrab1p`pE;b+r%P_EqUuOmY%wr|6OaK4? zABzYC000000RIL6LPG)o5edy%O^9Si9e+KOiG~T1sx7fvv$$2fVM}u9e*H1sjo?;I z5lhI2uzOI^AnR^U8Z~?JpzbRQErbQl3SK-2f`LWULr$WbKo(sQKk$-+AUU{t5Q(5D zM$GuDneLvqJ^fzq?2aM-nVz0kJw5dA_y79+|8Jv}?b(+vZe*u-pQ7v8ce9K8N7*A! zZ)60o>rQ7p=uNssf8ri39&`5WM?N|!Cf(k!nDjfN-lQ1!yQAzocnihjM;lqDESFJA zg9vtGth8%dO8P7oi?Y}Hu%w&%^tE1R2pm+h@(w*2%7x6^VT z+G**tJ2#$qe5due{aCm2)Xun@y_1ba&wcj( zOzobhtx6cYh_mOi`Y?b^y2D~Po)o=e)ZK$0ERW6yTUu_l6Utgfxm6}arFE&5V%7*9 zbPyInz;dQ*{NHZ4T59c@-}kKo|K<|-FV5i~I6qPH%x=B&m%>*7&p4yLv{o{1IU=4( zVYFq&E6Y4Z*juYZutr%bbZz(_tF3_lmorZS{#Q;^z5jOeWajIOK+zox@ngF`niPor z@gDr>Y1EXt2pZsU>zNH!TkZf_BmILGA{wHFBPP!g2I|z-QEb7lE7GDpe_8=QLEVRc z;Qd6&m+Di0DSRc6)mjPQS0P&X*{BdCB{GO$ohhx0gbEg%$cg1X@>7RD?lK7XXf^O> zmG9{vTxgx%{r$UI*{8A#)3a~=@IvcKLkk#o`;+dVKO9U(-F_!K1N1^ljsPIU86K^& z(J`caz)>7-A=Wu^( zM!P7rpLa(kpt~-AQk-U5uv5Z+tYuiyU<>7tZE6SGn{w2&z0)GT10s&OP|y z!YFAU+B$42BK{5&qWWh*zXtScHOYT|4*%*LexhVtU;3BAx2!biexAyaQe^B}pB}etX&$U%a z)iB}>dZ1+524bUOff=p6F+v&R1z6x#FqV^t4t>;>b{Dx(1Al$0{@?lX$u+h6(z~nb z{}aDHxpv{f2K8T{=Z%YgZ_?`zI@{T0RKJ(6W!Z1>UcnFtP8jAB6^=>nyrRS?dYn2N4%Ox}<$on)LL_wnF+kbD+{tGm`x|U^^HnZ$=>siKt z64hNY29*m96a-2GV@`pTkOIXh2Bi=*N4$V6zO)n`ztzw%*Fhf`frj_Jr&-GozeeY97$|Ugt-vz>mg7S}wsu&HW z0xJQo3Aa(93kEC;+>wTW<{H@a>I(P?>OTAf9hfNjX~Ph(41P(dvWiQVdY?|SZxVlm zDHk*&%*sfJ$HRdgC<7|U<*hrmdzc4S3<0OETwgoAyK}Od`>){a;fCBVa8PUyN23WS z*dKwk4$el*eoo^X1x^Paf+dj#fxK6O3X5d`bfQFrPz(x7o!@}7y<9Ua6Uh}@f&P^_ z`h(O@jQp`7^_QUMvJ~8urA5h8GBrBQOCL;*vhQi>koXRLfU3R9&xo~edi$%QpN&BF zneMvUeaCyNng1-#u4YXG;CRyQY(oN)l8m4_>&H@Y}0aUw2{^_&=M@fW6+i;r2ZDpPdtMko$?0&+InMfQJcaKq?g1 z%3&NpKt!CC9>L+&vc`8jLx0s42$=bwOy$p?yDzMt-ffHfD*nGUd13w02kQMl7;I0v zqak)+gYI~k{R40LdQw1FAO!Jja-}i!M2U)zmWN7@K}dRyOPc3M0&Ih$mY4!Vo|nj# zcy|)us9aT;xB@0Nz(mnI*V!qGozc$VgGDcEwGIeKq@=yTY%7w8`td*OV`71n8~9h3 z@5?garz`PWqA?)l-eO!}`R7s3skIwiqRek{n0!z{&4Fi664dN zS{WYs)6MlSY}9Ll{&rf9bbDhoMXX2nhhuaF8Zjg}NwEOI04#Fu0(aKoR)Go<(lANn z5U?K(m=k1eWw`t7*gSk$;ouib=7Iz@!C$Y`g+$3$U$55$i}3%3dEnAxS@ua}g?3I` ztj2OnrL{ppD4-qUD9uBGgCCQpDFG{Tj7l~)<~aL9yY{$-hFKK6|6jiW4e_=pxPi03 zHtYzBAtdp5G#XBNy}_W^-w~w!uTh?9$qX?RpmAqpc4`k!6GxOX8IKEoa~D~m3~$Wg zA4EZ-SVif#U^c0D*-tP@+*Lq=Xrul{vE_Z3xoRTri0x$+5w2PMaF|uTG&p zaN>7>{|%9p;knA$xdwI6>!oT~bnsGl8_n^|MjDDupcsTu39Q8J0Mx)d;0__a@_??1 zBNebIP-g4@U=@(xn}Qtmvo{tnu2uA3I{SWu09eGxP&5)w=dcHr+T&)Y(jq7ubZ+uM zvHy_HVC+>A&rx6=^wDA*3diW?23yX+{{U)jjNb?z001A02m}BC000301^_}s0stET N0{{R300000002N$thE3D literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/qualimap/qualimap_rnaseq/test_data/annotation.gtf b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/test_data/annotation.gtf new file mode 100644 index 00000000..976de753 --- /dev/null +++ b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/test_data/annotation.gtf @@ -0,0 +1,10 @@ +chr20 HAVANA transcript 347024 354868 . + . gene_id "ENSG00000125841.12"; transcript_id "ENST00000382291.7"; gene_type "protein_coding"; gene_name "NRSN2"; transcript_type "protein_coding"; transcript_name "NRSN2-202"; level 2; protein_id "ENSP00000371728.3"; transcript_support_level "2"; tag "basic"; tag "appris_principal_1"; tag "CCDS"; ccdsid "CCDS12996.1"; havana_gene "OTTHUMG00000031628.5"; havana_transcript "OTTHUMT00000077446.1"; +chr20 HAVANA exon 347024 347142 . + . gene_id "ENSG00000125841.12"; transcript_id "ENST00000382291.7"; gene_type "protein_coding"; gene_name "NRSN2"; transcript_type "protein_coding"; transcript_name "NRSN2-202"; exon_number 1; exon_id "ENSE00001831391.1"; level 2; protein_id "ENSP00000371728.3"; transcript_support_level "2"; tag "basic"; tag "appris_principal_1"; tag "CCDS"; ccdsid "CCDS12996.1"; havana_gene "OTTHUMG00000031628.5"; havana_transcript "OTTHUMT00000077446.1"; +chr20 HAVANA exon 349249 349363 . + . gene_id "ENSG00000125841.12"; transcript_id "ENST00000382291.7"; gene_type "protein_coding"; gene_name "NRSN2"; transcript_type "protein_coding"; transcript_name "NRSN2-202"; exon_number 2; exon_id "ENSE00001491647.1"; level 2; protein_id "ENSP00000371728.3"; transcript_support_level "2"; tag "basic"; tag "appris_principal_1"; tag "CCDS"; ccdsid "CCDS12996.1"; havana_gene "OTTHUMG00000031628.5"; havana_transcript "OTTHUMT00000077446.1"; +chr20 HAVANA exon 349638 349832 . + . gene_id "ENSG00000125841.12"; transcript_id "ENST00000382291.7"; gene_type "protein_coding"; gene_name "NRSN2"; transcript_type "protein_coding"; transcript_name "NRSN2-202"; exon_number 3; exon_id "ENSE00003710328.1"; level 2; protein_id "ENSP00000371728.3"; transcript_support_level "2"; tag "basic"; tag "appris_principal_1"; tag "CCDS"; ccdsid "CCDS12996.1"; havana_gene "OTTHUMG00000031628.5"; havana_transcript "OTTHUMT00000077446.1"; +chr20 HAVANA CDS 349644 349832 . + 0 gene_id "ENSG00000125841.12"; transcript_id "ENST00000382291.7"; gene_type "protein_coding"; gene_name "NRSN2"; transcript_type "protein_coding"; transcript_name "NRSN2-202"; exon_number 3; exon_id "ENSE00003710328.1"; level 2; protein_id "ENSP00000371728.3"; transcript_support_level "2"; tag "basic"; tag "appris_principal_1"; tag "CCDS"; ccdsid "CCDS12996.1"; havana_gene "OTTHUMG00000031628.5"; havana_transcript "OTTHUMT00000077446.1"; +chr20 HAVANA start_codon 349644 349646 . + 0 gene_id "ENSG00000125841.12"; transcript_id "ENST00000382291.7"; gene_type "protein_coding"; gene_name "NRSN2"; transcript_type "protein_coding"; transcript_name "NRSN2-202"; exon_number 3; exon_id "ENSE00003710328.1"; level 2; protein_id "ENSP00000371728.3"; transcript_support_level "2"; tag "basic"; tag "appris_principal_1"; tag "CCDS"; ccdsid "CCDS12996.1"; havana_gene "OTTHUMG00000031628.5"; havana_transcript "OTTHUMT00000077446.1"; +chr20 HAVANA exon 353210 354868 . + . gene_id "ENSG00000125841.12"; transcript_id "ENST00000382291.7"; gene_type "protein_coding"; gene_name "NRSN2"; transcript_type "protein_coding"; transcript_name "NRSN2-202"; exon_number 4; exon_id "ENSE00001822456.1"; level 2; protein_id "ENSP00000371728.3"; transcript_support_level "2"; tag "basic"; tag "appris_principal_1"; tag "CCDS"; ccdsid "CCDS12996.1"; havana_gene "OTTHUMG00000031628.5"; havana_transcript "OTTHUMT00000077446.1"; +chr20 HAVANA CDS 353210 353632 . + 0 gene_id "ENSG00000125841.12"; transcript_id "ENST00000382291.7"; gene_type "protein_coding"; gene_name "NRSN2"; transcript_type "protein_coding"; transcript_name "NRSN2-202"; exon_number 4; exon_id "ENSE00001822456.1"; level 2; protein_id "ENSP00000371728.3"; transcript_support_level "2"; tag "basic"; tag "appris_principal_1"; tag "CCDS"; ccdsid "CCDS12996.1"; havana_gene "OTTHUMG00000031628.5"; havana_transcript "OTTHUMT00000077446.1"; +chr20 HAVANA stop_codon 353633 353635 . + 0 gene_id "ENSG00000125841.12"; transcript_id "ENST00000382291.7"; gene_type "protein_coding"; gene_name "NRSN2"; transcript_type "protein_coding"; transcript_name "NRSN2-202"; exon_number 4; exon_id "ENSE00001822456.1"; level 2; protein_id "ENSP00000371728.3"; transcript_support_level "2"; tag "basic"; tag "appris_principal_1"; tag "CCDS"; ccdsid "CCDS12996.1"; havana_gene "OTTHUMG00000031628.5"; havana_transcript "OTTHUMT00000077446.1"; +chr20 HAVANA UTR 347024 347142 . + . gene_id "ENSG00000125841.12"; transcript_id "ENST00000382291.7"; gene_type "protein_coding"; gene_name "NRSN2"; transcript_type "protein_coding"; transcript_name "NRSN2-202"; exon_number 1; exon_id "ENSE00001831391.1"; level 2; protein_id "ENSP00000371728.3"; transcript_support_level "2"; tag "basic"; tag "appris_principal_1"; tag "CCDS"; ccdsid "CCDS12996.1"; havana_gene "OTTHUMG00000031628.5"; havana_transcript "OTTHUMT00000077446.1"; diff --git a/src/qualimap/qualimap_rnaseq/test_data/script.sh b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..801fe405 --- /dev/null +++ b/src/qualimap/qualimap_rnaseq/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,10 @@ +# qualimap test data + +# Test data was obtained from https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers/raw/master/bio/qualimap/rnaseq/test + +if [ ! -d /tmp/snakemake-wrappers ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers /tmp/snakemake-wrappers +fi + +cp -r /tmp/snakemake-wrappers/bio/qualimap/rnaseq/test/mapped/a.bam src/qualimap/qualimap_rnaseq/test_data +cp -r /tmp/snakemake-wrappers/bio/qualimap/rnaseq/test/annotation.gtf src/qualimap/qualimap_rnaseq/test_data diff --git a/src/salmon/salmon_index/config.vsh.yaml b/src/salmon/salmon_index/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..41c1e05b --- /dev/null +++ b/src/salmon/salmon_index/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,113 @@ +name: salmon_index +namespace: salmon +description: | + Salmon is a tool for wicked-fast transcript quantification from RNA-seq data. It can either make use of pre-computed alignments (in the form of a SAM/BAM file) to the transcripts rather than the raw reads, or can be run in the mapping-based mode. This component creates a salmon index for the transcriptome to use Salmon in the mapping-based mode. It is generally recommend that you build a decoy-aware transcriptome file. This is done using the entire genome of the organism as the decoy sequence by concatenating the genome to the end of the transcriptome to be indexed and populating the decoys.txt file with the chromosome names. +keywords: ["Transcriptome", "Index"] +links: + homepage: https://salmon.readthedocs.io/en/latest/salmon.html + documentation: https://salmon.readthedocs.io/en/latest/salmon.html + repository: https://github.com/COMBINE-lab/salmon +references: + doi: 10.1038/nmeth.4197 +license: GPL-3.0 +requirements: + commands: [ salmon ] + +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --genome + type: file + description: | + Genome of the organism to prepare the set of decoy sequences. Required to build decoy-aware transcriptome. + required: false + example: genome.fasta + - name: --transcripts + alternatives: ["-t"] + type: file + description: | + Transcript fasta file. + required: true + example: transcriptome.fasta + - name: --kmer_len + alternatives: ["-k"] + type: integer + description: | + The size of k-mers that should be used for the quasi index. + required: false + example: 31 + - name: --gencode + type: boolean_true + description: | + This flag will expect the input transcript fasta to be in GENCODE format, and will split the transcript name at the first '|' character. These reduced names will be used in the output and when looking for these transcripts in a gene to transcript GTF. + - name: --features + type: boolean_true + description: | + This flag will expect the input reference to be in the tsv file format, and will split the feature name at the first 'tab' character. These reduced names will be used in the output and when looking for the sequence of the features.GTF. + - name: --keep_duplicates + type: boolean_true + description: | + This flag will disable the default indexing behavior of discarding sequence-identical duplicate transcripts. If this flag is passed, then duplicate transcripts that appear in the input will be retained and quantified separately. + - name: --keep_fixed_fasta + type: boolean_true + description: | + Retain the fixed fasta file (without short transcripts and duplicates, clipped, etc.) generated during indexing. + - name: --filter_size + alternatives: ["-f"] + type: integer + description: | + The size of the Bloom filter that will be used by TwoPaCo during indexing. The filter will be of size 2^{filter_size}. The default value of -1 means that the filter size will be automatically set based on the number of distinct k-mers in the input, as estimated by nthll. + required: false + example: -1 + - name: --sparse + type: boolean_true + description: | + Build the index using a sparse sampling of k-mer positions This will require less memory (especially during quantification), but will take longer to construct and can slow down mapping / alignment. + - name: --decoys + alternatives: ["-d"] + type: file + description: | + Treat these sequences ids from the reference as the decoys that may have sequence homologous to some known transcript. For example in case of the genome, provide a list of chromosome names (one per line). + required: false + example: decoys.txt + - name: --no_clip + type: boolean_true + description: | + Don't clip poly-A tails from the ends of target sequences. + - name: --type + alternatives: ["-n"] + type: string + description: | + The type of index to build; the only option is "puff" in this version of salmon. + required: false + example: puff + + - name: Output + arguments: + - name: --index + alternatives: ["-i"] + type: file + direction: output + description: | + Salmon index + required: true + example: Salmon_index + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh + +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/salmon:1.10.2--hecfa306_0 + setup: + - type: docker + run: | + salmon index -v 2>&1 | sed 's/salmon \([0-9.]*\)/salmon: \1/' > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/salmon/salmon_index/help.txt b/src/salmon/salmon_index/help.txt new file mode 100644 index 00000000..bcca44d0 --- /dev/null +++ b/src/salmon/salmon_index/help.txt @@ -0,0 +1,66 @@ +```bash +salmon index -h +``` + +Version Info: This is the most recent version of salmon. + +Index +========== +Creates a salmon index. + +Command Line Options: + -v [ --version ] print version string + -h [ --help ] produce help message + -t [ --transcripts ] arg Transcript fasta file. + -k [ --kmerLen ] arg (=31) The size of k-mers that should be used for the + quasi index. + -i [ --index ] arg salmon index. + --gencode This flag will expect the input transcript + fasta to be in GENCODE format, and will split + the transcript name at the first '|' character. + These reduced names will be used in the output + and when looking for these transcripts in a + gene to transcript GTF. + --features This flag will expect the input reference to be + in the tsv file format, and will split the + feature name at the first 'tab' character. + These reduced names will be used in the output + and when looking for the sequence of the + features.GTF. + --keepDuplicates This flag will disable the default indexing + behavior of discarding sequence-identical + duplicate transcripts. If this flag is passed, + then duplicate transcripts that appear in the + input will be retained and quantified + separately. + -p [ --threads ] arg (=2) Number of threads to use during indexing. + --keepFixedFasta Retain the fixed fasta file (without short + transcripts and duplicates, clipped, etc.) + generated during indexing + -f [ --filterSize ] arg (=-1) The size of the Bloom filter that will be used + by TwoPaCo during indexing. The filter will be + of size 2^{filterSize}. The default value of -1 + means that the filter size will be + automatically set based on the number of + distinct k-mers in the input, as estimated by + nthll. + --tmpdir arg The directory location that will be used for + TwoPaCo temporary files; it will be created if + need be and be removed prior to indexing + completion. The default value will cause a + (temporary) subdirectory of the salmon index + directory to be used for this purpose. + --sparse Build the index using a sparse sampling of + k-mer positions This will require less memory + (especially during quantification), but will + take longer to construct and can slow down + mapping / alignment + -d [ --decoys ] arg Treat these sequences ids from the reference as + the decoys that may have sequence homologous to + some known transcript. for example in case of + the genome, provide a list of chromosome name + --- one per line + -n [ --no-clip ] Don't clip poly-A tails from the ends of target + sequences + --type arg (=puff) The type of index to build; the only option is + "puff" in this version of salmon. diff --git a/src/salmon/salmon_index/script.sh b/src/salmon/salmon_index/script.sh new file mode 100644 index 00000000..c2b9e7a0 --- /dev/null +++ b/src/salmon/salmon_index/script.sh @@ -0,0 +1,49 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +## VIASH START +## VIASH END + +[[ "$par_gencode" == "false" ]] && unset par_gencode +[[ "$par_features" == "false" ]] && unset par_features +[[ "$par_keep_duplicates" == "false" ]] && unset par_keep_duplicates +[[ "$par_keep_fixed_fasta" == "false" ]] && unset par_keep_fixed_fasta +[[ "$par_sparse" == "false" ]] && unset par_sparse +[[ "$par_no_clip" == "false" ]] && unset par_no_clip + +tmp_dir=$(mktemp -d -p "$meta_temp_dir" "${meta_functionality_name}_XXXXXX") +mkdir -p "$tmp_dir/temp" + +if [[ -f "$par_genome" ]] && [[ ! "$par_decoys" ]]; then + filename="$(basename -- $par_genome)" + decoys="decoys.txt" + if [ ${filename##*.} == "gz" ]; then + grep '^>' <(gunzip -c $par_genome) | cut -d ' ' -f 1 > $decoys + gentrome="gentrome.fa.gz" + else + grep '^>' $par_genome | cut -d ' ' -f 1 > $decoys + gentrome="gentrome.fa" + fi + sed -i.bak -e 's/>//g' $decoys + cat $par_transcripts $par_genome > $gentrome +else + gentrome=$par_transcripts + decoys=$par_decoys +fi + +salmon index \ + -t "$gentrome" \ + --tmpdir "$tmp_dir/temp" \ + ${meta_cpus:+--threads "${meta_cpus}"} \ + -i "$par_index" \ + ${par_kmer_len:+-k "${par_kmer_len}"} \ + ${par_gencode:+--gencode} \ + ${par_features:+--features} \ + ${par_keep_duplicates:+--keepDuplicates} \ + ${par_keep_fixed_fasta:+--keepFixedFasta} \ + ${par_filter_size:+-f "${par_filter_size}"} \ + ${par_sparse:+--sparse} \ + ${decoys:+-d "${decoys}"} \ + ${par_no_clip:+--no-clip} \ + ${par_type:+--type "${par_type}"} \ No newline at end of file diff --git a/src/salmon/salmon_index/test.sh b/src/salmon/salmon_index/test.sh new file mode 100644 index 00000000..091f11a9 --- /dev/null +++ b/src/salmon/salmon_index/test.sh @@ -0,0 +1,35 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +echo "> Prepare test data" + +dir_in="test_data" +mkdir -p "$dir_in" + +cat > "$dir_in/transcriptome.fasta" <<'EOF' +>contig1 +AGCTCCAGATTCGCTCAGGCCCTTGATCATCAGTCGTCGTCGTCTTCGATTTGCCAGAGG +AGTTTAGATGAAGAATGTCAAGGATGTTCCTCCCTGCCCTCCCATCTAGCCAAGAACATT +TCCAAGAAGATAAAACTGTCACTGAGACAGGTCTGGATGCGCCCTAGGGGCAAATAGAGA +>contig2 +AGGCCTTTACCACATTGCTGCTGGCTATAGGAAGTCCCAGGTACTAGCCTGAAACAGCTG +ATATTTGGGGCTGTCACAGACAATATGGCCACCCCTTGGTCTTTATGCATGAAGATTATG +TAAAGGTTTTTATTAAAAAATATATATATATATATAAATGATCTAGATTATTTTCCTCTT +TCTGAAGTACTTTCTTAAAAAAATAAAATTAAATGTTTATAGTATTCCCGGT +EOF + +printf ">>> Run salmon_index" +"$meta_executable" \ + --transcripts $dir_in/transcriptome.fasta \ + --index index \ + --kmer_len 31 + +printf ">>> Checking whether output exists" +[ ! -d "index" ] && echo "'index' does not exist!" && exit 1 +[ -z "$(ls -A 'index')" ] && echo "'index' is empty!" && exit 1 +[ ! -f "index/info.json" ] && echo "Salmon index does not contain 'info.json'! Not all files were generated correctly!" && exit 1 +[ $(grep '"k": [0-9]*' index/info.json | cut -d':' -f 2) != '31,' ] && printf "The generated Salmon index seems to be incorrect!" && exit 1 + +echo "All tests succeeded!" +exit 0 \ No newline at end of file diff --git a/src/salmon/salmon_quant/config.vsh.yaml b/src/salmon/salmon_quant/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..b7e303f4 --- /dev/null +++ b/src/salmon/salmon_quant/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,592 @@ +name: salmon_quant +namespace: salmon +description: | + Salmon is a tool for wicked-fast transcript quantification from RNA-seq data. It can either make use of pre-computed alignments (in the form of a SAM/BAM file) to the transcripts rather than the raw reads, or can be run in the mapping-based mode. +keywords: ["Transcriptome", "Quantification"] +links: + homepage: https://salmon.readthedocs.io/en/latest/salmon.html + documentation: https://salmon.readthedocs.io/en/latest/salmon.html + repository: https://github.com/COMBINE-lab/salmon +references: + doi: "10.1038/nmeth.4197" +license: GPL-3.0 +requirements: + commands: [ salmon ] + +argument_groups: + - name: Common input options + arguments: + - name: --lib_type + alternatives: ["-l"] + type: string + description: | + Format string describing the library. + The library type string consists of three parts: + 1. Relative orientation of the reads: This part is only provided if the library is paired-end, THe possible options are + I = inward + O = outward + M = matching + 2. Strandedness of the library: This part specifies whether the protocol is stranded or unstranded. The options are: + S = stranded + U = unstranded + 3. Directionality of the reads: If the library is stranded, the final part of the library string is used to specify the strand from which the read originates. The possible values are + F = read 1 (or single-end read) comes from the forward strand + R = read 1 (or single-end read) comes from the reverse strand + required: false + default: 'A' + choices: ['A', 'U', 'SF', 'SR', 'IU', 'IS', 'ISF', 'ISR', 'OU', 'OS', 'OSF', 'OSR', 'MU', 'MS', 'MSF', 'MSR'] + - name: Mapping input options + arguments: + - name: --index + alternatives: ["-i"] + type: file + description: | + Salmon index. + required: false + example: transcriptome_index + - name: --unmated_reads + alternatives: ["-r"] + type: file + description: | + List of files containing unmated reads of (e.g. single-end reads). + required: false + multiple: true + example: sample.fq.gz + - name: --mates1 + alternatives: ["-m1"] + type: file + description: | + File containing the #1 mates. + required: false + multiple: true + example: sample_1.fq.gz + - name: --mates2 + alternatives: ["-m2"] + type: file + description: | + File containing the #2 mates. + required: false + multiple: true + example: sample_2.fq.gz + + - name: Alignment input options + arguments: + - name: --discard_orphans + type: boolean_true + description: | + Discard orphan alignments in the input [for alignment-based mode only]. If this flag is passed, then only paired alignments will be considered toward quantification estimates. The default behavior is to consider orphan alignments if no valid paired mappings exist. + - name: --alignments + alternatives: ["-a"] + type: file + description: | + Input alignment (BAM) file(s). + required: false + multiple: true + example: sample.fq.gz + - name: --eqclasses + alternatives: ["-e"] + type: file + description: | + input salmon weighted equivalence class file. + required: false + - name: --targets + alternatives: ["-t"] + type: file + description: | + FASTA format file containing target transcripts. + required: false + example: transcripts.fasta + - name: --ont + type: boolean_true + description: | + Use alignment model for Oxford Nanopore long reads + + - name: Output + arguments: + - name: --output + alternatives: ["-o"] + type: file + direction: output + description: | + Output quantification directory. + required: true + example: quant_output + - name: --quant_results + type: file + direction: output + description: | + Salmon quantification file. + required: true + example: quant.sf + + - name: Basic options + arguments: + - name: --seq_bias + type: boolean_true + description: | + Perform sequence-specific bias correction. + - name: --gc_bias + type: boolean_true + description: | + Perform fragment GC bias correction [beta for single-end reads]. + - name: --pos_bias + type: boolean_true + description: | + Perform positional bias correction. + - name: --incompat_prior + type: double + description: | + Set the prior probability that an alignment that disagrees with the specified library type (--lib_type) results from the true fragment origin. Setting this to 0 specifies that alignments that disagree with the library type should be "impossible", while setting it to 1 says that alignments that disagree with the library type are no less likely than those that do. + required: false + min: 0 + max: 1 + example: 0 + - name: --gene_map + alternatives: ["-g"] + type: file + description: | + File containing a mapping of transcripts to genes. If this file is provided salmon will output both quant.sf and quant.genes.sf files, where the latter contains aggregated gene-level abundance estimates. The transcript to gene mapping should be provided as either a GTF file, or a in a simple tab-delimited format where each line contains the name of a transcript and the gene to which it belongs separated by a tab. The extension of the file is used to determine how the file should be parsed. Files ending in '.gtf', '.gff' or '.gff3' are assumed to be in GTF format; files with any other extension are assumed to be in the simple format. In GTF / GFF format, the "transcript_id" is assumed to contain the transcript identifier and the "gene_id" is assumed to contain the corresponding gene identifier. + required: false + example: gene_map.gtf + - name: --aux_target_file + type: file + description: | + A file containing a list of "auxiliary" targets. These are valid targets (i.e., not decoys) to which fragments are allowed to map and be assigned, and which will be quantified, but for which auxiliary models like sequence-specific and fragment-GC bias correction should not be applied. + required: false + example: auxilary_targets.txt + - name: --meta + type: boolean_true + description: | + If you're using Salmon on a metagenomic dataset, consider setting this flag to disable parts of the abundance estimation model that make less sense for metagenomic data. + - name: --score_exp + type: double + description: | + The factor by which sub-optimal alignment scores are downweighted to produce a probability. If the best alignment score for the current read is S, and the score for a particular alignment is w, then the probability will be computed porportional to exp( - scoreExp * (S-w) ). + required: false + example: 1 + + - name: Options specific to mapping mode + arguments: + - name: --discard_orphans_quasi + type: boolean_true + description: | + [selective-alignment mode only] + Discard orphan mappings in selective-alignment mode. If this flag is passed then only paired mappings will be considered toward quantification estimates. The default behavior is to consider orphan mappings if no valid paired mappings exist. This flag is independent of the option to write the orphaned mappings to file (--writeOrphanLinks). + - name: --consensus_slack + type: double + description: | + [selective-alignment mode only] + The amount of slack allowed in the selective-alignment filtering mechanism. If this is set to a fraction, X, greater than 0 (and in [0,1)), then uniMEM chains with scores below (100 * X)% of the best chain score for a read, and read pairs with a sum of chain scores below (100 * X)% of the best chain score for a read pair will be discounted as a mapping candidates. The default value of this option is 0.35. + required: false + min: 0 + max: 0.999999999 + example: 0.35 + - name: --pre_merge_chain_sub_thresh + type: double + description: | + [selective-alignment mode only] + The threshold of sub-optimal chains, compared to the best chain on a given target, that will be retained and passed to the next phase of mapping. Specifically, if the best chain for a read (or read-end in paired-end mode) to target t has score X_t, then all chains for this read with score >= X_t * preMergeChainSubThresh will be retained and passed to subsequent mapping phases. This value must be in the range [0, 1]. + required: false + min: 0 + max: 1 + example: 0.75 + - name: --post_merge_chain_sub_thresh + type: double + description: | + [selective-alignment mode only] + The threshold of sub-optimal chains, compared to the best chain on a given target, that will be retained and passed to the next phase of mapping. This is different than post_merge_chain_sub_thresh, because this is applied to pairs of chains (from the ends of paired-end reads) after merging (i.e. after checking concordancy constraints etc.). Specifically, if the best chain pair to target t has score X_t, then all chain pairs for this read pair with score >= X_t * post_merge_chain_sub_thresh will be retained and passed to subsequent mapping phases. This value must be in the range [0, 1]. Note: This option is only meaningful for paired-end libraries, and is ignored for single-end libraries. + required: false + min: 0 + max: 1 + example: 0.9 + - name: --orphan_chain_sub_thresh + type: double + description: | + [selective-alignment mode only] + This threshold sets a global sub-optimality threshold for chains corresponding to orphan mappings. That is, if the merging procedure results in no concordant mappings then only orphan mappings with a chain score >= orphan_chain_sub_thresh * bestChainScore will be retained and passed to subsequent mapping phases. This value must be in the range [0, 1]. Note: This option is only meaningful for paired-end libraries, and is ignored for single-end libraries. + required: false + min: 0 + max: 1 + example: 0.95 + - name: --min_score_fraction + type: double + description: | + [selective-alignment mode only] + The fraction of the optimal possible alignment score that a mapping must achieve in order to be considered "valid" --- should be in (0,1]. Default 0.65 + required: false + min: 0.000000001 + max: 1 + example: 0.65 + - name: --mismatch_seed_skip + type: integer + description: | + [selective-alignment mode only] + After a k-mer hit is extended to a uni-MEM, the uni-MEM extension can terminate for one of 3 reasons; the end of the read, the end of the unitig, or a mismatch. If the extension ends because of a mismatch, this is likely the result of a sequencing error. To avoid looking up many k-mers that will likely fail to be located in the index, the search procedure skips by a factor of mismatch_seed_skip until it either (1) finds another match or (2) is k-bases past the mismatch position. This value controls that skip length. A smaller value can increase sensitivity, while a larger value can speed up seeding. + required: false + example: 3 + - name: --disable_chaining_heuristic + type: boolean_true + description: | + [selective-alignment mode only] + By default, the heuristic of (Li 2018) is implemented, which terminates the chaining DP once a given number of valid backpointers are found. This speeds up the seed (MEM) chaining step, but may result in sub-optimal chains in complex situations (e.g. sequences with many repeats and overlapping repeats). Passing this flag will disable the chaining heuristic, and perform the full chaining dynamic program, guaranteeing the optimal chain is found in this step. + - name: --decoy_threshold + type: double + description: | + [selective-alignment mode only] + For an alignemnt to an annotated transcript to be considered invalid, it must have an alignment score < (decoy_threshold * bestDecoyScore). A value of 1.0 means that any alignment strictly worse than the best decoy alignment will be discarded. A smaller value will allow reads to be allocated to transcripts even if they strictly align better to the decoy sequence. + required: false + min: 0 + max: 1 + example: 1 + - name: --ma + type: integer + description: | + [selective-alignment mode only] + The value given to a match between read and reference nucleotides in an alignment. + required: false + example: 2 + - name: --mp + type: integer + description: | + [selective-alignment mode only] + The value given to a mis-match between read and reference nucleotides in an alignment. + required: false + example: -4 + - name: --go + type: integer + description: | + [selective-alignment mode only] + The value given to a gap opening in an alignment. + required: false + example: 6 + - name: --ge + type: integer + description: | + [selective-alignment mode only] + The value given to a gap extension in an alignment. + required: false + example: 2 + - name: --bandwidth + type: integer + description: | + [selective-alignment mode only] + The value used for the bandwidth passed to ksw2. A smaller bandwidth can make the alignment verification run more quickly, but could possibly miss valid alignments. + required: false + example: 15 + - name: --allow_dovetail + type: boolean_true + description: | + [selective-alignment mode only] + Allow dovetailing mappings. + - name: --recover_orphans + type: boolean_true + description: | + [selective-alignment mode only] + Attempt to recover the mates of orphaned reads. This uses edlib for orphan recovery, and so introduces some computational overhead, but it can improve sensitivity. + - name: --mimicBT2 + type: boolean_true + description: | + [selective-alignment mode only] + Set flags to mimic parameters similar to Bowtie2 with --no-discordant and --no-mixed flags. This increases disallows dovetailing reads, and discards orphans. Note, this does not impose the very strict parameters assumed by RSEM+Bowtie2, like gapless alignments. For that behavior, use the --mimic_strictBT2 flag below. + - name: --mimic_strictBT2 + type: boolean_true + description: | + [selective-alignment mode only] + Set flags to mimic the very strict parameters used by RSEM+Bowtie2. This increases --min_score_fraction to 0.8, disallows dovetailing reads, discards orphans, and disallows gaps in alignments. + - name: --softclip + type: boolean_true + description: | + [selective-alignment mode only] + Allos soft-clipping of reads during selective-alignment. If this option is provided, then regions at the beginning or end of the read can be withheld from alignment without any effect on the resulting score (i.e. neither adding nor removing from the score). This will drastically reduce the penalty if there are mismatches at the beginning or end of the read due to e.g. low-quality bases or adapters. NOTE: Even with soft-clipping enabled, the read must still achieve a score of at least min_score_fraction * maximum achievable score, where the maximum achievable score is computed based on the full (un-clipped) read length. + - name: --softclip_overhangs + type: boolean_true + description: | + [selective-alignment mode only] + Allow soft-clipping of reads that overhang the beginning or ends of the transcript. In this case, the overhaning section of the read will simply be unaligned, and will not contribute or detract from the alignment score. The default policy is to force an end-to-end alignment of the entire read, so that overhanings will result in some deletion of nucleotides from the read. + - name: --full_length_alignment + type: boolean_true + description: | + [selective-alignment mode only] + Perform selective alignment over the full length of the read, beginning from the (approximate) initial mapping location and using extension alignment. This is in contrast with the default behavior which is to only perform alignment between the MEMs in the optimal chain (and before the first and after the last MEM if applicable). The default strategy forces the MEMs to belong to the alignment, but has the benefit that it can discover indels prior to the first hit shared between the read and reference. Except in very rare circumstances, the default mode should be more accurate. + - name: --hard_filter + type: boolean_true + description: | + [selective-alignment mode only] + Instead of weighting mappings by their alignment score, this flag will discard any mappings with sub-optimal alignment score. The default option of soft-filtering (i.e. weighting mappings by their alignment score) usually yields slightly more accurate abundance estimates but this flag may be desirable if you want more accurate 'naive' equivalence classes, rather than range factorized equivalence classes. + - name: --min_aln_prob + type: double + description: | + The minimum number of fragments that must be assigned to the transcriptome for quantification to proceed. + example: 0.00001 + - name: --write_mappings + alternatives: ["-z"] + type: boolean_true + description: | + If this option is provided, then the selective-alignment results will be written out in SAM-compatible format. By default, output will be directed to stdout, but an alternative file name can be provided instead. + - name: --mapping_sam + type: file + description: Path to file that should output the selective-alignment results in SAM-compatible format. THis option must be provided while using --write_mappings + required: false + direction: output + example: mappings.sam + - name: --write_qualities + type: boolean_true + description: | + This flag only has meaning if mappings are being written (with --write_mappings/-z). If this flag is provided, then the output SAM file will contain quality strings as well as read sequences. Note that this can greatly increase the size of the output file. + - name: --hit_filter_policy + type: string + description: | + [selective-alignment mode only] + Determines the policy by which hits are filtered in selective alignment. Filtering hits after chaining (the default) is more sensitive, but more computationally intensive, because it performs the chaining dynamic program for all hits. Filtering before chaining is faster, but some true hits may be missed. The options are BEFORE, AFTER, BOTH and NONE. + required: false + choices: [BEFORE, AFTER, BOTH, NONE] + example: AFTER + + - name: Advance options + arguments: + - name: --alternative_init_mode + type: boolean_true + description: | + Use an alternative strategy (rather than simple interpolation between) the online and uniform abundance estimates to initialize the EM / VBEM algorithm. + - name: --aux_dir + type: file + direction: output + description: | + The sub-directory of the quantification directory where auxiliary information e.g. bootstraps, bias parameters, etc. will be written. + required: false + example: aux_info + - name: --skip_quant + type: boolean_true + description: | + Skip performing the actual transcript quantification (including any Gibbs sampling or bootstrapping). + - name: --dump_eq + type: boolean_true + description: | + Dump the simple equivalence class counts that were computed during mapping or alignment. + - name: --dump_eq_weights + alternatives: ["-d"] + type: boolean_true + description: | + Dump conditional probabilities associated with transcripts when equivalence class information is being dumped to file. Note, this will dump the factorization that is actually used by salmon's offline phase for inference. If you are using range-factorized equivalence classes (the default) then the same transcript set may appear multiple times with different associated conditional probabilities. + - name: --min_assigned_frags + type: integer + description: | + The minimum number of fragments that must be assigned to the transcriptome for quantification to proceed. + required: false + example: 10 + - name: --reduce_GC_memory + type: boolean_true + description: | + If this option is selected, a more memory efficient (but slightly slower) representation is used to compute fragment GC content. Enabling this will reduce memory usage, but can also reduce speed. However, the results themselves will remain the same. + - name: --bias_speed_samp + type: integer + description: | + The value at which the fragment length PMF is down-sampled when evaluating sequence-specific & GC fragment bias. Larger values speed up effective length correction, but may decrease the fidelity of bias modeling results. + required: false + example: 5 + - name: --fld_max + type: integer + description: | + The maximum fragment length to consider when building the empirical distribution + required: false + example: 1000 + - name: --fld_mean + type: integer + description: | + The mean used in the fragment length distribution prior + required: false + example: 250 + - name: --fld_SD + type: integer + description: | + The standard deviation used in the fragment length distribution prior + required: false + example: 25 + - name: --forgetting_factor + alternatives: ["-f"] + type: double + description: | + The forgetting factor used in the online learning schedule. A smallervalue results in quicker learning, but higher variance and may be unstable. A larger value results in slower learning but may be more stable. Value should be in the interval (0.5, 1.0]. + required: false + min: 0.500000001 + max: 1 + example: 0.65 + - name: --init_uniform + type: boolean_true + description: | + Initialize the offline inference with uniform parameters, rather than seeding with online parameters. + - name: --max_occs_per_hit + type: integer + description: | + When collecting "hits" (MEMs), hits having more than max_occs_per_hit occurrences won't be considered. + required: false + example: 1000 + - name: --max_read_occ + type: integer + description: | + Reads "mapping" to more than this many places won't be considered. + required: false + example: 200 + - name: --no_length_correction + type: boolean_true + description: | + Entirely disables length correction when estimating the abundance of transcripts. This option can be used with protocols where one expects that fragments derive from their underlying targets without regard to that target's length (e.g. QuantSeq) + - name: --no_effective_length_correction + type: boolean_true + description: | + Disables effective length correction when computing the probability that a fragment was generated from a transcript. If this flag is passed in,the fragment length distribution is not taken into account when computing this probability. + - name: --no_single_frag_prob + type: boolean_true + description: | + Disables the estimation of an associated fragment length probability for single-end reads or for orphaned mappings in paired-end libraries. The default behavior is to consider the probability of all possible fragment lengths associated with the retained mapping. Enabling this flag (i.e. turning this default behavior off) will simply not attempt to estimate a fragment length probability in such cases. + - name: --no_frag_length_dist + type: boolean_true + description: | + Don't consider concordance with the learned fragment length distribution when trying to determine the probability that a fragment has originated from a specified location. Normally, Fragments with unlikely lengths will be assigned a smaller relative probability than those with more likely lengths. When this flag is passed in, the observed fragment length has no effect on that fragment's a priori probability. + - name: --no_bias_length_threshold + type: boolean_true + description: | + If this option is enabled, then no (lower) threshold will be set on how short bias correction can make effective lengths. This can increase the precision of bias correction, but harm robustness. The default correction applies a threshold. + - name: --num_bias_samples + type: integer + description: | + Number of fragment mappings to use when learning the sequence-specific bias model. + required: false + example: 2000000 + - name: --num_aux_model_samples + type: integer + description: | + The first are used to train the auxiliary model parameters (e.g. fragment length distribution, bias, etc.). After ther first observations the auxiliary model parameters will be assumed to have converged and will be fixed. + required: false + example: 5000000 + - name: --num_pre_aux_model_samples + type: integer + description: | + The first will have their assignment likelihoods and contributions to the transcript abundances computed without applying any auxiliary models. The purpose of ignoring the auxiliary models for the first observations is to avoid applying these models before their parameters have been learned sufficiently well. + required: false + example: 5000 + - name: --useEM + type: boolean_true + description: | + Use the traditional EM algorithm for optimization in the batch passes. + - name: --useVBOpt + type: boolean_true + description: | + Use the Variational Bayesian EM [default] + - name: --range_factorization_bins + type: integer + description: | + Factorizes the likelihood used in quantification by adopting a new notion of equivalence classes based on the conditional probabilities with which fragments are generated from different transcripts. This is a more fine-grained factorization than the normal rich equivalence classes. The default value (4) corresponds to the default used in Zakeri et al. 2017 (doi: 10.1093/bioinformatics/btx262), and larger values imply a more fine-grained factorization. If range factorization is enabled, a common value to select for this parameter is 4. A value of 0 signifies the use of basic rich equivalence classes. + required: false + example: 4 + - name: --num_Gibbs_samples + type: integer + description: | + Number of Gibbs sampling rounds to perform. + required: false + example: 0 + - name: --no_Gamma_draw + type: boolean_true + description: | + This switch will disable drawing transcript fractions from a Gamma distribution during Gibbs sampling. In this case the sampler does not account for shot-noise, but only assignment ambiguity + - name: --num_bootstraps + type: integer + description: | + Number of bootstrap samples to generate. Note: This is mutually exclusive with Gibbs sampling. + required: false + example: 0 + - name: --bootstrap_reproject + type: boolean_true + description: | + This switch will learn the parameter distribution from the bootstrapped counts for each sample, but will reproject those parameters onto the original equivalence class counts. + - name: --thinning_factor + type: integer + description: | + Number of steps to discard for every sample kept from the Gibbs chain. The larger this number, the less chance that subsequent samples are auto-correlated, but the slower sampling becomes. + required: false + example: 16 + - name: --quiet + alternatives: ["-q"] + type: boolean_true + description: | + Be quiet while doing quantification (don't write informative output to the console unless something goes wrong). + - name: --per_transcript_prior + type: boolean_true + description: | + The prior (either the default or the argument provided via --vb_prior) will be interpreted as a transcript-level prior (i.e. each transcript will be given a prior read count of this value) + - name: --per_nucleotide_prior + type: boolean_true + description: | + The prior (either the default or the argument provided via --vb_prior) will be interpreted as a nucleotide-level prior (i.e. each nucleotide will be given a prior read count of this value) + - name: --sig_digits + type: integer + description: | + The number of significant digits to write when outputting the EffectiveLength and NumReads columns + required: false + example: 3 + - name: --vb_prior + type: double + description: | + The prior that will be used in the VBEM algorithm. This is interpreted as a per-transcript prior, unless the --per_nucleotide_prior flag is also given. If the --per_nucleotide_prior flag is given, this is used as a nucleotide-level prior. If the default is used, it will be divided by 1000 before being used as a nucleotide-level prior, i.e. the default per-nucleotide prior will be 1e-5. + required: false + example: 0.01 + - name: --write_orphan_links + type: boolean_true + description: | + Write the transcripts that are linked by orphaned reads. + - name: --write_unmapped_names + type: boolean_true + description: | + Write the names of un-mapped reads to the file unmapped_names.txt in the auxiliary directory. + + - name: Alignment-specific options + arguments: + - name: --no_error_model + type: boolean_true + description: | + Turn off the alignment error model, which takes into account the the observed frequency of different types of mismatches / indels when computing the likelihood of a given alignment. Turning this off can speed up alignment-based salmon, but can harm quantification accuracy. + - name: --num_error_bins + type: integer + description: | + The number of bins into which to divide each read when learning and applying the error model. For example, a value of 10 would mean that effectively, a separate error model is leared and applied to each 10th of the read, while a value of 3 would mean that a separate error model is applied to the read beginning (first third), middle (second third) and end (final third). + required: false + example: 6 + - name: --sample_out + alternatives: ["-s"] + type: boolean_true + description: | + Write a "postSample.bam" file in the output directory that will sample the input alignments according to the estimated transcript abundances. If you're going to perform downstream analysis of the alignments with tools which don't, themselves, take fragment assignment ambiguity into account, you should use this output. + - name: --sample_unaligned + alternatives: ["-u"] + type: boolean_true + description: | + In addition to sampling the aligned reads, also write the un-aligned reads to "postSample.bam". + - name: --gencode + type: boolean_true + description: | + This flag will expect the input transcript fasta to be in GENCODE format, and will split the transcript name at the first '|' character. These reduced names will be used in the output and when looking for these transcripts in a gene to transcript GTF. + - name: --mapping_cache_memory_limit + type: integer + description: | + If the file contained fewer than this many mapped reads, then just keep the data in memory for subsequent rounds of inference. Obviously, this value should not be too large if you wish to keep a low memory usage, but setting it large enough to accommodate all of the mapped read can substantially speed up inference on "small" files that contain only a few million reads. + required: false + example: 2000000 + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh + +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/salmon:1.10.2--hecfa306_0 + setup: + - type: docker + run: | + salmon index -v 2>&1 | sed 's/salmon \([0-9.]*\)/salmon: \1/' > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/salmon/salmon_quant/help.txt b/src/salmon/salmon_quant/help.txt new file mode 100644 index 00000000..bcd92656 --- /dev/null +++ b/src/salmon/salmon_quant/help.txt @@ -0,0 +1,976 @@ +```bash +salmon quant -h +``` +salmon v1.10.2 +=============== + +salmon quant has two modes --- one quantifies expression using raw reads +and the other makes use of already-aligned reads (in BAM/SAM format). +Which algorithm is used depends on the arguments passed to salmon quant. +If you provide salmon with alignments '-a [ --alignments ]' then the +alignment-based algorithm will be used, otherwise the algorithm for +quantifying from raw reads will be used. + +to view the help for salmon's selective-alignment-based mode, use the command + +salmon quant --help-reads + +To view the help for salmon's alignment-based mode, use the command + +salmon quant --help-alignment + + +```bash +salmon quant --help-reads +``` +Quant +========== +Perform dual-phase, selective-alignment-based estimation of +transcript abundance from RNA-seq reads + +salmon quant options: + + +mapping input options: + -l [ --libType ] arg Format string describing the library + type + -i [ --index ] arg salmon index + -r [ --unmatedReads ] arg List of files containing unmated reads + of (e.g. single-end reads) + -1 [ --mates1 ] arg File containing the #1 mates + -2 [ --mates2 ] arg File containing the #2 mates + + +basic options: + -v [ --version ] print version string + -h [ --help ] produce help message + -o [ --output ] arg Output quantification directory. + --seqBias Perform sequence-specific bias + correction. + --gcBias [beta for single-end reads] Perform + fragment GC bias correction. + --posBias Perform positional bias correction. + -p [ --threads ] arg (=16) The number of threads to use + concurrently. + --incompatPrior arg (=0) This option sets the prior probability + that an alignment that disagrees with + the specified library type (--libType) + results from the true fragment origin. + Setting this to 0 specifies that + alignments that disagree with the + library type should be "impossible", + while setting it to 1 says that + alignments that disagree with the + library type are no less likely than + those that do + -g [ --geneMap ] arg File containing a mapping of + transcripts to genes. If this file is + provided salmon will output both + quant.sf and quant.genes.sf files, + where the latter contains aggregated + gene-level abundance estimates. The + transcript to gene mapping should be + provided as either a GTF file, or a in + a simple tab-delimited format where + each line contains the name of a + transcript and the gene to which it + belongs separated by a tab. The + extension of the file is used to + determine how the file should be + parsed. Files ending in '.gtf', '.gff' + or '.gff3' are assumed to be in GTF + format; files with any other extension + are assumed to be in the simple format. + In GTF / GFF format, the + "transcript_id" is assumed to contain + the transcript identifier and the + "gene_id" is assumed to contain the + corresponding gene identifier. + --auxTargetFile arg A file containing a list of "auxiliary" + targets. These are valid targets + (i.e., not decoys) to which fragments + are allowed to map and be assigned, and + which will be quantified, but for which + auxiliary models like sequence-specific + and fragment-GC bias correction should + not be applied. + --meta If you're using Salmon on a metagenomic + dataset, consider setting this flag to + disable parts of the abundance + estimation model that make less sense + for metagenomic data. + + +options specific to mapping mode: + --discardOrphansQuasi [selective-alignment mode only] : + Discard orphan mappings in + selective-alignment mode. If this flag + is passed then only paired mappings + will be considered toward + quantification estimates. The default + behavior is to consider orphan mappings + if no valid paired mappings exist. + This flag is independent of the option + to write the orphaned mappings to file + (--writeOrphanLinks). + --validateMappings [*deprecated* (no effect; + selective-alignment is the default)] + --consensusSlack arg (=0.349999994) [selective-alignment mode only] : The + amount of slack allowed in the + selective-alignment filtering + mechanism. If this is set to a + fraction, X, greater than 0 (and in + [0,1)), then uniMEM chains with scores + below (100 * X)% of the best chain + score for a read, and read pairs with a + sum of chain scores below (100 * X)% of + the best chain score for a read pair + will be discounted as a mapping + candidates. The default value of this + option is 0.35. + --preMergeChainSubThresh arg (=0.75) [selective-alignment mode only] : The + threshold of sub-optimal chains, + compared to the best chain on a given + target, that will be retained and + passed to the next phase of mapping. + Specifically, if the best chain for a + read (or read-end in paired-end mode) + to target t has score X_t, then all + chains for this read with score >= X_t + * preMergeChainSubThresh will be + retained and passed to subsequent + mapping phases. This value must be in + the range [0, 1]. + --postMergeChainSubThresh arg (=0.90000000000000002) + [selective-alignment mode only] : The + threshold of sub-optimal chain pairs, + compared to the best chain pair on a + given target, that will be retained and + passed to the next phase of mapping. + This is different than + preMergeChainSubThresh, because this is + applied to pairs of chains (from the + ends of paired-end reads) after merging + (i.e. after checking concordancy + constraints etc.). Specifically, if + the best chain pair to target t has + score X_t, then all chain pairs for + this read pair with score >= X_t * + postMergeChainSubThresh will be + retained and passed to subsequent + mapping phases. This value must be in + the range [0, 1]. Note: This option is + only meaningful for paired-end + libraries, and is ignored for + single-end libraries. + --orphanChainSubThresh arg (=0.94999999999999996) + [selective-alignment mode only] : This + threshold sets a global sub-optimality + threshold for chains corresponding to + orphan mappings. That is, if the + merging procedure results in no + concordant mappings then only orphan + mappings with a chain score >= + orphanChainSubThresh * bestChainScore + will be retained and passed to + subsequent mapping phases. This value + must be in the range [0, 1]. Note: This + option is only meaningful for + paired-end libraries, and is ignored + for single-end libraries. + --scoreExp arg (=1) [selective-alignment mode only] : The + factor by which sub-optimal alignment + scores are downweighted to produce a + probability. If the best alignment + score for the current read is S, and + the score for a particular alignment is + w, then the probability will be + computed porportional to exp( - + scoreExp * (S-w) ). + --minScoreFraction arg [selective-alignment mode only] : The + fraction of the optimal possible + alignment score that a mapping must + achieve in order to be considered + "valid" --- should be in (0,1]. + Salmon Default 0.65 and Alevin Default + 0.87 + --mismatchSeedSkip arg (=3) [selective-alignment mode only] : After + a k-mer hit is extended to a uni-MEM, + the uni-MEM extension can terminate for + one of 3 reasons; the end of the read, + the end of the unitig, or a mismatch. + If the extension ends because of a + mismatch, this is likely the result of + a sequencing error. To avoid looking + up many k-mers that will likely fail to + be located in the index, the search + procedure skips by a factor of + mismatchSeedSkip until it either (1) + finds another match or (2) is k-bases + past the mismatch position. This value + controls that skip length. A smaller + value can increase sensitivity, while a + larger value can speed up seeding. + --disableChainingHeuristic [selective-alignment mode only] : By + default, the heuristic of (Li 2018) is + implemented, which terminates the + chaining DP once a given number of + valid backpointers are found. This + speeds up the seed (MEM) chaining step, + but may result in sub-optimal chains in + complex situations (e.g. sequences with + many repeats and overlapping repeats). + Passing this flag will disable the + chaining heuristic, and perform the + full chaining dynamic program, + guaranteeing the optimal chain is found + in this step. + --decoyThreshold arg (=1) [selective-alignment mode only] : For + an alignemnt to an annotated transcript + to be considered invalid, it must have + an alignment score < (decoyThreshold * + bestDecoyScore). A value of 1.0 means + that any alignment strictly worse than + the best decoy alignment will be + discarded. A smaller value will allow + reads to be allocated to transcripts + even if they strictly align better to + the decoy sequence. + --ma arg (=2) [selective-alignment mode only] : The + value given to a match between read and + reference nucleotides in an alignment. + --mp arg (=-4) [selective-alignment mode only] : The + value given to a mis-match between read + and reference nucleotides in an + alignment. + --go arg (=6) [selective-alignment mode only] : The + value given to a gap opening in an + alignment. + --ge arg (=2) [selective-alignment mode only] : The + value given to a gap extension in an + alignment. + --bandwidth arg (=15) [selective-alignment mode only] : The + value used for the bandwidth passed to + ksw2. A smaller bandwidth can make the + alignment verification run more + quickly, but could possibly miss valid + alignments. + --allowDovetail [selective-alignment mode only] : allow + dovetailing mappings. + --recoverOrphans [selective-alignment mode only] : + Attempt to recover the mates of + orphaned reads. This uses edlib for + orphan recovery, and so introduces some + computational overhead, but it can + improve sensitivity. + --mimicBT2 [selective-alignment mode only] : Set + flags to mimic parameters similar to + Bowtie2 with --no-discordant and + --no-mixed flags. This increases + disallows dovetailing reads, and + discards orphans. Note, this does not + impose the very strict parameters + assumed by RSEM+Bowtie2, like gapless + alignments. For that behavior, use the + --mimiStrictBT2 flag below. + --mimicStrictBT2 [selective-alignment mode only] : Set + flags to mimic the very strict + parameters used by RSEM+Bowtie2. This + increases --minScoreFraction to 0.8, + disallows dovetailing reads, discards + orphans, and disallows gaps in + alignments. + --softclip [selective-alignment mode only + (experimental)] : Allos soft-clipping + of reads during selective-alignment. If + this option is provided, then regions + at the beginning or end of the read can + be withheld from alignment without any + effect on the resulting score (i.e. + neither adding nor removing from the + score). This will drastically reduce + the penalty if there are mismatches at + the beginning or end of the read due to + e.g. low-quality bases or adapters. + NOTE: Even with soft-clipping enabled, + the read must still achieve a score of + at least minScoreFraction * maximum + achievable score, where the maximum + achievable score is computed based on + the full (un-clipped) read length. + --softclipOverhangs [selective-alignment mode only] : Allow + soft-clipping of reads that overhang + the beginning or ends of the + transcript. In this case, the + overhaning section of the read will + simply be unaligned, and will not + contribute or detract from the + alignment score. The default policy is + to force an end-to-end alignment of the + entire read, so that overhanings will + result in some deletion of nucleotides + from the read. + --fullLengthAlignment [selective-alignment mode only] : + Perform selective alignment over the + full length of the read, beginning from + the (approximate) initial mapping + location and using extension alignment. + This is in contrast with the default + behavior which is to only perform + alignment between the MEMs in the + optimal chain (and before the first and + after the last MEM if applicable). The + default strategy forces the MEMs to + belong to the alignment, but has the + benefit that it can discover indels + prior to the first hit shared between + the read and reference. Except in very + rare circumstances, the default mode + should be more accurate. + --hardFilter [selective-alignemnt mode only] : + Instead of weighting mappings by their + alignment score, this flag will discard + any mappings with sub-optimal alignment + score. The default option of + soft-filtering (i.e. weighting mappings + by their alignment score) usually + yields slightly more accurate abundance + estimates but this flag may be + desirable if you want more accurate + 'naive' equivalence classes, rather + than range factorized equivalence + classes. + --minAlnProb arg (=1.0000000000000001e-05) + [selective-alignment mode only] : Any + mapping whose alignment probability (as + computed by P(aln) = exp(-scoreExp * + difference from best mapping score) is + less than minAlnProb will not be + considered as a valid alignment for + this read. The goal of this flag is to + remove very low probability alignments + that are unlikely to have any + non-trivial effect on the final + quantifications. Filtering such + alignments reduces the number of + variables that need to be considered + and can result in slightly faster + inference and 'cleaner' equivalence + classes. + -z [ --writeMappings ] [=arg(=-)] If this option is provided, then the + selective-alignment results will be + written out in SAM-compatible format. + By default, output will be directed to + stdout, but an alternative file name + can be provided instead. + --writeQualities This flag only has meaning if mappings + are being written (with + --writeMappings/-z). If this flag is + provided, then the output SAM file will + contain quality strings as well as read + sequences. Note that this can greatly + increase the size of the output file. + --hitFilterPolicy arg (=AFTER) [selective-alignment mode only] : + Determines the policy by which hits are + filtered in selective alignment. + Filtering hits after chaining (the + default) is more sensitive, but more + computationally intensive, because it + performs the chaining dynamic program + for all hits. Filtering before + chaining is faster, but some true hits + may be missed. The options are BEFORE, + AFTER, BOTH and NONE. + + +advanced options: + --alternativeInitMode [Experimental]: Use an alternative + strategy (rather than simple + interpolation between) the online and + uniform abundance estimates to + initialize the EM / VBEM algorithm. + --auxDir arg (=aux_info) The sub-directory of the quantification + directory where auxiliary information + e.g. bootstraps, bias parameters, etc. + will be written. + --skipQuant Skip performing the actual transcript + quantification (including any Gibbs + sampling or bootstrapping). + --dumpEq Dump the simple equivalence class + counts that were computed during + mapping or alignment. + -d [ --dumpEqWeights ] Dump conditional probabilities + associated with transcripts when + equivalence class information is being + dumped to file. Note, this will dump + the factorization that is actually used + by salmon's offline phase for + inference. If you are using + range-factorized equivalence classes + (the default) then the same transcript + set may appear multiple times with + different associated conditional + probabilities. + --minAssignedFrags arg (=10) The minimum number of fragments that + must be assigned to the transcriptome + for quantification to proceed. + --reduceGCMemory If this option is selected, a more + memory efficient (but slightly slower) + representation is used to compute + fragment GC content. Enabling this will + reduce memory usage, but can also + reduce speed. However, the results + themselves will remain the same. + --biasSpeedSamp arg (=5) The value at which the fragment length + PMF is down-sampled when evaluating + sequence-specific & GC fragment bias. + Larger values speed up effective length + correction, but may decrease the + fidelity of bias modeling results. + --fldMax arg (=1000) The maximum fragment length to consider + when building the empirical + distribution + --fldMean arg (=250) The mean used in the fragment length + distribution prior + --fldSD arg (=25) The standard deviation used in the + fragment length distribution prior + -f [ --forgettingFactor ] arg (=0.65000000000000002) + The forgetting factor used in the + online learning schedule. A smaller + value results in quicker learning, but + higher variance and may be unstable. A + larger value results in slower learning + but may be more stable. Value should + be in the interval (0.5, 1.0]. + --initUniform initialize the offline inference with + uniform parameters, rather than seeding + with online parameters. + --maxOccsPerHit arg (=1000) When collecting "hits" (MEMs), hits + having more than maxOccsPerHit + occurrences won't be considered. + -w [ --maxReadOcc ] arg (=200) Reads "mapping" to more than this many + places won't be considered. + --maxRecoverReadOcc arg (=2500) Relevant for alevin with '--sketch' + mode only: if a read has valid seed + matches, but no read has matches + leading to fewer than "maxReadOcc" + mappings, then try to recover mappings + for this read as long as there are + fewer than "maxRecoverReadOcc" + mappings. + --noLengthCorrection [experimental] : Entirely disables + length correction when estimating the + abundance of transcripts. This option + can be used with protocols where one + expects that fragments derive from + their underlying targets without regard + to that target's length (e.g. QuantSeq) + --noEffectiveLengthCorrection Disables effective length correction + when computing the probability that a + fragment was generated from a + transcript. If this flag is passed in, + the fragment length distribution is not + taken into account when computing this + probability. + --noSingleFragProb Disables the estimation of an + associated fragment length probability + for single-end reads or for orphaned + mappings in paired-end libraries. The + default behavior is to consider the + probability of all possible fragment + lengths associated with the retained + mapping. Enabling this flag (i.e. + turning this default behavior off) will + simply not attempt to estimate a + fragment length probability in such + cases. + --noFragLengthDist [experimental] : Don't consider + concordance with the learned fragment + length distribution when trying to + determine the probability that a + fragment has originated from a + specified location. Normally, + Fragments with unlikely lengths will be + assigned a smaller relative probability + than those with more likely lengths. + When this flag is passed in, the + observed fragment length has no effect + on that fragment's a priori + probability. + --noBiasLengthThreshold [experimental] : If this option is + enabled, then no (lower) threshold will + be set on how short bias correction can + make effective lengths. This can + increase the precision of bias + correction, but harm robustness. The + default correction applies a threshold. + --numBiasSamples arg (=2000000) Number of fragment mappings to use when + learning the sequence-specific bias + model. + --numAuxModelSamples arg (=5000000) The first are used + to train the auxiliary model parameters + (e.g. fragment length distribution, + bias, etc.). After ther first + observations the + auxiliary model parameters will be + assumed to have converged and will be + fixed. + --numPreAuxModelSamples arg (=5000) The first will + have their assignment likelihoods and + contributions to the transcript + abundances computed without applying + any auxiliary models. The purpose of + ignoring the auxiliary models for the + first + observations is to avoid applying these + models before their parameters have + been learned sufficiently well. + --useEM Use the traditional EM algorithm for + optimization in the batch passes. + --useVBOpt Use the Variational Bayesian EM + [default] + --rangeFactorizationBins arg (=4) Factorizes the likelihood used in + quantification by adopting a new notion + of equivalence classes based on the + conditional probabilities with which + fragments are generated from different + transcripts. This is a more + fine-grained factorization than the + normal rich equivalence classes. The + default value (4) corresponds to the + default used in Zakeri et al. 2017 + (doi: 10.1093/bioinformatics/btx262), + and larger values imply a more + fine-grained factorization. If range + factorization is enabled, a common + value to select for this parameter is + 4. A value of 0 signifies the use of + basic rich equivalence classes. + --numGibbsSamples arg (=0) Number of Gibbs sampling rounds to + perform. + --noGammaDraw This switch will disable drawing + transcript fractions from a Gamma + distribution during Gibbs sampling. In + this case the sampler does not account + for shot-noise, but only assignment + ambiguity + --numBootstraps arg (=0) Number of bootstrap samples to + generate. Note: This is mutually + exclusive with Gibbs sampling. + --bootstrapReproject This switch will learn the parameter + distribution from the bootstrapped + counts for each sample, but will + reproject those parameters onto the + original equivalence class counts. + --thinningFactor arg (=16) Number of steps to discard for every + sample kept from the Gibbs chain. The + larger this number, the less chance + that subsequent samples are + auto-correlated, but the slower + sampling becomes. + -q [ --quiet ] Be quiet while doing quantification + (don't write informative output to the + console unless something goes wrong). + --perTranscriptPrior The prior (either the default or the + argument provided via --vbPrior) will + be interpreted as a transcript-level + prior (i.e. each transcript will be + given a prior read count of this value) + --perNucleotidePrior The prior (either the default or the + argument provided via --vbPrior) will + be interpreted as a nucleotide-level + prior (i.e. each nucleotide will be + given a prior read count of this value) + --sigDigits arg (=3) The number of significant digits to + write when outputting the + EffectiveLength and NumReads columns + --vbPrior arg (=0.01) The prior that will be used in the VBEM + algorithm. This is interpreted as a + per-transcript prior, unless the + --perNucleotidePrior flag is also + given. If the --perNucleotidePrior + flag is given, this is used as a + nucleotide-level prior. If the default + is used, it will be divided by 1000 + before being used as a nucleotide-level + prior, i.e. the default per-nucleotide + prior will be 1e-5. + --writeOrphanLinks Write the transcripts that are linked + by orphaned reads. + --writeUnmappedNames Write the names of un-mapped reads to + the file unmapped_names.txt in the + auxiliary directory. + + +```bash +salmon quant --help-alignment +``` +Quant +========== +Perform dual-phase, alignment-based estimation of +transcript abundance from RNA-seq reads + +salmon quant options: + + +alignment input options: + --discardOrphans [alignment-based mode only] : Discard + orphan alignments in the input . If + this flag is passed, then only paired + alignments will be considered toward + quantification estimates. The default + behavior is to consider orphan + alignments if no valid paired mappings + exist. + -l [ --libType ] arg Format string describing the library + type + -a [ --alignments ] arg input alignment (BAM) file(s). + -e [ --eqclasses ] arg input salmon weighted equivalence class + file. + -t [ --targets ] arg FASTA format file containing target + transcripts. + --ont use alignment model for Oxford Nanopore + long reads + + +basic options: + -v [ --version ] print version string + -h [ --help ] produce help message + -o [ --output ] arg Output quantification directory. + --seqBias Perform sequence-specific bias + correction. + --gcBias [beta for single-end reads] Perform + fragment GC bias correction. + --posBias Perform positional bias correction. + -p [ --threads ] arg (=8) The number of threads to use + concurrently. + --incompatPrior arg (=0) This option sets the prior probability + that an alignment that disagrees with + the specified library type (--libType) + results from the true fragment origin. + Setting this to 0 specifies that + alignments that disagree with the + library type should be "impossible", + while setting it to 1 says that + alignments that disagree with the + library type are no less likely than + those that do + -g [ --geneMap ] arg File containing a mapping of + transcripts to genes. If this file is + provided salmon will output both + quant.sf and quant.genes.sf files, + where the latter contains aggregated + gene-level abundance estimates. The + transcript to gene mapping should be + provided as either a GTF file, or a in + a simple tab-delimited format where + each line contains the name of a + transcript and the gene to which it + belongs separated by a tab. The + extension of the file is used to + determine how the file should be + parsed. Files ending in '.gtf', '.gff' + or '.gff3' are assumed to be in GTF + format; files with any other extension + are assumed to be in the simple format. + In GTF / GFF format, the + "transcript_id" is assumed to contain + the transcript identifier and the + "gene_id" is assumed to contain the + corresponding gene identifier. + --auxTargetFile arg A file containing a list of "auxiliary" + targets. These are valid targets + (i.e., not decoys) to which fragments + are allowed to map and be assigned, and + which will be quantified, but for which + auxiliary models like sequence-specific + and fragment-GC bias correction should + not be applied. + --meta If you're using Salmon on a metagenomic + dataset, consider setting this flag to + disable parts of the abundance + estimation model that make less sense + for metagenomic data. + + +alignment-specific options: + --noErrorModel Turn off the alignment error model, + which takes into account the the + observed frequency of different types + of mismatches / indels when computing + the likelihood of a given alignment. + Turning this off can speed up + alignment-based salmon, but can harm + quantification accuracy. + --numErrorBins arg (=6) The number of bins into which to divide + each read when learning and applying + the error model. For example, a value + of 10 would mean that effectively, a + separate error model is leared and + applied to each 10th of the read, while + a value of 3 would mean that a separate + error model is applied to the read + beginning (first third), middle (second + third) and end (final third). + -s [ --sampleOut ] Write a "postSample.bam" file in the + output directory that will sample the + input alignments according to the + estimated transcript abundances. If + you're going to perform downstream + analysis of the alignments with tools + which don't, themselves, take fragment + assignment ambiguity into account, you + should use this output. + -u [ --sampleUnaligned ] In addition to sampling the aligned + reads, also write the un-aligned reads + to "postSample.bam". + --gencode This flag will expect the input + transcript fasta to be in GENCODE + format, and will split the transcript + name at the first '|' character. These + reduced names will be used in the + output and when looking for these + transcripts in a gene to transcript + GTF. + --scoreExp arg (=1) The factor by which sub-optimal + alignment scores are downweighted to + produce a probability. If the best + alignment score for the current read is + S, and the score for a particular + alignment is w, then the probability + will be computed porportional to exp( - + scoreExp * (S-w) ). NOTE: This flag + only has an effect if you are parsing + alignments produced by salmon itself + (i.e. pufferfish or RapMap in + selective-alignment mode). + --mappingCacheMemoryLimit arg (=2000000) + If the file contained fewer than this + many mapped reads, then just keep the + data in memory for subsequent rounds of + inference. Obviously, this value should + not be too large if you wish to keep a + low memory usage, but setting it large + enough to accommodate all of the mapped + read can substantially speed up + inference on "small" files that contain + only a few million reads. + + +advanced options: + --alternativeInitMode [Experimental]: Use an alternative + strategy (rather than simple + interpolation between) the online and + uniform abundance estimates to + initialize the EM / VBEM algorithm. + --auxDir arg (=aux_info) The sub-directory of the quantification + directory where auxiliary information + e.g. bootstraps, bias parameters, etc. + will be written. + --skipQuant Skip performing the actual transcript + quantification (including any Gibbs + sampling or bootstrapping). + --dumpEq Dump the simple equivalence class + counts that were computed during + mapping or alignment. + -d [ --dumpEqWeights ] Dump conditional probabilities + associated with transcripts when + equivalence class information is being + dumped to file. Note, this will dump + the factorization that is actually used + by salmon's offline phase for + inference. If you are using + range-factorized equivalence classes + (the default) then the same transcript + set may appear multiple times with + different associated conditional + probabilities. + --minAssignedFrags arg (=10) The minimum number of fragments that + must be assigned to the transcriptome + for quantification to proceed. + --reduceGCMemory If this option is selected, a more + memory efficient (but slightly slower) + representation is used to compute + fragment GC content. Enabling this will + reduce memory usage, but can also + reduce speed. However, the results + themselves will remain the same. + --biasSpeedSamp arg (=5) The value at which the fragment length + PMF is down-sampled when evaluating + sequence-specific & GC fragment bias. + Larger values speed up effective length + correction, but may decrease the + fidelity of bias modeling results. + --fldMax arg (=1000) The maximum fragment length to consider + when building the empirical + distribution + --fldMean arg (=250) The mean used in the fragment length + distribution prior + --fldSD arg (=25) The standard deviation used in the + fragment length distribution prior + -f [ --forgettingFactor ] arg (=0.65000000000000002) + The forgetting factor used in the + online learning schedule. A smaller + value results in quicker learning, but + higher variance and may be unstable. A + larger value results in slower learning + but may be more stable. Value should + be in the interval (0.5, 1.0]. + --initUniform initialize the offline inference with + uniform parameters, rather than seeding + with online parameters. + --maxOccsPerHit arg (=1000) When collecting "hits" (MEMs), hits + having more than maxOccsPerHit + occurrences won't be considered. + -w [ --maxReadOcc ] arg (=200) Reads "mapping" to more than this many + places won't be considered. + --maxRecoverReadOcc arg (=2500) Relevant for alevin with '--sketch' + mode only: if a read has valid seed + matches, but no read has matches + leading to fewer than "maxReadOcc" + mappings, then try to recover mappings + for this read as long as there are + fewer than "maxRecoverReadOcc" + mappings. + --noLengthCorrection [experimental] : Entirely disables + length correction when estimating the + abundance of transcripts. This option + can be used with protocols where one + expects that fragments derive from + their underlying targets without regard + to that target's length (e.g. QuantSeq) + --noEffectiveLengthCorrection Disables effective length correction + when computing the probability that a + fragment was generated from a + transcript. If this flag is passed in, + the fragment length distribution is not + taken into account when computing this + probability. + --noSingleFragProb Disables the estimation of an + associated fragment length probability + for single-end reads or for orphaned + mappings in paired-end libraries. The + default behavior is to consider the + probability of all possible fragment + lengths associated with the retained + mapping. Enabling this flag (i.e. + turning this default behavior off) will + simply not attempt to estimate a + fragment length probability in such + cases. + --noFragLengthDist [experimental] : Don't consider + concordance with the learned fragment + length distribution when trying to + determine the probability that a + fragment has originated from a + specified location. Normally, + Fragments with unlikely lengths will be + assigned a smaller relative probability + than those with more likely lengths. + When this flag is passed in, the + observed fragment length has no effect + on that fragment's a priori + probability. + --noBiasLengthThreshold [experimental] : If this option is + enabled, then no (lower) threshold will + be set on how short bias correction can + make effective lengths. This can + increase the precision of bias + correction, but harm robustness. The + default correction applies a threshold. + --numBiasSamples arg (=2000000) Number of fragment mappings to use when + learning the sequence-specific bias + model. + --numAuxModelSamples arg (=5000000) The first are used + to train the auxiliary model parameters + (e.g. fragment length distribution, + bias, etc.). After ther first + observations the + auxiliary model parameters will be + assumed to have converged and will be + fixed. + --numPreAuxModelSamples arg (=5000) The first will + have their assignment likelihoods and + contributions to the transcript + abundances computed without applying + any auxiliary models. The purpose of + ignoring the auxiliary models for the + first + observations is to avoid applying these + models before their parameters have + been learned sufficiently well. + --useEM Use the traditional EM algorithm for + optimization in the batch passes. + --useVBOpt Use the Variational Bayesian EM + [default] + --rangeFactorizationBins arg (=4) Factorizes the likelihood used in + quantification by adopting a new notion + of equivalence classes based on the + conditional probabilities with which + fragments are generated from different + transcripts. This is a more + fine-grained factorization than the + normal rich equivalence classes. The + default value (4) corresponds to the + default used in Zakeri et al. 2017 + (doi: 10.1093/bioinformatics/btx262), + and larger values imply a more + fine-grained factorization. If range + factorization is enabled, a common + value to select for this parameter is + 4. A value of 0 signifies the use of + basic rich equivalence classes. + --numGibbsSamples arg (=0) Number of Gibbs sampling rounds to + perform. + --noGammaDraw This switch will disable drawing + transcript fractions from a Gamma + distribution during Gibbs sampling. In + this case the sampler does not account + for shot-noise, but only assignment + ambiguity + --numBootstraps arg (=0) Number of bootstrap samples to + generate. Note: This is mutually + exclusive with Gibbs sampling. + --bootstrapReproject This switch will learn the parameter + distribution from the bootstrapped + counts for each sample, but will + reproject those parameters onto the + original equivalence class counts. + --thinningFactor arg (=16) Number of steps to discard for every + sample kept from the Gibbs chain. The + larger this number, the less chance + that subsequent samples are + auto-correlated, but the slower + sampling becomes. + -q [ --quiet ] Be quiet while doing quantification + (don't write informative output to the + console unless something goes wrong). + --perTranscriptPrior The prior (either the default or the + argument provided via --vbPrior) will + be interpreted as a transcript-level + prior (i.e. each transcript will be + given a prior read count of this value) + --perNucleotidePrior The prior (either the default or the + argument provided via --vbPrior) will + be interpreted as a nucleotide-level + prior (i.e. each nucleotide will be + given a prior read count of this value) + --sigDigits arg (=3) The number of significant digits to + write when outputting the + EffectiveLength and NumReads columns + --vbPrior arg (=0.01) The prior that will be used in the VBEM + algorithm. This is interpreted as a + per-transcript prior, unless the + --perNucleotidePrior flag is also + given. If the --perNucleotidePrior + flag is given, this is used as a + nucleotide-level prior. If the default + is used, it will be divided by 1000 + before being used as a nucleotide-level + prior, i.e. the default per-nucleotide + prior will be 1e-5. + --writeOrphanLinks Write the transcripts that are linked + by orphaned reads. + --writeUnmappedNames Write the names of un-mapped reads to + the file unmapped_names.txt in the + auxiliary directory. \ No newline at end of file diff --git a/src/salmon/salmon_quant/script.sh b/src/salmon/salmon_quant/script.sh new file mode 100644 index 00000000..4c9f69d5 --- /dev/null +++ b/src/salmon/salmon_quant/script.sh @@ -0,0 +1,152 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +## VIASH START +## VIASH END + +[[ "$par_discard_orphans" == "false" ]] && unset par_discard_orphans +[[ "$par_ont" == "false" ]] && unset par_ont +[[ "$par_seq_bias" == "false" ]] && unset par_seq_bias +[[ "$par_gc_bias" == "false" ]] && unset par_gc_bias +[[ "$par_pos_bias" == "false" ]] && unset par_pos_bias +[[ "$par_meta" == "false" ]] && unset par_meta +[[ 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${alignment[*]}} \ + ${par_discard_orphans:+--discardOrphans} \ + ${par_eqclasses:+-e "${par_eqclasses}"} \ + ${par_targets:+-t "${par_targets}"} \ + ${par_ont:+--ont} \ + ${par_output:+-o "${par_output}"} \ + ${par_seq_bias:+--seqBias} \ + ${par_gc_bias:+--gcBias} \ + ${par_pos_bias:+--posBias} \ + ${meta_cpus:+-p "${meta_cpus}"} \ + ${par_incompat_prior:+--incompatPrior "${par_incompat_prior}"} \ + ${par_gene_map:+-g "${par_gene_map}"} \ + ${par_aux_target_file:+--auxTargetFile "${par_aux_target_file}"} \ + ${par_meta:+--meta} \ + ${par_score_exp:+--scoreExp "${par_score_exp}"} \ + ${par_discard_orphans_quasi:+--discardOrphansQuasi} \ + ${par_consensus_slack:+--consensusSlack "${par_consensus_slack}"} \ + ${par_pre_merge_chain_sub_thresh:+--preMergeChainSubThresh "${par_pre_merge_chain_sub_thresh}"} \ + ${par_post_merge_chain_sub_thresh:+--postMergeChainSubThresh "${par_post_merge_chain_sub_thresh}"} \ + ${par_orphan_chain_sub_thresh:+--orphanChainSubThresh 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${par_write_qualities:+--writeQualities} \ + ${par_hit_filter_policy:+--hitFilterPolicy "${par_hit_filter_policy}"} \ + ${par_alternative_init_mode:+--alternativeInitMode} \ + ${par_aux_dir:+--auxDir "${par_aux_dir}"} \ + ${par_skip_quant:+--skipQuant} \ + ${par_dump_eq:+--dumpEq} \ + ${par_dump_eq_weights:+-d "${par_dump_eq_weights}"} \ + ${par_min_assigned_frags:+--minAssignedFrags "${par_min_assigned_frags}"} \ + ${par_reduce_GC_memory:+--reduceGCMemory} \ + ${par_bias_speed_samp:+--biasSpeedSamp "${par_bias_speed_samp}"} \ + ${par_fld_max:+--fldMax "${par_fld_max}"} \ + ${par_fld_mean:+--fldMean "${par_fld_mean}"} \ + ${par_fld_SD:+--fldSD "${par_fld_SD}"} \ + ${par_forgetting_factor:+-f "${par_forgetting_factor}"} \ + ${par_init_uniform:+--initUniform} \ + ${par_max_occs_per_hit:+--maxOccsPerHit "${par_max_occs_per_hit}"} \ + ${par_max_read_occ:+-w "${par_max_read_occ}"} \ + ${par_no_length_correction:+--noLengthCorrection} \ + ${par_no_effective_length_correction:+--noEffectiveLengthCorrection} \ + ${par_no_single_frag_prob:+--noSingleFragProb} \ + ${par_no_frag_length_dist:+--noFragLengthDist} \ + ${par_no_bias_length_threshold:+--noBiasLengthThreshold} \ + ${par_num_bias_samples:+--numBiasSamples "${par_num_bias_samples}"} \ + ${par_num_aux_model_samples:+--numAuxModelSamples "${par_num_aux_model_samples}"} \ + ${par_num_pre_aux_model_samples:+--numPreAuxModelSamples "${par_num_pre_aux_model_samples}"} \ + ${par_useEM:+--useEM} \ + ${par_useVBOpt:+--useVBOpt} \ + ${par_range_factorization_bins:+--rangeFactorizationBins "${par_range_factorization_bins}"} \ + ${par_num_Gibbs_samples:+--numGibbsSamples "${par_num_Gibbs_samples}"} \ + ${par_no_Gamma_draw:+--noGammaDraw} \ + ${par_num_bootstraps:+--numBootstraps "${par_num_bootstraps}"} \ + ${par_bootstrap_reproject:+--bootstrapReproject} \ + ${par_thinning_factor:+--thinningFactor "${par_thinning_factor}"} \ + ${par_quiet:+--quiet} \ + ${par_per_transcript_prior:+--perTranscriptPrior} \ + ${par_per_nucleotide_prior:+--perNucleotidePrior} \ + ${par_sig_digits:+--sigDigits "${par_sig_digits}"} \ + ${par_vb_prior:+--vbPrior "${par_vb_prior}"} \ + ${par_write_orphan_links:+--writeOrphanLinks} \ + ${par_write_unmapped_names:+--writeUnmappedNames} \ + ${par_no_error_model:+--noErrorModel} \ + ${par_num_error_bins:+--numErrorBins "${par_num_error_bins}"} \ + ${par_sample_out:+--sampleOut} \ + ${par_sample_unaligned:+--sampleUnaligned} \ + ${par_gencode:+--gencode} \ + ${par_mapping_cache_memory_limit:+--mappingCacheMemoryLimit "${par_mapping_cache_memory_limit}"} + +if [ -f "$par_output/quant.sf" ]; then + mv $par_output/quant.sf $par_quant_results +else + echo "Quantification file not generated!" +fi \ No newline at end of file diff --git a/src/salmon/salmon_quant/test.sh b/src/salmon/salmon_quant/test.sh new file mode 100644 index 00000000..54953a87 --- /dev/null +++ b/src/salmon/salmon_quant/test.sh @@ -0,0 +1,156 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +echo "===============================================================================" +echo "> Prepare test data" + +dir_in="test_data" +mkdir -p "$dir_in" + +cat > "$dir_in/transcriptome.fasta" <<'EOF' +>contig1 +AGCTCCAGATTCGCTCAGGCCCTTGATCATCAGTCGTCGTCGTCTTCGATTTGCCAGAGG +AGTTTAGATGAAGAATGTCAAGGATGTTCCTCCCTGCCCTCCCATCTAGCCAAGAACATT +TCCAAGAAGATAAAACTGTCACTGAGACAGGTCTGGATGCGCCCTAGGGGCAAATAGAGA +>contig2 +AGGCCTTTACCACATTGCTGCTGGCTATAGGAAGTCCCAGGTACTAGCCTGAAACAGCTG +ATATTTGGGGCTGTCACAGACAATATGGCCACCCCTTGGTCTTTATGCATGAAGATTATG +TAAAGGTTTTTATTAAAAAATATATATATATATATAAATGATCTAGATTATTTTCCTCTT +TCTGAAGTACTTTCTTAAAAAAATAAAATTAAATGTTTATAGTATTCCCGGT +EOF + +cat > "$dir_in/a_1.fq" <<'EOF' +@SEQ_ID1 +AGAATGTCAAGGATGTTCCTCC ++ +IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII +@SEQ_ID2 +ACCCGCAAGATTAGGCTCCGTA ++ +!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! +@SEQ_ID3 +CTCAGGCCCTTGATCATCAGTC ++ +IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII +EOF + +cat > "$dir_in/a_2.fq" <<'EOF' +@SEQ_ID1 +GGAGGAACATCCTTGACATTCT ++ +IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII +@SEQ_ID2 +GTGTACGGAGCCTAATCTTGCA ++ +!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! +@SEQ_ID3 +GACTGATGATCAAGGGCCTGAG ++ +IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII +EOF + +cat > "$dir_in/b_1.fq" <<'EOF' +@SEQ_ID1 +CTTTACCACATTGCTGCTGGCT ++ +IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII +@SEQ_ID2 +ATTAGGCTCCGTAACCCGCAAG ++ +!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! +@SEQ_ID3 +GCCACCCCTTGGTCTTTATGCA ++ +IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII +EOF + +cat > "$dir_in/b_2.fq" <<'EOF' +@SEQ_ID1 +AGCCAGCAGCAATGTGGTAAAG ++ +IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII +@SEQ_ID2 +CTTGCGGGTTACGGAGCCTAAT ++ +!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! +@SEQ_ID3 +TGCATAAAGACCAAGGGGTGGC ++ +IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII +EOF + +echo "===============================================================================" +echo "> Run salmon index" + +salmon index \ + --transcripts "$dir_in/transcriptome.fasta" \ + --index "$dir_in/index" \ + --kmerLen 11 + +echo "===============================================================================" +echo "> Run salmon quant for single-end reads" +"$meta_executable" \ + --lib_type "A" \ + --index "$dir_in/index" \ + --unmated_reads "$dir_in/a_1.fq" \ + --output "quant_se_results" \ + --quant_results "quant_se.sf" \ + --min_assigned_frags 1 + +echo ">> Checking output" +[ ! -d "quant_se_results" ] && echo "Output directory quant_se_results does not exist" && exit 1 +[ ! -f "quant_se.sf" ] && echo "Output file quant_se.sf does not exist!" && exit 1 +[ ! -s "quant_se.sf" ] && echo "Output file quant_se.sf is empty!" && exit 1 +grep -q "Name Length EffectiveLength TPM NumReads" "quant_se.sf" || (echo "Output file quant_se.sf does not have the right format!" && exit 1) +[ $(grep "contig1" "quant_se.sf" | cut -f 5) != '2.000' ] && echo "Number of reads mapping to contig1 does not match the expected value!" && exit 1 +[ $(grep "contig2" "quant_se.sf" | cut -f 5) != '0.000' ] && echo "Number of reads mapping to contig2 does not match the expected value!" && exit 1 +[ $(grep '"percent_mapped":' quant_se_results/aux_info/meta_info.json | cut -d':' -f 2) != '66.66666666666666,' ] && echo "Mapping rate does not match the expected value!" && exit 1 + +echo "===============================================================================" +echo "> Run salmon quant for paired-end reads" +"$meta_executable" \ + --lib_type "A" \ + --index "$dir_in/index" \ + --mates1 "$dir_in/a_1.fq" \ + --mates2 "$dir_in/a_2.fq" \ + --output "quant_pe_results" \ + --quant_results "quant_pe.sf" \ + --min_assigned_frags 1 + +echo ">> Checking output" +[ ! -d "quant_pe_results" ] && echo "Output directory quant_pe_results does not exist" && exit +[ ! -f "quant_pe.sf" ] && echo "Output file quant_pe.sf does not exist!" && exit 1 +[ ! -s "quant_pe.sf" ] && echo "Output file quant_pe.sf is empty!" && exit 1 +grep -q "Name Length EffectiveLength TPM NumReads" "quant_pe.sf" || (echo "Output file quant_pe.sf does not have the right format!" && exit 1) +[ $(grep "contig1" "quant_pe.sf" | cut -f 5) != '2.000' ] && echo "Number of reads mapping to contig1 does not match the expected value!" && exit 1 +[ $(grep "contig2" "quant_pe.sf" | cut -f 5) != '0.000' ] && echo "Number of reads mapping to contig2 does not match the expected value!" && exit 1 +[ $(grep '"percent_mapped":' quant_pe_results/aux_info/meta_info.json | cut -d':' -f 2) != '66.66666666666666,' ] && echo "Mapping rate does not match the expected value!" && exit 1 + +echo "===============================================================================" +echo "> Run salmon quant for paired-end reads with technical replicates" +"$meta_executable" \ + --lib_type "A" \ + --index "$dir_in/index" \ + --mates1 "$dir_in/a_1.fq;$dir_in/b_1.fq" \ + --mates2 "$dir_in/a_2.fq;$dir_in/b_2.fq" \ + --output "quant_pe_rep_results" \ + --quant_results "quant_pe_rep.sf" \ + --min_assigned_frags 1 + +echo ">> Checking output" +[ ! -d "quant_pe_rep_results" ] && echo "Output directory quant_pe_rep_results does not exist" && exit +[ ! -f "quant_pe_rep.sf" ] && echo "Output file quant_pe_rep.sf does not exist!" && exit 1 +[ ! -s "quant_pe_rep.sf" ] && echo "Output file quant_pe_rep.sf is empty!" && exit 1 +grep -q "Name Length EffectiveLength TPM NumReads" "quant_pe_rep.sf" || (echo "Output file quant_pe_rep.sf does not have the right format!" && exit 1) +[ $(grep "contig1" "quant_pe_rep.sf" | cut -f 5) != '2.000' ] && echo "Number of reads mapping to contig1 does not match the expected value!" && exit 1 +[ $(grep "contig2" "quant_pe_rep.sf" | cut -f 5) != '2.000' ] && echo "Number of reads mapping to contig2 does not match the expected value!" && exit 1 +[ $(grep '"percent_mapped":' quant_pe_rep_results/aux_info/meta_info.json | cut -d':' -f 2) != '66.66666666666666,' ] && echo "Mapping rate does not match the expected value!" && exit 1 + + +# TODO: check counts and mapping rates +# contig1 should have 2 reads, contig2 should have 2 reads +# mapping rate should be 66.6% + +echo "===============================================================================" +echo "> Test successful" \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_collate/config.vsh.yaml b/src/samtools/samtools_collate/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..669f4cdf --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_collate/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,94 @@ +name: samtools_collate +namespace: samtools +description: Shuffles and groups reads in SAM/BAM/CRAM files together by their names. +keywords: [collate, counts, bam, sam, cram] +links: + homepage: https://www.htslib.org/ + documentation: https://www.htslib.org/doc/samtools-icollate.html + repository: https://github.com/samtools/samtools +references: + doi: [10.1093/bioinformatics/btp352, 10.1093/gigascience/giab008] +license: MIT/Expat + +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + type: file + description: The input BAM file. + required: true + - name: --reference + type: file + description: Reference sequence FASTA FILE. + + - name: Outputs + arguments: + - name: --output + alternatives: -o + type: file + description: The output filename. + required: true + direction: output + + - name: Options + arguments: + - name: --uncompressed + alternatives: -u + type: boolean_true + description: Output uncompressed BAM. + - name: --fast + alternatives: -f + type: boolean_true + description: Fast mode, only primary alignments. + - name: --working_reads + alternatives: -r + type: integer + description: Working reads stored (for use with -f). + default: 10000 + - name: --compression + alternatives: -l + type: integer + description: Compression level. + default: 1 + - name: --nb_tmp_files + alternatives: -n + type: integer + description: Number of temporary files. + default: 64 + - name: --tmp_prefix + alternatives: -T + type: string + description: Write temporary files to PREFIX.nnnn.bam. + - name: --no_pg + type: boolean_true + description: Do not add a PG line. + - name: --input_fmt_option + type: string + description: Specify a single input file format option in the form of OPTION or OPTION=VALUE. + - name: --output_fmt + type: string + description: Specify output format (SAM, BAM, CRAM). + - name: --output_fmt_option + type: string + description: Specify a single output file format option in the form of OPTION or OPTION=VALUE. + + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/samtools:1.19.2--h50ea8bc_1 + setup: + - type: docker + run: | + samtools --version 2>&1 | grep -E '^(samtools|Using htslib)' | \ + sed 's#Using ##;s# \([0-9\.]*\)$#: \1#' > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow diff --git a/src/samtools/samtools_collate/help.txt b/src/samtools/samtools_collate/help.txt new file mode 100644 index 00000000..16190f4b --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_collate/help.txt @@ -0,0 +1,31 @@ +``` +samtools collate +``` +Usage: samtools collate [options...] [] + +Options: + -O Output to stdout + -o Output file name (use prefix if not set) + -u Uncompressed BAM output + -f Fast (only primary alignments) + -r Working reads stored (with -f) [10000] + -l INT Compression level [1] + -n INT Number of temporary files [64] + -T PREFIX + Write temporary files to PREFIX.nnnn.bam + --no-PG do not add a PG line + --input-fmt-option OPT[=VAL] + Specify a single input file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE + --output-fmt FORMAT[,OPT[=VAL]]... + Specify output format (SAM, BAM, CRAM) + --output-fmt-option OPT[=VAL] + Specify a single output file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE + --reference FILE + Reference sequence FASTA FILE [null] + -@, --threads INT + Number of additional threads to use [0] + --verbosity INT + Set level of verbosity + is required unless the -o or -O options are used. \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_collate/script.sh b/src/samtools/samtools_collate/script.sh new file mode 100644 index 00000000..25847a52 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_collate/script.sh @@ -0,0 +1,27 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +set -e + +[[ "$par_uncompressed" == "false" ]] && unset par_uncompressed +[[ "$par_fast" == "false" ]] && unset par_fast +[[ "$par_no_pg" == "false" ]] && unset par_no_pg + +samtools collate \ + "$par_input" \ + ${par_output:+-o "$par_output"} \ + ${par_reference:+-T "$par_reference"} \ + ${par_uncompressed:+-u} \ + ${par_fast:+-f} \ + ${par_working_reads:+-r "$par_working_reads"} \ + ${par_compression:+-l "$par_compression"} \ + ${par_nb_tmp_files:+-n "$par_nb_tmp_files"} \ + ${par_tmp_prefix:+-T "$par_tmp_prefix"} \ + ${par_no_pg:+-P} \ + ${par_input_fmt_option:+-O "$par_input_fmt_option"} \ + ${par_output_fmt:+-O "$par_output_fmt"} \ + ${par_output_fmt_option:+-O "$par_output_fmt_option"} + +exit 0 diff --git a/src/samtools/samtools_collate/test.sh b/src/samtools/samtools_collate/test.sh new file mode 100644 index 00000000..c5a2e6e6 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_collate/test.sh @@ -0,0 +1,67 @@ +#!/bin/bash + +test_dir="${meta_resources_dir}/test_data" +out_dir="${meta_resources_dir}/out" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 1: $meta_functionality_name" +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam" \ + --output "$out_dir/collated.bam" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$out_dir/collated.bam" ] && echo "File 'collated.bam' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$out_dir/collated.bam" ] && echo "File 'collated.bam' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff <(samtools view "$out_dir/collated.bam") \ + <(samtools view "$test_dir/collated.bam") || \ + (echo "Output file collated.bam does not match expected output" && exit 1) + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 2: $meta_functionality_name with --fast option" +"$meta_executable" \ + --fast \ + --input "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam" \ + --output "$out_dir/fast_collated.bam" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/fast_collated.bam" ] && echo "File 'fast_collated.bam' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/fast_collated.bam" ] && echo "File 'fast_collated.bam' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff <(samtools view "$test_dir/fast_collated.bam") \ + <(samtools view "$test_dir/fast_collated.bam") || \ + (echo "Output file fast_collated.bam does not match expected output" && exit 1) + + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 3: $meta_functionality_name with compression" +"$meta_executable" \ + --compression 8 \ + --input "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam" \ + --output "$out_dir/comp_collated.bam" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$out_dir/comp_collated.bam" ] && echo "File 'comp_collated.bam' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$out_dir/comp_collated.bam" ] && echo "File 'comp_collated.bam' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff <(samtools view "$out_dir/comp_collated.bam") \ + <(samtools view "$test_dir/comp_collated.bam") || \ + (echo "Output file comp_collated.bam does not match expected output" && exit 1) + +############################################################################################ + +echo ">>> All tests passed successfully." + +exit 0 diff --git a/src/samtools/samtools_collate/test_data/collated.bam b/src/samtools/samtools_collate/test_data/collated.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..f6d5eab99b0c728b4c1a1e49cf38b408a735d0f9 GIT binary patch literal 21343 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zcCq4>k1aaa|C`5(;(ZI;va`9lMdcw+%nT7WE7HR7(3DVM%4lD@U~AZ>mP3XxL~$)+ zm!1vTe)KPNt)-Z3BjtRlj*#*h)x9P|3+;pyc$fO6UieCe8>TPwt@jP6b8Q?KNSbUw zWuGueq^Auv8%ZDV2^-lU)m1&JV=dJ|?dPUeMrbI~1DoVQD7&d@sa$BlooO0V>%g2U zaUUR{s#MxJZA}NYODphd;^G$2XWAPKt2z^Cz=??>DMpJbk7hZP8-bOu>g03_dA||E z4@J+lc^irK``&lYl4O3q^35I@-nvH~mrF%QuCG{t5=rv`@Mz9s=NeWacGaQSou^%x zXul=cwglxXE+$YNaOCb3vz9C)!YRe^qfW&=bA}+Kk{=0#IeNM#*-8KP#?Rif%udR> z>@OZ))MYo%isBas+_|x_JKdrRMGBHf0{2lvon~cXfXoqHGR|VnAhgodB50!(_oCK} zdsz#vloGX&P3@dxRg9I6zQ2}mHCleuv5!m^Kx*_?&, ] + default: rc + - name: --fai_idx + type: file + description: | + Read/Write to specified index file (default file.fa.fai). + direction: output + example: file.fa.fai + - name: --gzi_idx + type: file + description: | + Read/Write to specified compressed file index (used with .gz files, default file.fa.gz.gzi). + direction: output + example: file.fa.gz.gzi + - name: --fastq + type: boolean_true + description: | + Read FASTQ files and output extracted sequences in FASTQ format. Same as using samtools fqidx. + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/samtools:1.19.2--h50ea8bc_1 + setup: + - type: docker + run: | + samtools --version 2>&1 | grep -E '^(samtools|Using htslib)' | \ + sed 's#Using ##;s# \([0-9\.]*\)$#: \1#' > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/help.txt b/src/samtools/samtools_faidx/help.txt new file mode 100644 index 00000000..89320c6f --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/help.txt @@ -0,0 +1,19 @@ +```sh +samtools faidx -h +``` +Usage: samtools faidx [ [...]] +Option: + -o, --output FILE Write FASTA to file. + -n, --length INT Length of FASTA sequence line. [60] + -c, --continue Continue after trying to retrieve missing region. + -r, --region-file FILE File of regions. Format is chr:from-to. One per line. + -i, --reverse-complement Reverse complement sequences. + --mark-strand TYPE Add strand indicator to sequence name + TYPE = rc for /rc on negative strand (default) + no for no strand indicator + sign for (+) / (-) + custom,, for custom indicator + --fai-idx FILE name of the index file (default file.fa.fai). + --gzi-idx FILE name of compressed file index (default file.fa.gz.gzi). + -f, --fastq File and index in FASTQ format. + -h, --help This message. \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/script.sh b/src/samtools/samtools_faidx/script.sh new file mode 100644 index 00000000..61502d5f --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/script.sh @@ -0,0 +1,24 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +set -e + +[[ "$par_continue" == "false" ]] && unset par_continue +[[ "$par_reverse_complement" == "false" ]] && unset par_reverse_complement +[[ "$par_fastq" == "false" ]] && unset par_fastq + +samtools faidx \ + "$par_input" \ + ${par_output:+-o "$par_output"} \ + ${par_length:+-n "$par_length"} \ + ${par_continue:+-c} \ + ${par_region_file:+-r "$par_region_file"} \ + ${par_reverse_complement:+-r} \ + ${par_mark_strand:+--mark-strand "$par_mark_strand"} \ + ${par_fai_idx:+--fai-idx "$par_fai_idx"} \ + ${par_gzi_idx:+--gzi-idx "$par_gzi_idx"} \ + ${par_fastq:+-f} + +exit 0 \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test.sh b/src/samtools/samtools_faidx/test.sh new file mode 100644 index 00000000..10627c16 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/test.sh @@ -0,0 +1,104 @@ +#!/bin/bash + +test_dir="${meta_resources_dir}/test_data" +echo ">>> Testing $meta_functionality_name" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/test.fasta" \ + --output "$test_dir/test.fasta.fai" + +echo "$meta_executable" +echo "$test_dir/test.fasta" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/test.fasta.fai" ] && echo "File 'test.fasta.fai' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/test.fasta.fai" ] && echo "File 'test.fasta.fai' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff "$test_dir/test.fasta.fai" "$test_dir/output/test.fasta.fai" || \ + (echo "Output file test.fasta.fai does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/test.fasta.fai" + +#################################################################################################### + +echo ">>> Test 2: ${meta_functionality_name} with bgzipped input" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/test.fasta.gz" \ + --output "$test_dir/test.fasta.gz.fai" + +echo ">>> Checking whether output exists"1 +[ ! -f "$test_dir/test.fasta.gz.fai" ] && echo "File 'test.fasta.gz.fai' does not exist!" && exit 1 +[ ! -f "$test_dir/test.fasta.gz.gzi" ] && echo "File 'test.fasta.gz.gzi' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/test.fasta.gz.fai" ] && echo "File 'test.fasta.gz.fai' is empty!" && exit 1 +[ ! -s "$test_dir/test.fasta.gz.gzi" ] && echo "File 'test.fasta.gz.gzi' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff "$test_dir/test.fasta.gz.fai" "$test_dir/output/test.fasta.gz.fai" || \ + (echo "Output file test_zip.fasta.gz.fai does not match expected output" && exit 1) +diff "$test_dir/test.fasta.gz.gzi" "$test_dir/output/test.fasta.gz.gzi" || \ + (echo "Output file test2.fasta.gz.gzi does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/test.fasta.gz.fai" +rm "$test_dir/test.fasta.gz.gzi" + +#################################################################################################### + +echo ">>> Test 3: ${meta_functionality_name} with fastq input" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/test.fastq" \ + --output "$test_dir/test.fastq.fai" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/test.fastq.fai" ] && echo "File 'test.fastq.fai' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/test.fastq.fai" ] && echo "File 'test.fastq.fai' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff "$test_dir/test.fastq.fai" "$test_dir/output/test.fastq.fai" || \ + (echo "Output file test.fastq.fai does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/test.fastq.fai" + +#################################################################################################### + +echo ">>> Test 4: ${meta_functionality_name} with region file containing non-existent regions and + specific fasta line wrap length" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/test.fasta" \ + --output "$test_dir/regions.fasta" \ + --length 10 \ + --continue \ + --region_file "$test_dir/test.regions" \ + --fai_idx "$test_dir/regions.fasta.fai" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/regions.fasta" ] && echo "File 'regions.fasta' does not exist!" && exit 1 +[ ! -f "$test_dir/regions.fasta.fai" ] && echo "File 'regions.fasta.fai' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/regions.fasta" ] && echo "File 'regions.fasta' is empty!" && exit 1 +[ ! -s "$test_dir/regions.fasta.fai" ] && echo "File 'regions.fasta.fai' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff "$test_dir/regions.fasta" "$test_dir/output/regions.fasta" || \ + (echo "Output file regions.fasta does not match expected output" && exit 1) +diff "$test_dir/regions.fasta.fai" "$test_dir/output/regions.fasta.fai" || \ + (echo "Output file regions.fasta.fai does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/regions.fasta" +rm "$test_dir/regions.fasta.fai" + +#################################################################################################### + +echo "All tests succeeded!" +exit 0 + diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/regions.fasta b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/regions.fasta new file mode 100644 index 00000000..6953e46d --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/regions.fasta @@ -0,0 +1,14 @@ +>YAL069W:300-315 +CCCAAATATT +GTATAA +>YAL068C:200-230 +CTGAAGCCGT +TTTCAACTAC +GGTGACTTCA +C +>YAL067W-A:115-145 +GCTTATTGTC +TAAGCCTGAA +TTCAGTCTGC +T +>chr1:1-100 diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/regions.fasta.fai b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/regions.fasta.fai new file mode 100644 index 00000000..475dde4d --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/regions.fasta.fai @@ -0,0 +1,4 @@ +YAL069W 315 19 70 71 +YAL068W-A 255 360 70 71 +YAL068C 363 638 70 71 +YAL067W-A 228 1028 70 71 diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/test.fasta.fai b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/test.fasta.fai new file mode 100644 index 00000000..475dde4d --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/test.fasta.fai @@ -0,0 +1,4 @@ +YAL069W 315 19 70 71 +YAL068W-A 255 360 70 71 +YAL068C 363 638 70 71 +YAL067W-A 228 1028 70 71 diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/test.fasta.gz.fai b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/test.fasta.gz.fai new file mode 100644 index 00000000..475dde4d --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/test.fasta.gz.fai @@ -0,0 +1,4 @@ +YAL069W 315 19 70 71 +YAL068W-A 255 360 70 71 +YAL068C 363 638 70 71 +YAL067W-A 228 1028 70 71 diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/test.fasta.gz.gzi b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/test.fasta.gz.gzi new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..1b1cb4d44c57c2d7a5122870fa6ac3e62ff7e94e GIT binary patch literal 8 KcmZQzfB*mh2mk>9 literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/test.fastq.fai b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/test.fastq.fai new file mode 100644 index 00000000..d489386a --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/output/test.fastq.fai @@ -0,0 +1,2 @@ +fastq1 66 8 30 31 79 +fastq2 28 156 14 15 188 diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test_data/script.sh b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/script.sh new file mode 100644 index 00000000..ffd5b789 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,10 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +wget https://raw.githubusercontent.com/nf-core/test-datasets/rnaseq3/reference/transcriptome.fasta + +head -n 23 transcriptome.fasta > test.fasta # kepp only 4 first entries of the file for testing. + +rm transcriptome.fasta \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test_data/test.fasta b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/test.fasta new file mode 100644 index 00000000..eee04dde --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/test.fasta @@ -0,0 +1,23 @@ +>YAL069W CDS=1-315 +ATGATCGTAAATAACACACACGTGCTTACCCTACCACTTTATACCACCACCACATGCCATACTCACCCTC +ACTTGTATACTGATTTTACGTACGCACACGGATGCTACAGTATATACCATCTCAAACTTACCCTACTCTC +AGATTCCACTTCACTCCATGGCCCATCTCTCACTGAATCAGTACCAAATGCACTCACATCATTATGCACG +GCACTTGCCTCAGCGGTCTATACCCTGTGCCATTTACCCATAACGCCCATCATTATCCACATTTTGATAT +CTATATCTCATTCGGCGGTCCCAAATATTGTATAA +>YAL068W-A CDS=1-255 +ATGCACGGCACTTGCCTCAGCGGTCTATACCCTGTGCCATTTACCCATAACGCCCATCATTATCCACATT +TTGATATCTATATCTCATTCGGCGGTCCCAAATATTGTATAACTGCCCTTAATACATACGTTATACCACT +TTTGCACCATATACTTACCACTCCATTTATATACACTTATGTCAATATTACAGAAAAATCCCCACAAAAA +TCACCTAAACATAAAAATATTCTACTTTTCAACAATAATACATAA +>YAL068C CDS=1-363 +ATGGTCAAATTAACTTCAATCGCCGCTGGTGTCGCTGCCATCGCTGCTACTGCTTCTGCAACCACCACTC +TAGCTCAATCTGACGAAAGAGTCAACTTGGTGGAATTGGGTGTCTACGTCTCTGATATCAGAGCTCACTT +AGCCCAATACTACATGTTCCAAGCCGCCCACCCAACTGAAACCTACCCAGTCGAAGTTGCTGAAGCCGTT +TTCAACTACGGTGACTTCACCACCATGTTGACCGGTATTGCTCCAGACCAAGTGACCAGAATGATCACCG +GTGTTCCATGGTACTCCAGCAGATTAAAGCCAGCCATCTCCAGTGCTCTATCCAAGGACGGTATCTACAC +TATCGCAAACTAG +>YAL067W-A CDS=1-228 +ATGCCAATTATAGGGGTGCCGAGGTGCCTTATAAAACCCTTTTCTGTGCCTGTGACATTTCCTTTTTCGG +TCAAAAAGAATATCCGAATTTTAGATTTGGACCCTCGTACAGAAGCTTATTGTCTAAGCCTGAATTCAGT +CTGCTTTAAACGGCTTCCGCGGAGGAAATATTTCCATCTCTTGAATTCGTACAACATTAAACGTGTGTTG +GGAGTCGTATACTGTTAG diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test_data/test.fasta.gz b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/test.fasta.gz new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..d21edc5724fbfb22526014563324207b8f7657d8 GIT binary patch literal 480 zcmV<60U!P!iwFb&00000{{{d;LjnN90i~2dN~BQ?g!ehcTtFBV9cQ6Xlu#RYejwie zB0}Z0x)h|l>Gy}EDyh`_pWgNI_x}IeA3wi7USHi_-;IcHkc8y@gcxKS*)pI#?N`JW zGH#MbhBS!?Kn`*iE+R%&Q;LMKq%Rr@6TvcC#ukZBdP9*YjxC8aO%@jHbEZ*ZW5o$x zR+H^~Sv&E8Z}rXwM2KlsdBItrrPY~M^HfP6-mY{+y}7HX9s74}%<1C?ZJ5{w33V~~ z+!zCG$16Q2eE1t{l;Fjb6-g3ydy%B+u8~ThL*LB-mRfxHKXviNYWKGzQVP+I%jVcI z389Co&_lgsFtIMq!-L|jC2}N1#Wlr=1X;u?;bv0bY^`Bb#j8jSUEitgl&gS|I<##C zM+&6z*y)a%C@19jcEt`vcG5Lf@TeS(E84p!JCoA@3EEuuGN?@bvGHQ9OO$8{I)sOc z*L$U$9sK*|&6|hWyIY?rmC26wzrl{YOJ$>NSipvHGOR078`u>c+A_($6>^-E0`ERl zK#AVs*%jAS>9QRsN{+v{-2GEi$Trgws#_+tz~u!5%6tG_;aE8A1ONaZiwFb&00000 W{{{d;LjnLB00RI3000000002z9^DuK literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test_data/test.fastq b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/test.fastq new file mode 100644 index 00000000..b8f8c917 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/test.fastq @@ -0,0 +1,14 @@ +@fastq1 +ATGCATGCATGCATGCATGCATGCATGCAT +GCATGCATGCATGCATGCATGCATGCATGC +ATGCAT ++ +FFFA@@FFFFFFFFFFHHB:::@BFFFFGG +HIHIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIFFFF +8011<< +@fastq2 +ATGCATGCATGCAT +GCATGCATGCATGC ++ +IIA94445EEII== +=>IIIIIIIIICCC \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_faidx/test_data/test.regions b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/test.regions new file mode 100644 index 00000000..2034aaf0 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_faidx/test_data/test.regions @@ -0,0 +1,4 @@ +YAL069W:300-315 +YAL068C:200-230 +YAL067W-A:115-145 +chr1:1-100 diff --git a/src/samtools/samtools_fasta/config.vsh.yaml b/src/samtools/samtools_fasta/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..23517f6c --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fasta/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,191 @@ +name: samtools_fasta +namespace: samtools +description: Converts a SAM, BAM or CRAM to FASTA format. +keywords: [fasta, bam, sam, cram] +links: + homepage: https://www.htslib.org/ + documentation: https://www.htslib.org/doc/samtools-fasta.html + repository: https://github.com/samtools/samtools +references: + doi: [10.1093/bioinformatics/btp352, 10.1093/gigascience/giab008] +license: MIT/Expat + +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + type: file + description: input SAM/BAM/CRAM file + required: true + - name: Outputs + arguments: + - name: --output + type: file + description: output FASTA file + required: true + direction: output + - name: Options + arguments: + - name: --no_suffix + alternatives: -n + type: boolean_true + description: | + By default, either '/1' or '/2' is added to the end of read names where the corresponding + READ1 or READ2 FLAG bit is set. Using -n causes read names to be left as they are. + - name: --suffix + alternatives: -N + type: boolean_true + description: | + Always add either '/1' or '/2' to the end of read names even when put into different files. + - name: --use_oq + alternatives: -O + type: boolean_true + description: | + Use quality values from OQ tags in preference to standard quality string if available. + - name: --singleton + alternatives: -s + type: file + description: write singleton reads to FILE. + - name: --copy_tags + alternatives: -t + type: boolean_true + description: | + Copy RG, BC and QT tags to the FASTA header line, if they exist. + - name: --copy_tags_list + alternatives: -T + type: string + description: | + Specify a comma-separated list of tags to copy to the FASTA header line, if they exist. + TAGLIST can be blank or `*` to indicate all tags should be copied to the output. If using `*`, + be careful to quote it to avoid unwanted shell expansion. + - name: --read1 + alternatives: -1 + type: file + description: | + Write reads with the READ1 FLAG set (and READ2 not set) to FILE instead of outputting them. + If the -s option is used, only paired reads will be written to this file. + direction: output + - name: --read2 + alternatives: -2 + type: file + description: | + Write reads with the READ2 FLAG set (and READ1 not set) to FILE instead of outputting them. + If the -s option is used, only paired reads will be written to this file. + direction: output + - name: --output_reads + alternatives: -o + type: file + description: | + Write reads with either READ1 FLAG or READ2 flag set to FILE instead of outputting them to stdout. + This is equivalent to -1 FILE -2 FILE. + direction: output + - name: --output_reads_both + alternatives: -0 + type: file + description: | + Write reads where the READ1 and READ2 FLAG bits set are either both set or both unset to FILE + instead of outputting them. + direction: output + - name: --filter_flags + alternatives: -f + type: integer + description: | + Only output alignments with all bits set in INT present in the FLAG field. INT can be specified + in hex by beginning with '0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/) or in octal by beginning with '0' + (i.e. /^0[0-7]+/). Default: `0`. + example: 0 + - name: --excl_flags + alternatives: -F + type: string + description: | + Do not output alignments with any bits set in INT present in the FLAG field. INT can be specified + in hex by beginning with '0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/) or in octal by beginning with '0' + (i.e. /^0[0-7]+/). This defaults to 0x900 representing filtering of secondary and + supplementary alignments. Default: `0x900`. + example: "0x900" + - name: --incl_flags + alternatives: --rf + type: string + description: | + Only output alignments with any bits set in INT present in the FLAG field. INT can be specified + in hex by beginning with '0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/), in octal by beginning with '0' + (i.e. /^0[0-7]+/), as a decimal number not beginning with '0' or as a comma-separated list of + flag names. Default: `0`. + example: 0 + - name: --excl_flags_all + alternatives: -G + type: integer + description: | + Only EXCLUDE reads with all of the bits set in INT present in the FLAG field. INT can be specified + in hex by beginning with '0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/) or in octal by beginning with '0' (i.e. /^0[0-7]+/). + Default: `0`. + example: 0 + - name: --aux_tag + alternatives: -d + type: string + description: | + Only output alignments containing an auxiliary tag matching both TAG and VAL. If VAL is omitted + then any value is accepted. The tag types supported are i, f, Z, A and H. "B" arrays are not + supported. This is comparable to the method used in samtools view --tag. The option may be specified + multiple times and is equivalent to using the --aux_tag_file option. + - name: --aux_tag_file + alternatives: -D + type: string + description: | + Only output alignments containing an auxiliary tag matching TAG and having a value listed in FILE. + The format of the file is one line per value. This is equivalent to specifying --aux_tag multiple times. + - name: --casava + alternatives: -i + type: boolean_true + description: add Illumina Casava 1.8 format entry to header (eg 1:N:0:ATCACG) + - name: --compression + alternatives: -c + type: integer + description: set compression level when writing gz or bgzf fasta files. + example: 0 + - name: --index1 + alternatives: --i1 + type: file + description: write first index reads to FILE. + - name: --index2 + alternatives: --i2 + type: file + description: write second index reads to FILE. + - name: --barcode_tag + type: string + description: | + Auxiliary tag to find index reads in. Default: `BC`. + example: "BC" + - name: --quality_tag + type: string + description: | + Auxiliary tag to find index quality in. Default: `QT`. + example: "QT" + - name: --index_format + type: string + description: | + string to describe how to parse the barcode and quality tags. For example: + * `i14i8`: the first 14 characters are index 1, the next 8 characters are index 2. + * `n8i14`: ignore the first 8 characters, and use the next 14 characters for index 1. + If the tag contains a separator, then the numeric part can be replaced with`*` to mean + 'read until the separator or end of tag', for example: `n*i*`. + +resources: + - type: bash_script + path: ../samtools_fastq/script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/samtools:1.19.2--h50ea8bc_1 + setup: + - type: docker + run: | + samtools --version 2>&1 | grep -E '^(samtools|Using htslib)' | \ + sed 's#Using ##;s# \([0-9\.]*\)$#: \1#' > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow diff --git a/src/samtools/samtools_fasta/help.txt b/src/samtools/samtools_fasta/help.txt new file mode 100644 index 00000000..39ed0d00 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fasta/help.txt @@ -0,0 +1,80 @@ +``` +samtools fastq +``` + +Usage: samtools fastq [options...] + +Description: +Converts a SAM, BAM or CRAM to FASTQ format. + +Options: + -0 FILE write reads designated READ_OTHER to FILE + -1 FILE write reads designated READ1 to FILE + -2 FILE write reads designated READ2 to FILE + -o FILE write reads designated READ1 or READ2 to FILE + note: if a singleton file is specified with -s, only + paired reads will be written to the -1 and -2 files. + -d, --tag TAG[:VAL] + only include reads containing TAG, optionally with value VAL + -f, --require-flags INT + only include reads with all of the FLAGs in INT present [0] + -F, --excl[ude]-flags INT + only include reads with none of the FLAGs in INT present [0x900] + --rf, --incl[ude]-flags INT + only include reads with any of the FLAGs in INT present [0] + -G INT only EXCLUDE reads with all of the FLAGs in INT present [0] + -n don't append /1 and /2 to the read name + -N always append /1 and /2 to the read name + -O output quality in the OQ tag if present + -s FILE write singleton reads designated READ1 or READ2 to FILE + -t copy RG, BC and QT tags to the FASTQ header line + -T TAGLIST copy arbitrary tags to the FASTQ header line, '*' for all + -v INT default quality score if not given in file [1] + -i add Illumina Casava 1.8 format entry to header (eg 1:N:0:ATCACG) + -c INT compression level [0..9] to use when writing bgzf files [1] + --i1 FILE write first index reads to FILE + --i2 FILE write second index reads to FILE + --barcode-tag TAG + Barcode tag [BC] + --quality-tag TAG + Quality tag [QT] + --index-format STR + How to parse barcode and quality tags + + --input-fmt-option OPT[=VAL] + Specify a single input file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE + --reference FILE + Reference sequence FASTA FILE [null] + -@, --threads INT + Number of additional threads to use [0] + --verbosity INT + Set level of verbosity + +The files will be automatically compressed if the file names have a .gz +or .bgzf extension. The input to this program must be collated by name. +Run 'samtools collate' or 'samtools sort -n' to achieve this. + +Reads are designated READ1 if FLAG READ1 is set and READ2 is not set. +Reads are designated READ2 if FLAG READ1 is not set and READ2 is set. +Otherwise reads are designated READ_OTHER (both flags set or both flags unset). +Run 'samtools flags' for more information on flag codes and meanings. + +The index-format string describes how to parse the barcode and quality tags. +It is made up of 'i' or 'n' followed by a length or '*'. For example: + i14i8 The first 14 characters are index 1, the next 8 are index 2 + n8i14 Ignore the first 8 characters, and use the next 14 for index 1 + +If the tag contains a separator, then the numeric part can be replaced with +'*' to mean 'read until the separator or end of tag', for example: + i*i* Break the tag at the separator into index 1 and index 2 + n*i* Ignore the left part of the tag until the separator, + then use the second part of the tag as index 1 + +Examples: +To get just the paired reads in separate files, use: + samtools fastq -1 pair1.fq -2 pair2.fq -0 /dev/null -s /dev/null -n in.bam + +To get all non-supplementary/secondary reads in a single file, redirect +the output: + samtools fastq in.bam > all_reads.fq \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_fasta/test.sh b/src/samtools/samtools_fasta/test.sh new file mode 100644 index 00000000..687965ae --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fasta/test.sh @@ -0,0 +1,96 @@ +#!/bin/bash + +test_dir="${meta_resources_dir}/test_data" +out_dir="${meta_resources_dir}/out_data" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 1: Convert all reads from a bam file to fasta format" +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.bam" \ + --output "$out_dir/a.fa" + +echo ">>> Check if output file exists" +[ ! -f "$out_dir/a.fa" ] && echo "Output file a.fa does not exist" && exit 1 + +echo ">>> Check if output is empty" +[ ! -s "$out_dir/a.fa" ] && echo "Output file a.fa is empty" && exit 1 + +echo ">>> Check if output matches expected output" +diff "$out_dir/a.fa" "$test_dir/a.fa" || + (echo "Output file a.fa does not match expected output" && exit 1) + +rm "$out_dir/a.fa" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 2: Convert all reads from a sam file to fasta format" +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.sam" \ + --output "$out_dir/a.fa" + +echo ">>> Check if output file exists" +[ ! -f "$out_dir/a.fa" ] && echo "Output file a.fa does not exist" && exit 1 + +echo ">>> Check if output is empty" +[ ! -s "$out_dir/a.fa" ] && echo "Output file a.fa is empty" && exit 1 + +echo ">>> Check if output matches expected output" +diff "$out_dir/a.fa" "$test_dir/a.fa" || + (echo "Output file a.fa does not match expected output" && exit 1) + +rm "$out_dir/a.fa" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 3: Output reads from bam file to separate files" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.bam" \ + --read1 "$out_dir/a.1.fa" \ + --read2 "$out_dir/a.2.fa" \ + --output "$out_dir/a.fa" + +echo ">>> Check if output files exist" +[ ! -f "$out_dir/a.1.fa" ] && echo "Output file a.1.fa does not exist" && exit 1 +[ ! -f "$out_dir/a.2.fa" ] && echo "Output file a.2.fa does not exist" && exit 1 +[ ! -f "$out_dir/a.fa" ] && echo "Output file a.fa does not exist" && exit 1 + +echo ">>> Check if output files are empty" +[ ! -s "$out_dir/a.1.fa" ] && echo "Output file a.1.fa is empty" && exit 1 +[ ! -s "$out_dir/a.2.fa" ] && echo "Output file a.2.fa is empty" && exit 1 +# output should be empty since input has no singleton reads + +echo ">>> Check if output files match expected output" +diff "$out_dir/a.1.fa" "$test_dir/a.1.fa" || + (echo "Output file a.1.fa does not match expected output" && exit 1) +diff "$out_dir/a.2.fa" "$test_dir/a.2.fa" || + (echo "Output file a.2.fa does not match expected output" && exit 1) + +rm "$out_dir/a.1.fa" "$out_dir/a.2.fa" "$out_dir/a.fa" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 4: Output only forward reads from bam file to fasta format" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.sam" \ + --excl_flags "0x80" \ + --output "$out_dir/half.fa" + +echo ">>> Check if output file exists" +[ ! -f "$out_dir/half.fa" ] && echo "Output file half.fa does not exist" && exit 1 + +echo ">>> Check if output is empty" +[ ! -s "$out_dir/half.fa" ] && echo "Output file half.fa is empty" && exit 1 + +echo ">>> Check if output matches expected output" +diff "$out_dir/half.fa" "$test_dir/half.fa" || + (echo "Output file half.fa does not match expected output" && exit 1) + +rm "$out_dir/half.fa" + +############################################################################################ + +echo "All tests succeeded!" +exit 0 \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.1.fa b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.1.fa new file mode 100644 index 00000000..2c9fdbe5 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.1.fa @@ -0,0 +1,6 @@ +>a1 +AAAAAAAAAA +>b1 +AAAAAAAAAA +>c1 +AAAAAAAAAA diff --git a/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.2.fa b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.2.fa new file mode 100644 index 00000000..2c9fdbe5 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.2.fa @@ -0,0 +1,6 @@ +>a1 +AAAAAAAAAA +>b1 +AAAAAAAAAA +>c1 +AAAAAAAAAA diff --git a/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.bam b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..dba1268acbd8446e4fde54d7da33434597fbe635 GIT binary patch literal 184 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jWb_~TuUs6R95)ukH_@3~5+q`PUgD)R98yP)FV(BtuE_7vW z=9s|5aI{h|P#vgC9!+};gK@G0Lz-KrbIh-tVq12fpEAOZjf CvNY8I literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.fa b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.fa new file mode 100644 index 00000000..693cd395 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.fa @@ -0,0 +1,12 @@ +>a1/1 +AAAAAAAAAA +>b1/1 +AAAAAAAAAA +>c1/1 +AAAAAAAAAA +>a1/2 +AAAAAAAAAA +>b1/2 +AAAAAAAAAA +>c1/2 +AAAAAAAAAA diff --git a/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.sam b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.sam new file mode 100644 index 00000000..aa8c77b3 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/a.sam @@ -0,0 +1,7 @@ +@SQ SN:xx LN:20 +a1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +b1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +c1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +a1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +b1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +c1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** diff --git a/src/samtools/samtools_fasta/test_data/half.fa b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/half.fa new file mode 100644 index 00000000..36cd438c --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/half.fa @@ -0,0 +1,6 @@ +>a1/1 +AAAAAAAAAA +>b1/1 +AAAAAAAAAA +>c1/1 +AAAAAAAAAA diff --git a/src/samtools/samtools_fasta/test_data/script.sh b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..b59bc1bd --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fasta/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,11 @@ +#!/bin/bash + +# dowload test data from snakemake wrapper +if [ ! -d /tmp/fastq_source ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers.git /tmp/fastq_source +fi + +cp -r /tmp/fastq_source/bio/samtools/fastx/test/*.sam src/samtools/samtools_fastq/test_data/ +cp -r /tmp/fastq_source/bio/samtools/fastq/interleaved/test/mapped/*.bam src/samtools/samtools_fastq/test_data/ +cp -r /tmp/fastq_source/bio/samtools/fastq/interleaved/test/reads/*.fq src/samtools/samtools_fastq/test_data/ +cp -r /tmp/fastq_source/bio/samtools/fastq/separate/test/reads/*.fq src/samtools/samtools_fastq/test_data/ \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_fastq/config.vsh.yaml b/src/samtools/samtools_fastq/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..cac7653b --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fastq/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,192 @@ +name: samtools_fastq +namespace: samtools +description: Converts a SAM, BAM or CRAM to FASTQ format. +keywords: [fastq, bam, sam, cram] +links: + homepage: https://www.htslib.org/ + documentation: https://www.htslib.org/doc/samtools-fastq.html + repository: https://github.com/samtools/samtools +references: + doi: [10.1093/bioinformatics/btp352, 10.1093/gigascience/giab008] +license: MIT/Expat + +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + type: file + description: input SAM/BAM/CRAM file + required: true + - name: Outputs + arguments: + - name: --output + type: file + description: output FASTQ file + required: true + direction: output + - name: Options + arguments: + - name: --no_suffix + alternatives: -n + type: boolean_true + description: | + By default, either '/1' or '/2' is added to the end of read names where the corresponding + READ1 or READ2 FLAG bit is set. Using -n causes read names to be left as they are. + - name: --suffix + alternatives: -N + type: boolean_true + description: | + Always add either '/1' or '/2' to the end of read names even when put into different files. + - name: --use_oq + alternatives: -O + type: boolean_true + description: | + Use quality values from OQ tags in preference to standard quality string if available. + - name: --singleton + alternatives: -s + type: file + description: write singleton reads to FILE. + - name: --copy_tags + alternatives: -t + type: boolean_true + description: | + Copy RG, BC and QT tags to the FASTQ header line, if they exist. + - name: --copy_tags_list + alternatives: -T + type: string + description: | + Specify a comma-separated list of tags to copy to the FASTQ header line, if they exist. + TAGLIST can be blank or `*` to indicate all tags should be copied to the output. If using `*`, + be careful to quote it to avoid unwanted shell expansion. + - name: --read1 + alternatives: -1 + type: file + description: | + Write reads with the READ1 FLAG set (and READ2 not set) to FILE instead of outputting them. + If the -s option is used, only paired reads will be written to this file. + direction: output + - name: --read2 + alternatives: -2 + type: file + description: | + Write reads with the READ2 FLAG set (and READ1 not set) to FILE instead of outputting them. + If the -s option is used, only paired reads will be written to this file. + direction: output + - name: --output_reads + alternatives: -o + type: file + description: | + Write reads with either READ1 FLAG or READ2 flag set to FILE instead of outputting them to stdout. + This is equivalent to -1 FILE -2 FILE. + direction: output + - name: --output_reads_both + alternatives: -0 + type: file + description: | + Write reads where the READ1 and READ2 FLAG bits set are either both set or both unset to FILE + instead of outputting them. + direction: output + - name: --filter_flags + alternatives: -f + type: integer + description: | + Only output alignments with all bits set in INT present in the FLAG field. INT can be specified + in hex by beginning with '0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/) or in octal by beginning with '0' + (i.e. /^0[0-7]+/). Default: `0`. + example: 0 + - name: --excl_flags + alternatives: -F + type: string + description: | + Do not output alignments with any bits set in INT present in the FLAG field. INT can be specified + in hex by beginning with '0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/) or in octal by beginning with '0' + (i.e. /^0[0-7]+/). This defaults to 0x900 representing filtering of secondary and + supplementary alignments. Default: `0x900`. + example: "0x900" + - name: --incl_flags + alternatives: --rf + type: string + description: | + Only output alignments with any bits set in INT present in the FLAG field. INT can be specified + in hex by beginning with '0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/), in octal by beginning with '0' + (i.e. /^0[0-7]+/), as a decimal number not beginning with '0' or as a comma-separated list of + flag names. Default: `0`. + example: 0 + - name: --excl_flags_all + alternatives: -G + type: integer + description: | + Only EXCLUDE reads with all of the bits set in INT present in the FLAG field. INT can be specified + in hex by beginning with '0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/) or in octal by beginning with '0' (i.e. /^0[0-7]+/). + Default: `0`. + example: 0 + - name: --aux_tag + alternatives: -d + type: string + description: | + Only output alignments containing an auxiliary tag matching both TAG and VAL. If VAL is omitted + then any value is accepted. The tag types supported are i, f, Z, A and H. "B" arrays are not + supported. This is comparable to the method used in samtools view --tag. The option may be specified + multiple times and is equivalent to using the --aux_tag_file option. + - name: --aux_tag_file + alternatives: -D + type: string + description: | + Only output alignments containing an auxiliary tag matching TAG and having a value listed in FILE. + The format of the file is one line per value. This is equivalent to specifying --aux_tag multiple times. + - name: --casava + alternatives: -i + type: boolean_true + description: | + Add Illumina Casava 1.8 format entry to header, for example: `1:N:0:ATCACG`. + - name: --compression + alternatives: -c + type: integer + description: set compression level when writing gz or bgzf fastq files. + example: 0 + - name: --index1 + alternatives: --i1 + type: file + description: write first index reads to FILE. + - name: --index2 + alternatives: --i2 + type: file + description: write second index reads to FILE. + - name: --barcode_tag + type: string + description: | + Auxiliary tag to find index reads in. Default: `BC`. + example: "BC" + - name: --quality_tag + type: string + description: | + Auxiliary tag to find index quality in. Default: `QT`. + example: QT + - name: --index_format + type: string + description: | + string to describe how to parse the barcode and quality tags. For example: + * `i14i8`: the first 14 characters are index 1, the next 8 characters are index 2. + * `n8i14`: ignore the first 8 characters, and use the next 14 characters for index 1. + If the tag contains a separator, then the numeric part can be replaced with '*' to mean + 'read until the separator or end of tag', for example: `n*i*`. + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/samtools:1.19.2--h50ea8bc_1 + setup: + - type: docker + run: | + samtools --version 2>&1 | grep -E '^(samtools|Using htslib)' | \ + sed 's#Using ##;s# \([0-9\.]*\)$#: \1#' > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow diff --git a/src/samtools/samtools_fastq/help.txt b/src/samtools/samtools_fastq/help.txt new file mode 100644 index 00000000..39ed0d00 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fastq/help.txt @@ -0,0 +1,80 @@ +``` +samtools fastq +``` + +Usage: samtools fastq [options...] + +Description: +Converts a SAM, BAM or CRAM to FASTQ format. + +Options: + -0 FILE write reads designated READ_OTHER to FILE + -1 FILE write reads designated READ1 to FILE + -2 FILE write reads designated READ2 to FILE + -o FILE write reads designated READ1 or READ2 to FILE + note: if a singleton file is specified with -s, only + paired reads will be written to the -1 and -2 files. + -d, --tag TAG[:VAL] + only include reads containing TAG, optionally with value VAL + -f, --require-flags INT + only include reads with all of the FLAGs in INT present [0] + -F, --excl[ude]-flags INT + only include reads with none of the FLAGs in INT present [0x900] + --rf, --incl[ude]-flags INT + only include reads with any of the FLAGs in INT present [0] + -G INT only EXCLUDE reads with all of the FLAGs in INT present [0] + -n don't append /1 and /2 to the read name + -N always append /1 and /2 to the read name + -O output quality in the OQ tag if present + -s FILE write singleton reads designated READ1 or READ2 to FILE + -t copy RG, BC and QT tags to the FASTQ header line + -T TAGLIST copy arbitrary tags to the FASTQ header line, '*' for all + -v INT default quality score if not given in file [1] + -i add Illumina Casava 1.8 format entry to header (eg 1:N:0:ATCACG) + -c INT compression level [0..9] to use when writing bgzf files [1] + --i1 FILE write first index reads to FILE + --i2 FILE write second index reads to FILE + --barcode-tag TAG + Barcode tag [BC] + --quality-tag TAG + Quality tag [QT] + --index-format STR + How to parse barcode and quality tags + + --input-fmt-option OPT[=VAL] + Specify a single input file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE + --reference FILE + Reference sequence FASTA FILE [null] + -@, --threads INT + Number of additional threads to use [0] + --verbosity INT + Set level of verbosity + +The files will be automatically compressed if the file names have a .gz +or .bgzf extension. The input to this program must be collated by name. +Run 'samtools collate' or 'samtools sort -n' to achieve this. + +Reads are designated READ1 if FLAG READ1 is set and READ2 is not set. +Reads are designated READ2 if FLAG READ1 is not set and READ2 is set. +Otherwise reads are designated READ_OTHER (both flags set or both flags unset). +Run 'samtools flags' for more information on flag codes and meanings. + +The index-format string describes how to parse the barcode and quality tags. +It is made up of 'i' or 'n' followed by a length or '*'. For example: + i14i8 The first 14 characters are index 1, the next 8 are index 2 + n8i14 Ignore the first 8 characters, and use the next 14 for index 1 + +If the tag contains a separator, then the numeric part can be replaced with +'*' to mean 'read until the separator or end of tag', for example: + i*i* Break the tag at the separator into index 1 and index 2 + n*i* Ignore the left part of the tag until the separator, + then use the second part of the tag as index 1 + +Examples: +To get just the paired reads in separate files, use: + samtools fastq -1 pair1.fq -2 pair2.fq -0 /dev/null -s /dev/null -n in.bam + +To get all non-supplementary/secondary reads in a single file, redirect +the output: + samtools fastq in.bam > all_reads.fq \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_fastq/script.sh b/src/samtools/samtools_fastq/script.sh new file mode 100644 index 00000000..0cad9cfe --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fastq/script.sh @@ -0,0 +1,47 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +set -e + +[[ "$par_no_suffix" == "false" ]] && unset par_no_suffix +[[ "$par_suffix" == "false" ]] && unset par_suffix +[[ "$par_use_oq" == "false" ]] && unset par_use_oq +[[ "$par_copy_tags" == "false" ]] && unset par_copy_tags +[[ "$par_casava" == "false" ]] && unset par_casava + +if [[ "$meta_name" == "samtools_fasta" ]]; then + subcommand=fasta +elif [[ "$meta_name" == "samtools_fastq" ]]; then + subcommand=fastq +else + echo "Unrecognized component name" && exit 1 +fi +samtools "$subcommand" \ + ${par_no_suffix:+-n} \ + ${par_suffix:+-N} \ + ${par_use_oq:+-O} \ + ${par_singleton:+-s "$par_singleton"} \ + ${par_copy_tags:+-t} \ + ${par_copy_tags_list:+-T "$par_copy_tags_list"} \ + ${par_read1:+-1 "$par_read1"} \ + ${par_read2:+-2 "$par_read2"} \ + ${par_output_reads:+-o "$par_output_reads"} \ + ${par_output_reads_both:+-0 "$par_output_reads_both"} \ + ${par_filter_flags:+-f "$par_filter_flags"} \ + ${par_excl_flags:+-F "$par_excl_flags"} \ + ${par_incl_flags:+--rf "$par_incl_flags"} \ + ${par_excl_flags_all:+-G "$par_excl_flags_all"} \ + ${par_aux_tag:+-d "$par_aux_tag"} \ + ${par_aux_tag_file:+-D "$par_aux_tag_file"} \ + ${par_casava:+-i} \ + ${par_compression:+-c "$par_compression"} \ + ${par_index1:+--i1 "$par_index1"} \ + ${par_index2:+--i2 "$par_index2"} \ + ${par_barcode_tag:+--barcode-tag "$par_barcode_tag"} \ + ${par_quality_tag:+--quality-tag "$par_quality_tag"} \ + ${par_index_format:+--index-format "$par_index_format"} \ + "$par_input" \ + > "$par_output" + diff --git a/src/samtools/samtools_fastq/test.sh b/src/samtools/samtools_fastq/test.sh new file mode 100644 index 00000000..32ee3f5e --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fastq/test.sh @@ -0,0 +1,96 @@ +#!/bin/bash + +test_dir="${meta_resources_dir}/test_data" +out_dir="${meta_resources_dir}/out_data" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 1: Convert all reads from a bam file to fastq format" +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.bam" \ + --output "$out_dir/a.fq" + +echo ">>> Check if output file exists" +[ ! -f "$out_dir/a.fq" ] && echo "Output file a.fq does not exist" && exit 1 + +echo ">>> Check if output is empty" +[ ! -s "$out_dir/a.fq" ] && echo "Output file a.fq is empty" && exit 1 + +echo ">>> Check if output matches expected output" +diff "$out_dir/a.fq" "$test_dir/a.fq" || + (echo "Output file a.fq does not match expected output" && exit 1) + +rm "$out_dir/a.fq" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 2: Convert all reads from a sam file to fastq format" +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.sam" \ + --output "$out_dir/a.fq" + +echo ">>> Check if output file exists" +[ ! -f "$out_dir/a.fq" ] && echo "Output file a.fq does not exist" && exit 1 + +echo ">>> Check if output is empty" +[ ! -s "$out_dir/a.fq" ] && echo "Output file a.fq is empty" && exit 1 + +echo ">>> Check if output matches expected output" +diff "$out_dir/a.fq" "$test_dir/a.fq" || + (echo "Output file a.fq does not match expected output" && exit 1) + +rm "$out_dir/a.fq" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 3: Output reads from bam file to separate files" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.bam" \ + --read1 "$out_dir/a.1.fq" \ + --read2 "$out_dir/a.2.fq" \ + --output "$out_dir/a.fq" + +echo ">>> Check if output files exist" +[ ! -f "$out_dir/a.1.fq" ] && echo "Output file a.1.fq does not exist" && exit 1 +[ ! -f "$out_dir/a.2.fq" ] && echo "Output file a.2.fq does not exist" && exit 1 +[ ! -f "$out_dir/a.fq" ] && echo "Output file a.fq does not exist" && exit 1 + +echo ">>> Check if output files are empty" +[ ! -s "$out_dir/a.1.fq" ] && echo "Output file a.1.fq is empty" && exit 1 +[ ! -s "$out_dir/a.2.fq" ] && echo "Output file a.2.fq is empty" && exit 1 +# output should be empty since input has no singleton reads + +echo ">>> Check if output files match expected output" +diff "$out_dir/a.1.fq" "$test_dir/a.1.fq" || + (echo "Output file a.1.fq does not match expected output" && exit 1) +diff "$out_dir/a.2.fq" "$test_dir/a.2.fq" || + (echo "Output file a.2.fq does not match expected output" && exit 1) + +rm "$out_dir/a.1.fq" "$out_dir/a.2.fq" "$out_dir/a.fq" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 4: Output only forward reads from bam file to fastq format" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.sam" \ + --excl_flags "0x80" \ + --output "$out_dir/half.fq" + +echo ">>> Check if output file exists" +[ ! -f "$out_dir/half.fq" ] && echo "Output file half.fq does not exist" && exit 1 + +echo ">>> Check if output is empty" +[ ! -s "$out_dir/half.fq" ] && echo "Output file half.fq is empty" && exit 1 + +echo ">>> Check if output matches expected output" +diff "$out_dir/half.fq" "$test_dir/half.fq" || + (echo "Output file half.fq does not match expected output" && exit 1) + +rm "$out_dir/half.fq" + +############################################################################################ + +echo "All tests succeeded!" +exit 0 \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.1.fq b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.1.fq new file mode 100644 index 00000000..03eaa725 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.1.fq @@ -0,0 +1,12 @@ +@a1 +AAAAAAAAAA ++ +********** +@b1 +AAAAAAAAAA ++ +********** +@c1 +AAAAAAAAAA ++ +********** diff --git a/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.2.fq b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.2.fq new file mode 100644 index 00000000..03eaa725 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.2.fq @@ -0,0 +1,12 @@ +@a1 +AAAAAAAAAA ++ +********** +@b1 +AAAAAAAAAA ++ +********** +@c1 +AAAAAAAAAA ++ +********** diff --git a/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.bam b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..dba1268acbd8446e4fde54d7da33434597fbe635 GIT binary patch literal 184 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jWb_~TuUs6R95)ukH_@3~5+q`PUgD)R98yP)FV(BtuE_7vW z=9s|5aI{h|P#vgC9!+};gK@G0Lz-KrbIh-tVq12fpEAOZjf CvNY8I literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.fq b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.fq new file mode 100644 index 00000000..d12c62ca --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.fq @@ -0,0 +1,24 @@ +@a1/1 +AAAAAAAAAA ++ +********** +@b1/1 +AAAAAAAAAA ++ +********** +@c1/1 +AAAAAAAAAA ++ +********** +@a1/2 +AAAAAAAAAA ++ +********** +@b1/2 +AAAAAAAAAA ++ +********** +@c1/2 +AAAAAAAAAA ++ +********** diff --git a/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.sam b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.sam new file mode 100644 index 00000000..aa8c77b3 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/a.sam @@ -0,0 +1,7 @@ +@SQ SN:xx LN:20 +a1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +b1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +c1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +a1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +b1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +c1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** diff --git a/src/samtools/samtools_fastq/test_data/half.fq b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/half.fq new file mode 100644 index 00000000..85a2b1c4 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/half.fq @@ -0,0 +1,12 @@ +@a1/1 +AAAAAAAAAA ++ +********** +@b1/1 +AAAAAAAAAA ++ +********** +@c1/1 +AAAAAAAAAA ++ +********** diff --git a/src/samtools/samtools_fastq/test_data/script.sh b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..b59bc1bd --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_fastq/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,11 @@ +#!/bin/bash + +# dowload test data from snakemake wrapper +if [ ! -d /tmp/fastq_source ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers.git /tmp/fastq_source +fi + +cp -r /tmp/fastq_source/bio/samtools/fastx/test/*.sam src/samtools/samtools_fastq/test_data/ +cp -r /tmp/fastq_source/bio/samtools/fastq/interleaved/test/mapped/*.bam src/samtools/samtools_fastq/test_data/ +cp -r /tmp/fastq_source/bio/samtools/fastq/interleaved/test/reads/*.fq src/samtools/samtools_fastq/test_data/ +cp -r /tmp/fastq_source/bio/samtools/fastq/separate/test/reads/*.fq src/samtools/samtools_fastq/test_data/ \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_flagstat/config.vsh.yaml b/src/samtools/samtools_flagstat/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..9b4dfbe1 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_flagstat/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,52 @@ +name: samtools_flagstat +namespace: samtools +description: Counts the number of alignments in SAM/BAM/CRAM files for each FLAG type. +keywords: [ stats, mapping, counts, bam, sam, cram ] +links: + homepage: https://www.htslib.org/ + documentation: https://www.htslib.org/doc/samtools-flagstat.html + repository: https://github.com/samtools/samtools +references: + doi: [10.1093/bioinformatics/btp352, 10.1093/gigascience/giab008] +license: MIT/Expat + +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --bam + type: file + description: | + BAM input files. + - name: --bai + type: file + description: | + BAM index file. + - name: Outputs + arguments: + - name: --output + type: file + description: | + File containing samtools stats output. + direction: output + required: true + example: output.flagstat + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/samtools:1.19.2--h50ea8bc_1 + setup: + - type: docker + run: | + samtools --version 2>&1 | grep -E '^(samtools|Using htslib)' | \ + sed 's#Using ##;s# \([0-9\.]*\)$#: \1#' > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_flagstat/help.txt b/src/samtools/samtools_flagstat/help.txt new file mode 100644 index 00000000..fe54d20c --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_flagstat/help.txt @@ -0,0 +1,13 @@ +```sh +samtools flagstat --help +``` +Usage: samtools flagstat [options] + --input-fmt-option OPT[=VAL] + Specify a single input file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE + -@, --threads INT + Number of additional threads to use [0] + --verbosity INT + Set level of verbosity + -O, --output-fmt FORMAT[,OPT[=VAL]]... + Specify output format (json, tsv) \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_flagstat/script.sh b/src/samtools/samtools_flagstat/script.sh new file mode 100644 index 00000000..beac3703 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_flagstat/script.sh @@ -0,0 +1,11 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +set -e + +samtools flagstat \ + "$par_bam" \ + > "$par_output" + \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_flagstat/test.sh b/src/samtools/samtools_flagstat/test.sh new file mode 100644 index 00000000..647c64af --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_flagstat/test.sh @@ -0,0 +1,47 @@ +#!/bin/bash + +test_dir="${meta_resources_dir}/test_data" +echo ">>> Testing $meta_functionality_name" + +"$meta_executable" \ + --bam "$test_dir/a.bam" \ + --bai "$test_dir/a.bam.bai" \ + --output "$test_dir/a.flagstat" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/a.flagstat" ] && echo "File 'a.flagstat' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/a.flagstat" ] && echo "File 'a.flagstat' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff "$test_dir/a.flagstat" "$test_dir/a_ref.flagstat" || \ + (echo "Output file a.flagstat does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/a.flagstat" + +############################################################################################ + +echo ">>> Testing $meta_functionality_name with singletons in the input" + +"$meta_executable" \ + --bam "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam" \ + --bai "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam.bai" \ + --output "$test_dir/test.paired_end.sorted.flagstat" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/test.paired_end.sorted.flagstat" ] && echo "File 'test.paired_end.sorted.flagstat' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/test.paired_end.sorted.flagstat" ] && echo "File 'test.paired_end.sorted.flagstat' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff "$test_dir/test.paired_end.sorted.flagstat" "$test_dir/test_ref.paired_end.sorted.flagstat" || \ + (echo "Output file test.paired_end.sorted.flagstat does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/test.paired_end.sorted.flagstat" + + + +echo "All tests succeeded!" +exit 0 \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/a.bam b/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/a.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..dba1268acbd8446e4fde54d7da33434597fbe635 GIT binary patch literal 184 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jWb_~TuUs6R95)ukH_@3~5+q`PUgD)R98yP)FV(BtuE_7vW z=9s|5aI{h|P#vgC9!+};gK@G0Lz-KrbIh-tVq12fpEAOZjf CvNY8I literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/a.bam.bai b/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/a.bam.bai new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..12f5f510fe7136521c64241cae7a86f7ecf6287f GIT binary patch literal 96 vcmZ>A^kigYU|?VZVoxCk1`wNp!5&O9Fzf)+UXvj5=;CZpRWJ%wFGLgo503;t literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/a_ref.flagstat b/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/a_ref.flagstat new file mode 100644 index 00000000..5d8b9a73 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/a_ref.flagstat @@ -0,0 +1,16 @@ +6 + 0 in total (QC-passed reads + QC-failed reads) +6 + 0 primary +0 + 0 secondary +0 + 0 supplementary +0 + 0 duplicates +0 + 0 primary duplicates +6 + 0 mapped (100.00% : N/A) +6 + 0 primary mapped (100.00% : N/A) +6 + 0 paired in sequencing +3 + 0 read1 +3 + 0 read2 +6 + 0 properly paired (100.00% : N/A) +6 + 0 with itself and mate mapped +0 + 0 singletons (0.00% : N/A) +0 + 0 with mate mapped to a different chr +0 + 0 with mate mapped to a different chr (mapQ>=5) diff --git a/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/script.sh b/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..fc32b48e --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,14 @@ +#!/bin/bash + +# Download test data from snakemake wrapper + +wget https://raw.githubusercontent.com/snakemake/snakemake-wrappers/3a4f7004281efc176fd9af732ad88d00c47d432d/bio/samtools/flagstat/test/mapped/a.bam +samtools index a.bam +# samtools flagstat a.bam > a_ref.flagstat + + +# Download test data from nf-core module + +wget https://github.com/nf-core/test-datasets/raw/modules/data/genomics/sarscov2/illumina/bam/test.paired_end.sorted.bam +wget https://github.com/nf-core/test-datasets/raw/modules/data/genomics/sarscov2/illumina/bam/test.paired_end.sorted.bam.bai +# samtools flagstat test.paired_end.sorted.bam > test_ref.paired_end.sorted.flagstat \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/test.paired_end.sorted.bam b/src/samtools/samtools_flagstat/test_data/test.paired_end.sorted.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..85cccf14b05a885509f1a1a2945ead6370bff9d5 GIT binary patch literal 19725 zcmV)uK$gEBiwFb&00000{{{d;LjnNsOtrlWxGhI@Ce}wUbS3%Btx|2d;4pYsPa_wy 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+resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/samtools:1.19.2--h50ea8bc_1 + setup: + - type: docker + run: | + samtools --version 2>&1 | grep -E '^(samtools|Using htslib)' | \ + sed 's#Using ##;s# \([0-9\.]*\)$#: \1#' > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_idxstats/help.txt b/src/samtools/samtools_idxstats/help.txt new file mode 100644 index 00000000..7b63ab17 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_idxstats/help.txt @@ -0,0 +1,12 @@ +``` +samtools idxstats +``` + +Usage: samtools idxstats [options] + --input-fmt-option OPT[=VAL] + Specify a single input file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE + -@, --threads INT + Number of additional threads to use [0] + --verbosity INT + Set level of verbosity \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_idxstats/script.sh b/src/samtools/samtools_idxstats/script.sh new file mode 100644 index 00000000..9f8d4af4 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_idxstats/script.sh @@ -0,0 +1,8 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +set -e + +samtools idxstats "$par_bam" > "$par_output" \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_idxstats/test.sh b/src/samtools/samtools_idxstats/test.sh new file mode 100644 index 00000000..1459ec08 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_idxstats/test.sh @@ -0,0 +1,49 @@ +#!/bin/bash + +test_dir="${meta_resources_dir}/test_data" +echo ">>> Testing $meta_functionality_name" + +"$meta_executable" \ + --bam "$test_dir/a.sorted.bam" \ + --bai "$test_dir/a.sorted.bam.bai" \ + --output "$test_dir/a.sorted.idxstats" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/a.sorted.idxstats" ] && echo "File 'a.sorted.idxstats' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/a.sorted.idxstats" ] && echo "File 'a.sorted.idxstats' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff "$test_dir/a.sorted.idxstats" "$test_dir/a_ref.sorted.idxstats" || \ + (echo "Output file a.sorted.idxstats does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/a.sorted.idxstats" + +############################################################################################ + +echo ">>> Testing $meta_functionality_name with singletons in the input" + +"$meta_executable" \ + --bam "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam" \ + --bai "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam.bai" \ + --output "$test_dir/test.paired_end.sorted.idxstats" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/test.paired_end.sorted.idxstats" ] && \ + echo "File 'test.paired_end.sorted.idxstats' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/test.paired_end.sorted.idxstats" ] && \ + echo "File 'test.paired_end.sorted.idxstats' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff "$test_dir/test.paired_end.sorted.idxstats" "$test_dir/test_ref.paired_end.sorted.idxstats" || \ + (echo "Output file test.paired_end.sorted.idxstats does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/test.paired_end.sorted.idxstats" + +############################################################################################ + +echo "All tests succeeded!" +exit 0 \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_idxstats/test_data/a.sorted.bam b/src/samtools/samtools_idxstats/test_data/a.sorted.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..1c81d7cd59e70b71fce1ed9911445e08d1da7df8 GIT binary patch literal 209 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jW;S9w^UsA86BqS7kD0s;8d9%?K<7YhIwtJmBukUs8jJJ;G z(;^POCp_OauUhfo%g4<|Mh}u$w9?ofb#bu?DzGxN_C$v`0F9GJGdG68IN5(1qp5~=TtV8sy)7XlJ&Z!4_mw$DOPe8#p dUFfFO@gH)s11qG+dg28RP{p004LQLv#QD literal 0 HcmV?d00001 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O%>*%#)ga7(C;|ZDbP8+$ literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_idxstats/test_data/test_ref.paired_end.sorted.idxstats b/src/samtools/samtools_idxstats/test_data/test_ref.paired_end.sorted.idxstats new file mode 100644 index 00000000..77bc11b8 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_idxstats/test_data/test_ref.paired_end.sorted.idxstats @@ -0,0 +1,2 @@ +MT192765.1 29829 197 3 +* 0 0 0 diff --git a/src/samtools/samtools_index/config.vsh.yaml b/src/samtools/samtools_index/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..8c59a20e --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_index/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,67 @@ +name: samtools_index +namespace: samtools +description: Index SAM/BAM/CRAM files. +keywords: [index, bam, sam, cram] +links: + homepage: https://www.htslib.org/ + documentation: https://www.htslib.org/doc/samtools-index.html + repository: https://github.com/samtools/samtools +references: + doi: [10.1093/bioinformatics/btp352, 10.1093/gigascience/giab008] +license: MIT/Expat + +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + type: file + description: Input file name + required: true + must_exist: true + - name: Outputs + arguments: + - name: --output + alternatives: -o + type: file + description: Output file name + required: true + direction: output + example: out.bam.bai + - name: Options + arguments: + - name: --bai + alternatives: -b + type: boolean_true + description: Generate BAM index + - name: --csi + alternatives: -c + type: boolean_true + description: | + Create a CSI index for BAM files instead of the traditional BAI + index. This will be required for genomes with larger chromosome + sizes. + - name: --min_shift + alternatives: -m + type: integer + description: | + Create a CSI index, with a minimum interval size of 2^INT. + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/samtools:1.19.2--h50ea8bc_1 + setup: + - type: docker + run: | + samtools --version 2>&1 | grep -E '^(samtools|Using htslib)' | \ + sed 's#Using ##;s# \([0-9\.]*\)$#: \1#' > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_index/help.txt b/src/samtools/samtools_index/help.txt new file mode 100644 index 00000000..fdf0d12d --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_index/help.txt @@ -0,0 +1,13 @@ +``` +samtools index +``` + +Usage: samtools index -M [-bc] [-m INT] ... + or: samtools index [-bc] [-m INT] [out.index] +Options: + -b, --bai Generate BAI-format index for BAM files [default] + -c, --csi Generate CSI-format index for BAM files + -m, --min-shift INT Set minimum interval size for CSI indices to 2^INT [14] + -M Interpret all filename arguments as files to be indexed + -o, --output FILE Write index to FILE [alternative to in args] + -@, --threads INT Sets the number of threads [none] \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_index/script.sh b/src/samtools/samtools_index/script.sh new file mode 100644 index 00000000..9db47fa4 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_index/script.sh @@ -0,0 +1,18 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +set -e +[[ "$par_multiple" == "false" ]] && unset par_multiple +[[ "$par_bai" == "false" ]] && unset par_bai +[[ "$par_csi" == "false" ]] && unset par_csi +[[ "$par_multiple" == "false" ]] && unset par_multiple + +samtools index \ + "$par_input" \ + ${par_csi:+-c} \ + ${par_bai:+-b} \ + ${par_min_shift:+-m "par_min_shift"} \ + ${par_multiple:+-M} \ + -o "$par_output" \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_index/test.sh b/src/samtools/samtools_index/test.sh new file mode 100644 index 00000000..f4b1d3b6 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_index/test.sh @@ -0,0 +1,91 @@ +#!/bin/bash + +test_dir="${meta_resources_dir}/test_data" + +echo ">>> Testing $meta_functionality_name" + +echo ">>> Generating BAM index" +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.sorted.bam" \ + --bai \ + --output "$test_dir/a.sorted.bam.bai" + +echo ">>> Check whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/a.sorted.bam.bai" ] && echo "File 'a.sorted.bam.bai' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Check whether output is empty" +[ ! -s "$test_dir/a.sorted.bam.bai" ] && echo "File 'a.sorted.bam.bai' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Check whether output is correct" +diff "$test_dir/a.sorted.bam.bai" "$test_dir/a_ref.sorted.bam.bai" || \ + (echo "File 'a.sorted.bam.bai' does not match expected output." && exit 1) + +rm "$test_dir/a.sorted.bam.bai" + +################################################################################################# + +echo ">>> Generating CSI index" +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.sorted.bam" \ + --csi \ + --output "$test_dir/a.sorted.bam.csi" + +echo ">>> Check whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/a.sorted.bam.csi" ] && echo "File 'a.sorted.bam.csi' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Check whether output is empty" +[ ! -s "$test_dir/a.sorted.bam.csi" ] && echo "File 'a.sorted.bam.csi' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Check whether output is correct" +diff "$test_dir/a.sorted.bam.csi" "$test_dir/a_ref.sorted.bam.csi" || \ + (echo "File 'a.sorted.bam.csi' does not match expected output." && exit 1) + +rm "$test_dir/a.sorted.bam.csi" + +################################################################################################# + +echo ">>> Generating bam index with -M option" +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.sorted.bam" \ + --bai \ + --output "$test_dir/a_multiple.sorted.bam.bai" \ + --multiple + +echo ">>> Check whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/a_multiple.sorted.bam.bai" ] && echo "File 'a_multiple.sorted.bam.bai' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Check whether output is empty" +[ ! -s "$test_dir/a_multiple.sorted.bam.bai" ] && echo "File 'a_multiple.sorted.bam.bai' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Check whether output is correct" +diff "$test_dir/a_multiple.sorted.bam.bai" "$test_dir/a_multiple_ref.sorted.bam.bai" || \ + (echo "File 'a_multiple.sorted.bam.bai' does not match expected output." && exit 1) + + +################################################################################################# + +echo ">>> Generating BAM index with -m option" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.sorted.bam" \ + --min_shift 4 \ + --bai \ + --output "$test_dir/a_4.sorted.bam.bai" + +echo ">>> Check whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/a_4.sorted.bam.bai" ] && echo "File 'a_4.sorted.bam.bai' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Check whether output is empty" +[ ! -s "$test_dir/a_4.sorted.bam.bai" ] && echo "File 'a_4.sorted.bam.bai' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Check whether output is correct" +diff "$test_dir/a_4.sorted.bam.bai" "$test_dir/a_4_ref.sorted.bam.bai" || \ + (echo "File 'a_4.sorted.bam.bai' does not match expected output." && exit 1) + +rm "$test_dir/a_4.sorted.bam.bai" + +################################################################################################# + + +echo "All tests succeeded!" +exit 0 \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_index/test_data/a.sorted.bam b/src/samtools/samtools_index/test_data/a.sorted.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..1c81d7cd59e70b71fce1ed9911445e08d1da7df8 GIT binary patch literal 209 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jW;S9w^UsA86BqS7kD0s;8d9%?K<7YhIwtJmBukUs8jJJ;G z(;^POCp_OauUhfo%g4<|Mh}u$w9?ofb#bu?DzGxN_C$v`0F9GJGdG68IN5(1qp5~=TtV8sy)7XlJ&Z!4_mw$DOPe8#p dUFfFO@gH)s11qG+dg28RP{p004LQLv#QD literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_index/test_data/a_4_ref.sorted.bam.bai b/src/samtools/samtools_index/test_data/a_4_ref.sorted.bam.bai new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..4f08f5d5e5e01de5042cb8f625c1d26b338c3394 GIT binary patch literal 96 vcmZ>A^kigYU|?VZVoxCk1`wNpAp%S?Fl+_WUXvj5=;CZpRWJ%wFGLgo8^r{K literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_index/test_data/a_multiple_ref.sorted.bam.bai b/src/samtools/samtools_index/test_data/a_multiple_ref.sorted.bam.bai new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..4f08f5d5e5e01de5042cb8f625c1d26b338c3394 GIT binary patch literal 96 vcmZ>A^kigYU|?VZVoxCk1`wNpAp%S?Fl+_WUXvj5=;CZpRWJ%wFGLgo8^r{K literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_index/test_data/a_ref.sorted.bam.bai b/src/samtools/samtools_index/test_data/a_ref.sorted.bam.bai new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..4f08f5d5e5e01de5042cb8f625c1d26b338c3394 GIT binary patch literal 96 vcmZ>A^kigYU|?VZVoxCk1`wNpAp%S?Fl+_WUXvj5=;CZpRWJ%wFGLgo8^r{K literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_index/test_data/a_ref.sorted.bam.csi b/src/samtools/samtools_index/test_data/a_ref.sorted.bam.csi new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..e337be19114c46122bec090c290fa7f00b9656ba GIT binary patch literal 89 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jWHVnml-%_3=J21Ghv9YOH=rifDB^w*$q$W57GAA!Swb?L% Xond3!grWkV9(gp)(hSUCvp@s@dy5gP literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_index/test_data/script.sh b/src/samtools/samtools_index/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..ee86e514 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_index/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,12 @@ +#!/bin/bash + +# dowload test data from snakemake wrapper +if [ ! -d /tmp/idxstats_source ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers.git /tmp/idxstats_source +fi + +cp -r /tmp/idxstats_source/bio/samtools/idxstats/test/mapped/* src/samtools/idxstats/test_data +# samtools index a_ref.sorted.bam -o a_ref.sorted.bam.bai +# samtools index a_ref.sorted.bam -c a_ref.sorted.bam.csi + + diff --git a/src/samtools/samtools_sort/config.vsh.yaml b/src/samtools/samtools_sort/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..a78800da --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_sort/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,149 @@ +name: samtools_sort +namespace: samtools +description: Sort SAM/BAM/CRAM file. +keywords: [sort, bam, sam, cram] +links: + homepage: https://www.htslib.org/ + documentation: https://www.htslib.org/doc/samtools-sort.html + repository: https://github.com/samtools/samtools +references: + doi: [10.1093/bioinformatics/btp352, 10.1093/gigascience/giab008] +license: MIT/Expat + +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + type: file + description: SAM/BAM/CRAM input file. + required: true + must_exist: true + - name: Outputs + arguments: + - name: --output + type: file + description: | + Write final output to file. + required: true + direction: output + example: out.bam + - name: --output_fmt + alternatives: -O + type: string + description: | + Specify output format (SAM, BAM, CRAM). + example: BAM + - name: --output_fmt_option + type: string + description: | + Specify a single output file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE. + - name: --reference + type: file + description: | + Reference sequence FASTA FILE. + example: ref.fa + - name: --write_index + type: boolean_true + description: | + Automatically index the output files. + - name: --prefix + alternatives: -T + type: string + description: | + Write temporary files to PREFIX.nnnn.bam. + - name: --no_PG + type: boolean_true + description: | + Do not add a PG line. + - name: --template_coordinate + type: boolean_true + description: | + Sort by template-coordinate. + - name: --input_fmt_option + type: string + description: | + Specify a single input file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE. + - name: Options + arguments: + - name: --compression + alternatives: -l + type: integer + description: | + Set compression level, from 0 (uncompressed) to 9 (best). + default: 0 + - name: --uncompressed + alternatives: -u + type: boolean_true + description: | + Output uncompressed data (equivalent to --compression 0). + - name: --minimiser + alternatives: -M + type: boolean_true + description: | + Use minimiser for clustering unaligned/unplaced reads. + - name: --not_reverse + alternatives: -R + type: boolean_true + description: | + Do not use reverse strand (only compatible with --minimiser) + - name: --kmer_size + alternatives: -K + type: integer + description: | + Kmer size to use for minimiser. + example: 20 + - name: --order + alternatives: -I + type: file + description: | + Order minimisers by their position in FILE FASTA. + example: ref.fa + - name: --window + alternatives: -w + type: integer + description: | + Window size for minimiser INDEXING VIA --order REF.FA. + example: 100 + - name: --homopolymers + alternatives: -H + type: boolean_true + description: | + Squash homopolymers when computing minimiser. + - name: --natural_sort + alternatives: -n + type: boolean_true + description: | + Sort by read name (natural): cannot be used with samtools index. + - name: --ascii_sort + alternatives: -N + type: boolean_true + description: | + Sort by read name (ASCII): cannot be used with samtools index. + - name: --tag + alternatives: -t + type: string + description: | + Sort by value of TAG. Uses position as secondary index + (or read name if --natural_sort is set). + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/samtools:1.19.2--h50ea8bc_1 + setup: + - type: docker + run: | + samtools --version 2>&1 | grep -E '^(samtools|Using htslib)' | \ + sed 's#Using ##;s# \([0-9\.]*\)$#: \1#' > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_sort/help.txt b/src/samtools/samtools_sort/help.txt new file mode 100644 index 00000000..27cd86a0 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_sort/help.txt @@ -0,0 +1,40 @@ +``` +samtools sort +``` + +Usage: samtools sort [options...] [in.bam] +Options: + -l INT Set compression level, from 0 (uncompressed) to 9 (best) + -u Output uncompressed data (equivalent to -l 0) + -m INT Set maximum memory per thread; suffix K/M/G recognized [768M] + -M Use minimiser for clustering unaligned/unplaced reads + -R Do not use reverse strand (only compatible with -M) + -K INT Kmer size to use for minimiser [20] + -I FILE Order minimisers by their position in FILE FASTA + -w INT Window size for minimiser indexing via -I ref.fa [100] + -H Squash homopolymers when computing minimiser + -n Sort by read name (natural): cannot be used with samtools index + -N Sort by read name (ASCII): cannot be used with samtools index + -t TAG Sort by value of TAG. Uses position as secondary index (or read name if -n is set) + -o FILE Write final output to FILE rather than standard output + -T PREFIX Write temporary files to PREFIX.nnnn.bam + --no-PG + Do not add a PG line + --template-coordinate + Sort by template-coordinate + --input-fmt-option OPT[=VAL] + Specify a single input file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE + -O, --output-fmt FORMAT[,OPT[=VAL]]... + Specify output format (SAM, BAM, CRAM) + --output-fmt-option OPT[=VAL] + Specify a single output file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE + --reference FILE + Reference sequence FASTA FILE [null] + -@, --threads INT + Number of additional threads to use [0] + --write-index + Automatically index the output files [off] + --verbosity INT + Set level of verbosity \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_sort/script.sh b/src/samtools/samtools_sort/script.sh new file mode 100644 index 00000000..94836c18 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_sort/script.sh @@ -0,0 +1,43 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +set -e + +[[ "$par_uncompressed" == "false" ]] && unset par_uncompressed +[[ "$par_minimiser" == "false" ]] && unset par_minimiser +[[ "$par_not_reverse" == "false" ]] && unset par_not_reverse +[[ "$par_homopolymers" == "false" ]] && unset par_homopolymers +[[ "$par_natural_sort" == "false" ]] && unset par_natural_sort +[[ "$par_ascii_sort" == "false" ]] && unset par_ascii_sort +[[ "$par_template_coordinate" == "false" ]] && unset par_template_coordinate +[[ "$par_write_index" == "false" ]] && unset par_write_index +[[ "$par_no_PG" == "false" ]] && unset par_no_PG + + +samtools sort \ + ${par_compression:+-l "$par_compression"} \ + ${par_uncompressed:+-u} \ + ${par_minimiser:+-M} \ + ${par_not_reverse:+-R} \ + ${par_kmer_size:+-K "$par_kmer_size"} \ + ${par_order:+-I "$par_order"} \ + ${par_window:+-w "$par_window"} \ + ${par_homopolymers:+-H} \ + ${par_natural_sort:+-n} \ + ${par_ascii_sort:+-N} \ + ${par_tag:+-t "$par_tag"} \ + ${par_input_fmt_option:+--input-fmt-option "$par_input_fmt_option"} \ + ${par_template_coordinate:+--template-coordinate} \ + ${par_write_index:+--write-index} \ + ${par_prefix:+-T "$par_prefix"} \ + ${par_no_PG:+--no-PG} \ + ${par_output_fmt:+-O "$par_output_fmt"} \ + ${par_output_fmt_option:+--output-fmt-option "$par_output_fmt_option"} \ + ${par_reference:+--reference "$par_reference"} \ + -o "$par_output" \ + "$par_input" + +# save text files containing the output of samtools view for later comparison +samtools view "$par_output" -o "$par_output".txt \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_sort/test.sh b/src/samtools/samtools_sort/test.sh new file mode 100644 index 00000000..d8425dc9 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_sort/test.sh @@ -0,0 +1,79 @@ +#!/bin/bash + +test_dir="${meta_resources_dir}/test_data" +out_dir="${meta_resources_dir}/test_data/text" + +# Files are compared using the "samtools view" output. +############################################################################################ + +echo ">>> Test 1: Sorting a BAM file" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.bam" \ + --output "$test_dir/a.sorted.bam" + +echo ">>> Check if output file exists" +[ ! -f "$test_dir/a.sorted.bam" ] \ + && echo "Output file a.sorted.bam does not exist" && exit 1 + +echo ">>> Check if output is empty" +[ ! -s "$test_dir/a.sorted.bam" ] \ + && echo "Output file a.sorted.bam is empty" && exit 1 + +echo ">>> Check if output matches expected output" +diff -a "$test_dir/a.sorted.bam.txt" "$out_dir/a_ref.sorted.txt" \ + || (echo "Output file a.sorted.bam does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/a.sorted.bam" "$test_dir/a.sorted.bam.txt" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 2: Sorting a BAM file according to ascii order" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.bam" \ + --ascii_sort \ + --output "$test_dir/ascii.sorted.bam" + +echo ">>> Check if output file exists" +[ ! -f "$test_dir/ascii.sorted.bam" ] \ + && echo "Output file ascii.sorted.bam does not exist" && exit 1 + +echo ">>> Check if output is empty" +[ ! -s "$test_dir/ascii.sorted.bam" ] \ + && echo "Output file ascii.sorted.bam is empty" && exit 1 + +echo ">>> Check if output matches expected output" +diff -a "$test_dir/ascii.sorted.bam.txt" "$out_dir/ascii_ref.sorted.txt" \ + || (echo "Output file ascii.sorted.bam does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/ascii.sorted.bam" "$test_dir/ascii.sorted.bam.txt" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 3: Sorting a BAM file with compression" + +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/a.bam" \ + --compression 5 \ + --output "$test_dir/compressed.sorted.bam" + +echo ">>> Check if output file exists" +[ ! -f "$test_dir/compressed.sorted.bam" ] \ + && echo "Output file compressed.sorted.bam does not exist" && exit 1 + +echo ">>> Check if output is empty" +[ ! -s "$test_dir/compressed.sorted.bam" ] \ + && echo "Output file compressed.sorted.bam is empty" && exit 1 + +echo ">>> Check if output matches expected output" # +diff "$test_dir/compressed.sorted.bam.txt" "$out_dir/compressed_ref.sorted.txt" \ + || (echo "Output file compressed.sorted.bam does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/compressed.sorted.bam" "$test_dir/compressed.sorted.bam.txt" + +############################################################################################ + + +echo "All tests succeeded!" +exit 0 \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_sort/test_data/a.bam b/src/samtools/samtools_sort/test_data/a.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..dba1268acbd8446e4fde54d7da33434597fbe635 GIT binary patch literal 184 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jWb_~TuUs6R95)ukH_@3~5+q`PUgD)R98yP)FV(BtuE_7vW z=9s|5aI{h|P#vgC9!+};gK@G0Lz-KrbIh-tVq12fpEAOZjf CvNY8I literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_sort/test_data/output/a_ref.sorted.bam b/src/samtools/samtools_sort/test_data/output/a_ref.sorted.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..da4edc86ce845f32e87096851b93ac7d1e381b46 GIT binary patch literal 301 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jW%NdG`zNF4Mb>P5*2M-TPK1)wsk$z0_P5#t5^W&#XnmIjU z(y6BcGAAV8q=yC`eEB#%HRZrlfd}VazDx?8Gb4J^{Q1FWBpvNHGNa_av_YI!_+Wof!sMr3TLFQ`<(V$q&ZVreVm$7< RRX2ta(;{gGW^nj`2mtJmbie=r literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_sort/test_data/output/ascii_ref.sorted.bam b/src/samtools/samtools_sort/test_data/output/ascii_ref.sorted.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..58e4f57e7061005d529f9fbeb58cde781386eb0f GIT binary patch literal 325 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jWdl`It9Qm3IL|FG1hF+6v;AS{<=*YSN&nqn2%Q~Y!wXX6# zkQ6mdp9=h zMun!m;JFpWD(NOOt1~yM{_c^=SsT==$SVEaTu%RROU|eJuceo+l{c^t*e7~ynrT!| zNdE47ZW&sd-n#1^CUjcuN%)=q@W4G5hGh&7WX>==U_K=&@#Z|x(eh}n&tfo6c3?eZ4;(n~;o1NH{{!aA rg1`)`k2hz!Y@6$ua(kxFwz(%G-m)Gy^j@+&}~X>U@0T literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_sort/test_data/output/compressed_ref.sorted.bam b/src/samtools/samtools_sort/test_data/output/compressed_ref.sorted.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..d10c2c0079e633c0edc9ee46b03ca58e8a790ecf GIT binary patch literal 312 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jWn;3k14sta)h`7$*B6Yp?z@LU$PL7*532ALODRAr56CZ&L z|Fn4q|1bBq>8`rFxBc+VJimk744<42t_xc7vFmF3MWv{}64#7QHpM< z+?sye$>OST((?$_`rpDH*9(u8J)K_EKCR-)N7eoblMAn8xN04o*fw#J*zbc<&wKLL z>^wd>r=%wM@BCHEJ$D@-gIR951il1$3!Anv*jajFTN0(%k$N-P%&v^fcyo zH#R!9G&U+;oRG-K%-p;H2o%(1W(Y1c?#!8cvZA!;V5wi*>y(6qgo@Aq|JSd`wzdKS ekIOS%ww+5^W5syfcdKp;Bc?^t49wu50ucafe|m-h literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_sort/test_data/script.sh b/src/samtools/samtools_sort/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..a7a5b13c --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_sort/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,8 @@ +#!/bin/bash + +# dowload test data from snakemake wrapper +if [ ! -d /tmp/idxstats_source ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers.git /tmp/sort_source +fi + +cp -r /tmp/sort_source/bio/samtools/sort/test/mapped/* src/samtools/samtools_sort/test_data diff --git a/src/samtools/samtools_sort/test_data/text/a_ref.sorted.txt b/src/samtools/samtools_sort/test_data/text/a_ref.sorted.txt new file mode 100644 index 00000000..ce8d0527 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_sort/test_data/text/a_ref.sorted.txt @@ -0,0 +1,6 @@ +a1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +b1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +c1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +a1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +b1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +c1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** diff --git a/src/samtools/samtools_sort/test_data/text/ascii_ref.sorted.txt b/src/samtools/samtools_sort/test_data/text/ascii_ref.sorted.txt new file mode 100644 index 00000000..00cdbc69 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_sort/test_data/text/ascii_ref.sorted.txt @@ -0,0 +1,6 @@ +a1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +a1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +b1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +b1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +c1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +c1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** diff --git a/src/samtools/samtools_sort/test_data/text/compressed_ref.sorted.txt b/src/samtools/samtools_sort/test_data/text/compressed_ref.sorted.txt new file mode 100644 index 00000000..ce8d0527 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_sort/test_data/text/compressed_ref.sorted.txt @@ -0,0 +1,6 @@ +a1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +b1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +c1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +a1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +b1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +c1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** diff --git a/src/samtools/samtools_stats/config.vsh.yaml b/src/samtools/samtools_stats/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..0d8f57a4 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_stats/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,166 @@ +name: samtools_stats +namespace: samtools +description: Reports alignment summary statistics for a BAM file. +keywords: [statistics, counts, bam, sam, cram] +links: + homepage: https://www.htslib.org/ + documentation: https://www.htslib.org/doc/samtools-stats.html + repository: https://github.com/samtools/samtools +references: + doi: [10.1093/bioinformatics/btp352, 10.1093/gigascience/giab008] +license: MIT/Expat + +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + type: file + description: | + Input file. + required: true + must_exist: true + - name: --bai + type: file + description: | + Index file. + - name: --fasta + type: file + description: | + Reference file the CRAM was created with. + - name: --coverage + alternatives: -c + type: integer + description: | + Coverage distribution min,max,step [1,1000,1]. + multiple: true + multiple_sep: ',' + - name: --remove_dups + alternatives: -d + type: boolean_true + description: | + Exclude from statistics reads marked as duplicates. + - name: --customized_index_file + alternatives: -X + type: boolean_true + description: | + Use a customized index file. + - name: --required_flag + alternatives: -f + type: string + description: | + Required flag, 0 for unset. See also `samtools flags`. + default: "0" + - name: --filtering_flag + alternatives: -F + type: string + description: | + Filtering flag, 0 for unset. See also `samtools flags`. + default: "0" + - name: --GC_depth + type: double + description: | + The size of GC-depth bins (decreasing bin size increases memory requirement). + default: 20000.0 + - name: --insert_size + alternatives: -i + type: integer + description: | + Maximum insert size. + default: 8000 + - name: --id + alternatives: -I + type: string + description: | + Include only listed read group or sample name. + - name: --read_length + alternatives: -l + type: integer + description: | + Include in the statistics only reads with the given read length. + default: -1 + - name: --most_inserts + alternatives: -m + type: double + description: | + Report only the main part of inserts. + default: 0.99 + - name: --split_prefix + alternatives: -P + type: string + description: | + Path or string prefix for filepaths output by --split (default is input filename). + - name: --trim_quality + alternatives: -q + type: integer + description: | + The BWA trimming parameter. + default: 0 + - name: --ref_seq + alternatives: -r + type: file + description: | + Reference sequence (required for GC-depth and mismatches-per-cycle calculation). + - name: --split + alternatives: -S + type: string + description: | + Also write statistics to separate files split by tagged field. + - name: --target_regions + alternatives: -t + type: file + description: | + Do stats in these regions only. Tab-delimited file chr,from,to, 1-based, inclusive. + - name: --sparse + alternatives: -x + type: boolean_true + description: | + Suppress outputting IS rows where there are no insertions. + - name: --remove_overlaps + alternatives: -p + type: boolean_true + description: | + Remove overlaps of paired-end reads from coverage and base count computations. + - name: --cov_threshold + alternatives: -g + type: integer + description: | + Only bases with coverage above this value will be included in the target percentage computation. + default: 0 + - name: --input_fmt_option + type: string + description: | + Specify a single input file format option in the form of OPTION or OPTION=VALUE. + - name: --reference + type: file + description: | + Reference sequence FASTA FILE. + - name: Outputs + arguments: + - name: --output + alternatives: -o + type: file + description: | + Output file. + default: "out.txt" + required: true + direction: output + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/samtools:1.19.2--h50ea8bc_1 + setup: + - type: docker + run: | + samtools --version 2>&1 | grep -E '^(samtools|Using htslib)' | \ + sed 's#Using ##;s# \([0-9\.]*\)$#: \1#' > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow diff --git a/src/samtools/samtools_stats/help.txt b/src/samtools/samtools_stats/help.txt new file mode 100644 index 00000000..2298a362 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_stats/help.txt @@ -0,0 +1,36 @@ +``` +samtools stats -h +``` + +Usage: samtools stats [OPTIONS] file.bam + samtools stats [OPTIONS] file.bam chr:from-to +Options: + -c, --coverage ,, Coverage distribution min,max,step [1,1000,1] + -d, --remove-dups Exclude from statistics reads marked as duplicates + -X, --customized-index-file Use a customized index file + -f, --required-flag Required flag, 0 for unset. See also `samtools flags` [0] + -F, --filtering-flag Filtering flag, 0 for unset. See also `samtools flags` [0] + --GC-depth the size of GC-depth bins (decreasing bin size increases memory requirement) [2e4] + -h, --help This help message + -i, --insert-size Maximum insert size [8000] + -I, --id Include only listed read group or sample name + -l, --read-length Include in the statistics only reads with the given read length [-1] + -m, --most-inserts Report only the main part of inserts [0.99] + -P, --split-prefix Path or string prefix for filepaths output by -S (default is input filename) + -q, --trim-quality The BWA trimming parameter [0] + -r, --ref-seq Reference sequence (required for GC-depth and mismatches-per-cycle calculation). + -s, --sam Ignored (input format is auto-detected). + -S, --split Also write statistics to separate files split by tagged field. + -t, --target-regions Do stats in these regions only. Tab-delimited file chr,from,to, 1-based, inclusive. + -x, --sparse Suppress outputting IS rows where there are no insertions. + -p, --remove-overlaps Remove overlaps of paired-end reads from coverage and base count computations. + -g, --cov-threshold Only bases with coverage above this value will be included in the target percentage computation [0] + --input-fmt-option OPT[=VAL] + Specify a single input file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE + --reference FILE + Reference sequence FASTA FILE [null] + -@, --threads INT + Number of additional threads to use [0] + --verbosity INT + Set level of verbosity diff --git a/src/samtools/samtools_stats/script.sh b/src/samtools/samtools_stats/script.sh new file mode 100644 index 00000000..6e32e9a5 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_stats/script.sh @@ -0,0 +1,36 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +set -e + +[[ "$par_remove_dups" == "false" ]] && unset par_remove_dups +[[ "$par_customized_index_file" == "false" ]] && unset par_customized_index_file +[[ "$par_sparse" == "false" ]] && unset par_sparse +[[ "$par_remove_overlaps" == "false" ]] && unset par_remove_overlaps + +samtools stats \ + ${par_coverage:+-c "$par_coverage"} \ + ${par_remove_dups:+-d} \ + ${par_required_flag:+-f "$par_required_flag"} \ + ${par_filtering_flag:+-F "$par_filtering_flag"} \ + ${par_GC_depth:+--GC-depth "$par_GC_depth"} \ + ${par_insert_size:+-i "$par_insert_size"} \ + ${par_id:+-I "$par_id"} \ + ${par_read_length:+-l "$par_read_length"} \ + ${par_most_inserts:+-m "$par_most_inserts"} \ + ${par_split_prefix:+-P "$par_split_prefix"} \ + ${par_trim_quality:+-q "$par_trim_quality"} \ + ${par_ref_seq:+-r "$par_ref_seq"} \ + ${par_split:+-S "$par_split"} \ + ${par_target_regions:+-t "$par_target_regions"} \ + ${par_sparse:+-x} \ + ${par_remove_overlaps:+-p} \ + ${par_cov_threshold:+-g "$par_cov_threshold"} \ + ${par_input_fmt_option:+-O "$par_input_fmt_option"} \ + ${par_reference:+-R "$par_reference"} \ + "$par_input" \ + > "$par_output" + +exit 0 \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_stats/test.sh b/src/samtools/samtools_stats/test.sh new file mode 100644 index 00000000..05d70d30 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_stats/test.sh @@ -0,0 +1,78 @@ +#!/bin/bash + +test_dir="${meta_resources_dir}/test_data" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 1: $meta_functionality_name" +"$meta_executable" \ + --input "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam" \ + --bai "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam.bai" \ + --output "$test_dir/test.paired_end.sorted.txt" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/test.paired_end.sorted.txt" ] && echo "File 'test.paired_end.sorted.txt' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/test.paired_end.sorted.txt" ] && echo "File 'test.paired_end.sorted.txt' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +# compare using diff, ignoring the line stating the command that was passed. +diff <(grep -v "^# The command" "$test_dir/test.paired_end.sorted.txt") \ + <(grep -v "^# The command" "$test_dir/ref.paired_end.sorted.txt") || \ + (echo "Output file ref.paired_end.sorted.txt does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/test.paired_end.sorted.txt" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 2: $meta_functionality_name with --remove_dups" +"$meta_executable" \ + --remove_dups \ + --input "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam" \ + --bai "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam.bai" \ + --output "$test_dir/test.d.paired_end.sorted.txt" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/ref.d.paired_end.sorted.txt" ] && echo "File 'ref.d.paired_end.sorted.txt' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/ref.d.paired_end.sorted.txt" ] && echo "File 'ref.d.paired_end.sorted.txt' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +# compare using diff, ignoring the line stating the command that was passed. +diff <(grep -v "^# The command" "$test_dir/test.d.paired_end.sorted.txt") \ + <(grep -v "^# The command" "$test_dir/ref.d.paired_end.sorted.txt") || \ + (echo "Output file ref.d.paired_end.sorted.txt does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/test.d.paired_end.sorted.txt" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 3: $meta_functionality_name with --remove_overlaps" +"$meta_executable" \ + --remove_overlaps \ + --input "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam" \ + --bai "$test_dir/test.paired_end.sorted.bam.bai" \ + --output "$test_dir/test.p.paired_end.sorted.txt" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$test_dir/ref.p.paired_end.sorted.txt" ] && echo "File 'ref.p.paired_end.sorted.txt' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$test_dir/ref.p.paired_end.sorted.txt" ] && echo "File 'ref.p.paired_end.sorted.txt' is empty!" && exit 1 + + +echo ">>> Checking whether output is correct" +# compare using diff, ignoring the line stating the command that was passed. +diff <(grep -v "^# The command" "$test_dir/test.p.paired_end.sorted.txt") \ + <(grep -v "^# The command" "$test_dir/ref.p.paired_end.sorted.txt") || \ + (echo "Output file ref.p.paired_end.sorted.txt does not match expected output" && exit 1) + +rm "$test_dir/test.p.paired_end.sorted.txt" + +############################################################################################ + +echo ">>> All tests passed successfully." + +exit 0 diff --git a/src/samtools/samtools_stats/test_data/ref.d.paired_end.sorted.txt b/src/samtools/samtools_stats/test_data/ref.d.paired_end.sorted.txt new file mode 100644 index 00000000..315c597d --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_stats/test_data/ref.d.paired_end.sorted.txt @@ -0,0 +1,1539 @@ +# This file was produced by samtools stats (1.19.2+htslib-1.19.1) and can be plotted using plot-bamstats +# This file contains statistics for all reads. +# The command line was: stats -d test_data/test.paired_end.sorted.bam +# CHK, Checksum [2]Read Names [3]Sequences [4]Qualities +# CHK, CRC32 of reads which passed filtering followed by addition (32bit overflow) +CHK 696e2242 1799722a a8072f55 +# Summary Numbers. Use `grep ^SN | cut -f 2-` to extract this part. +SN raw total sequences: 200 # excluding supplementary and secondary reads +SN filtered sequences: 0 +SN sequences: 200 +SN is sorted: 1 +SN 1st fragments: 100 +SN last fragments: 100 +SN reads mapped: 197 +SN reads mapped and paired: 194 # paired-end technology bit set + both mates mapped +SN reads unmapped: 3 +SN reads properly paired: 192 # proper-pair bit set +SN reads paired: 200 # paired-end technology bit set +SN reads duplicated: 0 # PCR or optical duplicate bit set +SN reads MQ0: 0 # mapped and MQ=0 +SN reads QC failed: 0 +SN non-primary alignments: 0 +SN supplementary alignments: 0 +SN total length: 27645 # ignores clipping +SN total first fragment length: 13897 # ignores clipping +SN total last fragment length: 13748 # ignores clipping +SN bases mapped: 27423 # ignores clipping +SN bases mapped (cigar): 27401 # more accurate +SN bases trimmed: 0 +SN bases duplicated: 0 +SN mismatches: 140 # from NM fields +SN error rate: 5.109303e-03 # mismatches / bases mapped (cigar) +SN average length: 138 +SN average first fragment length: 139 +SN average last fragment length: 137 +SN maximum length: 151 +SN maximum first fragment length: 151 +SN maximum last fragment length: 151 +SN average quality: 33.3 +SN insert size average: 207.7 +SN insert size standard deviation: 66.4 +SN inward oriented pairs: 88 +SN outward oriented pairs: 9 +SN pairs with other orientation: 0 +SN pairs on different chromosomes: 0 +SN percentage of properly paired reads (%): 96.0 +# First Fragment Qualities. Use `grep ^FFQ | cut -f 2-` to extract this part. +# Columns correspond to qualities and rows to cycles. First column is the cycle number. +FFQ 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 100 0 0 0 0 0 +FFQ 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 96 0 0 0 0 0 +FFQ 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 97 0 0 0 0 0 +FFQ 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 94 0 0 0 1 0 +FFQ 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 93 0 0 0 0 0 +FFQ 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 86 0 +FFQ 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 84 0 +FFQ 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 12 0 0 0 83 0 +FFQ 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 11 0 0 0 85 0 +FFQ 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 5 0 0 0 87 0 +FFQ 11 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 90 0 +FFQ 12 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 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0 +FFQ 36 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 85 0 +FFQ 37 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 4 0 0 0 87 0 +FFQ 38 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 4 0 0 0 91 0 +FFQ 39 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 6 0 0 0 86 0 +FFQ 40 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 90 0 +FFQ 41 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 85 0 +FFQ 42 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 88 0 +FFQ 43 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 10 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 4 0 0 0 83 0 +FFQ 44 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 8 0 0 0 83 0 +FFQ 45 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 6 0 0 0 86 0 +FFQ 46 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 9 0 0 0 85 0 +FFQ 47 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 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0 0 0 0 18 0 0 0 11 0 +# Last Fragment Qualities. Use `grep ^LFQ | cut -f 2-` to extract this part. +# Columns correspond to qualities and rows to cycles. First column is the cycle number. +LFQ 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 100 0 0 0 0 0 +LFQ 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 95 0 0 0 0 0 +LFQ 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 93 0 0 0 0 0 +LFQ 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 94 0 0 0 0 0 +LFQ 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 94 0 0 0 1 0 +LFQ 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 10 0 0 0 83 0 +LFQ 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 93 0 +LFQ 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 91 0 +LFQ 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 87 0 +LFQ 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 90 0 +LFQ 11 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 90 0 +LFQ 12 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 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87 0 +LFQ 36 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 82 0 +LFQ 37 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 83 0 +LFQ 38 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 85 0 +LFQ 39 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 7 0 0 0 85 0 +LFQ 40 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 6 0 0 0 88 0 +LFQ 41 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 11 0 0 0 78 0 +LFQ 42 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 87 0 +LFQ 43 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 81 0 +LFQ 44 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 6 0 0 0 86 0 +LFQ 45 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 85 0 +LFQ 46 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 9 0 0 0 81 0 +LFQ 47 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 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Use `grep ^GCF | cut -f 2-` to extract this part. +GCF 15.08 0 +GCF 30.40 1 +GCF 31.16 2 +GCF 32.16 0 +GCF 33.17 2 +GCF 33.92 5 +GCF 34.42 4 +GCF 34.92 2 +GCF 35.43 3 +GCF 35.93 7 +GCF 36.43 9 +GCF 36.93 4 +GCF 37.44 7 +GCF 37.94 8 +GCF 38.44 10 +GCF 38.94 7 +GCF 39.70 6 +GCF 40.45 8 +GCF 40.95 9 +GCF 41.71 4 +GCF 42.46 5 +GCF 42.96 7 +GCF 43.72 2 +GCF 44.72 1 +GCF 45.48 3 +GCF 46.48 2 +GCF 47.74 1 +GCF 48.74 2 +GCF 50.25 0 +GCF 52.01 1 +GCF 54.77 0 +GCF 57.54 1 +# GC Content of last fragments. Use `grep ^GCL | cut -f 2-` to extract this part. +GCL 15.08 0 +GCL 30.65 1 +GCL 31.66 0 +GCL 32.41 2 +GCL 32.91 1 +GCL 33.42 3 +GCL 33.92 4 +GCL 34.42 3 +GCL 34.92 4 +GCL 35.68 5 +GCL 36.43 10 +GCL 36.93 8 +GCL 37.44 7 +GCL 37.94 9 +GCL 38.44 10 +GCL 38.94 13 +GCL 39.45 8 +GCL 39.95 7 +GCL 40.45 2 +GCL 40.95 4 +GCL 41.46 3 +GCL 41.96 1 +GCL 42.46 4 +GCL 42.96 6 +GCL 43.47 4 +GCL 44.22 2 +GCL 44.97 4 +GCL 45.48 7 +GCL 45.98 3 +GCL 46.48 2 +GCL 46.98 3 +GCL 47.49 1 +GCL 48.49 0 +GCL 49.75 2 +# ACGT content per cycle. Use `grep ^GCC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%]; and N and O counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +GCC 1 19.50 26.50 31.50 22.50 0.00 0.00 +GCC 2 30.50 20.50 17.00 32.00 0.00 0.00 +GCC 3 32.00 15.00 16.50 36.50 0.00 0.00 +GCC 4 30.50 21.00 17.50 31.00 0.00 0.00 +GCC 5 39.50 9.50 12.50 38.50 0.00 0.00 +GCC 6 28.00 17.50 18.50 36.00 0.00 0.00 +GCC 7 29.50 19.50 21.00 30.00 0.00 0.00 +GCC 8 29.50 21.00 23.00 26.50 0.00 0.00 +GCC 9 22.00 32.50 27.00 18.50 0.00 0.00 +GCC 10 36.00 12.00 16.00 36.00 0.00 0.00 +GCC 11 28.00 18.50 20.50 33.00 0.00 0.00 +GCC 12 33.50 21.00 16.00 29.50 0.00 0.00 +GCC 13 28.00 19.00 27.50 25.50 0.00 0.00 +GCC 14 24.50 21.50 19.00 35.00 0.00 0.00 +GCC 15 29.50 16.50 20.00 34.00 0.00 0.00 +GCC 16 31.00 20.00 21.50 27.50 0.00 0.00 +GCC 17 27.50 16.50 19.50 36.50 0.00 0.00 +GCC 18 30.50 24.00 19.50 26.00 0.00 0.00 +GCC 19 23.50 21.50 17.50 37.50 0.00 0.00 +GCC 20 31.50 17.00 21.50 30.00 0.00 0.00 +GCC 21 26.00 22.00 17.50 34.50 0.00 0.00 +GCC 22 30.50 19.00 23.00 27.50 0.00 0.00 +GCC 23 31.50 15.50 22.50 30.50 0.00 0.00 +GCC 24 32.00 18.00 21.00 29.00 0.00 0.00 +GCC 25 27.50 16.50 22.00 34.00 0.00 0.00 +GCC 26 27.50 18.50 23.50 30.50 0.00 0.00 +GCC 27 28.50 19.00 19.50 33.00 0.00 0.00 +GCC 28 22.50 21.00 22.50 34.00 0.00 0.00 +GCC 29 27.00 18.50 22.00 32.50 0.00 0.00 +GCC 30 30.50 20.00 21.50 28.00 0.00 0.00 +GCC 31 24.50 21.00 24.00 30.50 0.00 0.00 +GCC 32 32.50 17.50 16.50 33.50 0.00 0.00 +GCC 33 28.50 16.00 25.00 30.50 0.00 0.00 +GCC 34 29.00 21.00 23.50 26.50 0.00 0.00 +GCC 35 32.50 18.50 21.00 28.00 0.00 0.00 +GCC 36 35.00 12.50 20.00 32.50 0.00 0.00 +GCC 37 26.50 20.00 18.50 35.00 0.00 0.00 +GCC 38 27.00 21.00 19.50 32.50 0.00 0.00 +GCC 39 31.00 20.00 19.00 30.00 0.00 0.00 +GCC 40 27.50 20.00 21.50 31.00 0.00 0.00 +GCC 41 37.00 16.50 19.00 27.50 0.00 0.00 +GCC 42 26.50 19.50 18.50 35.50 0.00 0.00 +GCC 43 33.50 20.00 17.50 29.00 0.00 0.00 +GCC 44 31.50 16.00 21.00 31.50 0.00 0.00 +GCC 45 28.50 19.00 20.00 32.50 0.00 0.00 +GCC 46 24.50 23.50 17.50 34.50 0.00 0.00 +GCC 47 22.50 24.50 19.50 33.50 0.00 0.00 +GCC 48 27.50 17.50 22.50 32.50 0.00 0.00 +GCC 49 28.50 17.00 20.00 34.50 0.00 0.00 +GCC 50 32.00 16.50 20.00 31.50 0.00 0.00 +GCC 51 27.50 20.50 21.00 31.00 0.00 0.00 +GCC 52 27.50 21.50 19.50 31.50 0.00 0.00 +GCC 53 26.00 19.00 25.50 29.50 0.00 0.00 +GCC 54 30.65 23.62 16.58 29.15 0.00 0.00 +GCC 55 29.65 21.61 20.10 28.64 0.00 0.00 +GCC 56 32.16 16.58 22.11 29.15 0.00 0.00 +GCC 57 28.64 20.60 21.11 29.65 0.00 0.00 +GCC 58 29.65 14.57 24.62 31.16 0.00 0.00 +GCC 59 31.16 21.61 17.59 29.65 0.00 0.00 +GCC 60 28.64 17.59 22.11 31.66 0.00 0.00 +GCC 61 25.13 21.61 22.61 30.65 0.00 0.00 +GCC 62 27.14 26.13 21.61 25.13 0.00 0.00 +GCC 63 29.15 14.57 18.59 37.69 0.00 0.00 +GCC 64 29.15 15.08 21.61 34.17 0.00 0.00 +GCC 65 28.64 20.10 19.10 32.16 0.00 0.00 +GCC 66 31.66 19.10 16.08 33.17 0.00 0.00 +GCC 67 24.75 20.20 24.24 30.81 0.00 0.00 +GCC 68 26.77 19.70 23.23 30.30 0.00 0.00 +GCC 69 30.96 17.26 22.84 28.93 0.00 0.00 +GCC 70 33.67 16.84 21.94 27.55 0.00 0.00 +GCC 71 35.20 20.41 18.88 25.51 0.00 0.00 +GCC 72 33.67 15.82 18.88 31.63 0.00 0.00 +GCC 73 32.31 18.46 18.46 30.77 0.00 0.00 +GCC 74 27.69 18.46 24.10 29.74 0.00 0.00 +GCC 75 32.31 14.87 21.54 31.28 0.00 0.00 +GCC 76 24.62 20.00 21.03 34.36 0.00 0.00 +GCC 77 29.74 17.44 17.95 34.87 0.00 0.00 +GCC 78 24.48 20.83 17.19 37.50 0.00 0.00 +GCC 79 33.33 20.83 19.79 26.04 0.00 0.00 +GCC 80 31.05 16.32 22.11 30.53 0.00 0.00 +GCC 81 33.33 15.87 15.34 35.45 0.00 0.00 +GCC 82 31.75 19.58 19.58 29.10 0.00 0.00 +GCC 83 30.32 21.81 18.62 29.26 0.00 0.00 +GCC 84 27.66 21.81 15.96 34.57 0.00 0.00 +GCC 85 26.06 15.43 22.34 36.17 0.00 0.00 +GCC 86 25.00 18.09 21.81 35.11 0.00 0.00 +GCC 87 30.85 18.09 15.43 35.64 0.00 0.00 +GCC 88 32.45 25.00 18.09 24.47 0.00 0.00 +GCC 89 24.47 15.43 19.68 40.43 0.00 0.00 +GCC 90 27.27 21.93 20.86 29.95 0.00 0.00 +GCC 91 28.34 14.97 20.86 35.83 0.00 0.00 +GCC 92 28.34 18.18 20.32 33.16 0.00 0.00 +GCC 93 28.65 18.38 18.38 34.59 0.00 0.00 +GCC 94 29.19 17.84 20.54 32.43 0.00 0.00 +GCC 95 27.72 23.91 21.20 27.17 0.00 0.00 +GCC 96 31.32 18.68 16.48 33.52 0.00 0.00 +GCC 97 21.98 17.58 21.43 39.01 0.00 0.00 +GCC 98 27.47 15.93 18.68 37.91 0.00 0.00 +GCC 99 27.53 20.22 17.98 34.27 0.00 0.00 +GCC 100 34.83 15.17 19.66 30.34 0.00 0.00 +GCC 101 36.52 16.85 20.22 26.40 0.00 0.00 +GCC 102 29.55 22.16 23.30 25.00 0.00 0.00 +GCC 103 27.84 18.75 19.32 34.09 0.00 0.00 +GCC 104 26.14 14.77 22.16 36.93 0.00 0.00 +GCC 105 33.52 11.36 19.89 35.23 0.00 0.00 +GCC 106 28.00 20.00 19.43 32.57 0.00 0.00 +GCC 107 25.88 16.47 24.12 33.53 0.00 0.00 +GCC 108 30.77 20.71 15.98 32.54 0.00 0.00 +GCC 109 26.63 30.18 16.57 26.63 0.00 0.00 +GCC 110 27.81 9.47 23.67 39.05 0.00 0.00 +GCC 111 30.18 16.57 23.67 29.59 0.00 0.00 +GCC 112 28.40 21.30 24.85 25.44 0.00 0.00 +GCC 113 28.57 19.64 22.02 29.76 0.00 0.00 +GCC 114 31.55 23.21 17.86 27.38 0.00 0.00 +GCC 115 35.12 19.64 15.48 29.76 0.00 0.00 +GCC 116 26.79 17.86 22.62 32.74 0.00 0.00 +GCC 117 34.73 22.75 14.37 28.14 0.00 0.00 +GCC 118 27.11 23.49 15.06 34.34 0.00 0.00 +GCC 119 31.93 19.28 20.48 28.31 0.00 0.00 +GCC 120 35.15 16.97 18.18 29.70 0.00 0.00 +GCC 121 26.67 24.85 18.18 30.30 0.00 0.00 +GCC 122 33.94 17.58 19.39 29.09 0.00 0.00 +GCC 123 29.45 19.63 18.40 32.52 0.00 0.00 +GCC 124 24.54 22.09 23.31 30.06 0.00 0.00 +GCC 125 28.22 17.18 20.86 33.74 0.00 0.00 +GCC 126 40.99 17.39 16.15 25.47 0.00 0.00 +GCC 127 28.75 18.12 19.38 33.75 0.00 0.00 +GCC 128 25.16 22.01 20.13 32.70 0.00 0.00 +GCC 129 23.27 16.98 23.27 36.48 0.00 0.00 +GCC 130 33.12 12.74 24.20 29.94 0.00 0.00 +GCC 131 25.48 16.56 21.66 36.31 0.00 0.00 +GCC 132 31.21 19.11 22.29 27.39 0.00 0.00 +GCC 133 30.97 19.35 19.35 30.32 0.00 0.00 +GCC 134 32.90 14.84 23.23 29.03 0.00 0.00 +GCC 135 32.26 18.71 18.06 30.97 0.00 0.00 +GCC 136 34.19 19.35 22.58 23.87 0.00 0.00 +GCC 137 27.27 18.18 20.13 34.42 0.00 0.00 +GCC 138 30.52 18.18 17.53 33.77 0.00 0.00 +GCC 139 26.62 22.08 19.48 31.82 0.00 0.00 +GCC 140 27.81 24.50 19.87 27.81 0.00 0.00 +GCC 141 28.00 23.33 21.33 27.33 0.00 0.00 +GCC 142 29.53 15.44 28.19 26.85 0.00 0.00 +GCC 143 24.66 15.07 23.97 36.30 0.00 0.00 +GCC 144 27.40 16.44 19.86 36.30 0.00 0.00 +GCC 145 29.45 13.70 19.86 36.99 0.00 0.00 +GCC 146 35.86 12.41 18.62 33.10 0.00 0.00 +GCC 147 32.87 20.98 16.08 30.07 0.00 0.00 +GCC 148 31.11 20.74 23.70 24.44 0.00 0.00 +GCC 149 33.07 14.96 19.69 32.28 0.00 0.00 +GCC 150 36.94 14.41 14.41 34.23 0.00 0.00 +GCC 151 40.82 18.37 14.29 26.53 0.00 0.00 +# ACGT content per cycle, read oriented. Use `grep ^GCT | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +GCT 1 22.50 26.00 32.00 19.50 +GCT 2 20.00 21.50 16.00 42.50 +GCT 3 30.00 16.50 15.00 38.50 +GCT 4 21.50 26.50 12.00 40.00 +GCT 5 44.50 10.00 12.00 33.50 +GCT 6 42.50 13.50 22.50 21.50 +GCT 7 34.50 17.00 23.50 25.00 +GCT 8 37.50 22.50 21.50 18.50 +GCT 9 17.00 39.00 20.50 23.50 +GCT 10 33.00 14.50 13.50 39.00 +GCT 11 34.50 12.50 26.50 26.50 +GCT 12 27.50 14.50 22.50 35.50 +GCT 13 21.50 22.00 24.50 32.00 +GCT 14 28.00 27.50 13.00 31.50 +GCT 15 35.00 15.50 21.00 28.50 +GCT 16 36.50 24.00 17.50 22.00 +GCT 17 36.50 18.00 18.00 27.50 +GCT 18 29.50 23.50 20.00 27.00 +GCT 19 30.00 17.50 21.50 31.00 +GCT 20 30.00 19.00 19.50 31.50 +GCT 21 25.50 20.00 19.50 35.00 +GCT 22 29.00 23.00 19.00 29.00 +GCT 23 30.50 21.00 17.00 31.50 +GCT 24 30.50 22.00 17.00 30.50 +GCT 25 28.50 19.00 19.50 33.00 +GCT 26 27.50 19.00 23.00 30.50 +GCT 27 33.50 21.50 17.00 28.00 +GCT 28 28.50 23.50 20.00 28.00 +GCT 29 32.00 21.00 19.50 27.50 +GCT 30 30.50 20.50 21.00 28.00 +GCT 31 25.00 24.00 21.00 30.00 +GCT 32 37.00 17.50 16.50 29.00 +GCT 33 27.00 19.00 22.00 32.00 +GCT 34 29.50 22.00 22.50 26.00 +GCT 35 29.00 19.50 20.00 31.50 +GCT 36 37.50 17.50 15.00 30.00 +GCT 37 32.50 21.50 17.00 29.00 +GCT 38 30.00 20.50 20.00 29.50 +GCT 39 34.00 20.50 18.50 27.00 +GCT 40 27.00 22.00 19.50 31.50 +GCT 41 32.00 20.00 15.50 32.50 +GCT 42 37.50 17.00 21.00 24.50 +GCT 43 25.50 19.50 18.00 37.00 +GCT 44 31.50 18.50 18.50 31.50 +GCT 45 27.00 20.00 19.00 34.00 +GCT 46 29.00 20.50 20.50 30.00 +GCT 47 29.00 20.50 23.50 27.00 +GCT 48 27.00 21.50 18.50 33.00 +GCT 49 27.00 17.00 20.00 36.00 +GCT 50 29.00 21.00 15.50 34.50 +GCT 51 33.00 21.50 20.00 25.50 +GCT 52 30.50 21.00 20.00 28.50 +GCT 53 24.50 23.00 21.50 31.00 +GCT 54 30.15 20.60 19.60 29.65 +GCT 55 25.13 20.60 21.11 33.17 +GCT 56 26.13 21.11 17.59 35.18 +GCT 57 27.14 20.60 21.11 31.16 +GCT 58 30.15 17.59 21.61 30.65 +GCT 59 32.66 20.60 18.59 28.14 +GCT 60 31.66 18.09 21.61 28.64 +GCT 61 25.13 23.12 21.11 30.65 +GCT 62 24.62 23.12 24.62 27.64 +GCT 63 36.68 17.59 15.58 30.15 +GCT 64 35.18 16.58 20.10 28.14 +GCT 65 30.65 18.59 20.60 30.15 +GCT 66 34.67 15.58 19.60 30.15 +GCT 67 29.29 24.75 19.70 26.26 +GCT 68 28.28 21.21 21.72 28.79 +GCT 69 29.44 22.84 17.26 30.46 +GCT 70 36.22 19.90 18.88 25.00 +GCT 71 34.18 20.92 18.37 26.53 +GCT 72 32.14 17.86 16.84 33.16 +GCT 73 32.82 14.36 22.56 30.26 +GCT 74 30.26 21.54 21.03 27.18 +GCT 75 33.33 18.46 17.95 30.26 +GCT 76 29.23 23.08 17.95 29.74 +GCT 77 29.74 17.95 17.44 34.87 +GCT 78 31.25 20.83 17.19 30.73 +GCT 79 29.17 23.44 17.19 30.21 +GCT 80 35.79 21.05 17.37 25.79 +GCT 81 39.68 20.11 11.11 29.10 +GCT 82 28.04 16.93 22.22 32.80 +GCT 83 29.26 20.21 20.21 30.32 +GCT 84 35.11 18.09 19.68 27.13 +GCT 85 28.72 20.74 17.02 33.51 +GCT 86 29.79 21.28 18.62 30.32 +GCT 87 31.38 18.09 15.43 35.11 +GCT 88 28.72 21.81 21.28 28.19 +GCT 89 30.32 18.62 16.49 34.57 +GCT 90 29.95 13.90 28.88 27.27 +GCT 91 32.09 15.51 20.32 32.09 +GCT 92 26.20 18.18 20.32 35.29 +GCT 93 31.35 18.38 18.38 31.89 +GCT 94 29.73 15.68 22.70 31.89 +GCT 95 28.80 19.57 25.54 26.09 +GCT 96 32.42 20.33 14.84 32.42 +GCT 97 31.87 21.43 17.58 29.12 +GCT 98 30.77 14.29 20.33 34.62 +GCT 99 28.65 17.42 20.79 33.15 +GCT 100 28.65 14.04 20.79 36.52 +GCT 101 27.53 23.03 14.04 35.39 +GCT 102 26.70 17.05 28.41 27.84 +GCT 103 29.55 20.45 17.61 32.39 +GCT 104 34.66 22.16 14.77 28.41 +GCT 105 40.91 13.07 18.18 27.84 +GCT 106 24.57 20.57 18.86 36.00 +GCT 107 26.47 18.24 22.35 32.94 +GCT 108 31.95 17.16 19.53 31.36 +GCT 109 26.04 24.85 21.89 27.22 +GCT 110 32.54 17.75 15.38 34.32 +GCT 111 26.63 17.75 22.49 33.14 +GCT 112 27.81 23.08 23.08 26.04 +GCT 113 35.12 16.67 25.00 23.21 +GCT 114 30.95 21.43 19.64 27.98 +GCT 115 29.17 18.45 16.67 35.71 +GCT 116 30.36 17.86 22.62 29.17 +GCT 117 27.54 21.56 15.57 35.33 +GCT 118 33.13 22.89 15.66 28.31 +GCT 119 33.73 16.87 22.89 26.51 +GCT 120 26.67 13.94 21.21 38.18 +GCT 121 29.09 18.18 24.85 27.88 +GCT 122 27.27 21.21 15.76 35.76 +GCT 123 30.06 17.79 20.25 31.90 +GCT 124 28.22 22.09 23.31 26.38 +GCT 125 27.61 20.25 17.79 34.36 +GCT 126 31.06 16.77 16.77 35.40 +GCT 127 32.50 15.00 22.50 30.00 +GCT 128 25.79 18.87 23.27 32.08 +GCT 129 28.30 20.75 19.50 31.45 +GCT 130 33.12 18.47 18.47 29.94 +GCT 131 31.85 19.75 18.47 29.94 +GCT 132 30.57 22.93 18.47 28.03 +GCT 133 29.68 18.06 20.65 31.61 +GCT 134 30.97 23.23 14.84 30.97 +GCT 135 32.90 16.77 20.00 30.32 +GCT 136 29.03 19.35 22.58 29.03 +GCT 137 27.92 24.68 13.64 33.77 +GCT 138 35.06 16.88 18.83 29.22 +GCT 139 33.12 22.73 18.83 25.32 +GCT 140 34.44 22.52 21.85 21.19 +GCT 141 25.33 22.67 22.00 30.00 +GCT 142 31.54 21.48 22.15 24.83 +GCT 143 35.62 20.55 18.49 25.34 +GCT 144 25.34 14.38 21.92 38.36 +GCT 145 35.62 15.75 17.81 30.82 +GCT 146 33.79 14.48 16.55 35.17 +GCT 147 32.17 20.98 16.08 30.77 +GCT 148 26.67 23.70 20.74 28.89 +GCT 149 40.16 16.54 18.11 25.20 +GCT 150 33.33 9.91 18.92 37.84 +GCT 151 24.49 0.00 32.65 42.86 +# ACGT content per cycle for first fragments. Use `grep ^FBC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%]; and N and O counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +FBC 1 20.00 26.00 32.00 22.00 0.00 0.00 +FBC 2 34.00 16.00 18.00 32.00 0.00 0.00 +FBC 3 35.00 17.00 16.00 32.00 0.00 0.00 +FBC 4 27.00 22.00 22.00 29.00 0.00 0.00 +FBC 5 33.00 10.00 14.00 43.00 0.00 0.00 +FBC 6 30.00 18.00 13.00 39.00 0.00 0.00 +FBC 7 27.00 22.00 21.00 30.00 0.00 0.00 +FBC 8 35.00 20.00 20.00 25.00 0.00 0.00 +FBC 9 23.00 34.00 23.00 20.00 0.00 0.00 +FBC 10 33.00 13.00 14.00 40.00 0.00 0.00 +FBC 11 33.00 17.00 21.00 29.00 0.00 0.00 +FBC 12 35.00 21.00 11.00 33.00 0.00 0.00 +FBC 13 31.00 20.00 21.00 28.00 0.00 0.00 +FBC 14 26.00 23.00 21.00 30.00 0.00 0.00 +FBC 15 25.00 24.00 18.00 33.00 0.00 0.00 +FBC 16 32.00 24.00 23.00 21.00 0.00 0.00 +FBC 17 27.00 13.00 21.00 39.00 0.00 0.00 +FBC 18 26.00 28.00 15.00 31.00 0.00 0.00 +FBC 19 24.00 18.00 19.00 39.00 0.00 0.00 +FBC 20 29.00 16.00 22.00 33.00 0.00 0.00 +FBC 21 21.00 20.00 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+FBC 69 31.00 17.00 24.00 28.00 0.00 0.00 +FBC 70 31.00 18.00 27.00 24.00 0.00 0.00 +FBC 71 42.00 17.00 15.00 26.00 0.00 0.00 +FBC 72 34.00 15.00 23.00 28.00 0.00 0.00 +FBC 73 31.31 23.23 19.19 26.26 0.00 0.00 +FBC 74 21.21 22.22 26.26 30.30 0.00 0.00 +FBC 75 32.32 15.15 20.20 32.32 0.00 0.00 +FBC 76 29.29 13.13 17.17 40.40 0.00 0.00 +FBC 77 26.26 18.18 21.21 34.34 0.00 0.00 +FBC 78 28.87 17.53 22.68 30.93 0.00 0.00 +FBC 79 32.99 20.62 20.62 25.77 0.00 0.00 +FBC 80 29.47 16.84 26.32 27.37 0.00 0.00 +FBC 81 32.98 12.77 12.77 41.49 0.00 0.00 +FBC 82 37.23 20.21 21.28 21.28 0.00 0.00 +FBC 83 31.91 23.40 18.09 26.60 0.00 0.00 +FBC 84 24.47 23.40 14.89 37.23 0.00 0.00 +FBC 85 36.17 18.09 20.21 25.53 0.00 0.00 +FBC 86 25.53 19.15 20.21 35.11 0.00 0.00 +FBC 87 29.79 18.09 13.83 38.30 0.00 0.00 +FBC 88 32.98 28.72 15.96 22.34 0.00 0.00 +FBC 89 24.47 20.21 15.96 39.36 0.00 0.00 +FBC 90 31.18 19.35 13.98 35.48 0.00 0.00 +FBC 91 25.81 19.35 18.28 36.56 0.00 0.00 +FBC 92 30.11 18.28 18.28 33.33 0.00 0.00 +FBC 93 28.26 13.04 20.65 38.04 0.00 0.00 +FBC 94 31.52 18.48 20.65 29.35 0.00 0.00 +FBC 95 26.37 21.98 21.98 29.67 0.00 0.00 +FBC 96 24.44 17.78 23.33 34.44 0.00 0.00 +FBC 97 17.78 17.78 21.11 43.33 0.00 0.00 +FBC 98 26.67 13.33 14.44 45.56 0.00 0.00 +FBC 99 27.27 20.45 19.32 32.95 0.00 0.00 +FBC 100 36.36 13.64 22.73 27.27 0.00 0.00 +FBC 101 40.91 15.91 17.05 26.14 0.00 0.00 +FBC 102 28.41 23.86 22.73 25.00 0.00 0.00 +FBC 103 30.68 19.32 18.18 31.82 0.00 0.00 +FBC 104 18.18 18.18 25.00 38.64 0.00 0.00 +FBC 105 30.68 10.23 19.32 39.77 0.00 0.00 +FBC 106 36.36 15.91 21.59 26.14 0.00 0.00 +FBC 107 25.58 15.12 19.77 39.53 0.00 0.00 +FBC 108 32.94 18.82 12.94 35.29 0.00 0.00 +FBC 109 28.24 29.41 17.65 24.71 0.00 0.00 +FBC 110 28.24 10.59 24.71 36.47 0.00 0.00 +FBC 111 34.12 14.12 25.88 25.88 0.00 0.00 +FBC 112 23.53 21.18 28.24 27.06 0.00 0.00 +FBC 113 21.18 21.18 23.53 34.12 0.00 0.00 +FBC 114 23.53 23.53 16.47 36.47 0.00 0.00 +FBC 115 30.59 27.06 12.94 29.41 0.00 0.00 +FBC 116 24.71 15.29 29.41 30.59 0.00 0.00 +FBC 117 29.41 27.06 12.94 30.59 0.00 0.00 +FBC 118 24.71 27.06 15.29 32.94 0.00 0.00 +FBC 119 27.06 22.35 22.35 28.24 0.00 0.00 +FBC 120 36.90 20.24 14.29 28.57 0.00 0.00 +FBC 121 33.33 20.24 15.48 30.95 0.00 0.00 +FBC 122 35.71 20.24 14.29 29.76 0.00 0.00 +FBC 123 24.10 25.30 16.87 33.73 0.00 0.00 +FBC 124 27.71 24.10 19.28 28.92 0.00 0.00 +FBC 125 26.51 16.87 19.28 37.35 0.00 0.00 +FBC 126 41.46 15.85 13.41 29.27 0.00 0.00 +FBC 127 28.05 18.29 24.39 29.27 0.00 0.00 +FBC 128 20.99 20.99 22.22 35.80 0.00 0.00 +FBC 129 22.22 13.58 22.22 41.98 0.00 0.00 +FBC 130 32.50 10.00 26.25 31.25 0.00 0.00 +FBC 131 26.25 15.00 26.25 32.50 0.00 0.00 +FBC 132 30.00 18.75 21.25 30.00 0.00 0.00 +FBC 133 32.91 20.25 17.72 29.11 0.00 0.00 +FBC 134 29.11 15.19 25.32 30.38 0.00 0.00 +FBC 135 31.65 18.99 18.99 30.38 0.00 0.00 +FBC 136 34.18 18.99 25.32 21.52 0.00 0.00 +FBC 137 29.11 10.13 25.32 35.44 0.00 0.00 +FBC 138 25.32 24.05 17.72 32.91 0.00 0.00 +FBC 139 25.32 25.32 18.99 30.38 0.00 0.00 +FBC 140 29.87 24.68 19.48 25.97 0.00 0.00 +FBC 141 29.87 22.08 18.18 29.87 0.00 0.00 +FBC 142 27.63 15.79 30.26 26.32 0.00 0.00 +FBC 143 27.03 18.92 24.32 29.73 0.00 0.00 +FBC 144 28.38 18.92 18.92 33.78 0.00 0.00 +FBC 145 32.43 16.22 14.86 36.49 0.00 0.00 +FBC 146 36.49 13.51 16.22 33.78 0.00 0.00 +FBC 147 34.72 22.22 13.89 29.17 0.00 0.00 +FBC 148 26.87 20.90 26.87 25.37 0.00 0.00 +FBC 149 31.25 12.50 25.00 31.25 0.00 0.00 +FBC 150 32.73 16.36 10.91 40.00 0.00 0.00 +FBC 151 48.28 17.24 13.79 20.69 0.00 0.00 +# ACGT raw counters for first fragments. Use `grep ^FTC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: A,C,G,T,N base counters +FTC 4077 2634 2796 4390 0 +# ACGT content per cycle for last fragments. Use `grep ^LBC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%]; and N and O counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +LBC 1 19.00 27.00 31.00 23.00 0.00 0.00 +LBC 2 27.00 25.00 16.00 32.00 0.00 0.00 +LBC 3 29.00 13.00 17.00 41.00 0.00 0.00 +LBC 4 34.00 20.00 13.00 33.00 0.00 0.00 +LBC 5 46.00 9.00 11.00 34.00 0.00 0.00 +LBC 6 26.00 17.00 24.00 33.00 0.00 0.00 +LBC 7 32.00 17.00 21.00 30.00 0.00 0.00 +LBC 8 24.00 22.00 26.00 28.00 0.00 0.00 +LBC 9 21.00 31.00 31.00 17.00 0.00 0.00 +LBC 10 39.00 11.00 18.00 32.00 0.00 0.00 +LBC 11 23.00 20.00 20.00 37.00 0.00 0.00 +LBC 12 32.00 21.00 21.00 26.00 0.00 0.00 +LBC 13 25.00 18.00 34.00 23.00 0.00 0.00 +LBC 14 23.00 20.00 17.00 40.00 0.00 0.00 +LBC 15 34.00 9.00 22.00 35.00 0.00 0.00 +LBC 16 30.00 16.00 20.00 34.00 0.00 0.00 +LBC 17 28.00 20.00 18.00 34.00 0.00 0.00 +LBC 18 35.00 20.00 24.00 21.00 0.00 0.00 +LBC 19 23.00 25.00 16.00 36.00 0.00 0.00 +LBC 20 34.00 18.00 21.00 27.00 0.00 0.00 +LBC 21 31.00 24.00 22.00 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Use `grep ^LTC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: A,C,G,T,N base counters +LTC 4051 2592 2808 4297 0 +# Insert sizes. Use `grep ^IS | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: insert size, pairs total, inward oriented pairs, outward oriented pairs, other pairs +IS 0 0 0 0 0 +IS 1 0 0 0 0 +IS 2 0 0 0 0 +IS 3 0 0 0 0 +IS 4 0 0 0 0 +IS 5 0 0 0 0 +IS 6 0 0 0 0 +IS 7 0 0 0 0 +IS 8 0 0 0 0 +IS 9 0 0 0 0 +IS 10 0 0 0 0 +IS 11 0 0 0 0 +IS 12 0 0 0 0 +IS 13 0 0 0 0 +IS 14 0 0 0 0 +IS 15 0 0 0 0 +IS 16 0 0 0 0 +IS 17 0 0 0 0 +IS 18 0 0 0 0 +IS 19 0 0 0 0 +IS 20 0 0 0 0 +IS 21 0 0 0 0 +IS 22 0 0 0 0 +IS 23 0 0 0 0 +IS 24 0 0 0 0 +IS 25 0 0 0 0 +IS 26 0 0 0 0 +IS 27 0 0 0 0 +IS 28 0 0 0 0 +IS 29 0 0 0 0 +IS 30 0 0 0 0 +IS 31 0 0 0 0 +IS 32 0 0 0 0 +IS 33 0 0 0 0 +IS 34 0 0 0 0 +IS 35 0 0 0 0 +IS 36 0 0 0 0 +IS 37 0 0 0 0 +IS 38 0 0 0 0 +IS 39 0 0 0 0 +IS 40 0 0 0 0 +IS 41 0 0 0 0 +IS 42 0 0 0 0 +IS 43 0 0 0 0 +IS 44 0 0 0 0 +IS 45 0 0 0 0 +IS 46 0 0 0 0 +IS 47 0 0 0 0 +IS 48 0 0 0 0 +IS 49 0 0 0 0 +IS 50 0 0 0 0 +IS 51 0 0 0 0 +IS 52 0 0 0 0 +IS 53 0 0 0 0 +IS 54 0 0 0 0 +IS 55 0 0 0 0 +IS 56 0 0 0 0 +IS 57 0 0 0 0 +IS 58 0 0 0 0 +IS 59 0 0 0 0 +IS 60 0 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+IS 188 0 0 0 0 +IS 189 1 1 0 0 +IS 190 0 0 0 0 +IS 191 1 1 0 0 +IS 192 0 0 0 0 +IS 193 0 0 0 0 +IS 194 0 0 0 0 +IS 195 1 1 0 0 +IS 196 0 0 0 0 +IS 197 1 1 0 0 +IS 198 1 1 0 0 +IS 199 0 0 0 0 +IS 200 0 0 0 0 +IS 201 2 2 0 0 +IS 202 1 1 0 0 +IS 203 0 0 0 0 +IS 204 1 1 0 0 +IS 205 0 0 0 0 +IS 206 0 0 0 0 +IS 207 0 0 0 0 +IS 208 0 0 0 0 +IS 209 1 1 0 0 +IS 210 0 0 0 0 +IS 211 0 0 0 0 +IS 212 0 0 0 0 +IS 213 0 0 0 0 +IS 214 1 1 0 0 +IS 215 0 0 0 0 +IS 216 0 0 0 0 +IS 217 0 0 0 0 +IS 218 1 1 0 0 +IS 219 1 1 0 0 +IS 220 0 0 0 0 +IS 221 0 0 0 0 +IS 222 1 1 0 0 +IS 223 0 0 0 0 +IS 224 0 0 0 0 +IS 225 0 0 0 0 +IS 226 0 0 0 0 +IS 227 1 1 0 0 +IS 228 0 0 0 0 +IS 229 0 0 0 0 +IS 230 0 0 0 0 +IS 231 1 1 0 0 +IS 232 1 1 0 0 +IS 233 1 1 0 0 +IS 234 2 2 0 0 +IS 235 3 3 0 0 +IS 236 1 1 0 0 +IS 237 0 0 0 0 +IS 238 2 2 0 0 +IS 239 0 0 0 0 +IS 240 1 1 0 0 +IS 241 0 0 0 0 +IS 242 0 0 0 0 +IS 243 0 0 0 0 +IS 244 1 1 0 0 +IS 245 1 1 0 0 +IS 246 1 1 0 0 +IS 247 2 2 0 0 +IS 248 0 0 0 0 +IS 249 1 1 0 0 +IS 250 0 0 0 0 +IS 251 1 1 0 0 +IS 252 0 0 0 0 +IS 253 0 0 0 0 +IS 254 1 1 0 0 +IS 255 1 1 0 0 +IS 256 0 0 0 0 +IS 257 0 0 0 0 +IS 258 0 0 0 0 +IS 259 1 1 0 0 +IS 260 0 0 0 0 +IS 261 0 0 0 0 +IS 262 0 0 0 0 +IS 263 0 0 0 0 +IS 264 0 0 0 0 +IS 265 0 0 0 0 +IS 266 1 1 0 0 +IS 267 1 1 0 0 +IS 268 1 1 0 0 +IS 269 0 0 0 0 +IS 270 0 0 0 0 +IS 271 0 0 0 0 +IS 272 2 2 0 0 +IS 273 0 0 0 0 +IS 274 0 0 0 0 +IS 275 0 0 0 0 +IS 276 1 1 0 0 +IS 277 0 0 0 0 +IS 278 1 1 0 0 +IS 279 0 0 0 0 +IS 280 0 0 0 0 +IS 281 1 1 0 0 +IS 282 1 1 0 0 +IS 283 0 0 0 0 +IS 284 1 1 0 0 +IS 285 0 0 0 0 +IS 286 0 0 0 0 +IS 287 0 0 0 0 +IS 288 0 0 0 0 +IS 289 0 0 0 0 +IS 290 0 0 0 0 +IS 291 1 1 0 0 +IS 292 0 0 0 0 +IS 293 0 0 0 0 +IS 294 1 1 0 0 +IS 295 0 0 0 0 +IS 296 0 0 0 0 +IS 297 0 0 0 0 +IS 298 0 0 0 0 +IS 299 0 0 0 0 +IS 300 0 0 0 0 +IS 301 0 0 0 0 +IS 302 0 0 0 0 +IS 303 0 0 0 0 +IS 304 1 1 0 0 +IS 305 1 1 0 0 +IS 306 0 0 0 0 +IS 307 0 0 0 0 +IS 308 0 0 0 0 +IS 309 0 0 0 0 +IS 310 1 1 0 0 +IS 311 0 0 0 0 +IS 312 0 0 0 0 +IS 313 0 0 0 0 +IS 314 1 1 0 0 +IS 315 0 0 0 0 +IS 316 0 0 0 0 +IS 317 0 0 0 0 +IS 318 1 1 0 0 +IS 319 0 0 0 0 +IS 320 1 1 0 0 +IS 321 0 0 0 0 +IS 322 0 0 0 0 +IS 323 0 0 0 0 +IS 324 0 0 0 0 +IS 325 0 0 0 0 +IS 326 0 0 0 0 +IS 327 0 0 0 0 +IS 328 0 0 0 0 +IS 329 0 0 0 0 +IS 330 0 0 0 0 +IS 331 0 0 0 0 +IS 332 0 0 0 0 +IS 333 0 0 0 0 +IS 334 0 0 0 0 +IS 335 0 0 0 0 +IS 336 0 0 0 0 +IS 337 0 0 0 0 +IS 338 0 0 0 0 +IS 339 1 1 0 0 +IS 340 0 0 0 0 +IS 341 0 0 0 0 +IS 342 0 0 0 0 +IS 343 1 1 0 0 +IS 344 0 0 0 0 +IS 345 0 0 0 0 +IS 346 0 0 0 0 +IS 347 0 0 0 0 +IS 348 0 0 0 0 +IS 349 0 0 0 0 +IS 350 0 0 0 0 +IS 351 0 0 0 0 +IS 352 0 0 0 0 +IS 353 0 0 0 0 +IS 354 0 0 0 0 +IS 355 0 0 0 0 +IS 356 0 0 0 0 +IS 357 0 0 0 0 +IS 358 0 0 0 0 +IS 359 0 0 0 0 +IS 360 0 0 0 0 +IS 361 0 0 0 0 +IS 362 0 0 0 0 +IS 363 0 0 0 0 +IS 364 1 1 0 0 +# Read lengths. Use `grep ^RL | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: read length, count +RL 53 1 +RL 66 1 +RL 68 1 +RL 69 1 +RL 72 1 +RL 77 3 +RL 79 2 +RL 80 1 +RL 82 1 +RL 89 1 +RL 92 2 +RL 94 1 +RL 95 2 +RL 98 4 +RL 101 2 +RL 105 1 +RL 106 5 +RL 107 1 +RL 112 1 +RL 116 1 +RL 117 1 +RL 119 1 +RL 122 2 +RL 125 2 +RL 126 1 +RL 127 1 +RL 129 2 +RL 132 2 +RL 136 1 +RL 139 3 +RL 140 1 +RL 141 1 +RL 142 3 +RL 145 1 +RL 146 2 +RL 147 8 +RL 148 8 +RL 149 16 +RL 150 62 +RL 151 49 +# Read lengths - first fragments. Use `grep ^FRL | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: read length, count +FRL 72 1 +FRL 77 2 +FRL 79 2 +FRL 80 1 +FRL 89 1 +FRL 92 1 +FRL 94 1 +FRL 95 1 +FRL 98 2 +FRL 106 2 +FRL 107 1 +FRL 119 1 +FRL 122 1 +FRL 125 1 +FRL 127 1 +FRL 129 1 +FRL 132 1 +FRL 139 2 +FRL 141 1 +FRL 142 2 +FRL 146 2 +FRL 147 5 +FRL 148 3 +FRL 149 9 +FRL 150 26 +FRL 151 29 +# Read lengths - last fragments. Use `grep ^LRL | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: read length, count +LRL 53 1 +LRL 66 1 +LRL 68 1 +LRL 69 1 +LRL 77 1 +LRL 82 1 +LRL 92 1 +LRL 95 1 +LRL 98 2 +LRL 101 2 +LRL 105 1 +LRL 106 3 +LRL 112 1 +LRL 116 1 +LRL 117 1 +LRL 122 1 +LRL 125 1 +LRL 126 1 +LRL 129 1 +LRL 132 1 +LRL 136 1 +LRL 139 1 +LRL 140 1 +LRL 142 1 +LRL 145 1 +LRL 147 3 +LRL 148 5 +LRL 149 7 +LRL 150 36 +LRL 151 20 +# Mapping qualities for reads !(UNMAP|SECOND|SUPPL|QCFAIL|DUP). Use `grep ^MAPQ | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: mapq, count +MAPQ 1 1 +MAPQ 36 1 +MAPQ 37 1 +MAPQ 38 2 +MAPQ 48 14 +MAPQ 49 1 +MAPQ 50 5 +MAPQ 51 1 +MAPQ 52 1 +MAPQ 55 2 +MAPQ 57 1 +MAPQ 59 1 +MAPQ 60 166 +# Indel distribution. Use `grep ^ID | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: length, number of insertions, number of deletions +ID 1 0 8 +ID 2 0 1 +ID 32 0 1 +# Indels per cycle. Use `grep ^IC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle, number of insertions (fwd), .. (rev) , number of deletions (fwd), .. (rev) +IC 5 0 0 1 0 +IC 7 0 0 1 1 +IC 72 0 0 1 0 +IC 85 0 0 1 0 +IC 97 0 0 1 0 +IC 107 0 0 0 1 +IC 121 0 0 0 1 +IC 135 0 0 0 1 +IC 137 0 0 1 0 +# Coverage distribution. Use `grep ^COV | cut -f 2-` to extract this part. +COV [1-1] 1 5542 +COV [2-2] 2 3794 +COV [3-3] 3 1571 +COV [4-4] 4 944 +COV [5-5] 5 491 +COV [6-6] 6 377 +COV [7-7] 7 50 +COV [8-8] 8 39 +COV [9-9] 9 27 +COV [10-10] 10 16 +# GC-depth. Use `grep ^GCD | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: GC%, unique sequence percentiles, 10th, 25th, 50th, 75th and 90th depth percentile +GCD 0.0 66.667 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 +GCD 19.2 100.000 0.318 0.318 0.318 0.318 0.318 diff --git a/src/samtools/samtools_stats/test_data/ref.p.paired_end.sorted.txt b/src/samtools/samtools_stats/test_data/ref.p.paired_end.sorted.txt new file mode 100644 index 00000000..6355d2d0 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_stats/test_data/ref.p.paired_end.sorted.txt @@ -0,0 +1,1535 @@ +# This file was produced by samtools stats (1.19.2+htslib-1.19.1) and can be plotted using plot-bamstats +# This file contains statistics for all reads. +# The command line was: stats -p test_data/test.paired_end.sorted.bam +# CHK, Checksum [2]Read Names [3]Sequences [4]Qualities +# CHK, CRC32 of reads which passed filtering followed by addition (32bit overflow) +CHK 696e2242 1799722a a8072f55 +# Summary Numbers. Use `grep ^SN | cut -f 2-` to extract this part. +SN raw total sequences: 200 # excluding supplementary and secondary reads +SN filtered sequences: 0 +SN sequences: 200 +SN is sorted: 1 +SN 1st fragments: 100 +SN last fragments: 100 +SN reads mapped: 197 +SN reads mapped and paired: 194 # paired-end technology bit set + both mates mapped +SN reads unmapped: 3 +SN reads properly paired: 192 # proper-pair bit set +SN reads paired: 200 # paired-end technology bit set +SN reads duplicated: 0 # PCR or optical duplicate bit set +SN reads MQ0: 0 # mapped and MQ=0 +SN reads QC failed: 0 +SN non-primary alignments: 0 +SN supplementary alignments: 0 +SN total length: 27645 # ignores clipping +SN total first fragment length: 13897 # ignores clipping +SN total last fragment length: 13748 # ignores clipping +SN bases mapped: 27423 # ignores clipping +SN bases mapped (cigar): 20188 # more accurate +SN bases trimmed: 0 +SN bases duplicated: 0 +SN mismatches: 140 # from NM fields +SN error rate: 6.934813e-03 # mismatches / bases mapped (cigar) +SN average length: 138 +SN average first fragment length: 139 +SN average last fragment length: 137 +SN maximum length: 151 +SN maximum first fragment length: 151 +SN maximum last fragment length: 151 +SN average quality: 33.3 +SN insert size average: 207.7 +SN insert size standard deviation: 66.4 +SN inward oriented pairs: 88 +SN outward oriented pairs: 9 +SN pairs with other orientation: 0 +SN pairs on different chromosomes: 0 +SN percentage of properly paired reads (%): 96.0 +# First Fragment Qualities. Use `grep ^FFQ | cut -f 2-` to extract this part. +# Columns correspond to qualities and rows to cycles. First column is the cycle number. +FFQ 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 100 0 0 0 0 0 +FFQ 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 96 0 0 0 0 0 +FFQ 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 97 0 0 0 0 0 +FFQ 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 94 0 0 0 1 0 +FFQ 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 93 0 0 0 0 0 +FFQ 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 86 0 +FFQ 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 84 0 +FFQ 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 12 0 0 0 83 0 +FFQ 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 11 0 0 0 85 0 +FFQ 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 5 0 0 0 87 0 +FFQ 11 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 90 0 +FFQ 12 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 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Use `grep ^LFQ | cut -f 2-` to extract this part. +# Columns correspond to qualities and rows to cycles. First column is the cycle number. +LFQ 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 100 0 0 0 0 0 +LFQ 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 95 0 0 0 0 0 +LFQ 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 93 0 0 0 0 0 +LFQ 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 94 0 0 0 0 0 +LFQ 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 94 0 0 0 1 0 +LFQ 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 10 0 0 0 83 0 +LFQ 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 93 0 +LFQ 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 91 0 +LFQ 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 87 0 +LFQ 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 90 0 +LFQ 11 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 90 0 +LFQ 12 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 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87 0 +LFQ 36 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 82 0 +LFQ 37 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 83 0 +LFQ 38 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 85 0 +LFQ 39 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 7 0 0 0 85 0 +LFQ 40 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 6 0 0 0 88 0 +LFQ 41 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 11 0 0 0 78 0 +LFQ 42 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 87 0 +LFQ 43 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 81 0 +LFQ 44 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 6 0 0 0 86 0 +LFQ 45 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 85 0 +LFQ 46 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 9 0 0 0 81 0 +LFQ 47 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 5 0 0 0 88 0 +LFQ 48 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 84 0 +LFQ 49 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 11 0 0 0 80 0 +LFQ 50 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 10 0 0 0 79 0 +LFQ 51 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 8 0 0 0 80 0 +LFQ 52 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 8 0 0 0 79 0 +LFQ 53 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 7 0 0 0 81 0 +LFQ 54 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 15 0 0 0 79 0 +LFQ 55 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 8 0 0 0 85 0 +LFQ 56 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 8 0 0 0 80 0 +LFQ 57 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 6 0 0 0 83 0 +LFQ 58 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 9 0 0 0 80 0 +LFQ 59 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 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Use `grep ^GCF | cut -f 2-` to extract this part. +GCF 15.08 0 +GCF 30.40 1 +GCF 31.16 2 +GCF 32.16 0 +GCF 33.17 2 +GCF 33.92 5 +GCF 34.42 4 +GCF 34.92 2 +GCF 35.43 3 +GCF 35.93 7 +GCF 36.43 9 +GCF 36.93 4 +GCF 37.44 7 +GCF 37.94 8 +GCF 38.44 10 +GCF 38.94 7 +GCF 39.70 6 +GCF 40.45 8 +GCF 40.95 9 +GCF 41.71 4 +GCF 42.46 5 +GCF 42.96 7 +GCF 43.72 2 +GCF 44.72 1 +GCF 45.48 3 +GCF 46.48 2 +GCF 47.74 1 +GCF 48.74 2 +GCF 50.25 0 +GCF 52.01 1 +GCF 54.77 0 +GCF 57.54 1 +# GC Content of last fragments. Use `grep ^GCL | cut -f 2-` to extract this part. +GCL 15.08 0 +GCL 30.65 1 +GCL 31.66 0 +GCL 32.41 2 +GCL 32.91 1 +GCL 33.42 3 +GCL 33.92 4 +GCL 34.42 3 +GCL 34.92 4 +GCL 35.68 5 +GCL 36.43 10 +GCL 36.93 8 +GCL 37.44 7 +GCL 37.94 9 +GCL 38.44 10 +GCL 38.94 13 +GCL 39.45 8 +GCL 39.95 7 +GCL 40.45 2 +GCL 40.95 4 +GCL 41.46 3 +GCL 41.96 1 +GCL 42.46 4 +GCL 42.96 6 +GCL 43.47 4 +GCL 44.22 2 +GCL 44.97 4 +GCL 45.48 7 +GCL 45.98 3 +GCL 46.48 2 +GCL 46.98 3 +GCL 47.49 1 +GCL 48.49 0 +GCL 49.75 2 +# ACGT content per cycle. Use `grep ^GCC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%]; and N and O counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +GCC 1 19.50 26.50 31.50 22.50 0.00 0.00 +GCC 2 30.50 20.50 17.00 32.00 0.00 0.00 +GCC 3 32.00 15.00 16.50 36.50 0.00 0.00 +GCC 4 30.50 21.00 17.50 31.00 0.00 0.00 +GCC 5 39.50 9.50 12.50 38.50 0.00 0.00 +GCC 6 28.00 17.50 18.50 36.00 0.00 0.00 +GCC 7 29.50 19.50 21.00 30.00 0.00 0.00 +GCC 8 29.50 21.00 23.00 26.50 0.00 0.00 +GCC 9 22.00 32.50 27.00 18.50 0.00 0.00 +GCC 10 36.00 12.00 16.00 36.00 0.00 0.00 +GCC 11 28.00 18.50 20.50 33.00 0.00 0.00 +GCC 12 33.50 21.00 16.00 29.50 0.00 0.00 +GCC 13 28.00 19.00 27.50 25.50 0.00 0.00 +GCC 14 24.50 21.50 19.00 35.00 0.00 0.00 +GCC 15 29.50 16.50 20.00 34.00 0.00 0.00 +GCC 16 31.00 20.00 21.50 27.50 0.00 0.00 +GCC 17 27.50 16.50 19.50 36.50 0.00 0.00 +GCC 18 30.50 24.00 19.50 26.00 0.00 0.00 +GCC 19 23.50 21.50 17.50 37.50 0.00 0.00 +GCC 20 31.50 17.00 21.50 30.00 0.00 0.00 +GCC 21 26.00 22.00 17.50 34.50 0.00 0.00 +GCC 22 30.50 19.00 23.00 27.50 0.00 0.00 +GCC 23 31.50 15.50 22.50 30.50 0.00 0.00 +GCC 24 32.00 18.00 21.00 29.00 0.00 0.00 +GCC 25 27.50 16.50 22.00 34.00 0.00 0.00 +GCC 26 27.50 18.50 23.50 30.50 0.00 0.00 +GCC 27 28.50 19.00 19.50 33.00 0.00 0.00 +GCC 28 22.50 21.00 22.50 34.00 0.00 0.00 +GCC 29 27.00 18.50 22.00 32.50 0.00 0.00 +GCC 30 30.50 20.00 21.50 28.00 0.00 0.00 +GCC 31 24.50 21.00 24.00 30.50 0.00 0.00 +GCC 32 32.50 17.50 16.50 33.50 0.00 0.00 +GCC 33 28.50 16.00 25.00 30.50 0.00 0.00 +GCC 34 29.00 21.00 23.50 26.50 0.00 0.00 +GCC 35 32.50 18.50 21.00 28.00 0.00 0.00 +GCC 36 35.00 12.50 20.00 32.50 0.00 0.00 +GCC 37 26.50 20.00 18.50 35.00 0.00 0.00 +GCC 38 27.00 21.00 19.50 32.50 0.00 0.00 +GCC 39 31.00 20.00 19.00 30.00 0.00 0.00 +GCC 40 27.50 20.00 21.50 31.00 0.00 0.00 +GCC 41 37.00 16.50 19.00 27.50 0.00 0.00 +GCC 42 26.50 19.50 18.50 35.50 0.00 0.00 +GCC 43 33.50 20.00 17.50 29.00 0.00 0.00 +GCC 44 31.50 16.00 21.00 31.50 0.00 0.00 +GCC 45 28.50 19.00 20.00 32.50 0.00 0.00 +GCC 46 24.50 23.50 17.50 34.50 0.00 0.00 +GCC 47 22.50 24.50 19.50 33.50 0.00 0.00 +GCC 48 27.50 17.50 22.50 32.50 0.00 0.00 +GCC 49 28.50 17.00 20.00 34.50 0.00 0.00 +GCC 50 32.00 16.50 20.00 31.50 0.00 0.00 +GCC 51 27.50 20.50 21.00 31.00 0.00 0.00 +GCC 52 27.50 21.50 19.50 31.50 0.00 0.00 +GCC 53 26.00 19.00 25.50 29.50 0.00 0.00 +GCC 54 30.65 23.62 16.58 29.15 0.00 0.00 +GCC 55 29.65 21.61 20.10 28.64 0.00 0.00 +GCC 56 32.16 16.58 22.11 29.15 0.00 0.00 +GCC 57 28.64 20.60 21.11 29.65 0.00 0.00 +GCC 58 29.65 14.57 24.62 31.16 0.00 0.00 +GCC 59 31.16 21.61 17.59 29.65 0.00 0.00 +GCC 60 28.64 17.59 22.11 31.66 0.00 0.00 +GCC 61 25.13 21.61 22.61 30.65 0.00 0.00 +GCC 62 27.14 26.13 21.61 25.13 0.00 0.00 +GCC 63 29.15 14.57 18.59 37.69 0.00 0.00 +GCC 64 29.15 15.08 21.61 34.17 0.00 0.00 +GCC 65 28.64 20.10 19.10 32.16 0.00 0.00 +GCC 66 31.66 19.10 16.08 33.17 0.00 0.00 +GCC 67 24.75 20.20 24.24 30.81 0.00 0.00 +GCC 68 26.77 19.70 23.23 30.30 0.00 0.00 +GCC 69 30.96 17.26 22.84 28.93 0.00 0.00 +GCC 70 33.67 16.84 21.94 27.55 0.00 0.00 +GCC 71 35.20 20.41 18.88 25.51 0.00 0.00 +GCC 72 33.67 15.82 18.88 31.63 0.00 0.00 +GCC 73 32.31 18.46 18.46 30.77 0.00 0.00 +GCC 74 27.69 18.46 24.10 29.74 0.00 0.00 +GCC 75 32.31 14.87 21.54 31.28 0.00 0.00 +GCC 76 24.62 20.00 21.03 34.36 0.00 0.00 +GCC 77 29.74 17.44 17.95 34.87 0.00 0.00 +GCC 78 24.48 20.83 17.19 37.50 0.00 0.00 +GCC 79 33.33 20.83 19.79 26.04 0.00 0.00 +GCC 80 31.05 16.32 22.11 30.53 0.00 0.00 +GCC 81 33.33 15.87 15.34 35.45 0.00 0.00 +GCC 82 31.75 19.58 19.58 29.10 0.00 0.00 +GCC 83 30.32 21.81 18.62 29.26 0.00 0.00 +GCC 84 27.66 21.81 15.96 34.57 0.00 0.00 +GCC 85 26.06 15.43 22.34 36.17 0.00 0.00 +GCC 86 25.00 18.09 21.81 35.11 0.00 0.00 +GCC 87 30.85 18.09 15.43 35.64 0.00 0.00 +GCC 88 32.45 25.00 18.09 24.47 0.00 0.00 +GCC 89 24.47 15.43 19.68 40.43 0.00 0.00 +GCC 90 27.27 21.93 20.86 29.95 0.00 0.00 +GCC 91 28.34 14.97 20.86 35.83 0.00 0.00 +GCC 92 28.34 18.18 20.32 33.16 0.00 0.00 +GCC 93 28.65 18.38 18.38 34.59 0.00 0.00 +GCC 94 29.19 17.84 20.54 32.43 0.00 0.00 +GCC 95 27.72 23.91 21.20 27.17 0.00 0.00 +GCC 96 31.32 18.68 16.48 33.52 0.00 0.00 +GCC 97 21.98 17.58 21.43 39.01 0.00 0.00 +GCC 98 27.47 15.93 18.68 37.91 0.00 0.00 +GCC 99 27.53 20.22 17.98 34.27 0.00 0.00 +GCC 100 34.83 15.17 19.66 30.34 0.00 0.00 +GCC 101 36.52 16.85 20.22 26.40 0.00 0.00 +GCC 102 29.55 22.16 23.30 25.00 0.00 0.00 +GCC 103 27.84 18.75 19.32 34.09 0.00 0.00 +GCC 104 26.14 14.77 22.16 36.93 0.00 0.00 +GCC 105 33.52 11.36 19.89 35.23 0.00 0.00 +GCC 106 28.00 20.00 19.43 32.57 0.00 0.00 +GCC 107 25.88 16.47 24.12 33.53 0.00 0.00 +GCC 108 30.77 20.71 15.98 32.54 0.00 0.00 +GCC 109 26.63 30.18 16.57 26.63 0.00 0.00 +GCC 110 27.81 9.47 23.67 39.05 0.00 0.00 +GCC 111 30.18 16.57 23.67 29.59 0.00 0.00 +GCC 112 28.40 21.30 24.85 25.44 0.00 0.00 +GCC 113 28.57 19.64 22.02 29.76 0.00 0.00 +GCC 114 31.55 23.21 17.86 27.38 0.00 0.00 +GCC 115 35.12 19.64 15.48 29.76 0.00 0.00 +GCC 116 26.79 17.86 22.62 32.74 0.00 0.00 +GCC 117 34.73 22.75 14.37 28.14 0.00 0.00 +GCC 118 27.11 23.49 15.06 34.34 0.00 0.00 +GCC 119 31.93 19.28 20.48 28.31 0.00 0.00 +GCC 120 35.15 16.97 18.18 29.70 0.00 0.00 +GCC 121 26.67 24.85 18.18 30.30 0.00 0.00 +GCC 122 33.94 17.58 19.39 29.09 0.00 0.00 +GCC 123 29.45 19.63 18.40 32.52 0.00 0.00 +GCC 124 24.54 22.09 23.31 30.06 0.00 0.00 +GCC 125 28.22 17.18 20.86 33.74 0.00 0.00 +GCC 126 40.99 17.39 16.15 25.47 0.00 0.00 +GCC 127 28.75 18.12 19.38 33.75 0.00 0.00 +GCC 128 25.16 22.01 20.13 32.70 0.00 0.00 +GCC 129 23.27 16.98 23.27 36.48 0.00 0.00 +GCC 130 33.12 12.74 24.20 29.94 0.00 0.00 +GCC 131 25.48 16.56 21.66 36.31 0.00 0.00 +GCC 132 31.21 19.11 22.29 27.39 0.00 0.00 +GCC 133 30.97 19.35 19.35 30.32 0.00 0.00 +GCC 134 32.90 14.84 23.23 29.03 0.00 0.00 +GCC 135 32.26 18.71 18.06 30.97 0.00 0.00 +GCC 136 34.19 19.35 22.58 23.87 0.00 0.00 +GCC 137 27.27 18.18 20.13 34.42 0.00 0.00 +GCC 138 30.52 18.18 17.53 33.77 0.00 0.00 +GCC 139 26.62 22.08 19.48 31.82 0.00 0.00 +GCC 140 27.81 24.50 19.87 27.81 0.00 0.00 +GCC 141 28.00 23.33 21.33 27.33 0.00 0.00 +GCC 142 29.53 15.44 28.19 26.85 0.00 0.00 +GCC 143 24.66 15.07 23.97 36.30 0.00 0.00 +GCC 144 27.40 16.44 19.86 36.30 0.00 0.00 +GCC 145 29.45 13.70 19.86 36.99 0.00 0.00 +GCC 146 35.86 12.41 18.62 33.10 0.00 0.00 +GCC 147 32.87 20.98 16.08 30.07 0.00 0.00 +GCC 148 31.11 20.74 23.70 24.44 0.00 0.00 +GCC 149 33.07 14.96 19.69 32.28 0.00 0.00 +GCC 150 36.94 14.41 14.41 34.23 0.00 0.00 +GCC 151 40.82 18.37 14.29 26.53 0.00 0.00 +# ACGT content per cycle, read oriented. Use `grep ^GCT | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +GCT 1 22.50 26.00 32.00 19.50 +GCT 2 20.00 21.50 16.00 42.50 +GCT 3 30.00 16.50 15.00 38.50 +GCT 4 21.50 26.50 12.00 40.00 +GCT 5 44.50 10.00 12.00 33.50 +GCT 6 42.50 13.50 22.50 21.50 +GCT 7 34.50 17.00 23.50 25.00 +GCT 8 37.50 22.50 21.50 18.50 +GCT 9 17.00 39.00 20.50 23.50 +GCT 10 33.00 14.50 13.50 39.00 +GCT 11 34.50 12.50 26.50 26.50 +GCT 12 27.50 14.50 22.50 35.50 +GCT 13 21.50 22.00 24.50 32.00 +GCT 14 28.00 27.50 13.00 31.50 +GCT 15 35.00 15.50 21.00 28.50 +GCT 16 36.50 24.00 17.50 22.00 +GCT 17 36.50 18.00 18.00 27.50 +GCT 18 29.50 23.50 20.00 27.00 +GCT 19 30.00 17.50 21.50 31.00 +GCT 20 30.00 19.00 19.50 31.50 +GCT 21 25.50 20.00 19.50 35.00 +GCT 22 29.00 23.00 19.00 29.00 +GCT 23 30.50 21.00 17.00 31.50 +GCT 24 30.50 22.00 17.00 30.50 +GCT 25 28.50 19.00 19.50 33.00 +GCT 26 27.50 19.00 23.00 30.50 +GCT 27 33.50 21.50 17.00 28.00 +GCT 28 28.50 23.50 20.00 28.00 +GCT 29 32.00 21.00 19.50 27.50 +GCT 30 30.50 20.50 21.00 28.00 +GCT 31 25.00 24.00 21.00 30.00 +GCT 32 37.00 17.50 16.50 29.00 +GCT 33 27.00 19.00 22.00 32.00 +GCT 34 29.50 22.00 22.50 26.00 +GCT 35 29.00 19.50 20.00 31.50 +GCT 36 37.50 17.50 15.00 30.00 +GCT 37 32.50 21.50 17.00 29.00 +GCT 38 30.00 20.50 20.00 29.50 +GCT 39 34.00 20.50 18.50 27.00 +GCT 40 27.00 22.00 19.50 31.50 +GCT 41 32.00 20.00 15.50 32.50 +GCT 42 37.50 17.00 21.00 24.50 +GCT 43 25.50 19.50 18.00 37.00 +GCT 44 31.50 18.50 18.50 31.50 +GCT 45 27.00 20.00 19.00 34.00 +GCT 46 29.00 20.50 20.50 30.00 +GCT 47 29.00 20.50 23.50 27.00 +GCT 48 27.00 21.50 18.50 33.00 +GCT 49 27.00 17.00 20.00 36.00 +GCT 50 29.00 21.00 15.50 34.50 +GCT 51 33.00 21.50 20.00 25.50 +GCT 52 30.50 21.00 20.00 28.50 +GCT 53 24.50 23.00 21.50 31.00 +GCT 54 30.15 20.60 19.60 29.65 +GCT 55 25.13 20.60 21.11 33.17 +GCT 56 26.13 21.11 17.59 35.18 +GCT 57 27.14 20.60 21.11 31.16 +GCT 58 30.15 17.59 21.61 30.65 +GCT 59 32.66 20.60 18.59 28.14 +GCT 60 31.66 18.09 21.61 28.64 +GCT 61 25.13 23.12 21.11 30.65 +GCT 62 24.62 23.12 24.62 27.64 +GCT 63 36.68 17.59 15.58 30.15 +GCT 64 35.18 16.58 20.10 28.14 +GCT 65 30.65 18.59 20.60 30.15 +GCT 66 34.67 15.58 19.60 30.15 +GCT 67 29.29 24.75 19.70 26.26 +GCT 68 28.28 21.21 21.72 28.79 +GCT 69 29.44 22.84 17.26 30.46 +GCT 70 36.22 19.90 18.88 25.00 +GCT 71 34.18 20.92 18.37 26.53 +GCT 72 32.14 17.86 16.84 33.16 +GCT 73 32.82 14.36 22.56 30.26 +GCT 74 30.26 21.54 21.03 27.18 +GCT 75 33.33 18.46 17.95 30.26 +GCT 76 29.23 23.08 17.95 29.74 +GCT 77 29.74 17.95 17.44 34.87 +GCT 78 31.25 20.83 17.19 30.73 +GCT 79 29.17 23.44 17.19 30.21 +GCT 80 35.79 21.05 17.37 25.79 +GCT 81 39.68 20.11 11.11 29.10 +GCT 82 28.04 16.93 22.22 32.80 +GCT 83 29.26 20.21 20.21 30.32 +GCT 84 35.11 18.09 19.68 27.13 +GCT 85 28.72 20.74 17.02 33.51 +GCT 86 29.79 21.28 18.62 30.32 +GCT 87 31.38 18.09 15.43 35.11 +GCT 88 28.72 21.81 21.28 28.19 +GCT 89 30.32 18.62 16.49 34.57 +GCT 90 29.95 13.90 28.88 27.27 +GCT 91 32.09 15.51 20.32 32.09 +GCT 92 26.20 18.18 20.32 35.29 +GCT 93 31.35 18.38 18.38 31.89 +GCT 94 29.73 15.68 22.70 31.89 +GCT 95 28.80 19.57 25.54 26.09 +GCT 96 32.42 20.33 14.84 32.42 +GCT 97 31.87 21.43 17.58 29.12 +GCT 98 30.77 14.29 20.33 34.62 +GCT 99 28.65 17.42 20.79 33.15 +GCT 100 28.65 14.04 20.79 36.52 +GCT 101 27.53 23.03 14.04 35.39 +GCT 102 26.70 17.05 28.41 27.84 +GCT 103 29.55 20.45 17.61 32.39 +GCT 104 34.66 22.16 14.77 28.41 +GCT 105 40.91 13.07 18.18 27.84 +GCT 106 24.57 20.57 18.86 36.00 +GCT 107 26.47 18.24 22.35 32.94 +GCT 108 31.95 17.16 19.53 31.36 +GCT 109 26.04 24.85 21.89 27.22 +GCT 110 32.54 17.75 15.38 34.32 +GCT 111 26.63 17.75 22.49 33.14 +GCT 112 27.81 23.08 23.08 26.04 +GCT 113 35.12 16.67 25.00 23.21 +GCT 114 30.95 21.43 19.64 27.98 +GCT 115 29.17 18.45 16.67 35.71 +GCT 116 30.36 17.86 22.62 29.17 +GCT 117 27.54 21.56 15.57 35.33 +GCT 118 33.13 22.89 15.66 28.31 +GCT 119 33.73 16.87 22.89 26.51 +GCT 120 26.67 13.94 21.21 38.18 +GCT 121 29.09 18.18 24.85 27.88 +GCT 122 27.27 21.21 15.76 35.76 +GCT 123 30.06 17.79 20.25 31.90 +GCT 124 28.22 22.09 23.31 26.38 +GCT 125 27.61 20.25 17.79 34.36 +GCT 126 31.06 16.77 16.77 35.40 +GCT 127 32.50 15.00 22.50 30.00 +GCT 128 25.79 18.87 23.27 32.08 +GCT 129 28.30 20.75 19.50 31.45 +GCT 130 33.12 18.47 18.47 29.94 +GCT 131 31.85 19.75 18.47 29.94 +GCT 132 30.57 22.93 18.47 28.03 +GCT 133 29.68 18.06 20.65 31.61 +GCT 134 30.97 23.23 14.84 30.97 +GCT 135 32.90 16.77 20.00 30.32 +GCT 136 29.03 19.35 22.58 29.03 +GCT 137 27.92 24.68 13.64 33.77 +GCT 138 35.06 16.88 18.83 29.22 +GCT 139 33.12 22.73 18.83 25.32 +GCT 140 34.44 22.52 21.85 21.19 +GCT 141 25.33 22.67 22.00 30.00 +GCT 142 31.54 21.48 22.15 24.83 +GCT 143 35.62 20.55 18.49 25.34 +GCT 144 25.34 14.38 21.92 38.36 +GCT 145 35.62 15.75 17.81 30.82 +GCT 146 33.79 14.48 16.55 35.17 +GCT 147 32.17 20.98 16.08 30.77 +GCT 148 26.67 23.70 20.74 28.89 +GCT 149 40.16 16.54 18.11 25.20 +GCT 150 33.33 9.91 18.92 37.84 +GCT 151 24.49 0.00 32.65 42.86 +# ACGT content per cycle for first fragments. Use `grep ^FBC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%]; and N and O counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +FBC 1 20.00 26.00 32.00 22.00 0.00 0.00 +FBC 2 34.00 16.00 18.00 32.00 0.00 0.00 +FBC 3 35.00 17.00 16.00 32.00 0.00 0.00 +FBC 4 27.00 22.00 22.00 29.00 0.00 0.00 +FBC 5 33.00 10.00 14.00 43.00 0.00 0.00 +FBC 6 30.00 18.00 13.00 39.00 0.00 0.00 +FBC 7 27.00 22.00 21.00 30.00 0.00 0.00 +FBC 8 35.00 20.00 20.00 25.00 0.00 0.00 +FBC 9 23.00 34.00 23.00 20.00 0.00 0.00 +FBC 10 33.00 13.00 14.00 40.00 0.00 0.00 +FBC 11 33.00 17.00 21.00 29.00 0.00 0.00 +FBC 12 35.00 21.00 11.00 33.00 0.00 0.00 +FBC 13 31.00 20.00 21.00 28.00 0.00 0.00 +FBC 14 26.00 23.00 21.00 30.00 0.00 0.00 +FBC 15 25.00 24.00 18.00 33.00 0.00 0.00 +FBC 16 32.00 24.00 23.00 21.00 0.00 0.00 +FBC 17 27.00 13.00 21.00 39.00 0.00 0.00 +FBC 18 26.00 28.00 15.00 31.00 0.00 0.00 +FBC 19 24.00 18.00 19.00 39.00 0.00 0.00 +FBC 20 29.00 16.00 22.00 33.00 0.00 0.00 +FBC 21 21.00 20.00 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+FBC 69 31.00 17.00 24.00 28.00 0.00 0.00 +FBC 70 31.00 18.00 27.00 24.00 0.00 0.00 +FBC 71 42.00 17.00 15.00 26.00 0.00 0.00 +FBC 72 34.00 15.00 23.00 28.00 0.00 0.00 +FBC 73 31.31 23.23 19.19 26.26 0.00 0.00 +FBC 74 21.21 22.22 26.26 30.30 0.00 0.00 +FBC 75 32.32 15.15 20.20 32.32 0.00 0.00 +FBC 76 29.29 13.13 17.17 40.40 0.00 0.00 +FBC 77 26.26 18.18 21.21 34.34 0.00 0.00 +FBC 78 28.87 17.53 22.68 30.93 0.00 0.00 +FBC 79 32.99 20.62 20.62 25.77 0.00 0.00 +FBC 80 29.47 16.84 26.32 27.37 0.00 0.00 +FBC 81 32.98 12.77 12.77 41.49 0.00 0.00 +FBC 82 37.23 20.21 21.28 21.28 0.00 0.00 +FBC 83 31.91 23.40 18.09 26.60 0.00 0.00 +FBC 84 24.47 23.40 14.89 37.23 0.00 0.00 +FBC 85 36.17 18.09 20.21 25.53 0.00 0.00 +FBC 86 25.53 19.15 20.21 35.11 0.00 0.00 +FBC 87 29.79 18.09 13.83 38.30 0.00 0.00 +FBC 88 32.98 28.72 15.96 22.34 0.00 0.00 +FBC 89 24.47 20.21 15.96 39.36 0.00 0.00 +FBC 90 31.18 19.35 13.98 35.48 0.00 0.00 +FBC 91 25.81 19.35 18.28 36.56 0.00 0.00 +FBC 92 30.11 18.28 18.28 33.33 0.00 0.00 +FBC 93 28.26 13.04 20.65 38.04 0.00 0.00 +FBC 94 31.52 18.48 20.65 29.35 0.00 0.00 +FBC 95 26.37 21.98 21.98 29.67 0.00 0.00 +FBC 96 24.44 17.78 23.33 34.44 0.00 0.00 +FBC 97 17.78 17.78 21.11 43.33 0.00 0.00 +FBC 98 26.67 13.33 14.44 45.56 0.00 0.00 +FBC 99 27.27 20.45 19.32 32.95 0.00 0.00 +FBC 100 36.36 13.64 22.73 27.27 0.00 0.00 +FBC 101 40.91 15.91 17.05 26.14 0.00 0.00 +FBC 102 28.41 23.86 22.73 25.00 0.00 0.00 +FBC 103 30.68 19.32 18.18 31.82 0.00 0.00 +FBC 104 18.18 18.18 25.00 38.64 0.00 0.00 +FBC 105 30.68 10.23 19.32 39.77 0.00 0.00 +FBC 106 36.36 15.91 21.59 26.14 0.00 0.00 +FBC 107 25.58 15.12 19.77 39.53 0.00 0.00 +FBC 108 32.94 18.82 12.94 35.29 0.00 0.00 +FBC 109 28.24 29.41 17.65 24.71 0.00 0.00 +FBC 110 28.24 10.59 24.71 36.47 0.00 0.00 +FBC 111 34.12 14.12 25.88 25.88 0.00 0.00 +FBC 112 23.53 21.18 28.24 27.06 0.00 0.00 +FBC 113 21.18 21.18 23.53 34.12 0.00 0.00 +FBC 114 23.53 23.53 16.47 36.47 0.00 0.00 +FBC 115 30.59 27.06 12.94 29.41 0.00 0.00 +FBC 116 24.71 15.29 29.41 30.59 0.00 0.00 +FBC 117 29.41 27.06 12.94 30.59 0.00 0.00 +FBC 118 24.71 27.06 15.29 32.94 0.00 0.00 +FBC 119 27.06 22.35 22.35 28.24 0.00 0.00 +FBC 120 36.90 20.24 14.29 28.57 0.00 0.00 +FBC 121 33.33 20.24 15.48 30.95 0.00 0.00 +FBC 122 35.71 20.24 14.29 29.76 0.00 0.00 +FBC 123 24.10 25.30 16.87 33.73 0.00 0.00 +FBC 124 27.71 24.10 19.28 28.92 0.00 0.00 +FBC 125 26.51 16.87 19.28 37.35 0.00 0.00 +FBC 126 41.46 15.85 13.41 29.27 0.00 0.00 +FBC 127 28.05 18.29 24.39 29.27 0.00 0.00 +FBC 128 20.99 20.99 22.22 35.80 0.00 0.00 +FBC 129 22.22 13.58 22.22 41.98 0.00 0.00 +FBC 130 32.50 10.00 26.25 31.25 0.00 0.00 +FBC 131 26.25 15.00 26.25 32.50 0.00 0.00 +FBC 132 30.00 18.75 21.25 30.00 0.00 0.00 +FBC 133 32.91 20.25 17.72 29.11 0.00 0.00 +FBC 134 29.11 15.19 25.32 30.38 0.00 0.00 +FBC 135 31.65 18.99 18.99 30.38 0.00 0.00 +FBC 136 34.18 18.99 25.32 21.52 0.00 0.00 +FBC 137 29.11 10.13 25.32 35.44 0.00 0.00 +FBC 138 25.32 24.05 17.72 32.91 0.00 0.00 +FBC 139 25.32 25.32 18.99 30.38 0.00 0.00 +FBC 140 29.87 24.68 19.48 25.97 0.00 0.00 +FBC 141 29.87 22.08 18.18 29.87 0.00 0.00 +FBC 142 27.63 15.79 30.26 26.32 0.00 0.00 +FBC 143 27.03 18.92 24.32 29.73 0.00 0.00 +FBC 144 28.38 18.92 18.92 33.78 0.00 0.00 +FBC 145 32.43 16.22 14.86 36.49 0.00 0.00 +FBC 146 36.49 13.51 16.22 33.78 0.00 0.00 +FBC 147 34.72 22.22 13.89 29.17 0.00 0.00 +FBC 148 26.87 20.90 26.87 25.37 0.00 0.00 +FBC 149 31.25 12.50 25.00 31.25 0.00 0.00 +FBC 150 32.73 16.36 10.91 40.00 0.00 0.00 +FBC 151 48.28 17.24 13.79 20.69 0.00 0.00 +# ACGT raw counters for first fragments. Use `grep ^FTC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: A,C,G,T,N base counters +FTC 4077 2634 2796 4390 0 +# ACGT content per cycle for last fragments. Use `grep ^LBC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%]; and N and O counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +LBC 1 19.00 27.00 31.00 23.00 0.00 0.00 +LBC 2 27.00 25.00 16.00 32.00 0.00 0.00 +LBC 3 29.00 13.00 17.00 41.00 0.00 0.00 +LBC 4 34.00 20.00 13.00 33.00 0.00 0.00 +LBC 5 46.00 9.00 11.00 34.00 0.00 0.00 +LBC 6 26.00 17.00 24.00 33.00 0.00 0.00 +LBC 7 32.00 17.00 21.00 30.00 0.00 0.00 +LBC 8 24.00 22.00 26.00 28.00 0.00 0.00 +LBC 9 21.00 31.00 31.00 17.00 0.00 0.00 +LBC 10 39.00 11.00 18.00 32.00 0.00 0.00 +LBC 11 23.00 20.00 20.00 37.00 0.00 0.00 +LBC 12 32.00 21.00 21.00 26.00 0.00 0.00 +LBC 13 25.00 18.00 34.00 23.00 0.00 0.00 +LBC 14 23.00 20.00 17.00 40.00 0.00 0.00 +LBC 15 34.00 9.00 22.00 35.00 0.00 0.00 +LBC 16 30.00 16.00 20.00 34.00 0.00 0.00 +LBC 17 28.00 20.00 18.00 34.00 0.00 0.00 +LBC 18 35.00 20.00 24.00 21.00 0.00 0.00 +LBC 19 23.00 25.00 16.00 36.00 0.00 0.00 +LBC 20 34.00 18.00 21.00 27.00 0.00 0.00 +LBC 21 31.00 24.00 22.00 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Use `grep ^LTC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: A,C,G,T,N base counters +LTC 4051 2592 2808 4297 0 +# Insert sizes. Use `grep ^IS | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: insert size, pairs total, inward oriented pairs, outward oriented pairs, other pairs +IS 0 0 0 0 0 +IS 1 0 0 0 0 +IS 2 0 0 0 0 +IS 3 0 0 0 0 +IS 4 0 0 0 0 +IS 5 0 0 0 0 +IS 6 0 0 0 0 +IS 7 0 0 0 0 +IS 8 0 0 0 0 +IS 9 0 0 0 0 +IS 10 0 0 0 0 +IS 11 0 0 0 0 +IS 12 0 0 0 0 +IS 13 0 0 0 0 +IS 14 0 0 0 0 +IS 15 0 0 0 0 +IS 16 0 0 0 0 +IS 17 0 0 0 0 +IS 18 0 0 0 0 +IS 19 0 0 0 0 +IS 20 0 0 0 0 +IS 21 0 0 0 0 +IS 22 0 0 0 0 +IS 23 0 0 0 0 +IS 24 0 0 0 0 +IS 25 0 0 0 0 +IS 26 0 0 0 0 +IS 27 0 0 0 0 +IS 28 0 0 0 0 +IS 29 0 0 0 0 +IS 30 0 0 0 0 +IS 31 0 0 0 0 +IS 32 0 0 0 0 +IS 33 0 0 0 0 +IS 34 0 0 0 0 +IS 35 0 0 0 0 +IS 36 0 0 0 0 +IS 37 0 0 0 0 +IS 38 0 0 0 0 +IS 39 0 0 0 0 +IS 40 0 0 0 0 +IS 41 0 0 0 0 +IS 42 0 0 0 0 +IS 43 0 0 0 0 +IS 44 0 0 0 0 +IS 45 0 0 0 0 +IS 46 0 0 0 0 +IS 47 0 0 0 0 +IS 48 0 0 0 0 +IS 49 0 0 0 0 +IS 50 0 0 0 0 +IS 51 0 0 0 0 +IS 52 0 0 0 0 +IS 53 0 0 0 0 +IS 54 0 0 0 0 +IS 55 0 0 0 0 +IS 56 0 0 0 0 +IS 57 0 0 0 0 +IS 58 0 0 0 0 +IS 59 0 0 0 0 +IS 60 0 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+IS 188 0 0 0 0 +IS 189 1 1 0 0 +IS 190 0 0 0 0 +IS 191 1 1 0 0 +IS 192 0 0 0 0 +IS 193 0 0 0 0 +IS 194 0 0 0 0 +IS 195 1 1 0 0 +IS 196 0 0 0 0 +IS 197 1 1 0 0 +IS 198 1 1 0 0 +IS 199 0 0 0 0 +IS 200 0 0 0 0 +IS 201 2 2 0 0 +IS 202 1 1 0 0 +IS 203 0 0 0 0 +IS 204 1 1 0 0 +IS 205 0 0 0 0 +IS 206 0 0 0 0 +IS 207 0 0 0 0 +IS 208 0 0 0 0 +IS 209 1 1 0 0 +IS 210 0 0 0 0 +IS 211 0 0 0 0 +IS 212 0 0 0 0 +IS 213 0 0 0 0 +IS 214 1 1 0 0 +IS 215 0 0 0 0 +IS 216 0 0 0 0 +IS 217 0 0 0 0 +IS 218 1 1 0 0 +IS 219 1 1 0 0 +IS 220 0 0 0 0 +IS 221 0 0 0 0 +IS 222 1 1 0 0 +IS 223 0 0 0 0 +IS 224 0 0 0 0 +IS 225 0 0 0 0 +IS 226 0 0 0 0 +IS 227 1 1 0 0 +IS 228 0 0 0 0 +IS 229 0 0 0 0 +IS 230 0 0 0 0 +IS 231 1 1 0 0 +IS 232 1 1 0 0 +IS 233 1 1 0 0 +IS 234 2 2 0 0 +IS 235 3 3 0 0 +IS 236 1 1 0 0 +IS 237 0 0 0 0 +IS 238 2 2 0 0 +IS 239 0 0 0 0 +IS 240 1 1 0 0 +IS 241 0 0 0 0 +IS 242 0 0 0 0 +IS 243 0 0 0 0 +IS 244 1 1 0 0 +IS 245 1 1 0 0 +IS 246 1 1 0 0 +IS 247 2 2 0 0 +IS 248 0 0 0 0 +IS 249 1 1 0 0 +IS 250 0 0 0 0 +IS 251 1 1 0 0 +IS 252 0 0 0 0 +IS 253 0 0 0 0 +IS 254 1 1 0 0 +IS 255 1 1 0 0 +IS 256 0 0 0 0 +IS 257 0 0 0 0 +IS 258 0 0 0 0 +IS 259 1 1 0 0 +IS 260 0 0 0 0 +IS 261 0 0 0 0 +IS 262 0 0 0 0 +IS 263 0 0 0 0 +IS 264 0 0 0 0 +IS 265 0 0 0 0 +IS 266 1 1 0 0 +IS 267 1 1 0 0 +IS 268 1 1 0 0 +IS 269 0 0 0 0 +IS 270 0 0 0 0 +IS 271 0 0 0 0 +IS 272 2 2 0 0 +IS 273 0 0 0 0 +IS 274 0 0 0 0 +IS 275 0 0 0 0 +IS 276 1 1 0 0 +IS 277 0 0 0 0 +IS 278 1 1 0 0 +IS 279 0 0 0 0 +IS 280 0 0 0 0 +IS 281 1 1 0 0 +IS 282 1 1 0 0 +IS 283 0 0 0 0 +IS 284 1 1 0 0 +IS 285 0 0 0 0 +IS 286 0 0 0 0 +IS 287 0 0 0 0 +IS 288 0 0 0 0 +IS 289 0 0 0 0 +IS 290 0 0 0 0 +IS 291 1 1 0 0 +IS 292 0 0 0 0 +IS 293 0 0 0 0 +IS 294 1 1 0 0 +IS 295 0 0 0 0 +IS 296 0 0 0 0 +IS 297 0 0 0 0 +IS 298 0 0 0 0 +IS 299 0 0 0 0 +IS 300 0 0 0 0 +IS 301 0 0 0 0 +IS 302 0 0 0 0 +IS 303 0 0 0 0 +IS 304 1 1 0 0 +IS 305 1 1 0 0 +IS 306 0 0 0 0 +IS 307 0 0 0 0 +IS 308 0 0 0 0 +IS 309 0 0 0 0 +IS 310 1 1 0 0 +IS 311 0 0 0 0 +IS 312 0 0 0 0 +IS 313 0 0 0 0 +IS 314 1 1 0 0 +IS 315 0 0 0 0 +IS 316 0 0 0 0 +IS 317 0 0 0 0 +IS 318 1 1 0 0 +IS 319 0 0 0 0 +IS 320 1 1 0 0 +IS 321 0 0 0 0 +IS 322 0 0 0 0 +IS 323 0 0 0 0 +IS 324 0 0 0 0 +IS 325 0 0 0 0 +IS 326 0 0 0 0 +IS 327 0 0 0 0 +IS 328 0 0 0 0 +IS 329 0 0 0 0 +IS 330 0 0 0 0 +IS 331 0 0 0 0 +IS 332 0 0 0 0 +IS 333 0 0 0 0 +IS 334 0 0 0 0 +IS 335 0 0 0 0 +IS 336 0 0 0 0 +IS 337 0 0 0 0 +IS 338 0 0 0 0 +IS 339 1 1 0 0 +IS 340 0 0 0 0 +IS 341 0 0 0 0 +IS 342 0 0 0 0 +IS 343 1 1 0 0 +IS 344 0 0 0 0 +IS 345 0 0 0 0 +IS 346 0 0 0 0 +IS 347 0 0 0 0 +IS 348 0 0 0 0 +IS 349 0 0 0 0 +IS 350 0 0 0 0 +IS 351 0 0 0 0 +IS 352 0 0 0 0 +IS 353 0 0 0 0 +IS 354 0 0 0 0 +IS 355 0 0 0 0 +IS 356 0 0 0 0 +IS 357 0 0 0 0 +IS 358 0 0 0 0 +IS 359 0 0 0 0 +IS 360 0 0 0 0 +IS 361 0 0 0 0 +IS 362 0 0 0 0 +IS 363 0 0 0 0 +IS 364 1 1 0 0 +# Read lengths. Use `grep ^RL | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: read length, count +RL 53 1 +RL 66 1 +RL 68 1 +RL 69 1 +RL 72 1 +RL 77 3 +RL 79 2 +RL 80 1 +RL 82 1 +RL 89 1 +RL 92 2 +RL 94 1 +RL 95 2 +RL 98 4 +RL 101 2 +RL 105 1 +RL 106 5 +RL 107 1 +RL 112 1 +RL 116 1 +RL 117 1 +RL 119 1 +RL 122 2 +RL 125 2 +RL 126 1 +RL 127 1 +RL 129 2 +RL 132 2 +RL 136 1 +RL 139 3 +RL 140 1 +RL 141 1 +RL 142 3 +RL 145 1 +RL 146 2 +RL 147 8 +RL 148 8 +RL 149 16 +RL 150 62 +RL 151 49 +# Read lengths - first fragments. Use `grep ^FRL | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: read length, count +FRL 72 1 +FRL 77 2 +FRL 79 2 +FRL 80 1 +FRL 89 1 +FRL 92 1 +FRL 94 1 +FRL 95 1 +FRL 98 2 +FRL 106 2 +FRL 107 1 +FRL 119 1 +FRL 122 1 +FRL 125 1 +FRL 127 1 +FRL 129 1 +FRL 132 1 +FRL 139 2 +FRL 141 1 +FRL 142 2 +FRL 146 2 +FRL 147 5 +FRL 148 3 +FRL 149 9 +FRL 150 26 +FRL 151 29 +# Read lengths - last fragments. Use `grep ^LRL | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: read length, count +LRL 53 1 +LRL 66 1 +LRL 68 1 +LRL 69 1 +LRL 77 1 +LRL 82 1 +LRL 92 1 +LRL 95 1 +LRL 98 2 +LRL 101 2 +LRL 105 1 +LRL 106 3 +LRL 112 1 +LRL 116 1 +LRL 117 1 +LRL 122 1 +LRL 125 1 +LRL 126 1 +LRL 129 1 +LRL 132 1 +LRL 136 1 +LRL 139 1 +LRL 140 1 +LRL 142 1 +LRL 145 1 +LRL 147 3 +LRL 148 5 +LRL 149 7 +LRL 150 36 +LRL 151 20 +# Mapping qualities for reads !(UNMAP|SECOND|SUPPL|QCFAIL|DUP). Use `grep ^MAPQ | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: mapq, count +MAPQ 1 1 +MAPQ 36 1 +MAPQ 37 1 +MAPQ 38 2 +MAPQ 48 14 +MAPQ 49 1 +MAPQ 50 5 +MAPQ 51 1 +MAPQ 52 1 +MAPQ 55 2 +MAPQ 57 1 +MAPQ 59 1 +MAPQ 60 166 +# Indel distribution. Use `grep ^ID | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: length, number of insertions, number of deletions +ID 1 0 8 +ID 2 0 1 +ID 32 0 1 +# Indels per cycle. Use `grep ^IC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle, number of insertions (fwd), .. (rev) , number of deletions (fwd), .. (rev) +IC 5 0 0 1 0 +IC 7 0 0 1 1 +IC 72 0 0 1 0 +IC 85 0 0 1 0 +IC 97 0 0 1 0 +IC 107 0 0 0 1 +IC 121 0 0 0 1 +IC 135 0 0 0 1 +IC 137 0 0 1 0 +# Coverage distribution. Use `grep ^COV | cut -f 2-` to extract this part. +COV [1-1] 1 8276 +COV [2-2] 2 2632 +COV [3-3] 3 1381 +COV [4-4] 4 365 +COV [5-5] 5 137 +COV [6-6] 6 60 +# GC-depth. Use `grep ^GCD | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: GC%, unique sequence percentiles, 10th, 25th, 50th, 75th and 90th depth percentile +GCD 0.0 66.667 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 +GCD 19.2 100.000 0.318 0.318 0.318 0.318 0.318 diff --git a/src/samtools/samtools_stats/test_data/ref.paired_end.sorted.txt b/src/samtools/samtools_stats/test_data/ref.paired_end.sorted.txt new file mode 100644 index 00000000..7a1cda92 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_stats/test_data/ref.paired_end.sorted.txt @@ -0,0 +1,1539 @@ +# This file was produced by samtools stats (1.19.2+htslib-1.19.1) and can be plotted using plot-bamstats +# This file contains statistics for all reads. +# The command line was: stats test_data/test.paired_end.sorted.bam +# CHK, Checksum [2]Read Names [3]Sequences [4]Qualities +# CHK, CRC32 of reads which passed filtering followed by addition (32bit overflow) +CHK 696e2242 1799722a a8072f55 +# Summary Numbers. Use `grep ^SN | cut -f 2-` to extract this part. +SN raw total sequences: 200 # excluding supplementary and secondary reads +SN filtered sequences: 0 +SN sequences: 200 +SN is sorted: 1 +SN 1st fragments: 100 +SN last fragments: 100 +SN reads mapped: 197 +SN reads mapped and paired: 194 # paired-end technology bit set + both mates mapped +SN reads unmapped: 3 +SN reads properly paired: 192 # proper-pair bit set +SN reads paired: 200 # paired-end technology bit set +SN reads duplicated: 0 # PCR or optical duplicate bit set +SN reads MQ0: 0 # mapped and MQ=0 +SN reads QC failed: 0 +SN non-primary alignments: 0 +SN supplementary alignments: 0 +SN total length: 27645 # ignores clipping +SN total first fragment length: 13897 # ignores clipping +SN total last fragment length: 13748 # ignores clipping +SN bases mapped: 27423 # ignores clipping +SN bases mapped (cigar): 27401 # more accurate +SN bases trimmed: 0 +SN bases duplicated: 0 +SN mismatches: 140 # from NM fields +SN error rate: 5.109303e-03 # mismatches / bases mapped (cigar) +SN average length: 138 +SN average first fragment length: 139 +SN average last fragment length: 137 +SN maximum length: 151 +SN maximum first fragment length: 151 +SN maximum last fragment length: 151 +SN average quality: 33.3 +SN insert size average: 207.7 +SN insert size standard deviation: 66.4 +SN inward oriented pairs: 88 +SN outward oriented pairs: 9 +SN pairs with other orientation: 0 +SN pairs on different chromosomes: 0 +SN percentage of properly paired reads (%): 96.0 +# First Fragment Qualities. Use `grep ^FFQ | cut -f 2-` to extract this part. +# Columns correspond to qualities and rows to cycles. First column is the cycle number. +FFQ 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 100 0 0 0 0 0 +FFQ 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 96 0 0 0 0 0 +FFQ 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 97 0 0 0 0 0 +FFQ 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 94 0 0 0 1 0 +FFQ 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 93 0 0 0 0 0 +FFQ 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 86 0 +FFQ 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 84 0 +FFQ 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 12 0 0 0 83 0 +FFQ 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 11 0 0 0 85 0 +FFQ 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 5 0 0 0 87 0 +FFQ 11 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 90 0 +FFQ 12 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 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Use `grep ^LFQ | cut -f 2-` to extract this part. +# Columns correspond to qualities and rows to cycles. First column is the cycle number. +LFQ 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 100 0 0 0 0 0 +LFQ 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 95 0 0 0 0 0 +LFQ 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 93 0 0 0 0 0 +LFQ 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 94 0 0 0 0 0 +LFQ 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 94 0 0 0 1 0 +LFQ 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 10 0 0 0 83 0 +LFQ 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 93 0 +LFQ 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 91 0 +LFQ 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 87 0 +LFQ 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 90 0 +LFQ 11 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 90 0 +LFQ 12 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 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87 0 +LFQ 36 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 82 0 +LFQ 37 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 83 0 +LFQ 38 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 85 0 +LFQ 39 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 7 0 0 0 85 0 +LFQ 40 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 6 0 0 0 88 0 +LFQ 41 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 11 0 0 0 78 0 +LFQ 42 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 87 0 +LFQ 43 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 81 0 +LFQ 44 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 6 0 0 0 86 0 +LFQ 45 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 85 0 +LFQ 46 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 9 0 0 0 81 0 +LFQ 47 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 5 0 0 0 88 0 +LFQ 48 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 8 0 0 0 84 0 +LFQ 49 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 11 0 0 0 80 0 +LFQ 50 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 10 0 0 0 79 0 +LFQ 51 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 8 0 0 0 80 0 +LFQ 52 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 8 0 0 0 79 0 +LFQ 53 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 8 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 7 0 0 0 81 0 +LFQ 54 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 15 0 0 0 79 0 +LFQ 55 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 8 0 0 0 85 0 +LFQ 56 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 8 0 0 0 80 0 +LFQ 57 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 6 0 0 0 83 0 +LFQ 58 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 9 0 0 0 80 0 +LFQ 59 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 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Use `grep ^GCF | cut -f 2-` to extract this part. +GCF 15.08 0 +GCF 30.40 1 +GCF 31.16 2 +GCF 32.16 0 +GCF 33.17 2 +GCF 33.92 5 +GCF 34.42 4 +GCF 34.92 2 +GCF 35.43 3 +GCF 35.93 7 +GCF 36.43 9 +GCF 36.93 4 +GCF 37.44 7 +GCF 37.94 8 +GCF 38.44 10 +GCF 38.94 7 +GCF 39.70 6 +GCF 40.45 8 +GCF 40.95 9 +GCF 41.71 4 +GCF 42.46 5 +GCF 42.96 7 +GCF 43.72 2 +GCF 44.72 1 +GCF 45.48 3 +GCF 46.48 2 +GCF 47.74 1 +GCF 48.74 2 +GCF 50.25 0 +GCF 52.01 1 +GCF 54.77 0 +GCF 57.54 1 +# GC Content of last fragments. Use `grep ^GCL | cut -f 2-` to extract this part. +GCL 15.08 0 +GCL 30.65 1 +GCL 31.66 0 +GCL 32.41 2 +GCL 32.91 1 +GCL 33.42 3 +GCL 33.92 4 +GCL 34.42 3 +GCL 34.92 4 +GCL 35.68 5 +GCL 36.43 10 +GCL 36.93 8 +GCL 37.44 7 +GCL 37.94 9 +GCL 38.44 10 +GCL 38.94 13 +GCL 39.45 8 +GCL 39.95 7 +GCL 40.45 2 +GCL 40.95 4 +GCL 41.46 3 +GCL 41.96 1 +GCL 42.46 4 +GCL 42.96 6 +GCL 43.47 4 +GCL 44.22 2 +GCL 44.97 4 +GCL 45.48 7 +GCL 45.98 3 +GCL 46.48 2 +GCL 46.98 3 +GCL 47.49 1 +GCL 48.49 0 +GCL 49.75 2 +# ACGT content per cycle. Use `grep ^GCC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%]; and N and O counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +GCC 1 19.50 26.50 31.50 22.50 0.00 0.00 +GCC 2 30.50 20.50 17.00 32.00 0.00 0.00 +GCC 3 32.00 15.00 16.50 36.50 0.00 0.00 +GCC 4 30.50 21.00 17.50 31.00 0.00 0.00 +GCC 5 39.50 9.50 12.50 38.50 0.00 0.00 +GCC 6 28.00 17.50 18.50 36.00 0.00 0.00 +GCC 7 29.50 19.50 21.00 30.00 0.00 0.00 +GCC 8 29.50 21.00 23.00 26.50 0.00 0.00 +GCC 9 22.00 32.50 27.00 18.50 0.00 0.00 +GCC 10 36.00 12.00 16.00 36.00 0.00 0.00 +GCC 11 28.00 18.50 20.50 33.00 0.00 0.00 +GCC 12 33.50 21.00 16.00 29.50 0.00 0.00 +GCC 13 28.00 19.00 27.50 25.50 0.00 0.00 +GCC 14 24.50 21.50 19.00 35.00 0.00 0.00 +GCC 15 29.50 16.50 20.00 34.00 0.00 0.00 +GCC 16 31.00 20.00 21.50 27.50 0.00 0.00 +GCC 17 27.50 16.50 19.50 36.50 0.00 0.00 +GCC 18 30.50 24.00 19.50 26.00 0.00 0.00 +GCC 19 23.50 21.50 17.50 37.50 0.00 0.00 +GCC 20 31.50 17.00 21.50 30.00 0.00 0.00 +GCC 21 26.00 22.00 17.50 34.50 0.00 0.00 +GCC 22 30.50 19.00 23.00 27.50 0.00 0.00 +GCC 23 31.50 15.50 22.50 30.50 0.00 0.00 +GCC 24 32.00 18.00 21.00 29.00 0.00 0.00 +GCC 25 27.50 16.50 22.00 34.00 0.00 0.00 +GCC 26 27.50 18.50 23.50 30.50 0.00 0.00 +GCC 27 28.50 19.00 19.50 33.00 0.00 0.00 +GCC 28 22.50 21.00 22.50 34.00 0.00 0.00 +GCC 29 27.00 18.50 22.00 32.50 0.00 0.00 +GCC 30 30.50 20.00 21.50 28.00 0.00 0.00 +GCC 31 24.50 21.00 24.00 30.50 0.00 0.00 +GCC 32 32.50 17.50 16.50 33.50 0.00 0.00 +GCC 33 28.50 16.00 25.00 30.50 0.00 0.00 +GCC 34 29.00 21.00 23.50 26.50 0.00 0.00 +GCC 35 32.50 18.50 21.00 28.00 0.00 0.00 +GCC 36 35.00 12.50 20.00 32.50 0.00 0.00 +GCC 37 26.50 20.00 18.50 35.00 0.00 0.00 +GCC 38 27.00 21.00 19.50 32.50 0.00 0.00 +GCC 39 31.00 20.00 19.00 30.00 0.00 0.00 +GCC 40 27.50 20.00 21.50 31.00 0.00 0.00 +GCC 41 37.00 16.50 19.00 27.50 0.00 0.00 +GCC 42 26.50 19.50 18.50 35.50 0.00 0.00 +GCC 43 33.50 20.00 17.50 29.00 0.00 0.00 +GCC 44 31.50 16.00 21.00 31.50 0.00 0.00 +GCC 45 28.50 19.00 20.00 32.50 0.00 0.00 +GCC 46 24.50 23.50 17.50 34.50 0.00 0.00 +GCC 47 22.50 24.50 19.50 33.50 0.00 0.00 +GCC 48 27.50 17.50 22.50 32.50 0.00 0.00 +GCC 49 28.50 17.00 20.00 34.50 0.00 0.00 +GCC 50 32.00 16.50 20.00 31.50 0.00 0.00 +GCC 51 27.50 20.50 21.00 31.00 0.00 0.00 +GCC 52 27.50 21.50 19.50 31.50 0.00 0.00 +GCC 53 26.00 19.00 25.50 29.50 0.00 0.00 +GCC 54 30.65 23.62 16.58 29.15 0.00 0.00 +GCC 55 29.65 21.61 20.10 28.64 0.00 0.00 +GCC 56 32.16 16.58 22.11 29.15 0.00 0.00 +GCC 57 28.64 20.60 21.11 29.65 0.00 0.00 +GCC 58 29.65 14.57 24.62 31.16 0.00 0.00 +GCC 59 31.16 21.61 17.59 29.65 0.00 0.00 +GCC 60 28.64 17.59 22.11 31.66 0.00 0.00 +GCC 61 25.13 21.61 22.61 30.65 0.00 0.00 +GCC 62 27.14 26.13 21.61 25.13 0.00 0.00 +GCC 63 29.15 14.57 18.59 37.69 0.00 0.00 +GCC 64 29.15 15.08 21.61 34.17 0.00 0.00 +GCC 65 28.64 20.10 19.10 32.16 0.00 0.00 +GCC 66 31.66 19.10 16.08 33.17 0.00 0.00 +GCC 67 24.75 20.20 24.24 30.81 0.00 0.00 +GCC 68 26.77 19.70 23.23 30.30 0.00 0.00 +GCC 69 30.96 17.26 22.84 28.93 0.00 0.00 +GCC 70 33.67 16.84 21.94 27.55 0.00 0.00 +GCC 71 35.20 20.41 18.88 25.51 0.00 0.00 +GCC 72 33.67 15.82 18.88 31.63 0.00 0.00 +GCC 73 32.31 18.46 18.46 30.77 0.00 0.00 +GCC 74 27.69 18.46 24.10 29.74 0.00 0.00 +GCC 75 32.31 14.87 21.54 31.28 0.00 0.00 +GCC 76 24.62 20.00 21.03 34.36 0.00 0.00 +GCC 77 29.74 17.44 17.95 34.87 0.00 0.00 +GCC 78 24.48 20.83 17.19 37.50 0.00 0.00 +GCC 79 33.33 20.83 19.79 26.04 0.00 0.00 +GCC 80 31.05 16.32 22.11 30.53 0.00 0.00 +GCC 81 33.33 15.87 15.34 35.45 0.00 0.00 +GCC 82 31.75 19.58 19.58 29.10 0.00 0.00 +GCC 83 30.32 21.81 18.62 29.26 0.00 0.00 +GCC 84 27.66 21.81 15.96 34.57 0.00 0.00 +GCC 85 26.06 15.43 22.34 36.17 0.00 0.00 +GCC 86 25.00 18.09 21.81 35.11 0.00 0.00 +GCC 87 30.85 18.09 15.43 35.64 0.00 0.00 +GCC 88 32.45 25.00 18.09 24.47 0.00 0.00 +GCC 89 24.47 15.43 19.68 40.43 0.00 0.00 +GCC 90 27.27 21.93 20.86 29.95 0.00 0.00 +GCC 91 28.34 14.97 20.86 35.83 0.00 0.00 +GCC 92 28.34 18.18 20.32 33.16 0.00 0.00 +GCC 93 28.65 18.38 18.38 34.59 0.00 0.00 +GCC 94 29.19 17.84 20.54 32.43 0.00 0.00 +GCC 95 27.72 23.91 21.20 27.17 0.00 0.00 +GCC 96 31.32 18.68 16.48 33.52 0.00 0.00 +GCC 97 21.98 17.58 21.43 39.01 0.00 0.00 +GCC 98 27.47 15.93 18.68 37.91 0.00 0.00 +GCC 99 27.53 20.22 17.98 34.27 0.00 0.00 +GCC 100 34.83 15.17 19.66 30.34 0.00 0.00 +GCC 101 36.52 16.85 20.22 26.40 0.00 0.00 +GCC 102 29.55 22.16 23.30 25.00 0.00 0.00 +GCC 103 27.84 18.75 19.32 34.09 0.00 0.00 +GCC 104 26.14 14.77 22.16 36.93 0.00 0.00 +GCC 105 33.52 11.36 19.89 35.23 0.00 0.00 +GCC 106 28.00 20.00 19.43 32.57 0.00 0.00 +GCC 107 25.88 16.47 24.12 33.53 0.00 0.00 +GCC 108 30.77 20.71 15.98 32.54 0.00 0.00 +GCC 109 26.63 30.18 16.57 26.63 0.00 0.00 +GCC 110 27.81 9.47 23.67 39.05 0.00 0.00 +GCC 111 30.18 16.57 23.67 29.59 0.00 0.00 +GCC 112 28.40 21.30 24.85 25.44 0.00 0.00 +GCC 113 28.57 19.64 22.02 29.76 0.00 0.00 +GCC 114 31.55 23.21 17.86 27.38 0.00 0.00 +GCC 115 35.12 19.64 15.48 29.76 0.00 0.00 +GCC 116 26.79 17.86 22.62 32.74 0.00 0.00 +GCC 117 34.73 22.75 14.37 28.14 0.00 0.00 +GCC 118 27.11 23.49 15.06 34.34 0.00 0.00 +GCC 119 31.93 19.28 20.48 28.31 0.00 0.00 +GCC 120 35.15 16.97 18.18 29.70 0.00 0.00 +GCC 121 26.67 24.85 18.18 30.30 0.00 0.00 +GCC 122 33.94 17.58 19.39 29.09 0.00 0.00 +GCC 123 29.45 19.63 18.40 32.52 0.00 0.00 +GCC 124 24.54 22.09 23.31 30.06 0.00 0.00 +GCC 125 28.22 17.18 20.86 33.74 0.00 0.00 +GCC 126 40.99 17.39 16.15 25.47 0.00 0.00 +GCC 127 28.75 18.12 19.38 33.75 0.00 0.00 +GCC 128 25.16 22.01 20.13 32.70 0.00 0.00 +GCC 129 23.27 16.98 23.27 36.48 0.00 0.00 +GCC 130 33.12 12.74 24.20 29.94 0.00 0.00 +GCC 131 25.48 16.56 21.66 36.31 0.00 0.00 +GCC 132 31.21 19.11 22.29 27.39 0.00 0.00 +GCC 133 30.97 19.35 19.35 30.32 0.00 0.00 +GCC 134 32.90 14.84 23.23 29.03 0.00 0.00 +GCC 135 32.26 18.71 18.06 30.97 0.00 0.00 +GCC 136 34.19 19.35 22.58 23.87 0.00 0.00 +GCC 137 27.27 18.18 20.13 34.42 0.00 0.00 +GCC 138 30.52 18.18 17.53 33.77 0.00 0.00 +GCC 139 26.62 22.08 19.48 31.82 0.00 0.00 +GCC 140 27.81 24.50 19.87 27.81 0.00 0.00 +GCC 141 28.00 23.33 21.33 27.33 0.00 0.00 +GCC 142 29.53 15.44 28.19 26.85 0.00 0.00 +GCC 143 24.66 15.07 23.97 36.30 0.00 0.00 +GCC 144 27.40 16.44 19.86 36.30 0.00 0.00 +GCC 145 29.45 13.70 19.86 36.99 0.00 0.00 +GCC 146 35.86 12.41 18.62 33.10 0.00 0.00 +GCC 147 32.87 20.98 16.08 30.07 0.00 0.00 +GCC 148 31.11 20.74 23.70 24.44 0.00 0.00 +GCC 149 33.07 14.96 19.69 32.28 0.00 0.00 +GCC 150 36.94 14.41 14.41 34.23 0.00 0.00 +GCC 151 40.82 18.37 14.29 26.53 0.00 0.00 +# ACGT content per cycle, read oriented. Use `grep ^GCT | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +GCT 1 22.50 26.00 32.00 19.50 +GCT 2 20.00 21.50 16.00 42.50 +GCT 3 30.00 16.50 15.00 38.50 +GCT 4 21.50 26.50 12.00 40.00 +GCT 5 44.50 10.00 12.00 33.50 +GCT 6 42.50 13.50 22.50 21.50 +GCT 7 34.50 17.00 23.50 25.00 +GCT 8 37.50 22.50 21.50 18.50 +GCT 9 17.00 39.00 20.50 23.50 +GCT 10 33.00 14.50 13.50 39.00 +GCT 11 34.50 12.50 26.50 26.50 +GCT 12 27.50 14.50 22.50 35.50 +GCT 13 21.50 22.00 24.50 32.00 +GCT 14 28.00 27.50 13.00 31.50 +GCT 15 35.00 15.50 21.00 28.50 +GCT 16 36.50 24.00 17.50 22.00 +GCT 17 36.50 18.00 18.00 27.50 +GCT 18 29.50 23.50 20.00 27.00 +GCT 19 30.00 17.50 21.50 31.00 +GCT 20 30.00 19.00 19.50 31.50 +GCT 21 25.50 20.00 19.50 35.00 +GCT 22 29.00 23.00 19.00 29.00 +GCT 23 30.50 21.00 17.00 31.50 +GCT 24 30.50 22.00 17.00 30.50 +GCT 25 28.50 19.00 19.50 33.00 +GCT 26 27.50 19.00 23.00 30.50 +GCT 27 33.50 21.50 17.00 28.00 +GCT 28 28.50 23.50 20.00 28.00 +GCT 29 32.00 21.00 19.50 27.50 +GCT 30 30.50 20.50 21.00 28.00 +GCT 31 25.00 24.00 21.00 30.00 +GCT 32 37.00 17.50 16.50 29.00 +GCT 33 27.00 19.00 22.00 32.00 +GCT 34 29.50 22.00 22.50 26.00 +GCT 35 29.00 19.50 20.00 31.50 +GCT 36 37.50 17.50 15.00 30.00 +GCT 37 32.50 21.50 17.00 29.00 +GCT 38 30.00 20.50 20.00 29.50 +GCT 39 34.00 20.50 18.50 27.00 +GCT 40 27.00 22.00 19.50 31.50 +GCT 41 32.00 20.00 15.50 32.50 +GCT 42 37.50 17.00 21.00 24.50 +GCT 43 25.50 19.50 18.00 37.00 +GCT 44 31.50 18.50 18.50 31.50 +GCT 45 27.00 20.00 19.00 34.00 +GCT 46 29.00 20.50 20.50 30.00 +GCT 47 29.00 20.50 23.50 27.00 +GCT 48 27.00 21.50 18.50 33.00 +GCT 49 27.00 17.00 20.00 36.00 +GCT 50 29.00 21.00 15.50 34.50 +GCT 51 33.00 21.50 20.00 25.50 +GCT 52 30.50 21.00 20.00 28.50 +GCT 53 24.50 23.00 21.50 31.00 +GCT 54 30.15 20.60 19.60 29.65 +GCT 55 25.13 20.60 21.11 33.17 +GCT 56 26.13 21.11 17.59 35.18 +GCT 57 27.14 20.60 21.11 31.16 +GCT 58 30.15 17.59 21.61 30.65 +GCT 59 32.66 20.60 18.59 28.14 +GCT 60 31.66 18.09 21.61 28.64 +GCT 61 25.13 23.12 21.11 30.65 +GCT 62 24.62 23.12 24.62 27.64 +GCT 63 36.68 17.59 15.58 30.15 +GCT 64 35.18 16.58 20.10 28.14 +GCT 65 30.65 18.59 20.60 30.15 +GCT 66 34.67 15.58 19.60 30.15 +GCT 67 29.29 24.75 19.70 26.26 +GCT 68 28.28 21.21 21.72 28.79 +GCT 69 29.44 22.84 17.26 30.46 +GCT 70 36.22 19.90 18.88 25.00 +GCT 71 34.18 20.92 18.37 26.53 +GCT 72 32.14 17.86 16.84 33.16 +GCT 73 32.82 14.36 22.56 30.26 +GCT 74 30.26 21.54 21.03 27.18 +GCT 75 33.33 18.46 17.95 30.26 +GCT 76 29.23 23.08 17.95 29.74 +GCT 77 29.74 17.95 17.44 34.87 +GCT 78 31.25 20.83 17.19 30.73 +GCT 79 29.17 23.44 17.19 30.21 +GCT 80 35.79 21.05 17.37 25.79 +GCT 81 39.68 20.11 11.11 29.10 +GCT 82 28.04 16.93 22.22 32.80 +GCT 83 29.26 20.21 20.21 30.32 +GCT 84 35.11 18.09 19.68 27.13 +GCT 85 28.72 20.74 17.02 33.51 +GCT 86 29.79 21.28 18.62 30.32 +GCT 87 31.38 18.09 15.43 35.11 +GCT 88 28.72 21.81 21.28 28.19 +GCT 89 30.32 18.62 16.49 34.57 +GCT 90 29.95 13.90 28.88 27.27 +GCT 91 32.09 15.51 20.32 32.09 +GCT 92 26.20 18.18 20.32 35.29 +GCT 93 31.35 18.38 18.38 31.89 +GCT 94 29.73 15.68 22.70 31.89 +GCT 95 28.80 19.57 25.54 26.09 +GCT 96 32.42 20.33 14.84 32.42 +GCT 97 31.87 21.43 17.58 29.12 +GCT 98 30.77 14.29 20.33 34.62 +GCT 99 28.65 17.42 20.79 33.15 +GCT 100 28.65 14.04 20.79 36.52 +GCT 101 27.53 23.03 14.04 35.39 +GCT 102 26.70 17.05 28.41 27.84 +GCT 103 29.55 20.45 17.61 32.39 +GCT 104 34.66 22.16 14.77 28.41 +GCT 105 40.91 13.07 18.18 27.84 +GCT 106 24.57 20.57 18.86 36.00 +GCT 107 26.47 18.24 22.35 32.94 +GCT 108 31.95 17.16 19.53 31.36 +GCT 109 26.04 24.85 21.89 27.22 +GCT 110 32.54 17.75 15.38 34.32 +GCT 111 26.63 17.75 22.49 33.14 +GCT 112 27.81 23.08 23.08 26.04 +GCT 113 35.12 16.67 25.00 23.21 +GCT 114 30.95 21.43 19.64 27.98 +GCT 115 29.17 18.45 16.67 35.71 +GCT 116 30.36 17.86 22.62 29.17 +GCT 117 27.54 21.56 15.57 35.33 +GCT 118 33.13 22.89 15.66 28.31 +GCT 119 33.73 16.87 22.89 26.51 +GCT 120 26.67 13.94 21.21 38.18 +GCT 121 29.09 18.18 24.85 27.88 +GCT 122 27.27 21.21 15.76 35.76 +GCT 123 30.06 17.79 20.25 31.90 +GCT 124 28.22 22.09 23.31 26.38 +GCT 125 27.61 20.25 17.79 34.36 +GCT 126 31.06 16.77 16.77 35.40 +GCT 127 32.50 15.00 22.50 30.00 +GCT 128 25.79 18.87 23.27 32.08 +GCT 129 28.30 20.75 19.50 31.45 +GCT 130 33.12 18.47 18.47 29.94 +GCT 131 31.85 19.75 18.47 29.94 +GCT 132 30.57 22.93 18.47 28.03 +GCT 133 29.68 18.06 20.65 31.61 +GCT 134 30.97 23.23 14.84 30.97 +GCT 135 32.90 16.77 20.00 30.32 +GCT 136 29.03 19.35 22.58 29.03 +GCT 137 27.92 24.68 13.64 33.77 +GCT 138 35.06 16.88 18.83 29.22 +GCT 139 33.12 22.73 18.83 25.32 +GCT 140 34.44 22.52 21.85 21.19 +GCT 141 25.33 22.67 22.00 30.00 +GCT 142 31.54 21.48 22.15 24.83 +GCT 143 35.62 20.55 18.49 25.34 +GCT 144 25.34 14.38 21.92 38.36 +GCT 145 35.62 15.75 17.81 30.82 +GCT 146 33.79 14.48 16.55 35.17 +GCT 147 32.17 20.98 16.08 30.77 +GCT 148 26.67 23.70 20.74 28.89 +GCT 149 40.16 16.54 18.11 25.20 +GCT 150 33.33 9.91 18.92 37.84 +GCT 151 24.49 0.00 32.65 42.86 +# ACGT content per cycle for first fragments. Use `grep ^FBC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%]; and N and O counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +FBC 1 20.00 26.00 32.00 22.00 0.00 0.00 +FBC 2 34.00 16.00 18.00 32.00 0.00 0.00 +FBC 3 35.00 17.00 16.00 32.00 0.00 0.00 +FBC 4 27.00 22.00 22.00 29.00 0.00 0.00 +FBC 5 33.00 10.00 14.00 43.00 0.00 0.00 +FBC 6 30.00 18.00 13.00 39.00 0.00 0.00 +FBC 7 27.00 22.00 21.00 30.00 0.00 0.00 +FBC 8 35.00 20.00 20.00 25.00 0.00 0.00 +FBC 9 23.00 34.00 23.00 20.00 0.00 0.00 +FBC 10 33.00 13.00 14.00 40.00 0.00 0.00 +FBC 11 33.00 17.00 21.00 29.00 0.00 0.00 +FBC 12 35.00 21.00 11.00 33.00 0.00 0.00 +FBC 13 31.00 20.00 21.00 28.00 0.00 0.00 +FBC 14 26.00 23.00 21.00 30.00 0.00 0.00 +FBC 15 25.00 24.00 18.00 33.00 0.00 0.00 +FBC 16 32.00 24.00 23.00 21.00 0.00 0.00 +FBC 17 27.00 13.00 21.00 39.00 0.00 0.00 +FBC 18 26.00 28.00 15.00 31.00 0.00 0.00 +FBC 19 24.00 18.00 19.00 39.00 0.00 0.00 +FBC 20 29.00 16.00 22.00 33.00 0.00 0.00 +FBC 21 21.00 20.00 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+FBC 69 31.00 17.00 24.00 28.00 0.00 0.00 +FBC 70 31.00 18.00 27.00 24.00 0.00 0.00 +FBC 71 42.00 17.00 15.00 26.00 0.00 0.00 +FBC 72 34.00 15.00 23.00 28.00 0.00 0.00 +FBC 73 31.31 23.23 19.19 26.26 0.00 0.00 +FBC 74 21.21 22.22 26.26 30.30 0.00 0.00 +FBC 75 32.32 15.15 20.20 32.32 0.00 0.00 +FBC 76 29.29 13.13 17.17 40.40 0.00 0.00 +FBC 77 26.26 18.18 21.21 34.34 0.00 0.00 +FBC 78 28.87 17.53 22.68 30.93 0.00 0.00 +FBC 79 32.99 20.62 20.62 25.77 0.00 0.00 +FBC 80 29.47 16.84 26.32 27.37 0.00 0.00 +FBC 81 32.98 12.77 12.77 41.49 0.00 0.00 +FBC 82 37.23 20.21 21.28 21.28 0.00 0.00 +FBC 83 31.91 23.40 18.09 26.60 0.00 0.00 +FBC 84 24.47 23.40 14.89 37.23 0.00 0.00 +FBC 85 36.17 18.09 20.21 25.53 0.00 0.00 +FBC 86 25.53 19.15 20.21 35.11 0.00 0.00 +FBC 87 29.79 18.09 13.83 38.30 0.00 0.00 +FBC 88 32.98 28.72 15.96 22.34 0.00 0.00 +FBC 89 24.47 20.21 15.96 39.36 0.00 0.00 +FBC 90 31.18 19.35 13.98 35.48 0.00 0.00 +FBC 91 25.81 19.35 18.28 36.56 0.00 0.00 +FBC 92 30.11 18.28 18.28 33.33 0.00 0.00 +FBC 93 28.26 13.04 20.65 38.04 0.00 0.00 +FBC 94 31.52 18.48 20.65 29.35 0.00 0.00 +FBC 95 26.37 21.98 21.98 29.67 0.00 0.00 +FBC 96 24.44 17.78 23.33 34.44 0.00 0.00 +FBC 97 17.78 17.78 21.11 43.33 0.00 0.00 +FBC 98 26.67 13.33 14.44 45.56 0.00 0.00 +FBC 99 27.27 20.45 19.32 32.95 0.00 0.00 +FBC 100 36.36 13.64 22.73 27.27 0.00 0.00 +FBC 101 40.91 15.91 17.05 26.14 0.00 0.00 +FBC 102 28.41 23.86 22.73 25.00 0.00 0.00 +FBC 103 30.68 19.32 18.18 31.82 0.00 0.00 +FBC 104 18.18 18.18 25.00 38.64 0.00 0.00 +FBC 105 30.68 10.23 19.32 39.77 0.00 0.00 +FBC 106 36.36 15.91 21.59 26.14 0.00 0.00 +FBC 107 25.58 15.12 19.77 39.53 0.00 0.00 +FBC 108 32.94 18.82 12.94 35.29 0.00 0.00 +FBC 109 28.24 29.41 17.65 24.71 0.00 0.00 +FBC 110 28.24 10.59 24.71 36.47 0.00 0.00 +FBC 111 34.12 14.12 25.88 25.88 0.00 0.00 +FBC 112 23.53 21.18 28.24 27.06 0.00 0.00 +FBC 113 21.18 21.18 23.53 34.12 0.00 0.00 +FBC 114 23.53 23.53 16.47 36.47 0.00 0.00 +FBC 115 30.59 27.06 12.94 29.41 0.00 0.00 +FBC 116 24.71 15.29 29.41 30.59 0.00 0.00 +FBC 117 29.41 27.06 12.94 30.59 0.00 0.00 +FBC 118 24.71 27.06 15.29 32.94 0.00 0.00 +FBC 119 27.06 22.35 22.35 28.24 0.00 0.00 +FBC 120 36.90 20.24 14.29 28.57 0.00 0.00 +FBC 121 33.33 20.24 15.48 30.95 0.00 0.00 +FBC 122 35.71 20.24 14.29 29.76 0.00 0.00 +FBC 123 24.10 25.30 16.87 33.73 0.00 0.00 +FBC 124 27.71 24.10 19.28 28.92 0.00 0.00 +FBC 125 26.51 16.87 19.28 37.35 0.00 0.00 +FBC 126 41.46 15.85 13.41 29.27 0.00 0.00 +FBC 127 28.05 18.29 24.39 29.27 0.00 0.00 +FBC 128 20.99 20.99 22.22 35.80 0.00 0.00 +FBC 129 22.22 13.58 22.22 41.98 0.00 0.00 +FBC 130 32.50 10.00 26.25 31.25 0.00 0.00 +FBC 131 26.25 15.00 26.25 32.50 0.00 0.00 +FBC 132 30.00 18.75 21.25 30.00 0.00 0.00 +FBC 133 32.91 20.25 17.72 29.11 0.00 0.00 +FBC 134 29.11 15.19 25.32 30.38 0.00 0.00 +FBC 135 31.65 18.99 18.99 30.38 0.00 0.00 +FBC 136 34.18 18.99 25.32 21.52 0.00 0.00 +FBC 137 29.11 10.13 25.32 35.44 0.00 0.00 +FBC 138 25.32 24.05 17.72 32.91 0.00 0.00 +FBC 139 25.32 25.32 18.99 30.38 0.00 0.00 +FBC 140 29.87 24.68 19.48 25.97 0.00 0.00 +FBC 141 29.87 22.08 18.18 29.87 0.00 0.00 +FBC 142 27.63 15.79 30.26 26.32 0.00 0.00 +FBC 143 27.03 18.92 24.32 29.73 0.00 0.00 +FBC 144 28.38 18.92 18.92 33.78 0.00 0.00 +FBC 145 32.43 16.22 14.86 36.49 0.00 0.00 +FBC 146 36.49 13.51 16.22 33.78 0.00 0.00 +FBC 147 34.72 22.22 13.89 29.17 0.00 0.00 +FBC 148 26.87 20.90 26.87 25.37 0.00 0.00 +FBC 149 31.25 12.50 25.00 31.25 0.00 0.00 +FBC 150 32.73 16.36 10.91 40.00 0.00 0.00 +FBC 151 48.28 17.24 13.79 20.69 0.00 0.00 +# ACGT raw counters for first fragments. Use `grep ^FTC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: A,C,G,T,N base counters +FTC 4077 2634 2796 4390 0 +# ACGT content per cycle for last fragments. Use `grep ^LBC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle; A,C,G,T base counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%]; and N and O counts as a percentage of all A/C/G/T bases [%] +LBC 1 19.00 27.00 31.00 23.00 0.00 0.00 +LBC 2 27.00 25.00 16.00 32.00 0.00 0.00 +LBC 3 29.00 13.00 17.00 41.00 0.00 0.00 +LBC 4 34.00 20.00 13.00 33.00 0.00 0.00 +LBC 5 46.00 9.00 11.00 34.00 0.00 0.00 +LBC 6 26.00 17.00 24.00 33.00 0.00 0.00 +LBC 7 32.00 17.00 21.00 30.00 0.00 0.00 +LBC 8 24.00 22.00 26.00 28.00 0.00 0.00 +LBC 9 21.00 31.00 31.00 17.00 0.00 0.00 +LBC 10 39.00 11.00 18.00 32.00 0.00 0.00 +LBC 11 23.00 20.00 20.00 37.00 0.00 0.00 +LBC 12 32.00 21.00 21.00 26.00 0.00 0.00 +LBC 13 25.00 18.00 34.00 23.00 0.00 0.00 +LBC 14 23.00 20.00 17.00 40.00 0.00 0.00 +LBC 15 34.00 9.00 22.00 35.00 0.00 0.00 +LBC 16 30.00 16.00 20.00 34.00 0.00 0.00 +LBC 17 28.00 20.00 18.00 34.00 0.00 0.00 +LBC 18 35.00 20.00 24.00 21.00 0.00 0.00 +LBC 19 23.00 25.00 16.00 36.00 0.00 0.00 +LBC 20 34.00 18.00 21.00 27.00 0.00 0.00 +LBC 21 31.00 24.00 22.00 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Use `grep ^LTC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: A,C,G,T,N base counters +LTC 4051 2592 2808 4297 0 +# Insert sizes. Use `grep ^IS | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: insert size, pairs total, inward oriented pairs, outward oriented pairs, other pairs +IS 0 0 0 0 0 +IS 1 0 0 0 0 +IS 2 0 0 0 0 +IS 3 0 0 0 0 +IS 4 0 0 0 0 +IS 5 0 0 0 0 +IS 6 0 0 0 0 +IS 7 0 0 0 0 +IS 8 0 0 0 0 +IS 9 0 0 0 0 +IS 10 0 0 0 0 +IS 11 0 0 0 0 +IS 12 0 0 0 0 +IS 13 0 0 0 0 +IS 14 0 0 0 0 +IS 15 0 0 0 0 +IS 16 0 0 0 0 +IS 17 0 0 0 0 +IS 18 0 0 0 0 +IS 19 0 0 0 0 +IS 20 0 0 0 0 +IS 21 0 0 0 0 +IS 22 0 0 0 0 +IS 23 0 0 0 0 +IS 24 0 0 0 0 +IS 25 0 0 0 0 +IS 26 0 0 0 0 +IS 27 0 0 0 0 +IS 28 0 0 0 0 +IS 29 0 0 0 0 +IS 30 0 0 0 0 +IS 31 0 0 0 0 +IS 32 0 0 0 0 +IS 33 0 0 0 0 +IS 34 0 0 0 0 +IS 35 0 0 0 0 +IS 36 0 0 0 0 +IS 37 0 0 0 0 +IS 38 0 0 0 0 +IS 39 0 0 0 0 +IS 40 0 0 0 0 +IS 41 0 0 0 0 +IS 42 0 0 0 0 +IS 43 0 0 0 0 +IS 44 0 0 0 0 +IS 45 0 0 0 0 +IS 46 0 0 0 0 +IS 47 0 0 0 0 +IS 48 0 0 0 0 +IS 49 0 0 0 0 +IS 50 0 0 0 0 +IS 51 0 0 0 0 +IS 52 0 0 0 0 +IS 53 0 0 0 0 +IS 54 0 0 0 0 +IS 55 0 0 0 0 +IS 56 0 0 0 0 +IS 57 0 0 0 0 +IS 58 0 0 0 0 +IS 59 0 0 0 0 +IS 60 0 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+IS 313 0 0 0 0 +IS 314 1 1 0 0 +IS 315 0 0 0 0 +IS 316 0 0 0 0 +IS 317 0 0 0 0 +IS 318 1 1 0 0 +IS 319 0 0 0 0 +IS 320 1 1 0 0 +IS 321 0 0 0 0 +IS 322 0 0 0 0 +IS 323 0 0 0 0 +IS 324 0 0 0 0 +IS 325 0 0 0 0 +IS 326 0 0 0 0 +IS 327 0 0 0 0 +IS 328 0 0 0 0 +IS 329 0 0 0 0 +IS 330 0 0 0 0 +IS 331 0 0 0 0 +IS 332 0 0 0 0 +IS 333 0 0 0 0 +IS 334 0 0 0 0 +IS 335 0 0 0 0 +IS 336 0 0 0 0 +IS 337 0 0 0 0 +IS 338 0 0 0 0 +IS 339 1 1 0 0 +IS 340 0 0 0 0 +IS 341 0 0 0 0 +IS 342 0 0 0 0 +IS 343 1 1 0 0 +IS 344 0 0 0 0 +IS 345 0 0 0 0 +IS 346 0 0 0 0 +IS 347 0 0 0 0 +IS 348 0 0 0 0 +IS 349 0 0 0 0 +IS 350 0 0 0 0 +IS 351 0 0 0 0 +IS 352 0 0 0 0 +IS 353 0 0 0 0 +IS 354 0 0 0 0 +IS 355 0 0 0 0 +IS 356 0 0 0 0 +IS 357 0 0 0 0 +IS 358 0 0 0 0 +IS 359 0 0 0 0 +IS 360 0 0 0 0 +IS 361 0 0 0 0 +IS 362 0 0 0 0 +IS 363 0 0 0 0 +IS 364 1 1 0 0 +# Read lengths. Use `grep ^RL | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: read length, count +RL 53 1 +RL 66 1 +RL 68 1 +RL 69 1 +RL 72 1 +RL 77 3 +RL 79 2 +RL 80 1 +RL 82 1 +RL 89 1 +RL 92 2 +RL 94 1 +RL 95 2 +RL 98 4 +RL 101 2 +RL 105 1 +RL 106 5 +RL 107 1 +RL 112 1 +RL 116 1 +RL 117 1 +RL 119 1 +RL 122 2 +RL 125 2 +RL 126 1 +RL 127 1 +RL 129 2 +RL 132 2 +RL 136 1 +RL 139 3 +RL 140 1 +RL 141 1 +RL 142 3 +RL 145 1 +RL 146 2 +RL 147 8 +RL 148 8 +RL 149 16 +RL 150 62 +RL 151 49 +# Read lengths - first fragments. Use `grep ^FRL | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: read length, count +FRL 72 1 +FRL 77 2 +FRL 79 2 +FRL 80 1 +FRL 89 1 +FRL 92 1 +FRL 94 1 +FRL 95 1 +FRL 98 2 +FRL 106 2 +FRL 107 1 +FRL 119 1 +FRL 122 1 +FRL 125 1 +FRL 127 1 +FRL 129 1 +FRL 132 1 +FRL 139 2 +FRL 141 1 +FRL 142 2 +FRL 146 2 +FRL 147 5 +FRL 148 3 +FRL 149 9 +FRL 150 26 +FRL 151 29 +# Read lengths - last fragments. Use `grep ^LRL | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: read length, count +LRL 53 1 +LRL 66 1 +LRL 68 1 +LRL 69 1 +LRL 77 1 +LRL 82 1 +LRL 92 1 +LRL 95 1 +LRL 98 2 +LRL 101 2 +LRL 105 1 +LRL 106 3 +LRL 112 1 +LRL 116 1 +LRL 117 1 +LRL 122 1 +LRL 125 1 +LRL 126 1 +LRL 129 1 +LRL 132 1 +LRL 136 1 +LRL 139 1 +LRL 140 1 +LRL 142 1 +LRL 145 1 +LRL 147 3 +LRL 148 5 +LRL 149 7 +LRL 150 36 +LRL 151 20 +# Mapping qualities for reads !(UNMAP|SECOND|SUPPL|QCFAIL|DUP). Use `grep ^MAPQ | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: mapq, count +MAPQ 1 1 +MAPQ 36 1 +MAPQ 37 1 +MAPQ 38 2 +MAPQ 48 14 +MAPQ 49 1 +MAPQ 50 5 +MAPQ 51 1 +MAPQ 52 1 +MAPQ 55 2 +MAPQ 57 1 +MAPQ 59 1 +MAPQ 60 166 +# Indel distribution. Use `grep ^ID | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: length, number of insertions, number of deletions +ID 1 0 8 +ID 2 0 1 +ID 32 0 1 +# Indels per cycle. Use `grep ^IC | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: cycle, number of insertions (fwd), .. (rev) , number of deletions (fwd), .. (rev) +IC 5 0 0 1 0 +IC 7 0 0 1 1 +IC 72 0 0 1 0 +IC 85 0 0 1 0 +IC 97 0 0 1 0 +IC 107 0 0 0 1 +IC 121 0 0 0 1 +IC 135 0 0 0 1 +IC 137 0 0 1 0 +# Coverage distribution. Use `grep ^COV | cut -f 2-` to extract this part. +COV [1-1] 1 5542 +COV [2-2] 2 3794 +COV [3-3] 3 1571 +COV [4-4] 4 944 +COV [5-5] 5 491 +COV [6-6] 6 377 +COV [7-7] 7 50 +COV [8-8] 8 39 +COV [9-9] 9 27 +COV [10-10] 10 16 +# GC-depth. Use `grep ^GCD | cut -f 2-` to extract this part. The columns are: GC%, unique sequence percentiles, 10th, 25th, 50th, 75th and 90th depth percentile +GCD 0.0 66.667 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 +GCD 19.2 100.000 0.318 0.318 0.318 0.318 0.318 diff --git a/src/samtools/samtools_stats/test_data/script.sh b/src/samtools/samtools_stats/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..aed1fefb --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_stats/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,6 @@ +#!/bin/bash + +# dowload test data from nf-core module +wget https://github.com/nf-core/test-datasets/raw/modules/data/genomics/sarscov2/illumina/bam/test.paired_end.sorted.bam +wget https://github.com/nf-core/test-datasets/raw/modules/data/genomics/sarscov2/illumina/bam/test.paired_end.sorted.bam.bai +# samtools stats test.paired_end.sorted.bam > ref.paired_end.sorted.txt \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_stats/test_data/test.paired_end.sorted.bam b/src/samtools/samtools_stats/test_data/test.paired_end.sorted.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..85cccf14b05a885509f1a1a2945ead6370bff9d5 GIT binary patch literal 19725 zcmV)uK$gEBiwFb&00000{{{d;LjnNsOtrlWxGhI@Ce}wUbS3%Btx|2d;4pYsPa_wy ze0BCdZy}speHtivBrJ0=0}QXr(Ul{DB%&?A)JK=Dru*J>A=#?%j0$#VU>-}@qS=ED7V zKXGaH#F+=a@9x)KeEi_C2QN)-I{yHE;gN?QefW`!Z=9Za;6>f>OJ8*N^xS0UJ0IWM zoSfOeue~w;&Wk@Vo;^N>ht2MK@Zu8}?|SIs?1_ta%`QGZJ9zBP)4N`{Z(g%LnQU!t zZEbFyo4m$cxIdk}dGea?zx3#1k34*E?x9C74j=KK-u2+4-D6%eIfoa|eg6+0({b8% z%mbQTeB_D89(%(K2GkutFgLi#xe1Od-ygsE;Y)8Bf9HkQjoSxbe8Z#XW)~kBKK0yW z_}un**>h))J^sY_J0I&F`^Jk8KYr;!dirCJKXK{7bFaJj$kN-dyZFdWD@9SO9g!Ai$zg9|HUufTHoH=+uS=h-P_*YEna)3 zD4df{GR-0n-Ucp=s)Xa-YN>rtjjkhaqK~DuLDiL1UMS^V6QeB~YfWibKa^Mt*SNn7>_IJx4H@k*mV^;(=ptF%Www$S65f7wQ*Igt>KfP_jq-6 zbzH5E@FyI>?^=V;F?5GN1Fo#XZyL`g`~Q44Jt$uM!dFa+7u|obVlK?el?N|9^owu% z!{yHQFJdS|j9ge>n=0taRiTc-oQJ=3bwohGz}Dath6rtKJRYx&*Ty3l-0HX* zjd6_aKZ0yrAsp#TBSdC#z}K1!`|o`4(nHstx#@Xnyf<{?-GAr3iFEumMZs~n2QBG* z@tUIe<~-?4CY!rE>qt9Hm^#>|lp^w`Dvfu{su*|_wW)*-H4n0k(g+znGmHnrxns)J 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zK!;go<`p8K*V~6^5^drN(WwCAJQ@=xnjt>#a0dw@3Czdov%9GI4 ztNn2m0nJc;?6?)8zLBX{Upk;(jrP_v@)7SUHYbKROKwVKRknd9|P1_kyhzoYr!D%f|zZw4NS#ljkd8$C;jq< zANRMXb{IhI_0^?!lT>>8YFyqtUDdIQ zHFKdBF~SZV;HR=!0i+CD^I6qMp>1GFaK<<Ik_EuN3#M${*MJ!wG;k+rRp^GVR3 zs#Muz?(2*08XV8zy1TQrwOu@QLs8U0Lpn$m zLqLzT<4qYk>7cC+w zqtQkL#iDUdG`_2DJU5i%Fuq2R35P**=l z8=Mpd)`Fq7EQHjQF(|H$bVjSF#CfVglZMj{wxhp{_V_5cyPGFz$MnwH@=s6aYR@qq z#X%<-GoC+iP!zWe0uJ}KHug3sq0QEw34?naO9u(T71Iu)x}X*>^HC`o3=fXSz-rb6 zCY3NjbFV!ZCb6nC4~iRCnk#n?FZ(jF{*sp7#To|Lli)}@N5L0xk8i5eG@HzdV^fCu z5uE4R70T~DSgdsQO9urm(3Cc-wU}Lcz+dXAR^Fl@anYw6ANYYgS2KNzQ7m zbg5lsU~xUTriwL>5Sb98GIbqGmWt_TebCLj=hr3joP2d{G+M**6RC(kR8vcf$buh_M(rBq+;&6Pr}EtI+Q0dEOA6P0 z)vk0zIE;7)V*TdFGQuiVp2I?dd7s1 zjpDB6-Ye0}{h zIw%q)5?N8bHF9iFy_B^SVwe#{!ozrk1YJ5vF-E}Q6nC)Nmy#bChQ!qymk~R`Z(mcQY^!KmL z`Ml>$kG%YsdmP@zy;;SxXVZh%_L2DH;q`|;nHN@PJ*vo}9Y!s4tn?AQxJrvs!W691-b8C_%Y&|&JGJIq?0dww53!0{8J5qwb2wPGd%*2S zB$3>{GKXZMsXmgA3~B1G1If;!qaVr7lT6hGl;-+g2}dsXRrSkWzwIa_`^$j0xBl6$ 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O%>*%#)ga7(C;|ZDbP8+$ literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_view/config.vsh.yaml b/src/samtools/samtools_view/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..206b87ac --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_view/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,351 @@ +name: samtools_view +namespace: samtools +description: Views and converts SAM/BAM/CRAM files. +keywords: [view, convert, bam, sam, cram] +links: + homepage: https://www.htslib.org/ + documentation: https://www.htslib.org/doc/samtools-view.html + repository: https://github.com/samtools/samtools +references: + doi: [10.1093/bioinformatics/btp352, 10.1093/gigascience/giab008] +license: MIT/Expat + +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + type: file + description: Input SAM, BAM, or CRAM file. + required: true + must_exist: true + - name: --fai_reference + alternatives: -t + type: file + description: | + A tab-delimited FILE. Each line must contain the reference name in the first column + and the length of the reference in the second column, with one line for each distinct + reference. Any additional fields beyond the second column are ignored. This file also + defines the order of the reference sequences in sorting. If you run: `samtools faidx ', + the resulting index file .fai can be used as this FILE. + - name: --reference + alternatives: -T + type: file + description: | + A FASTA format reference FILE, optionally compressed by bgzip and ideally indexed by samtools faidx. + If an index is not present one will be generated for you, if the reference file is local. + If the reference file is not local, but is accessed instead via an https://, s3:// or other URL, + the index file will need to be supplied by the server alongside the reference. It is possible to + have the reference and index files in different locations by supplying both to this option separated + by the string "##idx##", for example: + --reference ftp://x.com/ref.fa##idx##ftp://y.com/index.fa.fai + However, note that only the location of the reference will be stored in the output file header. + If this method is used to make CRAM files, the cram reader may not be able to find the index, + and may not be able to decode the file unless it can get the references it needs using a different + method. + - name: --target_file + alternatives: -L + type: file + description: | + Only output alignments overlapping the input BED FILE [null]. + - name: --region_file + type: file + description: | + Use an index and multi-region iterator to only output alignments overlapping the input BED FILE. + Equivalent to --use_index --target_file FILE. + - name: --qname_file + alternatives: -N + type: file + description: | + Output only alignments with read names listed in FILE. If FILE starts with ^ then the operation is + negated and only outputs alignment with read groups not listed in FILE. It is not permissible to mix + both the filter-in and filter-out style syntax in the same command. + must_exist: true + - name: --read_group_file + alternatives: -R + type: file + description: | + Output alignments in read groups listed in FILE [null]. If FILE starts with ^ then the operation is + negated and only outputs alignment with read names not listed in FILE. It is not permissible to mix + both the filter-in and filter-out style syntax in the same command. Note that records with no RG tag + will also be output when using this option. This behaviour may change in a future release. + must_exist: true + - name: --use_index + alternatives: -M + type: boolean_true + description: | + Use the multi-region iterator on the union of a BED file and command-line region arguments. + This avoids re-reading the same regions of files so can sometimes be much faster. Note this also + removes duplicate sequences. Without this a sequence that overlaps multiple regions specified on + the command line will be reported multiple times. The usage of a BED file is optional and its path + has to be preceded by --target_file option. + + - name: Outputs + arguments: + - name: --output + alternatives: -o + type: file + description: Output to FILE instead of [stdout]. + required: true + direction: output + example: output.bam + - name: --bam + alternatives: -b + type: boolean_true + description: Output in the BAM format. + - name: --cram + alternatives: -C + type: boolean_true + description: | + Output in the CRAM format (requires --reference). + - name: --fast + type: boolean_true + description: | + Enable fast compression. This also changes the default output format to BAM, + but this can be overridden by the explicit format options or using a filename + with a known suffix. + - name: --uncompressed + alternatives: -u + type: boolean_true + description: | + Output uncompressed data. This also changes the default output format to BAM, + but this can be overridden by the explicit format options or using a filename + with a known suffix. + This option saves time spent on compression/decompression and is thus preferred + when the output is piped to another samtools command. + - name: --with_header + type: boolean_true + description: | + Include the header in the output. + - name: --header_only + alternatives: -H + type: boolean_true + description: | + Output the header only. + - name: --no_header + type: boolean_true + description: | + When producing SAM format, output alignment records but not headers. + This is the default; the option can be used to reset the effect of + --with_header/--header_only. + - name: --count + alternatives: -c + type: boolean_true + description: | + Instead of printing the alignments, only count them and print the total number. + All filter options, such as --require_flags, --excl_flags, and --min_MQ, are taken + into account. The --unmap option is ignored in this mode. + - name: --output_unselected + alternatives: -U + type: file + description: | + Write alignments that are not selected by the various filter options to FILE. + When this option is used, all alignments (or all alignments intersecting the regions + specified) are written to either the output file or this file, but never both. + - name: --unmap + alternatives: -p + type: boolean_true + description: | + Set the UNMAP flag on alignments that are not selected by the filter options. + These alignments are then written to the normal output. This is not compatible + with --output_unselected. + - name: --read_group + alternatives: -r + type: string + description: | + Output alignments in read group STR [null]. Note that records with no RG tag will also be output + when using this option. This behaviour may change in a future release. + - name: --tag + alternatives: -d + type: string + description: | + Only output alignments with tag STR1 and associated value STR2, which can be a string or an integer + [null]. + The value can be omitted, in which case only the tag is considered. + Note that this option does not specify a tag type. For example, use --tag XX:42 to select alignments + with an XX:i:42 field, not --tag XX:i:42. + - name: --tag_file + alternatives: -D + type: file + description: | + Only output alignments with tag STR and associated values listed in FILE. + must_exist: true + - name: --min_MQ + alternatives: -q + type: integer + description: | + Skip alignments with MAPQ smaller than INT. + default: 0 + - name: --library + alternatives: -l + type: string + description: | + Only output alignments in library STR. + - name: --min_qlen + alternatives: -m + type: integer + description: | + Only output alignments with number of CIGAR bases consuming query sequence >= INT. + default: 0 + - name: --expr + alternatives: -e + type: string + description: | + Only include alignments that match the filter expression STR. The syntax for these expressions is + described in the main samtools. + - name: --require_flags + alternatives: -f + type: string + description: | + Only output alignments with all bits set in FLAG present in the FLAG field. FLAG can be specified + in hex by beginning with `0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/), in octal by beginning with `0' (i.e. /^0[0-7]+/), + as a decimal number not beginning with '0' or as a comma-separated list of flag names. + - name: --excl_flags + alternatives: -F + type: string + description: | + Do not output alignments with any bits set in FLAG present in the FLAG field. FLAG can be specified + in hex by beginning with `0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/), in octal by beginning with `0' (i.e. /^0[0-7]+/), + as a decimal number not beginning with '0' or as a comma-separated list of flag names. + - name: --excl_all_flags + alternatives: -G + type: integer + description: | + Do not output alignments with all bits set in INT present in the FLAG field. This is the opposite of + --require_flags such that --require_flags 12 --exclude_all_flags 12 is the same as no filtering at all. + FLAG can be specified in hex by beginning with `0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/), in octal by beginning with `0' + (i.e. /^0[0-7]+/), as a decimal number not beginning with '0' or as a comma-separated list of flag names. + - name: --incl_flags + alternatives: --rf + type: string + description: | + Only output alignments with any bit set in FLAG present in the FLAG field. FLAG can be specified in hex + by beginning with `0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/), in octal by beginning with `0' (i.e. /^0[0-7]+/), as a decimal + number not beginning with '0' or as a comma-separated list of flag names. + - name: --remove_tag + alternatives: -x + type: string + description: | + Read tag(s) to exclude from output (repeatable) [null]. This can be a single tag or a comma separated list. + Alternatively the option itself can be repeated multiple times. + If the list starts with a `^' then it is negated and treated as a request to remove all tags except those in STR. + The list may be empty, so --remove_tag ^ will remove all tags. + Note that tags will only be removed from reads that pass filtering. + - name: --keep_tag + type: string + description: | + This keeps only tags listed in STR and is directly equivalent to --remove_tag ^STR. Specifying an empty list + will remove all tags. If both --keep_tag and --remove_tag are specified then --keep_tag has precedence. + Note that tags will only be removed from reads that pass filtering. + - name: --remove_B + alternatives: -B + type: boolean_true + description: | + Collapse the backward CIGAR operation. + - name: --add_flags + type: string + description: | + Adds flag(s) to read. FLAG can be specified in hex by beginning with `0x' (i.e. /^0x[0-9A-F]+/), in octal + by beginning with `0' (i.e. /^0[0-7]+/), as a decimal number not beginning with '0' or as a comma-separated + list of flag names. + - name: --remove_flags + type: string + description: | + Remove flag(s) from read. FLAG is specified in the same way as with the --add_flags option. + - name: --subsample + type: double + description: | + Output only a proportion of the input alignments, as specified by 0.0 <= FLOAT <= 1.0, which gives the fraction + of templates/pairs to be kept. This subsampling acts in the same way on all of the alignment records in the same + template or read pair, so it never keeps a read but not its mate. + - name: --subsample_seed + type: integer + description: | + Subsampling seed used to influence which subset of reads is kept. When subsampling data that has previously + been subsampled, be sure to use a different seed value from those used previously; otherwise more reads will + be retained than expected. + default: 0 + - name: --fetch_pairs + alternatives: -P + type: boolean_true + description: | + Retrieve pairs even when the mate is outside of the requested region. Enabling this option also turns on the + multi-region iterator (-M). A region to search must be specified, either on the command-line, or using the + --target_file option. The input file must be an indexed regular file. + This option first scans the requested region, using the RNEXT and PNEXT fields of the records that have the + PAIRED flag set and pass other filtering options to find where paired reads are located. These locations are + used to build an expanded region list, and a set of QNAMEs to allow from the new regions. It will then make + a second pass, collecting all reads from the originally-specified region list together with reads from additional + locations that match the allowed set of QNAMEs. Any other filtering options used will be applied to all reads + found during this second pass. + As this option links reads using RNEXT and PNEXT, it is important that these fields are set accurately. Use + 'samtools fixmate' to correct them if necessary. + Note that this option does not work with the --count, --output-unselected or --unmap options. + - name: --customized_index + alternatives: -X + type: boolean_true + description: | + Include customized index file as a part of arguments. See EXAMPLES section for sample of usage. + - name: --sanitize + alternatives: -z + type: string + description: | + Perform some sanity checks on the state of SAM record fields, fixing up common mistakes made by aligners. + These include soft-clipping alignments when they extend beyond the end of the reference, marking records as + unmapped when they have reference * or position 0, and ensuring unmapped alignments have no CIGAR or mapping + quality for unmapped alignments and no MD, NM, CG or SM tags. + FLAGs is a comma-separated list of keywords chosen from the following list. + + unmap: The UNMAPPED BAM flag. This is set for reads with position <= 0, reference name "*" or reads starting + beyond the end of the reference. Note CIGAR "*" is permitted for mapped data so does not trigger this. + + pos: Position and reference name fields. These may be cleared when a sequence is unmapped due to the + coordinates being beyond the end of the reference. Selecting this may change the sort order of the file, + so it is not a part of the on compound argument. + mqual: Mapping quality. This is set to zero for unmapped reads. + cigar: Modifies CIGAR fields, either by adding soft-clips for reads that overlap the end of the reference or + by clearing it for unmapped reads. + aux: For unmapped data, some auxiliary fields are meaningless and will be removed. These include NM, MD, CG and SM. + off: Perform no sanity fixing. This is the default + on: Sanitize data in a way that guarantees the same sort order. This is everything except for pos. + all: All sanitizing options, including pos. + - name: --no_PG + type: boolean_true + description: | + Do not add a @PG line to the header of the output file. + - name: --input_fmt_option + type: string + description: | + Specify a single input file format option in the form of OPTION or OPTION=VALUE. + - name: --output_fmt + alternatives: -O + type: string + description: | + Specify output format (SAM, BAM, CRAM). + - name: --output_fmt_option + type: string + description: | + Specify a single output file format option in the form of OPTION or OPTION=VALUE. + - name: --write_index + type: boolean_true + description: | + Automatically index the output files. + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/samtools:1.19.2--h50ea8bc_1 + setup: + - type: docker + run: | + samtools --version 2>&1 | grep -E '^(samtools|Using htslib)' | \ + sed 's#Using ##;s# \([0-9\.]*\)$#: \1#' > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_view/help.txt b/src/samtools/samtools_view/help.txt new file mode 100644 index 00000000..753b1bc6 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_view/help.txt @@ -0,0 +1,80 @@ +``` +samtools view +``` + +Usage: samtools view [options] || [region ...] + +Output options: + -b, --bam Output BAM + -C, --cram Output CRAM (requires -T) + -1, --fast Use fast BAM compression (and default to --bam) + -u, --uncompressed Uncompressed BAM output (and default to --bam) + -h, --with-header Include header in SAM output + -H, --header-only Print SAM header only (no alignments) + --no-header Print SAM alignment records only [default] + -c, --count Print only the count of matching records + -o, --output FILE Write output to FILE [standard output] + -U, --unoutput FILE, --output-unselected FILE + Output reads not selected by filters to FILE + -p, --unmap Set flag to UNMAP on reads not selected + then write to output file. + -P, --fetch-pairs Retrieve complete pairs even when outside of region +Input options: + -t, --fai-reference FILE FILE listing reference names and lengths + -M, --use-index Use index and multi-region iterator for regions + --region[s]-file FILE Use index to include only reads overlapping FILE + -X, --customized-index Expect extra index file argument after + +Filtering options (Only include in output reads that...): + -L, --target[s]-file FILE ...overlap (BED) regions in FILE + -N, --qname-file [^]FILE ...whose read name is listed in FILE ("^" negates) + -r, --read-group STR ...are in read group STR + -R, --read-group-file [^]FILE + ...are in a read group listed in FILE + -d, --tag STR1[:STR2] ...have a tag STR1 (with associated value STR2) + -D, --tag-file STR:FILE ...have a tag STR whose value is listed in FILE + -q, --min-MQ INT ...have mapping quality >= INT + -l, --library STR ...are in library STR + -m, --min-qlen INT ...cover >= INT query bases (as measured via CIGAR) + -e, --expr STR ...match the filter expression STR + -f, --require-flags FLAG ...have all of the FLAGs present + -F, --excl[ude]-flags FLAG ...have none of the FLAGs present + --rf, --incl-flags, --include-flags FLAG + ...have some of the FLAGs present + -G FLAG EXCLUDE reads with all of the FLAGs present + --subsample FLOAT Keep only FLOAT fraction of templates/read pairs + --subsample-seed INT Influence WHICH reads are kept in subsampling [0] + -s INT.FRAC Same as --subsample 0.FRAC --subsample-seed INT + +Processing options: + --add-flags FLAG Add FLAGs to reads + --remove-flags FLAG Remove FLAGs from reads + -x, --remove-tag STR + Comma-separated read tags to strip (repeatable) [null] + --keep-tag STR + Comma-separated read tags to preserve (repeatable) [null]. + Equivalent to "-x ^STR" + -B, --remove-B Collapse the backward CIGAR operation + -z, --sanitize FLAGS Perform sanitity checking and fixing on records. + FLAGS is comma separated (see manual). [off] + +General options: + -?, --help Print long help, including note about region specification + -S Ignored (input format is auto-detected) + --no-PG Do not add a PG line + --input-fmt-option OPT[=VAL] + Specify a single input file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE + -O, --output-fmt FORMAT[,OPT[=VAL]]... + Specify output format (SAM, BAM, CRAM) + --output-fmt-option OPT[=VAL] + Specify a single output file format option in the form + of OPTION or OPTION=VALUE + -T, --reference FILE + Reference sequence FASTA FILE [null] + -@, --threads INT + Number of additional threads to use [0] + --write-index + Automatically index the output files [off] + --verbosity INT + Set level of verbosity diff --git a/src/samtools/samtools_view/script.sh b/src/samtools/samtools_view/script.sh new file mode 100644 index 00000000..c3911b48 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_view/script.sh @@ -0,0 +1,71 @@ +#!/bin/bash + +## VIASH START +## VIASH END + +set -e + +[[ "$par_bam" == "false" ]] && unset par_bam +[[ "$par_cram" == "false" ]] && unset par_cram +[[ "$par_fast" == "false" ]] && unset par_fast +[[ "$par_uncompressed" == "false" ]] && unset par_uncompressed +[[ "$par_with_header" == "false" ]] && unset par_with_header +[[ "$par_header_only" == "false" ]] && unset par_header_only +[[ "$par_no_header" == "false" ]] && unset par_no_header +[[ "$par_count" == "false" ]] && unset par_count +[[ "$par_unmap" == "false" ]] && unset par_unmap +[[ "$par_use_index" == "false" ]] && unset par_use_index +[[ "$par_fetch_pairs" == "false" ]] && unset par_fetch_pairs +[[ "$par_customized_index" == "false" ]] && unset par_customized_index +[[ "$par_no_PG" == "false" ]] && unset par_no_PG +[[ "$par_write_index" == "false" ]] && unset par_write_index +[[ "$par_remove_B" == "false" ]] && unset par_remove_B + +samtools view \ + ${par_bam:+-b} \ + ${par_cram:+-C} \ + ${par_fast:+--fast} \ + ${par_uncompressed:+-u} \ + ${par_with_header:+--with-header} \ + ${par_header_only:+-H} \ + ${par_no_header:+--no-header} \ + ${par_count:+-c} \ + ${par_output:+-o "$par_output"} \ + ${par_output_unselected:+-U "$par_output_unselected"} \ + ${par_unmap:+-p "$par_unmap"} \ + ${par_fetch_pairs:+-P "$par_fetch_pairs"} \ + ${par_fai_reference:+-t "$par_fai_reference"} \ + ${par_use_index:+-M "$par_use_index"} \ + ${par_region_file:+--region-file "$par_region_file"} \ + ${par_customized_index:+-X} \ + ${par_target_file:+-L "$par_target_file"} \ + ${par_qname_file:+-N "$par_qname_file"} \ + ${par_read_group:+-r "$par_read_group"} \ + ${par_read_group_file:+-R "$par_read_group_file"} \ + ${par_tag:+-d "$par_tag"} \ + ${par_tag_file:+-D "$par_tag_file"} \ + ${par_min_MQ:+-q "$par_min_MQ"} \ + ${par_library:+-l "$par_library"} \ + ${par_min_qlen:+-m "$par_min_qlen"} \ + ${par_expr:+-e "$par_expr"} \ + ${par_require_flags:+-f "$par_require_flags"} \ + ${par_excl_flags:+-F "$par_excl_flags"} \ + ${par_incl_flags:+--rf "$par_incl_flags"} \ + ${par_excl_all_flags:+-G "$par_excl_all_flags"} \ + ${par_subsample:+--subsample "$par_subsample"} \ + ${par_subsample_seed:+--subsample-seed "$par_subsample_seed"} \ + ${par_add_flags:+--add-flags "$par_add_flags"} \ + ${par_remove_flags:+--remove-flags "$par_remove_flags"} \ + ${par_remove_tag:+-x "$par_remove_tag"} \ + ${par_keep_tag:+--keep-tag "$par_keep_tag"} \ + ${par_remove_B:+-B} \ + ${par_sanitize:+-z "$par_sanitize"} \ + ${par_input_fmt_option:+--input-fmt-option "$par_input_fmt_option"} \ + ${par_output_fmt:+-O "$par_output_fmt"} \ + ${par_output_fmt_option:+--output-fmt-option "$par_output_fmt_option"} \ + ${par_reference:+-T "$par_reference"} \ + ${par_write_index:+--write-index} \ + ${par_no_PG:+--no-PG} \ + "$par_input" + +exit 0 diff --git a/src/samtools/samtools_view/test.sh b/src/samtools/samtools_view/test.sh new file mode 100644 index 00000000..1de29a7c --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_view/test.sh @@ -0,0 +1,87 @@ +#!/bin/bash + +test_dir="${meta_resources_dir}/test_data" +temp_dir="${meta_resources_dir}/out" + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 1: Import SAM to BAM when @SQ lines are present in the header" +"$meta_executable" \ + --bam \ + --output "$temp_dir/a.bam" \ + --input "$test_dir/a.sam" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$temp_dir/a.bam" ] && echo "File 'a.bam' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$temp_dir/a.bam" ] && echo "File 'a.bam' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +# compare output of "samtools view" for both files +diff <(samtools view "$temp_dir/a.bam") <(samtools view "$test_dir/a.bam") || \ + (echo "Output file a.bam does not match expected output" && exit 1) + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 2: ${meta_functionality_name} with CRAM format output" + +"$meta_executable" \ + --cram \ + --output "$temp_dir/a.cram" \ + --input "$test_dir/a.sam" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$temp_dir/a.cram" ] && echo "File 'a.cram' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$temp_dir/a.cram" ] && echo "File 'a.cram' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +# compare output of "samtools view" for both files +diff <(samtools view "$temp_dir/a.cram") <(samtools view "$test_dir/a.cram") || \ + (echo "Output file a.cram does not match expected output" && exit 1) + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 3: ${meta_functionality_name} with --count option" + +"$meta_executable" \ + --count \ + --output "$temp_dir/a.count" \ + --input "$test_dir/a.sam" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$temp_dir/a.count" ] && echo "File 'a.count' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$temp_dir/a.count" ] && echo "File 'a.count' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff "$temp_dir/a.count" "$test_dir/a.count" || \ + (echo "Output file a.count does not match expected output" && exit 1) + +############################################################################################ + +echo ">>> Test 4: ${meta_functionality_name} including only the forward reads from read pairs" + +"$meta_executable" \ + --output "$temp_dir/a.forward" \ + --excl_flags "0x80" \ + --input "$test_dir/a.sam" + +echo ">>> Checking whether output exists" +[ ! -f "$temp_dir/a.forward" ] && echo "File 'a.forward' does not exist!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is non-empty" +[ ! -s "$temp_dir/a.forward" ] && echo "File 'a.forward' is empty!" && exit 1 + +echo ">>> Checking whether output is correct" +diff "$temp_dir/a.forward" "$test_dir/a.forward" || \ + (echo "Output file a.forward does not match expected output" && exit 1) + +############################################################################################ + +echo ">>> All test passed successfully" +rm -rf "${temp_dir}" +exit 0 \ No newline at end of file diff --git a/src/samtools/samtools_view/test_data/a.bam b/src/samtools/samtools_view/test_data/a.bam new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..95b85b72e85bba4f2ecfed9f289bab13bcebfbf5 GIT binary patch literal 254 zcmb2|=3rp}f&Xj_PR>jW6%55iUs8FJ6A}tI_@3~5+q`PUgD)R98yP();wX6jrDUU) z-x=ML=g(_C}`M^ziWT zoB?7{Q642A#c*VXT}m#{K6x~YGZ>7M9T?Kw{1x5WQrPq~=65$XI<_=6DqftB$jHpx zyZ{Ik)MaJ}E;R1UnR~LLwCG@|U)$@HgoK2O&;S3|ugJEx0s@cAGhMcwOIc&Zc-(iZ QZVV%)MbZq+U=M=`0DTczqyPW_ literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_view/test_data/a.count b/src/samtools/samtools_view/test_data/a.count new file mode 100644 index 00000000..1e8b3149 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_view/test_data/a.count @@ -0,0 +1 @@ +6 diff --git a/src/samtools/samtools_view/test_data/a.cram b/src/samtools/samtools_view/test_data/a.cram new file mode 100644 index 0000000000000000000000000000000000000000..57fb3269c06238f3f35201ce71f5a554098b5ebe GIT binary patch literal 692 zcmZ<`a`a_pNYqO%O3Y}Y6&fsz=PDjk6K_20>viTS6N9DK-?^KBwq36IoCl=r z?cr`Bk5T(Aa!wb}8w`vhYz#JBj19XvmaW~xz{t?Bp<#mrYlsU=vYRtQP!L0~uXMZj zWa%J3M#lighDJdrH%3N&XCNUEJ26lW9+a%bjX{0{{Dj0}DOKnX@hhLB*0 z*gqbim>W=x2`C2A1hmG@4?=tTu`)66IytehF*0f~GOGFpLi7fK#JK~585wzkJRwSh zoqhJ&4pn}=UO5G2F3`^&xDmgx&6?=E{# z5+vq)N2O`TUItd6zxCPwd}LtZ5)pBPgAh1)b|^=afrVR0DAAB1$&ex0kO9s(WfZxM zk%dRX1`+#@pQy+)Fubiw@2~+Hyf0=74+9H7CueeUa>Ha06fA39%fKSQ#>UFZ3Je$T zS9YrzSOnSFfQq>o7|#FuU&sLV1{)hQ7_8`bQ{o3of`jvctG^qN4Gc2Yy*K@V6dM~T M{1_SDB{O;h0B-B2a{vGU literal 0 HcmV?d00001 diff --git a/src/samtools/samtools_view/test_data/a.forward b/src/samtools/samtools_view/test_data/a.forward new file mode 100644 index 00000000..766d4f20 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_view/test_data/a.forward @@ -0,0 +1,3 @@ +a1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +b1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +c1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** diff --git a/src/samtools/samtools_view/test_data/a.sam b/src/samtools/samtools_view/test_data/a.sam new file mode 100644 index 00000000..aa8c77b3 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_view/test_data/a.sam @@ -0,0 +1,7 @@ +@SQ SN:xx LN:20 +a1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +b1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +c1 99 xx 1 1 10M = 11 20 AAAAAAAAAA ********** +a1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +b1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** +c1 147 xx 11 1 10M = 1 -20 TTTTTTTTTT ********** diff --git a/src/samtools/samtools_view/test_data/script.sh b/src/samtools/samtools_view/test_data/script.sh new file mode 100755 index 00000000..90918e44 --- /dev/null +++ b/src/samtools/samtools_view/test_data/script.sh @@ -0,0 +1,8 @@ +#!/bin/bash + +# dowload test data from snakemake wrapper +if [ ! -d /tmp/view_source ]; then + git clone --depth 1 --single-branch --branch master https://github.com/snakemake/snakemake-wrappers.git /tmp/view_source +fi + +cp -r /tmp/idxstats_source/bio/samtools/view/test/*.sam src/samtools/samtools_view/test_data \ No newline at end of file diff --git a/src/star/star_align_reads/argument_groups.yaml b/src/star/star_align_reads/argument_groups.yaml new file mode 100644 index 00000000..e6a1c874 --- /dev/null +++ b/src/star/star_align_reads/argument_groups.yaml @@ -0,0 +1,1088 @@ +argument_groups: +- name: Run Parameters + arguments: + - name: --runRNGseed + type: integer + description: random number generator seed. + example: 777 +- name: Genome Parameters + arguments: + - name: --genomeDir + type: file + description: path to the directory where genome files are stored (for --runMode + alignReads) or will be generated (for --runMode generateGenome) + example: ./GenomeDir/ + required: yes + - name: --genomeLoad + type: string + description: |- + mode of shared memory usage for the genome files. Only used with --runMode alignReads. + + - LoadAndKeep ... load genome into shared and keep it in memory after run + - LoadAndRemove ... load genome into shared but remove it after run + - LoadAndExit ... load genome into shared memory and exit, keeping the genome in memory for future runs + - Remove ... do not map anything, just remove loaded genome from memory + - NoSharedMemory ... do not use shared memory, each job will have its own private copy of the genome + example: NoSharedMemory + - name: --genomeFastaFiles + type: file + description: |- + path(s) to the fasta files with the genome sequences, separated by spaces. These files should be plain text FASTA files, they *cannot* be zipped. + + Required for the genome generation (--runMode genomeGenerate). Can also be used in the mapping (--runMode alignReads) to add extra (new) sequences to the genome (e.g. spike-ins). + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --genomeFileSizes + type: integer + description: genome files exact sizes in bytes. Typically, this should not be + defined by the user. + example: 0 + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --genomeTransformOutput + type: string + description: |- + which output to transform back to original genome + + - SAM ... SAM/BAM alignments + - SJ ... splice junctions (SJ.out.tab) + - Quant ... quantifications (from --quantMode option) + - None ... no transformation of the output + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --genomeChrSetMitochondrial + type: string + description: names of the mitochondrial chromosomes. Presently only used for STARsolo + statistics output/ + example: + - chrM + - M + - MT + multiple: yes + multiple_sep: ; +- name: Splice Junctions Database + arguments: + - name: --sjdbFileChrStartEnd + type: string + description: path to the files with genomic coordinates (chr start + end strand) for the splice junction introns. Multiple files can be supplied + and will be concatenated. + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --sjdbGTFfile + type: file + description: path to the GTF file with annotations + - name: --sjdbGTFchrPrefix + type: string + description: prefix for chromosome names in a GTF file (e.g. 'chr' for using ENSMEBL + annotations with UCSC genomes) + - name: --sjdbGTFfeatureExon + type: string + description: feature type in GTF file to be used as exons for building transcripts + example: exon + - name: --sjdbGTFtagExonParentTranscript + type: string + description: GTF attribute name for parent transcript ID (default "transcript_id" + works for GTF files) + example: transcript_id + - name: --sjdbGTFtagExonParentGene + type: string + description: GTF attribute name for parent gene ID (default "gene_id" works for + GTF files) + example: gene_id + - name: --sjdbGTFtagExonParentGeneName + type: string + description: GTF attribute name for parent gene name + example: gene_name + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --sjdbGTFtagExonParentGeneType + type: string + description: GTF attribute name for parent gene type + example: + - gene_type + - gene_biotype + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --sjdbOverhang + type: integer + description: length of the donor/acceptor sequence on each side of the junctions, + ideally = (mate_length - 1) + example: 100 + - name: --sjdbScore + type: integer + description: extra alignment score for alignments that cross database junctions + example: 2 + - name: --sjdbInsertSave + type: string + description: |- + which files to save when sjdb junctions are inserted on the fly at the mapping step + + - Basic ... only small junction / transcript files + - All ... all files including big Genome, SA and SAindex - this will create a complete genome directory + example: Basic +- name: Variation parameters + arguments: + - name: --varVCFfile + type: string + description: path to the VCF file that contains variation data. The 10th column + should contain the genotype information, e.g. 0/1 +- name: Read Parameters + arguments: + - name: --readFilesType + type: string + description: |- + format of input read files + + - Fastx ... FASTA or FASTQ + - SAM SE ... SAM or BAM single-end reads; for BAM use --readFilesCommand samtools view + - SAM PE ... SAM or BAM paired-end reads; for BAM use --readFilesCommand samtools view + example: Fastx + - name: --readFilesSAMattrKeep + type: string + description: |- + for --readFilesType SAM SE/PE, which SAM tags to keep in the output BAM, e.g.: --readFilesSAMtagsKeep RG PL + + - All ... keep all tags + - None ... do not keep any tags + example: All + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --readFilesManifest + type: file + description: |- + path to the "manifest" file with the names of read files. The manifest file should contain 3 tab-separated columns: + + paired-end reads: read1_file_name $tab$ read2_file_name $tab$ read_group_line. + single-end reads: read1_file_name $tab$ - $tab$ read_group_line. + Spaces, but not tabs are allowed in file names. + If read_group_line does not start with ID:, it can only contain one ID field, and ID: will be added to it. + If read_group_line starts with ID:, it can contain several fields separated by $tab$, and all fields will be be copied verbatim into SAM @RG header line. + - name: --readFilesPrefix + type: string + description: prefix for the read files names, i.e. it will be added in front of + the strings in --readFilesIn + - name: --readFilesCommand + type: string + description: |- + command line to execute for each of the input file. This command should generate FASTA or FASTQ text and send it to stdout + + For example: zcat - to uncompress .gz files, bzcat - to uncompress .bz2 files, etc. + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --readMapNumber + type: integer + description: |- + number of reads to map from the beginning of the file + + -1: map all reads + example: -1 + - name: --readMatesLengthsIn + type: string + description: Equal/NotEqual - lengths of names,sequences,qualities for both mates + are the same / not the same. NotEqual is safe in all situations. + example: NotEqual + - name: --readNameSeparator + type: string + description: character(s) separating the part of the read names that will be trimmed + in output (read name after space is always trimmed) + example: / + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --readQualityScoreBase + type: integer + description: number to be subtracted from the ASCII code to get Phred quality + score + example: 33 +- name: Read Clipping + arguments: + - name: --clipAdapterType + type: string + description: |- + adapter clipping type + + - Hamming ... adapter clipping based on Hamming distance, with the number of mismatches controlled by --clip5pAdapterMMp + - CellRanger4 ... 5p and 3p adapter clipping similar to CellRanger4. Utilizes Opal package by Martin Sosic: https://github.com/Martinsos/opal + - None ... no adapter clipping, all other clip* parameters are disregarded + example: Hamming + - name: --clip3pNbases + type: integer + description: number(s) of bases to clip from 3p of each mate. If one value is + given, it will be assumed the same for both mates. + example: 0 + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --clip3pAdapterSeq + type: string + description: |- + adapter sequences to clip from 3p of each mate. If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + + - polyA ... polyA sequence with the length equal to read length + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --clip3pAdapterMMp + type: double + description: max proportion of mismatches for 3p adapter clipping for each mate. If + one value is given, it will be assumed the same for both mates. + example: 0.1 + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --clip3pAfterAdapterNbases + type: integer + description: number of bases to clip from 3p of each mate after the adapter clipping. + If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + example: 0 + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --clip5pNbases + type: integer + description: number(s) of bases to clip from 5p of each mate. If one value is + given, it will be assumed the same for both mates. + example: 0 + multiple: yes + multiple_sep: ; +- name: Limits + arguments: + - name: --limitGenomeGenerateRAM + type: long + description: maximum available RAM (bytes) for genome generation + example: '31000000000' + - name: --limitIObufferSize + type: long + description: max available buffers size (bytes) for input/output, per thread + example: + - 30000000 + - 50000000 + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --limitOutSAMoneReadBytes + type: long + description: 'max size of the SAM record (bytes) for one read. Recommended value: + >(2*(LengthMate1+LengthMate2+100)*outFilterMultimapNmax' + example: 100000 + - name: --limitOutSJoneRead + type: integer + description: max number of junctions for one read (including all multi-mappers) + example: 1000 + - name: --limitOutSJcollapsed + type: integer + description: max number of collapsed junctions + example: 1000000 + - name: --limitBAMsortRAM + type: long + description: maximum available RAM (bytes) for sorting BAM. If =0, it will be + set to the genome index size. 0 value can only be used with --genomeLoad NoSharedMemory + option. + example: 0 + - name: --limitSjdbInsertNsj + type: integer + description: maximum number of junctions to be inserted to the genome on the fly + at the mapping stage, including those from annotations and those detected in + the 1st step of the 2-pass run + example: 1000000 + - name: --limitNreadsSoft + type: integer + description: soft limit on the number of reads + example: -1 +- name: 'Output: general' + arguments: + - name: --outTmpKeep + type: string + description: |- + whether to keep the temporary files after STAR runs is finished + + - None ... remove all temporary files + - All ... keep all files + - name: --outStd + type: string + description: |- + which output will be directed to stdout (standard out) + + - Log ... log messages + - SAM ... alignments in SAM format (which normally are output to Aligned.out.sam file), normal standard output will go into Log.std.out + - BAM_Unsorted ... alignments in BAM format, unsorted. Requires --outSAMtype BAM Unsorted + - BAM_SortedByCoordinate ... alignments in BAM format, sorted by coordinate. Requires --outSAMtype BAM SortedByCoordinate + - BAM_Quant ... alignments to transcriptome in BAM format, unsorted. Requires --quantMode TranscriptomeSAM + example: Log + - name: --outReadsUnmapped + type: string + description: |- + output of unmapped and partially mapped (i.e. mapped only one mate of a paired end read) reads in separate file(s). + + - None ... no output + - Fastx ... output in separate fasta/fastq files, Unmapped.out.mate1/2 + - name: --outQSconversionAdd + type: integer + description: add this number to the quality score (e.g. to convert from Illumina + to Sanger, use -31) + example: 0 + - name: --outMultimapperOrder + type: string + description: |- + order of multimapping alignments in the output files + + - Old_2.4 ... quasi-random order used before 2.5.0 + - Random ... random order of alignments for each multi-mapper. Read mates (pairs) are always adjacent, all alignment for each read stay together. This option will become default in the future releases. + example: Old_2.4 +- name: 'Output: SAM and BAM' + arguments: + - name: --outSAMtype + type: string + description: |- + type of SAM/BAM output + + 1st word: + - BAM ... output BAM without sorting + - SAM ... output SAM without sorting + - None ... no SAM/BAM output + 2nd, 3rd: + - Unsorted ... standard unsorted + - SortedByCoordinate ... sorted by coordinate. This option will allocate extra memory for sorting which can be specified by --limitBAMsortRAM. + example: SAM + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outSAMmode + type: string + description: |- + mode of SAM output + + - None ... no SAM output + - Full ... full SAM output + - NoQS ... full SAM but without quality scores + example: Full + - name: --outSAMstrandField + type: string + description: |- + Cufflinks-like strand field flag + + - None ... not used + - intronMotif ... strand derived from the intron motif. This option changes the output alignments: reads with inconsistent and/or non-canonical introns are filtered out. + - name: --outSAMattributes + type: string + description: |- + a string of desired SAM attributes, in the order desired for the output SAM. Tags can be listed in any combination/order. + + ***Presets: + - None ... no attributes + - Standard ... NH HI AS nM + - All ... NH HI AS nM NM MD jM jI MC ch + ***Alignment: + - NH ... number of loci the reads maps to: =1 for unique mappers, >1 for multimappers. Standard SAM tag. + - HI ... multiple alignment index, starts with --outSAMattrIHstart (=1 by default). Standard SAM tag. + - AS ... local alignment score, +1/-1 for matches/mismateches, score* penalties for indels and gaps. For PE reads, total score for two mates. Stadnard SAM tag. + - nM ... number of mismatches. For PE reads, sum over two mates. + - NM ... edit distance to the reference (number of mismatched + inserted + deleted bases) for each mate. Standard SAM tag. + - MD ... string encoding mismatched and deleted reference bases (see standard SAM specifications). Standard SAM tag. + - jM ... intron motifs for all junctions (i.e. N in CIGAR): 0: non-canonical; 1: GT/AG, 2: CT/AC, 3: GC/AG, 4: CT/GC, 5: AT/AC, 6: GT/AT. If splice junctions database is used, and a junction is annotated, 20 is added to its motif value. + - jI ... start and end of introns for all junctions (1-based). + - XS ... alignment strand according to --outSAMstrandField. + - MC ... mate's CIGAR string. Standard SAM tag. + - ch ... marks all segment of all chimeric alingments for --chimOutType WithinBAM output. + - cN ... number of bases clipped from the read ends: 5' and 3' + ***Variation: + - vA ... variant allele + - vG ... genomic coordinate of the variant overlapped by the read. + - vW ... 1 - alignment passes WASP filtering; 2,3,4,5,6,7 - alignment does not pass WASP filtering. Requires --waspOutputMode SAMtag. + - ha ... haplotype (1/2) when mapping to the diploid genome. Requires genome generated with --genomeTransformType Diploid . + ***STARsolo: + - CR CY UR UY ... sequences and quality scores of cell barcodes and UMIs for the solo* demultiplexing. + - GX GN ... gene ID and gene name for unique-gene reads. + - gx gn ... gene IDs and gene names for unique- and multi-gene reads. + - CB UB ... error-corrected cell barcodes and UMIs for solo* demultiplexing. Requires --outSAMtype BAM SortedByCoordinate. + - sM ... assessment of CB and UMI. + - sS ... sequence of the entire barcode (CB,UMI,adapter). + - sQ ... quality of the entire barcode. + - sF ... type of feature overlap and number of features for each alignment + ***Unsupported/undocumented: + - rB ... alignment block read/genomic coordinates. + - vR ... read coordinate of the variant. + example: Standard + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outSAMattrIHstart + type: integer + description: start value for the IH attribute. 0 may be required by some downstream + software, such as Cufflinks or StringTie. + example: 1 + - name: --outSAMunmapped + type: string + description: |- + output of unmapped reads in the SAM format + + 1st word: + - None ... no output + - Within ... output unmapped reads within the main SAM file (i.e. Aligned.out.sam) + 2nd word: + - KeepPairs ... record unmapped mate for each alignment, and, in case of unsorted output, keep it adjacent to its mapped mate. Only affects multi-mapping reads. + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outSAMorder + type: string + description: |- + type of sorting for the SAM output + + Paired: one mate after the other for all paired alignments + PairedKeepInputOrder: one mate after the other for all paired alignments, the order is kept the same as in the input FASTQ files + example: Paired + - name: --outSAMprimaryFlag + type: string + description: |- + which alignments are considered primary - all others will be marked with 0x100 bit in the FLAG + + - OneBestScore ... only one alignment with the best score is primary + - AllBestScore ... all alignments with the best score are primary + example: OneBestScore + - name: --outSAMreadID + type: string + description: |- + read ID record type + + - Standard ... first word (until space) from the FASTx read ID line, removing /1,/2 from the end + - Number ... read number (index) in the FASTx file + example: Standard + - name: --outSAMmapqUnique + type: integer + description: '0 to 255: the MAPQ value for unique mappers' + example: 255 + - name: --outSAMflagOR + type: integer + description: '0 to 65535: sam FLAG will be bitwise OR''d with this value, i.e. + FLAG=FLAG | outSAMflagOR. This is applied after all flags have been set by STAR, + and after outSAMflagAND. Can be used to set specific bits that are not set otherwise.' + example: 0 + - name: --outSAMflagAND + type: integer + description: '0 to 65535: sam FLAG will be bitwise AND''d with this value, i.e. + FLAG=FLAG & outSAMflagOR. This is applied after all flags have been set by STAR, + but before outSAMflagOR. Can be used to unset specific bits that are not set + otherwise.' + example: 65535 + - name: --outSAMattrRGline + type: string + description: |- + SAM/BAM read group line. The first word contains the read group identifier and must start with "ID:", e.g. --outSAMattrRGline ID:xxx CN:yy "DS:z z z". + + xxx will be added as RG tag to each output alignment. Any spaces in the tag values have to be double quoted. + Comma separated RG lines correspons to different (comma separated) input files in --readFilesIn. Commas have to be surrounded by spaces, e.g. + --outSAMattrRGline ID:xxx , ID:zzz "DS:z z" , ID:yyy DS:yyyy + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outSAMheaderHD + type: string + description: '@HD (header) line of the SAM header' + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outSAMheaderPG + type: string + description: extra @PG (software) line of the SAM header (in addition to STAR) + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outSAMheaderCommentFile + type: string + description: path to the file with @CO (comment) lines of the SAM header + - name: --outSAMfilter + type: string + description: |- + filter the output into main SAM/BAM files + + - KeepOnlyAddedReferences ... only keep the reads for which all alignments are to the extra reference sequences added with --genomeFastaFiles at the mapping stage. + - KeepAllAddedReferences ... keep all alignments to the extra reference sequences added with --genomeFastaFiles at the mapping stage. + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outSAMmultNmax + type: integer + description: |- + max number of multiple alignments for a read that will be output to the SAM/BAM files. Note that if this value is not equal to -1, the top scoring alignment will be output first + + - -1 ... all alignments (up to --outFilterMultimapNmax) will be output + example: -1 + - name: --outSAMtlen + type: integer + description: |- + calculation method for the TLEN field in the SAM/BAM files + + - 1 ... leftmost base of the (+)strand mate to rightmost base of the (-)mate. (+)sign for the (+)strand mate + - 2 ... leftmost base of any mate to rightmost base of any mate. (+)sign for the mate with the leftmost base. This is different from 1 for overlapping mates with protruding ends + example: 1 + - name: --outBAMcompression + type: integer + description: -1 to 10 BAM compression level, -1=default compression (6?), 0=no + compression, 10=maximum compression + example: 1 + - name: --outBAMsortingThreadN + type: integer + description: '>=0: number of threads for BAM sorting. 0 will default to min(6,--runThreadN).' + example: 0 + - name: --outBAMsortingBinsN + type: integer + description: '>0: number of genome bins for coordinate-sorting' + example: 50 +- name: BAM processing + arguments: + - name: --bamRemoveDuplicatesType + type: string + description: |- + mark duplicates in the BAM file, for now only works with (i) sorted BAM fed with inputBAMfile, and (ii) for paired-end alignments only + + - - ... no duplicate removal/marking + - UniqueIdentical ... mark all multimappers, and duplicate unique mappers. The coordinates, FLAG, CIGAR must be identical + - UniqueIdenticalNotMulti ... mark duplicate unique mappers but not multimappers. + - name: --bamRemoveDuplicatesMate2basesN + type: integer + description: number of bases from the 5' of mate 2 to use in collapsing (e.g. + for RAMPAGE) + example: 0 +- name: Output Wiggle + arguments: + - name: --outWigType + type: string + description: |- + type of signal output, e.g. "bedGraph" OR "bedGraph read1_5p". Requires sorted BAM: --outSAMtype BAM SortedByCoordinate . + + 1st word: + - None ... no signal output + - bedGraph ... bedGraph format + - wiggle ... wiggle format + 2nd word: + - read1_5p ... signal from only 5' of the 1st read, useful for CAGE/RAMPAGE etc + - read2 ... signal from only 2nd read + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outWigStrand + type: string + description: |- + strandedness of wiggle/bedGraph output + + - Stranded ... separate strands, str1 and str2 + - Unstranded ... collapsed strands + example: Stranded + - name: --outWigReferencesPrefix + type: string + description: prefix matching reference names to include in the output wiggle file, + e.g. "chr", default "-" - include all references + - name: --outWigNorm + type: string + description: |- + type of normalization for the signal + + - RPM ... reads per million of mapped reads + - None ... no normalization, "raw" counts + example: RPM +- name: Output Filtering + arguments: + - name: --outFilterType + type: string + description: |- + type of filtering + + - Normal ... standard filtering using only current alignment + - BySJout ... keep only those reads that contain junctions that passed filtering into SJ.out.tab + example: Normal + - name: --outFilterMultimapScoreRange + type: integer + description: the score range below the maximum score for multimapping alignments + example: 1 + - name: --outFilterMultimapNmax + type: integer + description: |- + maximum number of loci the read is allowed to map to. Alignments (all of them) will be output only if the read maps to no more loci than this value. + + Otherwise no alignments will be output, and the read will be counted as "mapped to too many loci" in the Log.final.out . + example: 10 + - name: --outFilterMismatchNmax + type: integer + description: alignment will be output only if it has no more mismatches than this + value. + example: 10 + - name: --outFilterMismatchNoverLmax + type: double + description: alignment will be output only if its ratio of mismatches to *mapped* + length is less than or equal to this value. + example: 0.3 + - name: --outFilterMismatchNoverReadLmax + type: double + description: alignment will be output only if its ratio of mismatches to *read* + length is less than or equal to this value. + example: 1.0 + - name: --outFilterScoreMin + type: integer + description: alignment will be output only if its score is higher than or equal + to this value. + example: 0 + - name: --outFilterScoreMinOverLread + type: double + description: same as outFilterScoreMin, but normalized to read length (sum of + mates' lengths for paired-end reads) + example: 0.66 + - name: --outFilterMatchNmin + type: integer + description: alignment will be output only if the number of matched bases is higher + than or equal to this value. + example: 0 + - name: --outFilterMatchNminOverLread + type: double + description: sam as outFilterMatchNmin, but normalized to the read length (sum + of mates' lengths for paired-end reads). + example: 0.66 + - name: --outFilterIntronMotifs + type: string + description: |- + filter alignment using their motifs + + - None ... no filtering + - RemoveNoncanonical ... filter out alignments that contain non-canonical junctions + - RemoveNoncanonicalUnannotated ... filter out alignments that contain non-canonical unannotated junctions when using annotated splice junctions database. The annotated non-canonical junctions will be kept. + - name: --outFilterIntronStrands + type: string + description: |- + filter alignments + + - RemoveInconsistentStrands ... remove alignments that have junctions with inconsistent strands + - None ... no filtering + example: RemoveInconsistentStrands +- name: Output splice junctions (SJ.out.tab) + arguments: + - name: --outSJtype + type: string + description: |- + type of splice junction output + + - Standard ... standard SJ.out.tab output + - None ... no splice junction output + example: Standard +- name: 'Output Filtering: Splice Junctions' + arguments: + - name: --outSJfilterReads + type: string + description: |- + which reads to consider for collapsed splice junctions output + + - All ... all reads, unique- and multi-mappers + - Unique ... uniquely mapping reads only + example: All + - name: --outSJfilterOverhangMin + type: integer + description: |- + minimum overhang length for splice junctions on both sides for: (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. -1 means no output for that motif + + does not apply to annotated junctions + example: + - 30 + - 12 + - 12 + - 12 + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outSJfilterCountUniqueMin + type: integer + description: |- + minimum uniquely mapping read count per junction for: (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. -1 means no output for that motif + + Junctions are output if one of outSJfilterCountUniqueMin OR outSJfilterCountTotalMin conditions are satisfied + does not apply to annotated junctions + example: + - 3 + - 1 + - 1 + - 1 + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outSJfilterCountTotalMin + type: integer + description: |- + minimum total (multi-mapping+unique) read count per junction for: (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. -1 means no output for that motif + + Junctions are output if one of outSJfilterCountUniqueMin OR outSJfilterCountTotalMin conditions are satisfied + does not apply to annotated junctions + example: + - 3 + - 1 + - 1 + - 1 + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outSJfilterDistToOtherSJmin + type: integer + description: |- + minimum allowed distance to other junctions' donor/acceptor + + does not apply to annotated junctions + example: + - 10 + - 0 + - 5 + - 10 + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --outSJfilterIntronMaxVsReadN + type: integer + description: |- + maximum gap allowed for junctions supported by 1,2,3,,,N reads + + i.e. by default junctions supported by 1 read can have gaps <=50000b, by 2 reads: <=100000b, by 3 reads: <=200000. by >=4 reads any gap <=alignIntronMax + does not apply to annotated junctions + example: + - 50000 + - 100000 + - 200000 + multiple: yes + multiple_sep: ; +- name: Scoring + arguments: + - name: --scoreGap + type: integer + description: splice junction penalty (independent on intron motif) + example: 0 + - name: --scoreGapNoncan + type: integer + description: non-canonical junction penalty (in addition to scoreGap) + example: -8 + - name: --scoreGapGCAG + type: integer + description: GC/AG and CT/GC junction penalty (in addition to scoreGap) + example: -4 + - name: --scoreGapATAC + type: integer + description: AT/AC and GT/AT junction penalty (in addition to scoreGap) + example: -8 + - name: --scoreGenomicLengthLog2scale + type: integer + description: 'extra score logarithmically scaled with genomic length of the alignment: + scoreGenomicLengthLog2scale*log2(genomicLength)' + example: 0 + - name: --scoreDelOpen + type: integer + description: deletion open penalty + example: -2 + - name: --scoreDelBase + type: integer + description: deletion extension penalty per base (in addition to scoreDelOpen) + example: -2 + - name: --scoreInsOpen + type: integer + description: insertion open penalty + example: -2 + - name: --scoreInsBase + type: integer + description: insertion extension penalty per base (in addition to scoreInsOpen) + example: -2 + - name: --scoreStitchSJshift + type: integer + description: maximum score reduction while searching for SJ boundaries in the + stitching step + example: 1 +- name: Alignments and Seeding + arguments: + - name: --seedSearchStartLmax + type: integer + description: defines the search start point through the read - the read is split + into pieces no longer than this value + example: 50 + - name: --seedSearchStartLmaxOverLread + type: double + description: seedSearchStartLmax normalized to read length (sum of mates' lengths + for paired-end reads) + example: 1.0 + - name: --seedSearchLmax + type: integer + description: defines the maximum length of the seeds, if =0 seed length is not + limited + example: 0 + - name: --seedMultimapNmax + type: integer + description: only pieces that map fewer than this value are utilized in the stitching + procedure + example: 10000 + - name: --seedPerReadNmax + type: integer + description: max number of seeds per read + example: 1000 + - name: --seedPerWindowNmax + type: integer + description: max number of seeds per window + example: 50 + - name: --seedNoneLociPerWindow + type: integer + description: max number of one seed loci per window + example: 10 + - name: --seedSplitMin + type: integer + description: min length of the seed sequences split by Ns or mate gap + example: 12 + - name: --seedMapMin + type: integer + description: min length of seeds to be mapped + example: 5 + - name: --alignIntronMin + type: integer + description: minimum intron size, genomic gap is considered intron if its length>=alignIntronMin, + otherwise it is considered Deletion + example: 21 + - name: --alignIntronMax + type: integer + description: maximum intron size, if 0, max intron size will be determined by + (2^winBinNbits)*winAnchorDistNbins + example: 0 + - name: --alignMatesGapMax + type: integer + description: maximum gap between two mates, if 0, max intron gap will be determined + by (2^winBinNbits)*winAnchorDistNbins + example: 0 + - name: --alignSJoverhangMin + type: integer + description: minimum overhang (i.e. block size) for spliced alignments + example: 5 + - name: --alignSJstitchMismatchNmax + type: integer + description: |- + maximum number of mismatches for stitching of the splice junctions (-1: no limit). + + (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. + example: + - 0 + - -1 + - 0 + - 0 + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --alignSJDBoverhangMin + type: integer + description: minimum overhang (i.e. block size) for annotated (sjdb) spliced alignments + example: 3 + - name: --alignSplicedMateMapLmin + type: integer + description: minimum mapped length for a read mate that is spliced + example: 0 + - name: --alignSplicedMateMapLminOverLmate + type: double + description: alignSplicedMateMapLmin normalized to mate length + example: 0.66 + - name: --alignWindowsPerReadNmax + type: integer + description: max number of windows per read + example: 10000 + - name: --alignTranscriptsPerWindowNmax + type: integer + description: max number of transcripts per window + example: 100 + - name: --alignTranscriptsPerReadNmax + type: integer + description: max number of different alignments per read to consider + example: 10000 + - name: --alignEndsType + type: string + description: |- + type of read ends alignment + + - Local ... standard local alignment with soft-clipping allowed + - EndToEnd ... force end-to-end read alignment, do not soft-clip + - Extend5pOfRead1 ... fully extend only the 5p of the read1, all other ends: local alignment + - Extend5pOfReads12 ... fully extend only the 5p of the both read1 and read2, all other ends: local alignment + example: Local + - name: --alignEndsProtrude + type: string + description: |- + allow protrusion of alignment ends, i.e. start (end) of the +strand mate downstream of the start (end) of the -strand mate + + 1st word: int: maximum number of protrusion bases allowed + 2nd word: string: + - ConcordantPair ... report alignments with non-zero protrusion as concordant pairs + - DiscordantPair ... report alignments with non-zero protrusion as discordant pairs + example: 0 ConcordantPair + - name: --alignSoftClipAtReferenceEnds + type: string + description: |- + allow the soft-clipping of the alignments past the end of the chromosomes + + - Yes ... allow + - No ... prohibit, useful for compatibility with Cufflinks + example: 'Yes' + - name: --alignInsertionFlush + type: string + description: |- + how to flush ambiguous insertion positions + + - None ... insertions are not flushed + - Right ... insertions are flushed to the right +- name: Paired-End reads + arguments: + - name: --peOverlapNbasesMin + type: integer + description: minimum number of overlapping bases to trigger mates merging and + realignment. Specify >0 value to switch on the "merginf of overlapping mates" + algorithm. + example: 0 + - name: --peOverlapMMp + type: double + description: maximum proportion of mismatched bases in the overlap area + example: 0.01 +- name: Windows, Anchors, Binning + arguments: + - name: --winAnchorMultimapNmax + type: integer + description: max number of loci anchors are allowed to map to + example: 50 + - name: --winBinNbits + type: integer + description: =log2(winBin), where winBin is the size of the bin for the windows/clustering, + each window will occupy an integer number of bins. + example: 16 + - name: --winAnchorDistNbins + type: integer + description: max number of bins between two anchors that allows aggregation of + anchors into one window + example: 9 + - name: --winFlankNbins + type: integer + description: log2(winFlank), where win Flank is the size of the left and right + flanking regions for each window + example: 4 + - name: --winReadCoverageRelativeMin + type: double + description: minimum relative coverage of the read sequence by the seeds in a + window, for STARlong algorithm only. + example: 0.5 + - name: --winReadCoverageBasesMin + type: integer + description: minimum number of bases covered by the seeds in a window , for STARlong + algorithm only. + example: 0 +- name: Chimeric Alignments + arguments: + - name: --chimOutType + type: string + description: |- + type of chimeric output + + - Junctions ... Chimeric.out.junction + - SeparateSAMold ... output old SAM into separate Chimeric.out.sam file + - WithinBAM ... output into main aligned BAM files (Aligned.*.bam) + - WithinBAM HardClip ... (default) hard-clipping in the CIGAR for supplemental chimeric alignments (default if no 2nd word is present) + - WithinBAM SoftClip ... soft-clipping in the CIGAR for supplemental chimeric alignments + example: Junctions + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --chimSegmentMin + type: integer + description: minimum length of chimeric segment length, if ==0, no chimeric output + example: 0 + - name: --chimScoreMin + type: integer + description: minimum total (summed) score of the chimeric segments + example: 0 + - name: --chimScoreDropMax + type: integer + description: max drop (difference) of chimeric score (the sum of scores of all + chimeric segments) from the read length + example: 20 + - name: --chimScoreSeparation + type: integer + description: minimum difference (separation) between the best chimeric score and + the next one + example: 10 + - name: --chimScoreJunctionNonGTAG + type: integer + description: penalty for a non-GT/AG chimeric junction + example: -1 + - name: --chimJunctionOverhangMin + type: integer + description: minimum overhang for a chimeric junction + example: 20 + - name: --chimSegmentReadGapMax + type: integer + description: maximum gap in the read sequence between chimeric segments + example: 0 + - name: --chimFilter + type: string + description: |- + different filters for chimeric alignments + + - None ... no filtering + - banGenomicN ... Ns are not allowed in the genome sequence around the chimeric junction + example: banGenomicN + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --chimMainSegmentMultNmax + type: integer + description: maximum number of multi-alignments for the main chimeric segment. + =1 will prohibit multimapping main segments. + example: 10 + - name: --chimMultimapNmax + type: integer + description: |- + maximum number of chimeric multi-alignments + + - 0 ... use the old scheme for chimeric detection which only considered unique alignments + example: 0 + - name: --chimMultimapScoreRange + type: integer + description: the score range for multi-mapping chimeras below the best chimeric + score. Only works with --chimMultimapNmax > 1 + example: 1 + - name: --chimNonchimScoreDropMin + type: integer + description: to trigger chimeric detection, the drop in the best non-chimeric + alignment score with respect to the read length has to be greater than this + value + example: 20 + - name: --chimOutJunctionFormat + type: integer + description: |- + formatting type for the Chimeric.out.junction file + + - 0 ... no comment lines/headers + - 1 ... comment lines at the end of the file: command line and Nreads: total, unique/multi-mapping + example: 0 +- name: Quantification of Annotations + arguments: + - name: --quantMode + type: string + description: |- + types of quantification requested + + - - ... none + - TranscriptomeSAM ... output SAM/BAM alignments to transcriptome into a separate file + - GeneCounts ... count reads per gene + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --quantTranscriptomeBAMcompression + type: integer + description: |- + -2 to 10 transcriptome BAM compression level + + - -2 ... no BAM output + - -1 ... default compression (6?) + - 0 ... no compression + - 10 ... maximum compression + example: 1 + - name: --quantTranscriptomeSAMoutput + type: string + description: |- + alignment filtering for TranscriptomeSAM output + + - BanSingleEnd_BanIndels_ExtendSoftclip ... prohibit indels and single-end alignments, extend softclips - compatible with RSEM + - BanSingleEnd ... prohibit single-end alignments, allow indels and softclips + - BanSingleEnd_ExtendSoftclip ... prohibit single-end alignments, extend softclips, allow indels + example: BanSingleEnd_BanIndels_ExtendSoftclip +- name: 2-pass Mapping + arguments: + - name: --twopassMode + type: string + description: |- + 2-pass mapping mode. + + - None ... 1-pass mapping + - Basic ... basic 2-pass mapping, with all 1st pass junctions inserted into the genome indices on the fly + - name: --twopass1readsN + type: integer + description: number of reads to process for the 1st step. Use very large number + (or default -1) to map all reads in the first step. + example: -1 +- name: WASP parameters + arguments: + - name: --waspOutputMode + type: string + description: |- + WASP allele-specific output type. This is re-implementation of the original WASP mappability filtering by Bryce van de Geijn, Graham McVicker, Yoav Gilad & Jonathan K Pritchard. Please cite the original WASP paper: Nature Methods 12, 1061-1063 (2015), https://www.nature.com/articles/nmeth.3582 . + + - SAMtag ... add WASP tags to the alignments that pass WASP filtering diff --git a/src/star/star_align_reads/config.vsh.yaml b/src/star/star_align_reads/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..eab65b35 --- /dev/null +++ b/src/star/star_align_reads/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,121 @@ +name: star_align_reads +namespace: star +description: | + Aligns reads to a reference genome using STAR. +keywords: [align, fasta, genome] +links: + repository: https://github.com/alexdobin/STAR + documentation: https://github.com/alexdobin/STAR/blob/master/doc/STARmanual.pdf +references: + doi: 10.1093/bioinformatics/bts635 +license: MIT +requirements: + commands: [ STAR, python, ps, zcat, bzcat ] +# manually taking care of the main input and output arguments +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - type: file + name: --input + alternatives: --readFilesIn + required: true + description: The single-end or paired-end R1 FastQ files to be processed. + example: [ mysample_S1_L001_R1_001.fastq.gz ] + multiple: true + - type: file + name: --input_r2 + required: false + description: The paired-end R2 FastQ files to be processed. Only required if --input is a paired-end R1 file. + example: [ mysample_S1_L001_R2_001.fastq.gz ] + multiple: true + - name: Outputs + arguments: + - type: file + name: --aligned_reads + required: true + description: The output file containing the aligned reads. + direction: output + example: aligned_reads.bam + - type: file + name: --reads_per_gene + required: false + description: The output file containing the number of reads per gene. + direction: output + example: reads_per_gene.tsv + - type: file + name: --unmapped + required: false + description: The output file containing the unmapped reads. + direction: output + example: unmapped.fastq + - type: file + name: --unmapped_r2 + required: false + description: The output file containing the unmapped R2 reads. + direction: output + example: unmapped_r2.fastq + - type: file + name: --chimeric_junctions + required: false + description: The output file containing the chimeric junctions. + direction: output + example: chimeric_junctions.tsv + - type: file + name: --log + required: false + description: The output file containing the log of the alignment process. + direction: output + example: log.txt + - type: file + name: --splice_junctions + required: false + description: The output file containing the splice junctions. + direction: output + example: splice_junctions.tsv + - type: file + name: --reads_aligned_to_transcriptome + required: false + description: The output file containing the alignments to transcriptome in BAM formats. This file is generated when --quantMode is set to TranscriptomeSAM. + direction: output + example: transcriptome_aligned.bam +# other arguments are defined in a separate file +__merge__: argument_groups.yaml +resources: + - type: python_script + path: script.py +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh +engines: + - type: docker + image: python:3.12-slim + setup: + - type: apt + packages: + - procps + - gzip + - bzip2 + # setup derived from https://github.com/alexdobin/STAR/blob/master/extras/docker/Dockerfile + - type: docker + env: + - STAR_VERSION 2.7.11b + - PACKAGES gcc g++ make wget zlib1g-dev unzip xxd + run: | + apt-get update && \ + apt-get install -y --no-install-recommends ${PACKAGES} && \ + cd /tmp && \ + wget --no-check-certificate https://github.com/alexdobin/STAR/archive/refs/tags/${STAR_VERSION}.zip && \ + unzip ${STAR_VERSION}.zip && \ + cd STAR-${STAR_VERSION}/source && \ + make STARstatic CXXFLAGS_SIMD=-std=c++11 && \ + cp STAR /usr/local/bin && \ + cd / && \ + rm -rf /tmp/STAR-${STAR_VERSION} /tmp/${STAR_VERSION}.zip && \ + apt-get --purge autoremove -y ${PACKAGES} && \ + apt-get clean + - type: docker + run: | + STAR --version | sed 's#\(.*\)#star: "\1"#' > /var/software_versions.txt +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/star/star_align_reads/help.txt b/src/star/star_align_reads/help.txt new file mode 100644 index 00000000..940f639d --- /dev/null +++ b/src/star/star_align_reads/help.txt @@ -0,0 +1,927 @@ +Usage: STAR [options]... --genomeDir /path/to/genome/index/ --readFilesIn R1.fq R2.fq +Spliced Transcripts Alignment to a Reference (c) Alexander Dobin, 2009-2022 + +STAR version=2.7.11b +STAR compilation time,server,dir=2024-02-11T19:36:26+00:00 :/tmp/STAR-2.7.11b/source +For more details see: + + +### versions +versionGenome 2.7.4a + string: earliest genome index version compatible with this STAR release. Please do not change this value! + +### Parameter Files +parametersFiles - + string: name of a user-defined parameters file, "-": none. Can only be defined on the command line. + +### System +sysShell - + string: path to the shell binary, preferably bash, e.g. /bin/bash. + - ... the default shell is executed, typically /bin/sh. This was reported to fail on some Ubuntu systems - then you need to specify path to bash. + +### Run Parameters +runMode alignReads + string: type of the run. + alignReads ... map reads + genomeGenerate ... generate genome files + inputAlignmentsFromBAM ... input alignments from BAM. Presently only works with --outWigType and --bamRemoveDuplicates options. + liftOver ... lift-over of GTF files (--sjdbGTFfile) between genome assemblies using chain file(s) from --genomeChainFiles. + soloCellFiltering ... STARsolo cell filtering ("calling") without remapping, followed by the path to raw count directory and output (filtered) prefix + +runThreadN 1 + int: number of threads to run STAR + +runDirPerm User_RWX + string: permissions for the directories created at the run-time. + User_RWX ... user-read/write/execute + All_RWX ... all-read/write/execute (same as chmod 777) + +runRNGseed 777 + int: random number generator seed. + + +### Genome Parameters +genomeDir ./GenomeDir/ + string: path to the directory where genome files are stored (for --runMode alignReads) or will be generated (for --runMode generateGenome) + +genomeLoad NoSharedMemory + string: mode of shared memory usage for the genome files. Only used with --runMode alignReads. + LoadAndKeep ... load genome into shared and keep it in memory after run + LoadAndRemove ... load genome into shared but remove it after run + LoadAndExit ... load genome into shared memory and exit, keeping the genome in memory for future runs + Remove ... do not map anything, just remove loaded genome from memory + NoSharedMemory ... do not use shared memory, each job will have its own private copy of the genome + +genomeFastaFiles - + string(s): path(s) to the fasta files with the genome sequences, separated by spaces. These files should be plain text FASTA files, they *cannot* be zipped. + Required for the genome generation (--runMode genomeGenerate). Can also be used in the mapping (--runMode alignReads) to add extra (new) sequences to the genome (e.g. spike-ins). + +genomeChainFiles - + string: chain files for genomic liftover. Only used with --runMode liftOver . + +genomeFileSizes 0 + uint(s)>0: genome files exact sizes in bytes. Typically, this should not be defined by the user. + +genomeTransformOutput None + string(s): which output to transform back to original genome + SAM ... SAM/BAM alignments + SJ ... splice junctions (SJ.out.tab) + Quant ... quantifications (from --quantMode option) + None ... no transformation of the output + +genomeChrSetMitochondrial chrM M MT + string(s): names of the mitochondrial chromosomes. Presently only used for STARsolo statistics output/ + +### Genome Indexing Parameters - only used with --runMode genomeGenerate +genomeChrBinNbits 18 + int: =log2(chrBin), where chrBin is the size of the bins for genome storage: each chromosome will occupy an integer number of bins. For a genome with large number of contigs, it is recommended to scale this parameter as min(18, log2[max(GenomeLength/NumberOfReferences,ReadLength)]). + +genomeSAindexNbases 14 + int: length (bases) of the SA pre-indexing string. Typically between 10 and 15. Longer strings will use much more memory, but allow faster searches. For small genomes, the parameter --genomeSAindexNbases must be scaled down to min(14, log2(GenomeLength)/2 - 1). + +genomeSAsparseD 1 + int>0: suffux array sparsity, i.e. distance between indices: use bigger numbers to decrease needed RAM at the cost of mapping speed reduction + +genomeSuffixLengthMax -1 + int: maximum length of the suffixes, has to be longer than read length. -1 = infinite. + +genomeTransformType None + string: type of genome transformation + None ... no transformation + Haploid ... replace reference alleles with alternative alleles from VCF file (e.g. consensus allele) + Diploid ... create two haplotypes for each chromosome listed in VCF file, for genotypes 1|2, assumes perfect phasing (e.g. personal genome) + +genomeTransformVCF - + string: path to VCF file for genome transformation + + + +#####UnderDevelopment_begin : not supported - do not use +genomeType Full + string: type of genome to generate + Full ... full (normal) genome + Transcriptome ... genome consists of transcript sequences + SuperTransriptome ... genome consists of superTranscript sequences +#####UnderDevelopment_end + +# DEPRECATED: please use --genomeTransformVCF and --genomeTransformType options instead. +#genomeConsensusFile - +# string: VCF file with consensus SNPs (i.e. alternative allele is the major (AF>0.5) allele) +# DEPRECATED + + + +### Splice Junctions Database +sjdbFileChrStartEnd - + string(s): path to the files with genomic coordinates (chr start end strand) for the splice junction introns. Multiple files can be supplied and will be concatenated. + +sjdbGTFfile - + string: path to the GTF file with annotations + +sjdbGTFchrPrefix - + string: prefix for chromosome names in a GTF file (e.g. 'chr' for using ENSMEBL annotations with UCSC genomes) + +sjdbGTFfeatureExon exon + string: feature type in GTF file to be used as exons for building transcripts + +sjdbGTFtagExonParentTranscript transcript_id + string: GTF attribute name for parent transcript ID (default "transcript_id" works for GTF files) + +sjdbGTFtagExonParentGene gene_id + string: GTF attribute name for parent gene ID (default "gene_id" works for GTF files) + +sjdbGTFtagExonParentGeneName gene_name + string(s): GTF attribute name for parent gene name + +sjdbGTFtagExonParentGeneType gene_type gene_biotype + string(s): GTF attribute name for parent gene type + +sjdbOverhang 100 + int>0: length of the donor/acceptor sequence on each side of the junctions, ideally = (mate_length - 1) + +sjdbScore 2 + int: extra alignment score for alignments that cross database junctions + +sjdbInsertSave Basic + string: which files to save when sjdb junctions are inserted on the fly at the mapping step + Basic ... only small junction / transcript files + All ... all files including big Genome, SA and SAindex - this will create a complete genome directory + +### Variation parameters +varVCFfile - + string: path to the VCF file that contains variation data. The 10th column should contain the genotype information, e.g. 0/1 + +### Input Files +inputBAMfile - + string: path to BAM input file, to be used with --runMode inputAlignmentsFromBAM + +### Read Parameters +readFilesType Fastx + string: format of input read files + Fastx ... FASTA or FASTQ + SAM SE ... SAM or BAM single-end reads; for BAM use --readFilesCommand samtools view + SAM PE ... SAM or BAM paired-end reads; for BAM use --readFilesCommand samtools view + +readFilesSAMattrKeep All + string(s): for --readFilesType SAM SE/PE, which SAM tags to keep in the output BAM, e.g.: --readFilesSAMtagsKeep RG PL + All ... keep all tags + None ... do not keep any tags + +readFilesIn Read1 Read2 + string(s): paths to files that contain input read1 (and, if needed, read2) + +readFilesManifest - + string: path to the "manifest" file with the names of read files. The manifest file should contain 3 tab-separated columns: + paired-end reads: read1_file_name $tab$ read2_file_name $tab$ read_group_line. + single-end reads: read1_file_name $tab$ - $tab$ read_group_line. + Spaces, but not tabs are allowed in file names. + If read_group_line does not start with ID:, it can only contain one ID field, and ID: will be added to it. + If read_group_line starts with ID:, it can contain several fields separated by $tab$, and all fields will be be copied verbatim into SAM @RG header line. + +readFilesPrefix - + string: prefix for the read files names, i.e. it will be added in front of the strings in --readFilesIn + +readFilesCommand - + string(s): command line to execute for each of the input file. This command should generate FASTA or FASTQ text and send it to stdout + For example: zcat - to uncompress .gz files, bzcat - to uncompress .bz2 files, etc. + +readMapNumber -1 + int: number of reads to map from the beginning of the file + -1: map all reads + +readMatesLengthsIn NotEqual + string: Equal/NotEqual - lengths of names,sequences,qualities for both mates are the same / not the same. NotEqual is safe in all situations. + +readNameSeparator / + string(s): character(s) separating the part of the read names that will be trimmed in output (read name after space is always trimmed) + +readQualityScoreBase 33 + int>=0: number to be subtracted from the ASCII code to get Phred quality score + +### Read Clipping + +clipAdapterType Hamming + string: adapter clipping type + Hamming ... adapter clipping based on Hamming distance, with the number of mismatches controlled by --clip5pAdapterMMp + CellRanger4 ... 5p and 3p adapter clipping similar to CellRanger4. Utilizes Opal package by Martin Šošić: https://github.com/Martinsos/opal + None ... no adapter clipping, all other clip* parameters are disregarded + +clip3pNbases 0 + int(s): number(s) of bases to clip from 3p of each mate. If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + +clip3pAdapterSeq - + string(s): adapter sequences to clip from 3p of each mate. If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + polyA ... polyA sequence with the length equal to read length + +clip3pAdapterMMp 0.1 + double(s): max proportion of mismatches for 3p adapter clipping for each mate. If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + +clip3pAfterAdapterNbases 0 + int(s): number of bases to clip from 3p of each mate after the adapter clipping. If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + +clip5pNbases 0 + int(s): number(s) of bases to clip from 5p of each mate. If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + +#####UnderDevelopment_begin : not supported - do not use +clip5pAdapterSeq - + string(s): adapter sequences to clip from 5p of each mate, separated by space. + +clip5pAdapterMMp 0.1 + double(s): max proportion of mismatches for 5p adapter clipping for each mate, separated by space + +clip5pAfterAdapterNbases 0 + int(s): number of bases to clip from 5p of each mate after the adapter clipping, separated by space. +#####UnderDevelopment_end + +### Limits +limitGenomeGenerateRAM 31000000000 + int>0: maximum available RAM (bytes) for genome generation + +limitIObufferSize 30000000 50000000 + int(s)>0: max available buffers size (bytes) for input/output, per thread + +limitOutSAMoneReadBytes 100000 + int>0: max size of the SAM record (bytes) for one read. Recommended value: >(2*(LengthMate1+LengthMate2+100)*outFilterMultimapNmax + +limitOutSJoneRead 1000 + int>0: max number of junctions for one read (including all multi-mappers) + +limitOutSJcollapsed 1000000 + int>0: max number of collapsed junctions + +limitBAMsortRAM 0 + int>=0: maximum available RAM (bytes) for sorting BAM. If =0, it will be set to the genome index size. 0 value can only be used with --genomeLoad NoSharedMemory option. + +limitSjdbInsertNsj 1000000 + int>=0: maximum number of junctions to be inserted to the genome on the fly at the mapping stage, including those from annotations and those detected in the 1st step of the 2-pass run + +limitNreadsSoft -1 + int: soft limit on the number of reads + +### Output: general +outFileNamePrefix ./ + string: output files name prefix (including full or relative path). Can only be defined on the command line. + +outTmpDir - + string: path to a directory that will be used as temporary by STAR. All contents of this directory will be removed! + - ... the temp directory will default to outFileNamePrefix_STARtmp + +outTmpKeep None + string: whether to keep the temporary files after STAR runs is finished + None ... remove all temporary files + All ... keep all files + +outStd Log + string: which output will be directed to stdout (standard out) + Log ... log messages + SAM ... alignments in SAM format (which normally are output to Aligned.out.sam file), normal standard output will go into Log.std.out + BAM_Unsorted ... alignments in BAM format, unsorted. Requires --outSAMtype BAM Unsorted + BAM_SortedByCoordinate ... alignments in BAM format, sorted by coordinate. Requires --outSAMtype BAM SortedByCoordinate + BAM_Quant ... alignments to transcriptome in BAM format, unsorted. Requires --quantMode TranscriptomeSAM + +outReadsUnmapped None + string: output of unmapped and partially mapped (i.e. mapped only one mate of a paired end read) reads in separate file(s). + None ... no output + Fastx ... output in separate fasta/fastq files, Unmapped.out.mate1/2 + +outQSconversionAdd 0 + int: add this number to the quality score (e.g. to convert from Illumina to Sanger, use -31) + +outMultimapperOrder Old_2.4 + string: order of multimapping alignments in the output files + Old_2.4 ... quasi-random order used before 2.5.0 + Random ... random order of alignments for each multi-mapper. Read mates (pairs) are always adjacent, all alignment for each read stay together. This option will become default in the future releases. + +### Output: SAM and BAM +outSAMtype SAM + strings: type of SAM/BAM output + 1st word: + BAM ... output BAM without sorting + SAM ... output SAM without sorting + None ... no SAM/BAM output + 2nd, 3rd: + Unsorted ... standard unsorted + SortedByCoordinate ... sorted by coordinate. This option will allocate extra memory for sorting which can be specified by --limitBAMsortRAM. + +outSAMmode Full + string: mode of SAM output + None ... no SAM output + Full ... full SAM output + NoQS ... full SAM but without quality scores + +outSAMstrandField None + string: Cufflinks-like strand field flag + None ... not used + intronMotif ... strand derived from the intron motif. This option changes the output alignments: reads with inconsistent and/or non-canonical introns are filtered out. + +outSAMattributes Standard + string(s): a string of desired SAM attributes, in the order desired for the output SAM. Tags can be listed in any combination/order. + ***Presets: + None ... no attributes + Standard ... NH HI AS nM + All ... NH HI AS nM NM MD jM jI MC ch + ***Alignment: + NH ... number of loci the reads maps to: =1 for unique mappers, >1 for multimappers. Standard SAM tag. + HI ... multiple alignment index, starts with --outSAMattrIHstart (=1 by default). Standard SAM tag. + AS ... local alignment score, +1/-1 for matches/mismateches, score* penalties for indels and gaps. For PE reads, total score for two mates. Stadnard SAM tag. + nM ... number of mismatches. For PE reads, sum over two mates. + NM ... edit distance to the reference (number of mismatched + inserted + deleted bases) for each mate. Standard SAM tag. + MD ... string encoding mismatched and deleted reference bases (see standard SAM specifications). Standard SAM tag. + jM ... intron motifs for all junctions (i.e. N in CIGAR): 0: non-canonical; 1: GT/AG, 2: CT/AC, 3: GC/AG, 4: CT/GC, 5: AT/AC, 6: GT/AT. If splice junctions database is used, and a junction is annotated, 20 is added to its motif value. + jI ... start and end of introns for all junctions (1-based). + XS ... alignment strand according to --outSAMstrandField. + MC ... mate's CIGAR string. Standard SAM tag. + ch ... marks all segment of all chimeric alingments for --chimOutType WithinBAM output. + cN ... number of bases clipped from the read ends: 5' and 3' + ***Variation: + vA ... variant allele + vG ... genomic coordinate of the variant overlapped by the read. + vW ... 1 - alignment passes WASP filtering; 2,3,4,5,6,7 - alignment does not pass WASP filtering. Requires --waspOutputMode SAMtag. + ha ... haplotype (1/2) when mapping to the diploid genome. Requires genome generated with --genomeTransformType Diploid . + ***STARsolo: + CR CY UR UY ... sequences and quality scores of cell barcodes and UMIs for the solo* demultiplexing. + GX GN ... gene ID and gene name for unique-gene reads. + gx gn ... gene IDs and gene names for unique- and multi-gene reads. + CB UB ... error-corrected cell barcodes and UMIs for solo* demultiplexing. Requires --outSAMtype BAM SortedByCoordinate. + sM ... assessment of CB and UMI. + sS ... sequence of the entire barcode (CB,UMI,adapter). + sQ ... quality of the entire barcode. + sF ... type of feature overlap and number of features for each alignment + ***Unsupported/undocumented: + rB ... alignment block read/genomic coordinates. + vR ... read coordinate of the variant. + +outSAMattrIHstart 1 + int>=0: start value for the IH attribute. 0 may be required by some downstream software, such as Cufflinks or StringTie. + +outSAMunmapped None + string(s): output of unmapped reads in the SAM format + 1st word: + None ... no output + Within ... output unmapped reads within the main SAM file (i.e. Aligned.out.sam) + 2nd word: + KeepPairs ... record unmapped mate for each alignment, and, in case of unsorted output, keep it adjacent to its mapped mate. Only affects multi-mapping reads. + +outSAMorder Paired + string: type of sorting for the SAM output + Paired: one mate after the other for all paired alignments + PairedKeepInputOrder: one mate after the other for all paired alignments, the order is kept the same as in the input FASTQ files + +outSAMprimaryFlag OneBestScore + string: which alignments are considered primary - all others will be marked with 0x100 bit in the FLAG + OneBestScore ... only one alignment with the best score is primary + AllBestScore ... all alignments with the best score are primary + +outSAMreadID Standard + string: read ID record type + Standard ... first word (until space) from the FASTx read ID line, removing /1,/2 from the end + Number ... read number (index) in the FASTx file + +outSAMmapqUnique 255 + int: 0 to 255: the MAPQ value for unique mappers + +outSAMflagOR 0 + int: 0 to 65535: sam FLAG will be bitwise OR'd with this value, i.e. FLAG=FLAG | outSAMflagOR. This is applied after all flags have been set by STAR, and after outSAMflagAND. Can be used to set specific bits that are not set otherwise. + +outSAMflagAND 65535 + int: 0 to 65535: sam FLAG will be bitwise AND'd with this value, i.e. FLAG=FLAG & outSAMflagOR. This is applied after all flags have been set by STAR, but before outSAMflagOR. Can be used to unset specific bits that are not set otherwise. + +outSAMattrRGline - + string(s): SAM/BAM read group line. The first word contains the read group identifier and must start with "ID:", e.g. --outSAMattrRGline ID:xxx CN:yy "DS:z z z". + xxx will be added as RG tag to each output alignment. Any spaces in the tag values have to be double quoted. + Comma separated RG lines correspons to different (comma separated) input files in --readFilesIn. Commas have to be surrounded by spaces, e.g. + --outSAMattrRGline ID:xxx , ID:zzz "DS:z z" , ID:yyy DS:yyyy + +outSAMheaderHD - + strings: @HD (header) line of the SAM header + +outSAMheaderPG - + strings: extra @PG (software) line of the SAM header (in addition to STAR) + +outSAMheaderCommentFile - + string: path to the file with @CO (comment) lines of the SAM header + +outSAMfilter None + string(s): filter the output into main SAM/BAM files + KeepOnlyAddedReferences ... only keep the reads for which all alignments are to the extra reference sequences added with --genomeFastaFiles at the mapping stage. + KeepAllAddedReferences ... keep all alignments to the extra reference sequences added with --genomeFastaFiles at the mapping stage. + + +outSAMmultNmax -1 + int: max number of multiple alignments for a read that will be output to the SAM/BAM files. Note that if this value is not equal to -1, the top scoring alignment will be output first + -1 ... all alignments (up to --outFilterMultimapNmax) will be output + +outSAMtlen 1 + int: calculation method for the TLEN field in the SAM/BAM files + 1 ... leftmost base of the (+)strand mate to rightmost base of the (-)mate. (+)sign for the (+)strand mate + 2 ... leftmost base of any mate to rightmost base of any mate. (+)sign for the mate with the leftmost base. This is different from 1 for overlapping mates with protruding ends + +outBAMcompression 1 + int: -1 to 10 BAM compression level, -1=default compression (6?), 0=no compression, 10=maximum compression + +outBAMsortingThreadN 0 + int: >=0: number of threads for BAM sorting. 0 will default to min(6,--runThreadN). + +outBAMsortingBinsN 50 + int: >0: number of genome bins for coordinate-sorting + +### BAM processing +bamRemoveDuplicatesType - + string: mark duplicates in the BAM file, for now only works with (i) sorted BAM fed with inputBAMfile, and (ii) for paired-end alignments only + - ... no duplicate removal/marking + UniqueIdentical ... mark all multimappers, and duplicate unique mappers. The coordinates, FLAG, CIGAR must be identical + UniqueIdenticalNotMulti ... mark duplicate unique mappers but not multimappers. + +bamRemoveDuplicatesMate2basesN 0 + int>0: number of bases from the 5' of mate 2 to use in collapsing (e.g. for RAMPAGE) + +### Output Wiggle +outWigType None + string(s): type of signal output, e.g. "bedGraph" OR "bedGraph read1_5p". Requires sorted BAM: --outSAMtype BAM SortedByCoordinate . + 1st word: + None ... no signal output + bedGraph ... bedGraph format + wiggle ... wiggle format + 2nd word: + read1_5p ... signal from only 5' of the 1st read, useful for CAGE/RAMPAGE etc + read2 ... signal from only 2nd read + +outWigStrand Stranded + string: strandedness of wiggle/bedGraph output + Stranded ... separate strands, str1 and str2 + Unstranded ... collapsed strands + +outWigReferencesPrefix - + string: prefix matching reference names to include in the output wiggle file, e.g. "chr", default "-" - include all references + +outWigNorm RPM + string: type of normalization for the signal + RPM ... reads per million of mapped reads + None ... no normalization, "raw" counts + +### Output Filtering +outFilterType Normal + string: type of filtering + Normal ... standard filtering using only current alignment + BySJout ... keep only those reads that contain junctions that passed filtering into SJ.out.tab + +outFilterMultimapScoreRange 1 + int: the score range below the maximum score for multimapping alignments + +outFilterMultimapNmax 10 + int: maximum number of loci the read is allowed to map to. Alignments (all of them) will be output only if the read maps to no more loci than this value. + Otherwise no alignments will be output, and the read will be counted as "mapped to too many loci" in the Log.final.out . + +outFilterMismatchNmax 10 + int: alignment will be output only if it has no more mismatches than this value. + +outFilterMismatchNoverLmax 0.3 + real: alignment will be output only if its ratio of mismatches to *mapped* length is less than or equal to this value. + +outFilterMismatchNoverReadLmax 1.0 + real: alignment will be output only if its ratio of mismatches to *read* length is less than or equal to this value. + + +outFilterScoreMin 0 + int: alignment will be output only if its score is higher than or equal to this value. + +outFilterScoreMinOverLread 0.66 + real: same as outFilterScoreMin, but normalized to read length (sum of mates' lengths for paired-end reads) + +outFilterMatchNmin 0 + int: alignment will be output only if the number of matched bases is higher than or equal to this value. + +outFilterMatchNminOverLread 0.66 + real: sam as outFilterMatchNmin, but normalized to the read length (sum of mates' lengths for paired-end reads). + +outFilterIntronMotifs None + string: filter alignment using their motifs + None ... no filtering + RemoveNoncanonical ... filter out alignments that contain non-canonical junctions + RemoveNoncanonicalUnannotated ... filter out alignments that contain non-canonical unannotated junctions when using annotated splice junctions database. The annotated non-canonical junctions will be kept. + +outFilterIntronStrands RemoveInconsistentStrands + string: filter alignments + RemoveInconsistentStrands ... remove alignments that have junctions with inconsistent strands + None ... no filtering + +### Output splice junctions (SJ.out.tab) +outSJtype Standard + string: type of splice junction output + Standard ... standard SJ.out.tab output + None ... no splice junction output + +### Output Filtering: Splice Junctions +outSJfilterReads All + string: which reads to consider for collapsed splice junctions output + All ... all reads, unique- and multi-mappers + Unique ... uniquely mapping reads only + +outSJfilterOverhangMin 30 12 12 12 + 4 integers: minimum overhang length for splice junctions on both sides for: (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. -1 means no output for that motif + does not apply to annotated junctions + +outSJfilterCountUniqueMin 3 1 1 1 + 4 integers: minimum uniquely mapping read count per junction for: (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. -1 means no output for that motif + Junctions are output if one of outSJfilterCountUniqueMin OR outSJfilterCountTotalMin conditions are satisfied + does not apply to annotated junctions + +outSJfilterCountTotalMin 3 1 1 1 + 4 integers: minimum total (multi-mapping+unique) read count per junction for: (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. -1 means no output for that motif + Junctions are output if one of outSJfilterCountUniqueMin OR outSJfilterCountTotalMin conditions are satisfied + does not apply to annotated junctions + +outSJfilterDistToOtherSJmin 10 0 5 10 + 4 integers>=0: minimum allowed distance to other junctions' donor/acceptor + does not apply to annotated junctions + +outSJfilterIntronMaxVsReadN 50000 100000 200000 + N integers>=0: maximum gap allowed for junctions supported by 1,2,3,,,N reads + i.e. by default junctions supported by 1 read can have gaps <=50000b, by 2 reads: <=100000b, by 3 reads: <=200000. by >=4 reads any gap <=alignIntronMax + does not apply to annotated junctions + +### Scoring +scoreGap 0 + int: splice junction penalty (independent on intron motif) + +scoreGapNoncan -8 + int: non-canonical junction penalty (in addition to scoreGap) + +scoreGapGCAG -4 + int: GC/AG and CT/GC junction penalty (in addition to scoreGap) + +scoreGapATAC -8 + int: AT/AC and GT/AT junction penalty (in addition to scoreGap) + +scoreGenomicLengthLog2scale -0.25 + int: extra score logarithmically scaled with genomic length of the alignment: scoreGenomicLengthLog2scale*log2(genomicLength) + +scoreDelOpen -2 + int: deletion open penalty + +scoreDelBase -2 + int: deletion extension penalty per base (in addition to scoreDelOpen) + +scoreInsOpen -2 + int: insertion open penalty + +scoreInsBase -2 + int: insertion extension penalty per base (in addition to scoreInsOpen) + +scoreStitchSJshift 1 + int: maximum score reduction while searching for SJ boundaries in the stitching step + + +### Alignments and Seeding + +seedSearchStartLmax 50 + int>0: defines the search start point through the read - the read is split into pieces no longer than this value + +seedSearchStartLmaxOverLread 1.0 + real: seedSearchStartLmax normalized to read length (sum of mates' lengths for paired-end reads) + +seedSearchLmax 0 + int>=0: defines the maximum length of the seeds, if =0 seed length is not limited + +seedMultimapNmax 10000 + int>0: only pieces that map fewer than this value are utilized in the stitching procedure + +seedPerReadNmax 1000 + int>0: max number of seeds per read + +seedPerWindowNmax 50 + int>0: max number of seeds per window + +seedNoneLociPerWindow 10 + int>0: max number of one seed loci per window + +seedSplitMin 12 + int>0: min length of the seed sequences split by Ns or mate gap + +seedMapMin 5 + int>0: min length of seeds to be mapped + +alignIntronMin 21 + int: minimum intron size, genomic gap is considered intron if its length>=alignIntronMin, otherwise it is considered Deletion + +alignIntronMax 0 + int: maximum intron size, if 0, max intron size will be determined by (2^winBinNbits)*winAnchorDistNbins + +alignMatesGapMax 0 + int: maximum gap between two mates, if 0, max intron gap will be determined by (2^winBinNbits)*winAnchorDistNbins + +alignSJoverhangMin 5 + int>0: minimum overhang (i.e. block size) for spliced alignments + +alignSJstitchMismatchNmax 0 -1 0 0 + 4*int>=0: maximum number of mismatches for stitching of the splice junctions (-1: no limit). + (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. + +alignSJDBoverhangMin 3 + int>0: minimum overhang (i.e. block size) for annotated (sjdb) spliced alignments + +alignSplicedMateMapLmin 0 + int>0: minimum mapped length for a read mate that is spliced + +alignSplicedMateMapLminOverLmate 0.66 + real>0: alignSplicedMateMapLmin normalized to mate length + +alignWindowsPerReadNmax 10000 + int>0: max number of windows per read + +alignTranscriptsPerWindowNmax 100 + int>0: max number of transcripts per window + +alignTranscriptsPerReadNmax 10000 + int>0: max number of different alignments per read to consider + +alignEndsType Local + string: type of read ends alignment + Local ... standard local alignment with soft-clipping allowed + EndToEnd ... force end-to-end read alignment, do not soft-clip + Extend5pOfRead1 ... fully extend only the 5p of the read1, all other ends: local alignment + Extend5pOfReads12 ... fully extend only the 5p of the both read1 and read2, all other ends: local alignment + +alignEndsProtrude 0 ConcordantPair + int, string: allow protrusion of alignment ends, i.e. start (end) of the +strand mate downstream of the start (end) of the -strand mate + 1st word: int: maximum number of protrusion bases allowed + 2nd word: string: + ConcordantPair ... report alignments with non-zero protrusion as concordant pairs + DiscordantPair ... report alignments with non-zero protrusion as discordant pairs + +alignSoftClipAtReferenceEnds Yes + string: allow the soft-clipping of the alignments past the end of the chromosomes + Yes ... allow + No ... prohibit, useful for compatibility with Cufflinks + +alignInsertionFlush None + string: how to flush ambiguous insertion positions + None ... insertions are not flushed + Right ... insertions are flushed to the right + +### Paired-End reads +peOverlapNbasesMin 0 + int>=0: minimum number of overlapping bases to trigger mates merging and realignment. Specify >0 value to switch on the "merginf of overlapping mates" algorithm. + +peOverlapMMp 0.01 + real, >=0 & <1: maximum proportion of mismatched bases in the overlap area + +### Windows, Anchors, Binning + +winAnchorMultimapNmax 50 + int>0: max number of loci anchors are allowed to map to + +winBinNbits 16 + int>0: =log2(winBin), where winBin is the size of the bin for the windows/clustering, each window will occupy an integer number of bins. + +winAnchorDistNbins 9 + int>0: max number of bins between two anchors that allows aggregation of anchors into one window + +winFlankNbins 4 + int>0: log2(winFlank), where win Flank is the size of the left and right flanking regions for each window + +winReadCoverageRelativeMin 0.5 + real>=0: minimum relative coverage of the read sequence by the seeds in a window, for STARlong algorithm only. + +winReadCoverageBasesMin 0 + int>0: minimum number of bases covered by the seeds in a window , for STARlong algorithm only. + +### Chimeric Alignments +chimOutType Junctions + string(s): type of chimeric output + Junctions ... Chimeric.out.junction + SeparateSAMold ... output old SAM into separate Chimeric.out.sam file + WithinBAM ... output into main aligned BAM files (Aligned.*.bam) + WithinBAM HardClip ... (default) hard-clipping in the CIGAR for supplemental chimeric alignments (default if no 2nd word is present) + WithinBAM SoftClip ... soft-clipping in the CIGAR for supplemental chimeric alignments + +chimSegmentMin 0 + int>=0: minimum length of chimeric segment length, if ==0, no chimeric output + +chimScoreMin 0 + int>=0: minimum total (summed) score of the chimeric segments + +chimScoreDropMax 20 + int>=0: max drop (difference) of chimeric score (the sum of scores of all chimeric segments) from the read length + +chimScoreSeparation 10 + int>=0: minimum difference (separation) between the best chimeric score and the next one + +chimScoreJunctionNonGTAG -1 + int: penalty for a non-GT/AG chimeric junction + +chimJunctionOverhangMin 20 + int>=0: minimum overhang for a chimeric junction + +chimSegmentReadGapMax 0 + int>=0: maximum gap in the read sequence between chimeric segments + +chimFilter banGenomicN + string(s): different filters for chimeric alignments + None ... no filtering + banGenomicN ... Ns are not allowed in the genome sequence around the chimeric junction + +chimMainSegmentMultNmax 10 + int>=1: maximum number of multi-alignments for the main chimeric segment. =1 will prohibit multimapping main segments. + +chimMultimapNmax 0 + int>=0: maximum number of chimeric multi-alignments + 0 ... use the old scheme for chimeric detection which only considered unique alignments + +chimMultimapScoreRange 1 + int>=0: the score range for multi-mapping chimeras below the best chimeric score. Only works with --chimMultimapNmax > 1 + +chimNonchimScoreDropMin 20 + int>=0: to trigger chimeric detection, the drop in the best non-chimeric alignment score with respect to the read length has to be greater than this value + +chimOutJunctionFormat 0 + int: formatting type for the Chimeric.out.junction file + 0 ... no comment lines/headers + 1 ... comment lines at the end of the file: command line and Nreads: total, unique/multi-mapping + +### Quantification of Annotations +quantMode - + string(s): types of quantification requested + - ... none + TranscriptomeSAM ... output SAM/BAM alignments to transcriptome into a separate file + GeneCounts ... count reads per gene + +quantTranscriptomeBAMcompression 1 + int: -2 to 10 transcriptome BAM compression level + -2 ... no BAM output + -1 ... default compression (6?) + 0 ... no compression + 10 ... maximum compression + +quantTranscriptomeSAMoutput BanSingleEnd_BanIndels_ExtendSoftclip + string: alignment filtering for TranscriptomeSAM output + BanSingleEnd_BanIndels_ExtendSoftclip ... prohibit indels and single-end alignments, extend softclips - compatible with RSEM + BanSingleEnd ... prohibit single-end alignments, allow indels and softclips + BanSingleEnd_ExtendSoftclip ... prohibit single-end alignments, extend softclips, allow indels + + +### 2-pass Mapping +twopassMode None + string: 2-pass mapping mode. + None ... 1-pass mapping + Basic ... basic 2-pass mapping, with all 1st pass junctions inserted into the genome indices on the fly + +twopass1readsN -1 + int: number of reads to process for the 1st step. Use very large number (or default -1) to map all reads in the first step. + + +### WASP parameters +waspOutputMode None + string: WASP allele-specific output type. This is re-implementation of the original WASP mappability filtering by Bryce van de Geijn, Graham McVicker, Yoav Gilad & Jonathan K Pritchard. Please cite the original WASP paper: Nature Methods 12, 1061–1063 (2015), https://www.nature.com/articles/nmeth.3582 . + SAMtag ... add WASP tags to the alignments that pass WASP filtering + +### STARsolo (single cell RNA-seq) parameters +soloType None + string(s): type of single-cell RNA-seq + CB_UMI_Simple ... (a.k.a. Droplet) one UMI and one Cell Barcode of fixed length in read2, e.g. Drop-seq and 10X Chromium. + CB_UMI_Complex ... multiple Cell Barcodes of varying length, one UMI of fixed length and one adapter sequence of fixed length are allowed in read2 only (e.g. inDrop, ddSeq). + CB_samTagOut ... output Cell Barcode as CR and/or CB SAm tag. No UMI counting. --readFilesIn cDNA_read1 [cDNA_read2 if paired-end] CellBarcode_read . Requires --outSAMtype BAM Unsorted [and/or SortedByCoordinate] + SmartSeq ... Smart-seq: each cell in a separate FASTQ (paired- or single-end), barcodes are corresponding read-groups, no UMI sequences, alignments deduplicated according to alignment start and end (after extending soft-clipped bases) + +soloCBtype Sequence + string: cell barcode type + Sequence: cell barcode is a sequence (standard option) + String: cell barcode is an arbitrary string + +soloCBwhitelist - + string(s): file(s) with whitelist(s) of cell barcodes. Only --soloType CB_UMI_Complex allows more than one whitelist file. + None ... no whitelist: all cell barcodes are allowed + +soloCBstart 1 + int>0: cell barcode start base + +soloCBlen 16 + int>0: cell barcode length + +soloUMIstart 17 + int>0: UMI start base + +soloUMIlen 10 + int>0: UMI length + +soloBarcodeReadLength 1 + int: length of the barcode read + 1 ... equal to sum of soloCBlen+soloUMIlen + 0 ... not defined, do not check + +soloBarcodeMate 0 + int: identifies which read mate contains the barcode (CB+UMI) sequence + 0 ... barcode sequence is on separate read, which should always be the last file in the --readFilesIn listed + 1 ... barcode sequence is a part of mate 1 + 2 ... barcode sequence is a part of mate 2 + +soloCBposition - + strings(s): position of Cell Barcode(s) on the barcode read. + Presently only works with --soloType CB_UMI_Complex, and barcodes are assumed to be on Read2. + Format for each barcode: startAnchor_startPosition_endAnchor_endPosition + start(end)Anchor defines the Anchor Base for the CB: 0: read start; 1: read end; 2: adapter start; 3: adapter end + start(end)Position is the 0-based position with of the CB start(end) with respect to the Anchor Base + String for different barcodes are separated by space. + Example: inDrop (Zilionis et al, Nat. Protocols, 2017): + --soloCBposition 0_0_2_-1 3_1_3_8 + +soloUMIposition - + string: position of the UMI on the barcode read, same as soloCBposition + Example: inDrop (Zilionis et al, Nat. Protocols, 2017): + --soloCBposition 3_9_3_14 + +soloAdapterSequence - + string: adapter sequence to anchor barcodes. Only one adapter sequence is allowed. + +soloAdapterMismatchesNmax 1 + int>0: maximum number of mismatches allowed in adapter sequence. + +soloCBmatchWLtype 1MM_multi + string: matching the Cell Barcodes to the WhiteList + Exact ... only exact matches allowed + 1MM ... only one match in whitelist with 1 mismatched base allowed. Allowed CBs have to have at least one read with exact match. + 1MM_multi ... multiple matches in whitelist with 1 mismatched base allowed, posterior probability calculation is used choose one of the matches. + Allowed CBs have to have at least one read with exact match. This option matches best with CellRanger 2.2.0 + 1MM_multi_pseudocounts ... same as 1MM_Multi, but pseudocounts of 1 are added to all whitelist barcodes. + 1MM_multi_Nbase_pseudocounts ... same as 1MM_multi_pseudocounts, multimatching to WL is allowed for CBs with N-bases. This option matches best with CellRanger >= 3.0.0 + EditDist_2 ... allow up to edit distance of 3 fpr each of the barcodes. May include one deletion + one insertion. Only works with --soloType CB_UMI_Complex. Matches to multiple passlist barcdoes are not allowed. Similar to ParseBio Split-seq pipeline. + +soloInputSAMattrBarcodeSeq - + string(s): when inputting reads from a SAM file (--readsFileType SAM SE/PE), these SAM attributes mark the barcode sequence (in proper order). + For instance, for 10X CellRanger or STARsolo BAMs, use --soloInputSAMattrBarcodeSeq CR UR . + This parameter is required when running STARsolo with input from SAM. + +soloInputSAMattrBarcodeQual - + string(s): when inputting reads from a SAM file (--readsFileType SAM SE/PE), these SAM attributes mark the barcode qualities (in proper order). + For instance, for 10X CellRanger or STARsolo BAMs, use --soloInputSAMattrBarcodeQual CY UY . + If this parameter is '-' (default), the quality 'H' will be assigned to all bases. + +soloStrand Forward + string: strandedness of the solo libraries: + Unstranded ... no strand information + Forward ... read strand same as the original RNA molecule + Reverse ... read strand opposite to the original RNA molecule + +soloFeatures Gene + string(s): genomic features for which the UMI counts per Cell Barcode are collected + Gene ... genes: reads match the gene transcript + SJ ... splice junctions: reported in SJ.out.tab + GeneFull ... full gene (pre-mRNA): count all reads overlapping genes' exons and introns + GeneFull_ExonOverIntron ... full gene (pre-mRNA): count all reads overlapping genes' exons and introns: prioritize 100% overlap with exons + GeneFull_Ex50pAS ... full gene (pre-RNA): count all reads overlapping genes' exons and introns: prioritize >50% overlap with exons. Do not count reads with 100% exonic overlap in the antisense direction. + +#####UnderDevelopment_begin : not supported - do not use + Transcript3p ... quantification of transcript for 3' protocols +#####UnderDevelopment_end + +soloMultiMappers Unique + string(s): counting method for reads mapping to multiple genes + Unique ... count only reads that map to unique genes + Uniform ... uniformly distribute multi-genic UMIs to all genes + Rescue ... distribute UMIs proportionally to unique+uniform counts (~ first iteration of EM) + PropUnique ... distribute UMIs proportionally to unique mappers, if present, and uniformly if not. + EM ... multi-gene UMIs are distributed using Expectation Maximization algorithm + +soloUMIdedup 1MM_All + string(s): type of UMI deduplication (collapsing) algorithm + 1MM_All ... all UMIs with 1 mismatch distance to each other are collapsed (i.e. counted once). + 1MM_Directional_UMItools ... follows the "directional" method from the UMI-tools by Smith, Heger and Sudbery (Genome Research 2017). + 1MM_Directional ... same as 1MM_Directional_UMItools, but with more stringent criteria for duplicate UMIs + Exact ... only exactly matching UMIs are collapsed. + NoDedup ... no deduplication of UMIs, count all reads. + 1MM_CR ... CellRanger2-4 algorithm for 1MM UMI collapsing. + +soloUMIfiltering - + string(s): type of UMI filtering (for reads uniquely mapping to genes) + - ... basic filtering: remove UMIs with N and homopolymers (similar to CellRanger 2.2.0). + MultiGeneUMI ... basic + remove lower-count UMIs that map to more than one gene. + MultiGeneUMI_All ... basic + remove all UMIs that map to more than one gene. + MultiGeneUMI_CR ... basic + remove lower-count UMIs that map to more than one gene, matching CellRanger > 3.0.0 . + Only works with --soloUMIdedup 1MM_CR + +soloOutFileNames Solo.out/ features.tsv barcodes.tsv matrix.mtx + string(s): file names for STARsolo output: + file_name_prefix gene_names barcode_sequences cell_feature_count_matrix + +soloCellFilter CellRanger2.2 3000 0.99 10 + string(s): cell filtering type and parameters + None ... do not output filtered cells + TopCells ... only report top cells by UMI count, followed by the exact number of cells + CellRanger2.2 ... simple filtering of CellRanger 2.2. + Can be followed by numbers: number of expected cells, robust maximum percentile for UMI count, maximum to minimum ratio for UMI count + The harcoded values are from CellRanger: nExpectedCells=3000; maxPercentile=0.99; maxMinRatio=10 + EmptyDrops_CR ... EmptyDrops filtering in CellRanger flavor. Please cite the original EmptyDrops paper: A.T.L Lun et al, Genome Biology, 20, 63 (2019): https://genomebiology.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13059-019-1662-y + Can be followed by 10 numeric parameters: nExpectedCells maxPercentile maxMinRatio indMin indMax umiMin umiMinFracMedian candMaxN FDR simN + The harcoded values are from CellRanger: 3000 0.99 10 45000 90000 500 0.01 20000 0.01 10000 + +soloOutFormatFeaturesGeneField3 "Gene Expression" + string(s): field 3 in the Gene features.tsv file. If "-", then no 3rd field is output. + +soloCellReadStats None + string: Output reads statistics for each CB + Standard ... standard output + +#####UnderDevelopment_begin : not supported - do not use +soloClusterCBfile - + string: file containing the cluster information for cell barcodes, two columns: CB cluster_index. Only used with --soloFeatures Transcript3p +#####UnderDevelopment_end diff --git a/src/star/star_align_reads/script.py b/src/star/star_align_reads/script.py new file mode 100644 index 00000000..f3d64a57 --- /dev/null +++ b/src/star/star_align_reads/script.py @@ -0,0 +1,110 @@ +import tempfile +import subprocess +import shutil +from pathlib import Path + +## VIASH START +par = { + "input": [ + "src/star/star_align_reads/test_data/a_R1.1.fastq", + "src/star/star_align_reads/test_data/a_R1.2.fastq", + ], + "input_r2": [ + "src/star/star_align_reads/test_data/a_R2.1.fastq", + "src/star/star_align_reads/test_data/a_R2.2.fastq", + ], + "genomeDir": "src/star/star_align_reads/test_data/genome.fasta", + "aligned_reads": "aligned_reads.sam" +} +meta = { + "cpus": 8, + "temp_dir": "/tmp" +} +## VIASH END + +################################################## +# check and process SE / PE R1 input files +input_r1 = par["input"] +readFilesIn = ",".join(par["input"]) +par["input"] = None + +# check and process PE R2 input files +input_r2 = par["input_r2"] +if input_r2 is not None: + if len(input_r1) != len(input_r2): + raise ValueError("The number of R1 and R2 files do not match.") + readFilesIn = [readFilesIn, ",".join(par["input_r2"])] + par["input_r2"] = None + +# store readFilesIn +par["readFilesIn"] = readFilesIn + +################################################## + +# determine readFilesCommand +if input_r1[0].endswith(".gz"): + print(">> Input files are gzipped, setting readFilesCommand to zcat", flush=True) + par["readFilesCommand"] = "zcat" +elif input_r1[0].endswith(".bz2"): + print(">> Input files are bzipped, setting readFilesCommand to bzcat", flush=True) + par["readFilesCommand"] = "bzcat" + +################################################## +# store output paths +expected_outputs = { + "aligned_reads": ["Aligned.out.sam", "Aligned.out.bam"], + "reads_per_gene": "ReadsPerGene.out.tab", + "chimeric_junctions": "Chimeric.out.junction", + "log": "Log.final.out", + "splice_junctions": "SJ.out.tab", + "unmapped": "Unmapped.out.mate1", + "unmapped_r2": "Unmapped.out.mate2", + "reads_aligned_to_transcriptome": "Aligned.toTranscriptome.out.bam" +} +output_paths = {name: par[name] for name in expected_outputs.keys()} +for name in expected_outputs.keys(): + par[name] = None + +################################################## +# process other args +par["runMode"] = "alignReads" + +if "cpus" in meta and meta["cpus"]: + par["runThreadN"] = meta["cpus"] + +################################################## +# run STAR and move output to final destination +with tempfile.TemporaryDirectory(prefix="star-", dir=meta["temp_dir"], ignore_cleanup_errors=True) as temp_dir: + print(">> Constructing command", flush=True) + + # set output paths + temp_dir = Path(temp_dir) + par["outTmpDir"] = temp_dir / "tempdir" + out_dir = temp_dir / "out" + par["outFileNamePrefix"] = f"{out_dir}/" # star needs this slash + + # construct command + cmd_args = [ "STAR" ] + for name, value in par.items(): + if value is not None: + val_to_add = value if isinstance(value, list) else [value] + cmd_args.extend([f"--{name}"] + [str(x) for x in val_to_add]) + print("", flush=True) + + # run command + print(">> Running STAR with command:", flush=True) + print(f"+ {' '.join(cmd_args)}", end="\n\n", flush=True) + subprocess.run( + cmd_args, + check=True + ) + print(">> STAR finished successfully", end="\n\n", flush=True) + + # move output to final destination + print(">> Moving output to final destination", flush=True) + for name, paths in expected_outputs.items(): + for expected_path in [paths] if isinstance(paths, str) else paths: + expected_full_path = out_dir / expected_path + if output_paths[name] and expected_full_path.is_file(): + print(f">> Moving {expected_path} to {output_paths[name]}", flush=True) + shutil.move(expected_full_path, output_paths[name]) diff --git a/src/star/star_align_reads/test.sh b/src/star/star_align_reads/test.sh new file mode 100644 index 00000000..a15ea599 --- /dev/null +++ b/src/star/star_align_reads/test.sh @@ -0,0 +1,176 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +## VIASH START +meta_executable="target/docker/star/star_align_reads/star_align_reads" +meta_resources_dir="src/star/star_align_reads" +## VIASH END + +######################################################################################### + +# helper functions +assert_file_exists() { + [ -f "$1" ] || (echo "File '$1' does not exist" && exit 1) +} +assert_file_doesnt_exist() { + [ ! -f "$1" ] || (echo "File '$1' exists but shouldn't" && exit 1) +} +assert_file_empty() { + [ ! -s "$1" ] || (echo "File '$1' is not empty but should be" && exit 1) +} +assert_file_not_empty() { + [ -s "$1" ] || (echo "File '$1' is empty but shouldn't be" && exit 1) +} +assert_file_contains() { + grep -q "$2" "$1" || (echo "File '$1' does not contain '$2'" && exit 1) +} +assert_file_not_contains() { + grep -q "$2" "$1" && (echo "File '$1' contains '$2' but shouldn't" && exit 1) +} +assert_file_contains_regex() { + grep -q -E "$2" "$1" || (echo "File '$1' does not contain '$2'" && exit 1) +} +assert_file_not_contains_regex() { + grep -q -E "$2" "$1" && (echo "File '$1' contains '$2' but shouldn't" && exit 1) +} + +######################################################################################### +echo "> Prepare test data" + +cat > reads_R1.fastq <<'EOF' +@SEQ_ID1 +ACGCTGCCTCATAAGCCTCACACAT ++ +IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII +@SEQ_ID2 +ACCCGCAAGATTAGGCTCCGTACAC ++ +!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! +EOF + +cat > reads_R2.fastq <<'EOF' +@SEQ_ID1 +ATGTGTGAGGCTTATGAGGCAGCGT ++ +IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII +@SEQ_ID2 +GTGTACGGAGCCTAATCTTGCAGGG ++ +!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! +EOF + +cat > genome.fasta <<'EOF' +>chr1 +TGGCATGAGCCAACGAACGCTGCCTCATAAGCCTCACACATCCGCGCCTATGTTGTGACTCTCTGTGAGCGTTCGTGGG +GCTCGTCACCACTATGGTTGGCCGGTTAGTAGTGTGACTCCTGGTTTTCTGGAGCTTCTTTAAACCGTAGTCCAGTCAA +TGCGAATGGCACTTCACGACGGACTGTCCTTAGCTCAGGGGA +EOF + +cat > genes.gtf <<'EOF' +chr1 example_source gene 0 50 . + . gene_id "gene1"; transcript_id "transcript1"; +chr1 example_source exon 20 40 . + . gene_id "gene1"; transcript_id "transcript1"; +EOF + +echo "> Generate index" +STAR \ + ${meta_cpus:+--runThreadN $meta_cpus} \ + --runMode genomeGenerate \ + --genomeDir "index/" \ + --genomeFastaFiles "genome.fasta" \ + --sjdbGTFfile "genes.gtf" \ + --genomeSAindexNbases 2 + +######################################################################################### + +mkdir star_align_reads_se +cd star_align_reads_se + +echo "> Run star_align_reads on SE" +"$meta_executable" \ + --input "../reads_R1.fastq" \ + --genomeDir "../index/" \ + --aligned_reads "output.sam" \ + --log "log.txt" \ + --outReadsUnmapped "Fastx" \ + --unmapped "unmapped.sam" \ + --quantMode "TranscriptomeSAM;GeneCounts" \ + --reads_per_gene "reads_per_gene.tsv" \ + --outSJtype Standard \ + --splice_junctions "splice_junctions.tsv" \ + --reads_aligned_to_transcriptome "transcriptome_aligned.bam" \ + ${meta_cpus:+---cpus $meta_cpus} + +# TODO: Test data doesn't contain any chimeric reads yet +# --chimOutType "Junctions" \ +# --chimeric_junctions "chimeric_junctions.tsv" \ + +echo ">> Check if output exists" +assert_file_exists "output.sam" +assert_file_exists "log.txt" +assert_file_exists "reads_per_gene.tsv" +# assert_file_exists "chimeric_junctions.tsv" +assert_file_exists "splice_junctions.tsv" +assert_file_exists "unmapped.sam" +assert_file_exists "transcriptome_aligned.bam" + +echo ">> Check if output contents are not empty" +assert_file_not_empty "output.sam" +assert_file_not_empty "log.txt" +assert_file_not_empty "reads_per_gene.tsv" +# assert_file_not_empty "chimeric_junctions.tsv" +# assert_file_not_empty "splice_junctions.tsv" # TODO: test data doesn't contain any splice junctions yet +assert_file_not_empty "unmapped.sam" +assert_file_not_empty "transcriptome_aligned.bam" + +echo ">> Check if output contents are correct" +assert_file_contains "log.txt" "Number of input reads \\| 2" +assert_file_contains "log.txt" "Number of reads unmapped: too short \\| 1" +assert_file_contains "log.txt" "Uniquely mapped reads number \\| 1" +assert_file_contains "reads_per_gene.tsv" "gene1 1 1 0" +assert_file_contains "reads_per_gene.tsv" "N_unmapped 1 1 1" +assert_file_contains "output.sam" "SEQ_ID1 0 chr1 17 255 25M \\* 0 0 ACGCTGCCTCATAAGCCTCACACAT IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII NH:i:1 HI:i:1 AS:i:24 nM:i:0" +assert_file_contains "unmapped.sam" "@SEQ_ID2 0:N:" +assert_file_contains "unmapped.sam" "ACCCGCAAGATTAGGCTCCGTACAC" + +cd .. + +######################################################################################### + +mkdir star_align_reads_pe_minimal +cd star_align_reads_pe_minimal + +echo ">> Run star_align_reads on PE" +"$meta_executable" \ + --input ../reads_R1.fastq \ + --input_r2 ../reads_R2.fastq \ + --genomeDir ../index/ \ + --aligned_reads output.bam \ + --log log.txt \ + --outReadsUnmapped Fastx \ + --unmapped unmapped_r1.bam \ + --unmapped_r2 unmapped_r2.bam \ + ${meta_cpus:+---cpus $meta_cpus} + +echo ">> Check if output exists" +assert_file_exists "output.bam" +assert_file_exists "log.txt" +assert_file_exists "unmapped_r1.bam" +assert_file_exists "unmapped_r2.bam" + +echo ">> Check if output contents are not empty" +assert_file_not_empty "output.bam" +assert_file_not_empty "log.txt" +assert_file_not_empty "unmapped_r1.bam" +assert_file_not_empty "unmapped_r2.bam" + +echo ">> Check if output contents are correct" +assert_file_contains "log.txt" "Number of input reads \\| 2" +assert_file_contains "log.txt" "Number of reads unmapped: too short \\| 1" +assert_file_contains "log.txt" "Uniquely mapped reads number \\| 1" + +cd .. + +######################################################################################### + +echo "> Test successful" diff --git a/src/star/star_align_reads/utils/process_params.R b/src/star/star_align_reads/utils/process_params.R new file mode 100644 index 00000000..ccdc50b3 --- /dev/null +++ b/src/star/star_align_reads/utils/process_params.R @@ -0,0 +1,189 @@ +library(tidyverse) + +# This script processes the STAR aligner's help file +# to create a viash argument_groups.yaml file. + +local_file <- "src/star/star_align_reads/help.txt" +yaml_file <- "src/star/star_align_reads/argument_groups.yaml" + +param_txt <- readr::read_lines(local_file) + +# replace non-ascii characters with their ascii approximations +param_txt <- iconv(param_txt, "UTF-8", "ASCII//TRANSLIT") + +dev_begin <- grep("#####UnderDevelopment_begin", param_txt) +dev_end <- grep("#####UnderDevelopment_end", param_txt) + +# strip development sections +nondev_ix <- unlist(map2(c(1, dev_end + 1), c(dev_begin - 1, length(param_txt)), function(i, j) { + if (i >= 1 && i < j) { + seq(i, j, 1) + } else { + NULL + } +})) + +param_txt2 <- param_txt[nondev_ix] + +# strip comments +param_txt3 <- param_txt2[-grep("^#[^#]", param_txt2)] + +# detect groups +group_ix <- grep("^### ", param_txt3) + +out <- map2_dfr( + group_ix, + c(group_ix[-1] - 1, length(param_txt3)), + function(group_start, group_end) { + # cat("group_start <- ", group_start, "; group_end <- ", group_end, "\n", sep = "") + group_name <- gsub("^### ", "", param_txt3[[group_start]]) + + group_txt <- param_txt3[seq(group_start + 1, group_end)] + + arg_ix <- grep("^[^ ]", group_txt) + + arguments <- map2_dfr( + arg_ix, + c(arg_ix[-1] - 1, length(group_txt)), + function(arg_start, arg_end) { + # cat("arg_start <- ", arg_start, "; arg_end <- ", arg_end, "\n", sep = "") + + # process name and default + first_txt <- group_txt[[arg_start]] + first_regex <- "^([^ ]*) +(.*) *$" + if (!grepl(first_regex, first_txt)) { + stop("Line '", first_txt, "' did not match regex '", first_regex, "'") + } + name <- gsub(first_regex, "\\1", first_txt) + default <- gsub(first_regex, "\\2", first_txt) + + # process type and first description + second_txt <- group_txt[[arg_start + 1]] + second_regex <- "^ +([^:]*):[ ]+(.*)$" + if (!grepl(second_regex, second_txt)) { + stop("Line '", second_txt, "' did not match regex '", second_regex, "'") + } + type <- gsub(second_regex, "\\1", second_txt) + desc_start <- str_trim(gsub(second_regex, "\\2", second_txt)) + + # process more description + desc_cont1 <- group_txt[seq(arg_start + 2, arg_end)] + + desc <- + if (sum(str_length(desc_cont1)) == 0) { + desc_start + } else { + # detect margin + margins <- str_extract(desc_cont1, "^( +)") %>% na.omit + margin <- margins[[which.min(str_length(margins))]] + desc_cont2 <- gsub(paste0("^", margin), "", desc_cont1) + desc_cont3 <- ifelse(grepl("\\.\\.\\.", desc_cont2), paste0("- ", desc_cont2), desc_cont2) + desc_cont4 <- str_trim(desc_cont3) + + # construct desc + str_trim(paste0(c(desc_start, "", desc_cont4), "\n", collapse = "")) + } + + tibble( + group_name, + name, + default, + type, + description = desc + ) + } + ) + + arguments + } +) + +# todo: manually fix alignEndsProtrude? +# assigning types +type_map <- c("string" = "string", "int" = "integer", "real" = "double", "double" = "double", "int, string" = "string") +file_args <- c("genomeDir", "readFilesIn", "sjdbGTFfile", "genomeFastaFiles", "genomeChainFiles", "readFilesManifest") +long_args <- c("limitGenomeGenerateRAM", "limitIObufferSize", "limitOutSAMoneReadBytes", "limitBAMsortRAM") +required_args <- c("genomeDir", "readFilesIn") + +# converting examples +as_safe_int <- function(x) tryCatch({as.integer(x)}, warning = function(e) { bit64::as.integer64(x) }) +safe_split <- function(x) strsplit(x, "'[^']*'(*SKIP)(*F)|\"[^\"]*\"(*SKIP)(*F)|\\s+", perl = TRUE)[[1]] %>% gsub("^[\"']|[\"']$", "", .) +trafos <- list( + string = function(x) x, + integer = as_safe_int, + double = as.numeric, + strings = function(x) safe_split(x), + integers = function(x) sapply(safe_split(x), as_safe_int), + doubles = function(x) as.numeric(safe_split(x)) +) +# remove arguments that are not relevant for viash +removed_args <- c("versionGenome", "parametersFiles", "sysShell", "runDirPerm") +# these settings are defined by the viash component +manual_args <- c("runThreadN", "outTmpDir", "runMode", "outFileNamePrefix", "readFilesIn") + +# make viash-like values +out2 <- out %>% + # remove arguments that are not relevant for viash + filter(!name %in% c(removed_args, manual_args)) %>% + # remove arguments that are related to a different runmode + filter(!grepl("--runMode", description) | grepl("--runMode alignReads", description)) %>% + filter(!grepl("--runMode", group_name) | grepl("--runMode alignReads", group_name)) %>% + filter(!grepl("STARsolo", group_name)) %>% + mutate( + viash_arg = paste0("--", name), + type_step1 = type %>% + str_replace_all(".*(int, string|string|int|real|double)\\(?(s?).*", "\\1\\2"), + viash_type = type_map[gsub("(int, string|string|int|real|double).*", "\\1", type_step1)], + multiple = type_step1 == "int, string" | grepl("s$", type_step1) | grepl("^[4N][\\* ]", type), + default_step1 = default %>% + {ifelse(. %in% c("-", "None"), NA_character_, .)}, + viash_default = + mapply( + default_step1, + paste0(viash_type, ifelse(multiple, "s", "")), + FUN = function(str, typ) trafos[[typ]](str) + ), + # viash_type = ifelse(sapply(viash_default, bit64::is.integer64), "long", viash_type), + # update type + viash_type = case_when( + name %in% long_args ~ "long", + name %in% file_args ~ "file", + TRUE ~ viash_type + ), + # turn longs into character because yaml::write_yaml doesn't handle longs well + viash_default = ifelse(sapply(viash_default, bit64::is.integer64), map(viash_default, as.character), viash_default), + group_name = gsub(" - .*", "", group_name), + required = ifelse(name %in% required_args, TRUE, NA) + ) +print(out2, n = 200) +out2 %>% mutate(i = row_number()) %>% + # filter(is.na(default_step1) != is.na(viash_default)) %>% + select(-group_name, -description) + +out2 %>% filter(!grepl("--runMode", description) | grepl("--runMode alignReads", description)) + +argument_groups <- map(unique(out2$group_name), function(group_name) { + args <- out2 %>% + filter(group_name == !!group_name) %>% + pmap(function(viash_arg, viash_type, multiple, viash_default, description, required, ...) { + li <- lst( + name = viash_arg, + type = viash_type, + description = description + ) + if (all(!is.na(viash_default))) { + li$example <- viash_default + } + if (!is.na(multiple) && multiple) { + li$multiple <- multiple + li$multiple_sep <- ";" + } + if (!is.na(required) && required) { + li$required <- required + } + li + }) + list(name = group_name, arguments = args) +}) + +yaml::write_yaml(list(argument_groups = argument_groups), yaml_file) diff --git a/src/star/star_genome_generate/config.vsh.yaml b/src/star/star_genome_generate/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..3adaf7a2 --- /dev/null +++ b/src/star/star_genome_generate/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,139 @@ +name: star_genome_generate +namespace: star +description: | + Create index for STAR +keywords: [genome, index, align] +links: + repository: https://github.com/alexdobin/STAR + documentation: https://github.com/alexdobin/STAR/blob/master/doc/STARmanual.pdf +references: + doi: 10.1093/bioinformatics/bts635 +license: MIT +requirements: + commands: [ STAR ] + +argument_groups: +- name: "Input" + arguments: + - name: "--genomeFastaFiles" + type: file + description: | + Path(s) to the fasta files with the genome sequences, separated by spaces. These files should be plain text FASTA files, they *cannot* be zipped. + required: true + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: "--sjdbGTFfile" + type: file + description: Path to the GTF file with annotations + - name: --sjdbOverhang + type: integer + description: Length of the donor/acceptor sequence on each side of the junctions, ideally = (mate_length - 1) + example: 100 + - name: --sjdbGTFchrPrefix + type: string + description: Prefix for chromosome names in a GTF file (e.g. 'chr' for using ENSMEBL annotations with UCSC genomes) + - name: --sjdbGTFfeatureExon + type: string + description: Feature type in GTF file to be used as exons for building transcripts + example: exon + - name: --sjdbGTFtagExonParentTranscript + type: string + description: GTF attribute name for parent transcript ID (default "transcript_id" works for GTF files) + example: transcript_id + - name: --sjdbGTFtagExonParentGene + type: string + description: GTF attribute name for parent gene ID (default "gene_id" works for GTF files) + example: gene_id + - name: --sjdbGTFtagExonParentGeneName + type: string + description: GTF attribute name for parent gene name + example: gene_name + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --sjdbGTFtagExonParentGeneType + type: string + description: GTF attribute name for parent gene type + example: + - gene_type + - gene_biotype + multiple: yes + multiple_sep: ; + - name: --limitGenomeGenerateRAM + type: long + description: Maximum available RAM (bytes) for genome generation + example: '31000000000' + - name: --genomeSAindexNbases + type: integer + description: Length (bases) of the SA pre-indexing string. Typically between 10 and 15. Longer strings will use much more memory, but allow faster searches. For small genomes, this parameter must be scaled down to min(14, log2(GenomeLength)/2 - 1). + example: 14 + - name: --genomeChrBinNbits + type: integer + description: Defined as log2(chrBin), where chrBin is the size of the bins for genome storage. Each chromosome will occupy an integer number of bins. For a genome with large number of contigs, it is recommended to scale this parameter as min(18, log2[max(GenomeLength/NumberOfReferences,ReadLength)]). + example: 18 + - name: --genomeSAsparseD + type: integer + min: 0 + example: 1 + description: Suffux array sparsity, i.e. distance between indices. Use bigger numbers to decrease needed RAM at the cost of mapping speed reduction. + - name: --genomeSuffixLengthMax + type: integer + description: Maximum length of the suffixes, has to be longer than read length. Use -1 for infinite length. + example: -1 + - name: --genomeTransformType + type: string + description: | + Type of genome transformation + None ... no transformation + Haploid ... replace reference alleles with alternative alleles from VCF file (e.g. consensus allele) + Diploid ... create two haplotypes for each chromosome listed in VCF file, for genotypes 1|2, assumes perfect phasing (e.g. personal genome) + example: None + - name: --genomeTransformVCF + type: file + description: path to VCF file for genome transformation + +- name: "Output" + arguments: + - name: "--index" + type: file + direction: output + description: STAR index directory. + default: STAR_index + required: true + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh + +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + +engines: +- type: docker + image: ubuntu:22.04 + setup: + # setup derived from https://github.com/alexdobin/STAR/blob/master/extras/docker/Dockerfile + - type: docker + env: + - STAR_VERSION 2.7.11b + - PACKAGES gcc g++ make wget zlib1g-dev unzip xxd + run: | + apt-get update && \ + apt-get install -y --no-install-recommends ${PACKAGES} && \ + cd /tmp && \ + wget --no-check-certificate https://github.com/alexdobin/STAR/archive/refs/tags/${STAR_VERSION}.zip && \ + unzip ${STAR_VERSION}.zip && \ + cd STAR-${STAR_VERSION}/source && \ + make STARstatic CXXFLAGS_SIMD=-std=c++11 && \ + cp STAR /usr/local/bin && \ + cd / && \ + rm -rf /tmp/STAR-${STAR_VERSION} /tmp/${STAR_VERSION}.zip && \ + apt-get --purge autoremove -y ${PACKAGES} && \ + apt-get clean + - type: docker + run: | + STAR --version | sed 's#\(.*\)#star: "\1"#' > /var/software_versions.txt + +runners: + - type: executable + - type: nextflow diff --git a/src/star/star_genome_generate/help.txt b/src/star/star_genome_generate/help.txt new file mode 100644 index 00000000..940f639d --- /dev/null +++ b/src/star/star_genome_generate/help.txt @@ -0,0 +1,927 @@ +Usage: STAR [options]... --genomeDir /path/to/genome/index/ --readFilesIn R1.fq R2.fq +Spliced Transcripts Alignment to a Reference (c) Alexander Dobin, 2009-2022 + +STAR version=2.7.11b +STAR compilation time,server,dir=2024-02-11T19:36:26+00:00 :/tmp/STAR-2.7.11b/source +For more details see: + + +### versions +versionGenome 2.7.4a + string: earliest genome index version compatible with this STAR release. Please do not change this value! + +### Parameter Files +parametersFiles - + string: name of a user-defined parameters file, "-": none. Can only be defined on the command line. + +### System +sysShell - + string: path to the shell binary, preferably bash, e.g. /bin/bash. + - ... the default shell is executed, typically /bin/sh. This was reported to fail on some Ubuntu systems - then you need to specify path to bash. + +### Run Parameters +runMode alignReads + string: type of the run. + alignReads ... map reads + genomeGenerate ... generate genome files + inputAlignmentsFromBAM ... input alignments from BAM. Presently only works with --outWigType and --bamRemoveDuplicates options. + liftOver ... lift-over of GTF files (--sjdbGTFfile) between genome assemblies using chain file(s) from --genomeChainFiles. + soloCellFiltering ... STARsolo cell filtering ("calling") without remapping, followed by the path to raw count directory and output (filtered) prefix + +runThreadN 1 + int: number of threads to run STAR + +runDirPerm User_RWX + string: permissions for the directories created at the run-time. + User_RWX ... user-read/write/execute + All_RWX ... all-read/write/execute (same as chmod 777) + +runRNGseed 777 + int: random number generator seed. + + +### Genome Parameters +genomeDir ./GenomeDir/ + string: path to the directory where genome files are stored (for --runMode alignReads) or will be generated (for --runMode generateGenome) + +genomeLoad NoSharedMemory + string: mode of shared memory usage for the genome files. Only used with --runMode alignReads. + LoadAndKeep ... load genome into shared and keep it in memory after run + LoadAndRemove ... load genome into shared but remove it after run + LoadAndExit ... load genome into shared memory and exit, keeping the genome in memory for future runs + Remove ... do not map anything, just remove loaded genome from memory + NoSharedMemory ... do not use shared memory, each job will have its own private copy of the genome + +genomeFastaFiles - + string(s): path(s) to the fasta files with the genome sequences, separated by spaces. These files should be plain text FASTA files, they *cannot* be zipped. + Required for the genome generation (--runMode genomeGenerate). Can also be used in the mapping (--runMode alignReads) to add extra (new) sequences to the genome (e.g. spike-ins). + +genomeChainFiles - + string: chain files for genomic liftover. Only used with --runMode liftOver . + +genomeFileSizes 0 + uint(s)>0: genome files exact sizes in bytes. Typically, this should not be defined by the user. + +genomeTransformOutput None + string(s): which output to transform back to original genome + SAM ... SAM/BAM alignments + SJ ... splice junctions (SJ.out.tab) + Quant ... quantifications (from --quantMode option) + None ... no transformation of the output + +genomeChrSetMitochondrial chrM M MT + string(s): names of the mitochondrial chromosomes. Presently only used for STARsolo statistics output/ + +### Genome Indexing Parameters - only used with --runMode genomeGenerate +genomeChrBinNbits 18 + int: =log2(chrBin), where chrBin is the size of the bins for genome storage: each chromosome will occupy an integer number of bins. For a genome with large number of contigs, it is recommended to scale this parameter as min(18, log2[max(GenomeLength/NumberOfReferences,ReadLength)]). + +genomeSAindexNbases 14 + int: length (bases) of the SA pre-indexing string. Typically between 10 and 15. Longer strings will use much more memory, but allow faster searches. For small genomes, the parameter --genomeSAindexNbases must be scaled down to min(14, log2(GenomeLength)/2 - 1). + +genomeSAsparseD 1 + int>0: suffux array sparsity, i.e. distance between indices: use bigger numbers to decrease needed RAM at the cost of mapping speed reduction + +genomeSuffixLengthMax -1 + int: maximum length of the suffixes, has to be longer than read length. -1 = infinite. + +genomeTransformType None + string: type of genome transformation + None ... no transformation + Haploid ... replace reference alleles with alternative alleles from VCF file (e.g. consensus allele) + Diploid ... create two haplotypes for each chromosome listed in VCF file, for genotypes 1|2, assumes perfect phasing (e.g. personal genome) + +genomeTransformVCF - + string: path to VCF file for genome transformation + + + +#####UnderDevelopment_begin : not supported - do not use +genomeType Full + string: type of genome to generate + Full ... full (normal) genome + Transcriptome ... genome consists of transcript sequences + SuperTransriptome ... genome consists of superTranscript sequences +#####UnderDevelopment_end + +# DEPRECATED: please use --genomeTransformVCF and --genomeTransformType options instead. +#genomeConsensusFile - +# string: VCF file with consensus SNPs (i.e. alternative allele is the major (AF>0.5) allele) +# DEPRECATED + + + +### Splice Junctions Database +sjdbFileChrStartEnd - + string(s): path to the files with genomic coordinates (chr start end strand) for the splice junction introns. Multiple files can be supplied and will be concatenated. + +sjdbGTFfile - + string: path to the GTF file with annotations + +sjdbGTFchrPrefix - + string: prefix for chromosome names in a GTF file (e.g. 'chr' for using ENSMEBL annotations with UCSC genomes) + +sjdbGTFfeatureExon exon + string: feature type in GTF file to be used as exons for building transcripts + +sjdbGTFtagExonParentTranscript transcript_id + string: GTF attribute name for parent transcript ID (default "transcript_id" works for GTF files) + +sjdbGTFtagExonParentGene gene_id + string: GTF attribute name for parent gene ID (default "gene_id" works for GTF files) + +sjdbGTFtagExonParentGeneName gene_name + string(s): GTF attribute name for parent gene name + +sjdbGTFtagExonParentGeneType gene_type gene_biotype + string(s): GTF attribute name for parent gene type + +sjdbOverhang 100 + int>0: length of the donor/acceptor sequence on each side of the junctions, ideally = (mate_length - 1) + +sjdbScore 2 + int: extra alignment score for alignments that cross database junctions + +sjdbInsertSave Basic + string: which files to save when sjdb junctions are inserted on the fly at the mapping step + Basic ... only small junction / transcript files + All ... all files including big Genome, SA and SAindex - this will create a complete genome directory + +### Variation parameters +varVCFfile - + string: path to the VCF file that contains variation data. The 10th column should contain the genotype information, e.g. 0/1 + +### Input Files +inputBAMfile - + string: path to BAM input file, to be used with --runMode inputAlignmentsFromBAM + +### Read Parameters +readFilesType Fastx + string: format of input read files + Fastx ... FASTA or FASTQ + SAM SE ... SAM or BAM single-end reads; for BAM use --readFilesCommand samtools view + SAM PE ... SAM or BAM paired-end reads; for BAM use --readFilesCommand samtools view + +readFilesSAMattrKeep All + string(s): for --readFilesType SAM SE/PE, which SAM tags to keep in the output BAM, e.g.: --readFilesSAMtagsKeep RG PL + All ... keep all tags + None ... do not keep any tags + +readFilesIn Read1 Read2 + string(s): paths to files that contain input read1 (and, if needed, read2) + +readFilesManifest - + string: path to the "manifest" file with the names of read files. The manifest file should contain 3 tab-separated columns: + paired-end reads: read1_file_name $tab$ read2_file_name $tab$ read_group_line. + single-end reads: read1_file_name $tab$ - $tab$ read_group_line. + Spaces, but not tabs are allowed in file names. + If read_group_line does not start with ID:, it can only contain one ID field, and ID: will be added to it. + If read_group_line starts with ID:, it can contain several fields separated by $tab$, and all fields will be be copied verbatim into SAM @RG header line. + +readFilesPrefix - + string: prefix for the read files names, i.e. it will be added in front of the strings in --readFilesIn + +readFilesCommand - + string(s): command line to execute for each of the input file. This command should generate FASTA or FASTQ text and send it to stdout + For example: zcat - to uncompress .gz files, bzcat - to uncompress .bz2 files, etc. + +readMapNumber -1 + int: number of reads to map from the beginning of the file + -1: map all reads + +readMatesLengthsIn NotEqual + string: Equal/NotEqual - lengths of names,sequences,qualities for both mates are the same / not the same. NotEqual is safe in all situations. + +readNameSeparator / + string(s): character(s) separating the part of the read names that will be trimmed in output (read name after space is always trimmed) + +readQualityScoreBase 33 + int>=0: number to be subtracted from the ASCII code to get Phred quality score + +### Read Clipping + +clipAdapterType Hamming + string: adapter clipping type + Hamming ... adapter clipping based on Hamming distance, with the number of mismatches controlled by --clip5pAdapterMMp + CellRanger4 ... 5p and 3p adapter clipping similar to CellRanger4. Utilizes Opal package by Martin Šošić: https://github.com/Martinsos/opal + None ... no adapter clipping, all other clip* parameters are disregarded + +clip3pNbases 0 + int(s): number(s) of bases to clip from 3p of each mate. If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + +clip3pAdapterSeq - + string(s): adapter sequences to clip from 3p of each mate. If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + polyA ... polyA sequence with the length equal to read length + +clip3pAdapterMMp 0.1 + double(s): max proportion of mismatches for 3p adapter clipping for each mate. If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + +clip3pAfterAdapterNbases 0 + int(s): number of bases to clip from 3p of each mate after the adapter clipping. If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + +clip5pNbases 0 + int(s): number(s) of bases to clip from 5p of each mate. If one value is given, it will be assumed the same for both mates. + +#####UnderDevelopment_begin : not supported - do not use +clip5pAdapterSeq - + string(s): adapter sequences to clip from 5p of each mate, separated by space. + +clip5pAdapterMMp 0.1 + double(s): max proportion of mismatches for 5p adapter clipping for each mate, separated by space + +clip5pAfterAdapterNbases 0 + int(s): number of bases to clip from 5p of each mate after the adapter clipping, separated by space. +#####UnderDevelopment_end + +### Limits +limitGenomeGenerateRAM 31000000000 + int>0: maximum available RAM (bytes) for genome generation + +limitIObufferSize 30000000 50000000 + int(s)>0: max available buffers size (bytes) for input/output, per thread + +limitOutSAMoneReadBytes 100000 + int>0: max size of the SAM record (bytes) for one read. Recommended value: >(2*(LengthMate1+LengthMate2+100)*outFilterMultimapNmax + +limitOutSJoneRead 1000 + int>0: max number of junctions for one read (including all multi-mappers) + +limitOutSJcollapsed 1000000 + int>0: max number of collapsed junctions + +limitBAMsortRAM 0 + int>=0: maximum available RAM (bytes) for sorting BAM. If =0, it will be set to the genome index size. 0 value can only be used with --genomeLoad NoSharedMemory option. + +limitSjdbInsertNsj 1000000 + int>=0: maximum number of junctions to be inserted to the genome on the fly at the mapping stage, including those from annotations and those detected in the 1st step of the 2-pass run + +limitNreadsSoft -1 + int: soft limit on the number of reads + +### Output: general +outFileNamePrefix ./ + string: output files name prefix (including full or relative path). Can only be defined on the command line. + +outTmpDir - + string: path to a directory that will be used as temporary by STAR. All contents of this directory will be removed! + - ... the temp directory will default to outFileNamePrefix_STARtmp + +outTmpKeep None + string: whether to keep the temporary files after STAR runs is finished + None ... remove all temporary files + All ... keep all files + +outStd Log + string: which output will be directed to stdout (standard out) + Log ... log messages + SAM ... alignments in SAM format (which normally are output to Aligned.out.sam file), normal standard output will go into Log.std.out + BAM_Unsorted ... alignments in BAM format, unsorted. Requires --outSAMtype BAM Unsorted + BAM_SortedByCoordinate ... alignments in BAM format, sorted by coordinate. Requires --outSAMtype BAM SortedByCoordinate + BAM_Quant ... alignments to transcriptome in BAM format, unsorted. Requires --quantMode TranscriptomeSAM + +outReadsUnmapped None + string: output of unmapped and partially mapped (i.e. mapped only one mate of a paired end read) reads in separate file(s). + None ... no output + Fastx ... output in separate fasta/fastq files, Unmapped.out.mate1/2 + +outQSconversionAdd 0 + int: add this number to the quality score (e.g. to convert from Illumina to Sanger, use -31) + +outMultimapperOrder Old_2.4 + string: order of multimapping alignments in the output files + Old_2.4 ... quasi-random order used before 2.5.0 + Random ... random order of alignments for each multi-mapper. Read mates (pairs) are always adjacent, all alignment for each read stay together. This option will become default in the future releases. + +### Output: SAM and BAM +outSAMtype SAM + strings: type of SAM/BAM output + 1st word: + BAM ... output BAM without sorting + SAM ... output SAM without sorting + None ... no SAM/BAM output + 2nd, 3rd: + Unsorted ... standard unsorted + SortedByCoordinate ... sorted by coordinate. This option will allocate extra memory for sorting which can be specified by --limitBAMsortRAM. + +outSAMmode Full + string: mode of SAM output + None ... no SAM output + Full ... full SAM output + NoQS ... full SAM but without quality scores + +outSAMstrandField None + string: Cufflinks-like strand field flag + None ... not used + intronMotif ... strand derived from the intron motif. This option changes the output alignments: reads with inconsistent and/or non-canonical introns are filtered out. + +outSAMattributes Standard + string(s): a string of desired SAM attributes, in the order desired for the output SAM. Tags can be listed in any combination/order. + ***Presets: + None ... no attributes + Standard ... NH HI AS nM + All ... NH HI AS nM NM MD jM jI MC ch + ***Alignment: + NH ... number of loci the reads maps to: =1 for unique mappers, >1 for multimappers. Standard SAM tag. + HI ... multiple alignment index, starts with --outSAMattrIHstart (=1 by default). Standard SAM tag. + AS ... local alignment score, +1/-1 for matches/mismateches, score* penalties for indels and gaps. For PE reads, total score for two mates. Stadnard SAM tag. + nM ... number of mismatches. For PE reads, sum over two mates. + NM ... edit distance to the reference (number of mismatched + inserted + deleted bases) for each mate. Standard SAM tag. + MD ... string encoding mismatched and deleted reference bases (see standard SAM specifications). Standard SAM tag. + jM ... intron motifs for all junctions (i.e. N in CIGAR): 0: non-canonical; 1: GT/AG, 2: CT/AC, 3: GC/AG, 4: CT/GC, 5: AT/AC, 6: GT/AT. If splice junctions database is used, and a junction is annotated, 20 is added to its motif value. + jI ... start and end of introns for all junctions (1-based). + XS ... alignment strand according to --outSAMstrandField. + MC ... mate's CIGAR string. Standard SAM tag. + ch ... marks all segment of all chimeric alingments for --chimOutType WithinBAM output. + cN ... number of bases clipped from the read ends: 5' and 3' + ***Variation: + vA ... variant allele + vG ... genomic coordinate of the variant overlapped by the read. + vW ... 1 - alignment passes WASP filtering; 2,3,4,5,6,7 - alignment does not pass WASP filtering. Requires --waspOutputMode SAMtag. + ha ... haplotype (1/2) when mapping to the diploid genome. Requires genome generated with --genomeTransformType Diploid . + ***STARsolo: + CR CY UR UY ... sequences and quality scores of cell barcodes and UMIs for the solo* demultiplexing. + GX GN ... gene ID and gene name for unique-gene reads. + gx gn ... gene IDs and gene names for unique- and multi-gene reads. + CB UB ... error-corrected cell barcodes and UMIs for solo* demultiplexing. Requires --outSAMtype BAM SortedByCoordinate. + sM ... assessment of CB and UMI. + sS ... sequence of the entire barcode (CB,UMI,adapter). + sQ ... quality of the entire barcode. + sF ... type of feature overlap and number of features for each alignment + ***Unsupported/undocumented: + rB ... alignment block read/genomic coordinates. + vR ... read coordinate of the variant. + +outSAMattrIHstart 1 + int>=0: start value for the IH attribute. 0 may be required by some downstream software, such as Cufflinks or StringTie. + +outSAMunmapped None + string(s): output of unmapped reads in the SAM format + 1st word: + None ... no output + Within ... output unmapped reads within the main SAM file (i.e. Aligned.out.sam) + 2nd word: + KeepPairs ... record unmapped mate for each alignment, and, in case of unsorted output, keep it adjacent to its mapped mate. Only affects multi-mapping reads. + +outSAMorder Paired + string: type of sorting for the SAM output + Paired: one mate after the other for all paired alignments + PairedKeepInputOrder: one mate after the other for all paired alignments, the order is kept the same as in the input FASTQ files + +outSAMprimaryFlag OneBestScore + string: which alignments are considered primary - all others will be marked with 0x100 bit in the FLAG + OneBestScore ... only one alignment with the best score is primary + AllBestScore ... all alignments with the best score are primary + +outSAMreadID Standard + string: read ID record type + Standard ... first word (until space) from the FASTx read ID line, removing /1,/2 from the end + Number ... read number (index) in the FASTx file + +outSAMmapqUnique 255 + int: 0 to 255: the MAPQ value for unique mappers + +outSAMflagOR 0 + int: 0 to 65535: sam FLAG will be bitwise OR'd with this value, i.e. FLAG=FLAG | outSAMflagOR. This is applied after all flags have been set by STAR, and after outSAMflagAND. Can be used to set specific bits that are not set otherwise. + +outSAMflagAND 65535 + int: 0 to 65535: sam FLAG will be bitwise AND'd with this value, i.e. FLAG=FLAG & outSAMflagOR. This is applied after all flags have been set by STAR, but before outSAMflagOR. Can be used to unset specific bits that are not set otherwise. + +outSAMattrRGline - + string(s): SAM/BAM read group line. The first word contains the read group identifier and must start with "ID:", e.g. --outSAMattrRGline ID:xxx CN:yy "DS:z z z". + xxx will be added as RG tag to each output alignment. Any spaces in the tag values have to be double quoted. + Comma separated RG lines correspons to different (comma separated) input files in --readFilesIn. Commas have to be surrounded by spaces, e.g. + --outSAMattrRGline ID:xxx , ID:zzz "DS:z z" , ID:yyy DS:yyyy + +outSAMheaderHD - + strings: @HD (header) line of the SAM header + +outSAMheaderPG - + strings: extra @PG (software) line of the SAM header (in addition to STAR) + +outSAMheaderCommentFile - + string: path to the file with @CO (comment) lines of the SAM header + +outSAMfilter None + string(s): filter the output into main SAM/BAM files + KeepOnlyAddedReferences ... only keep the reads for which all alignments are to the extra reference sequences added with --genomeFastaFiles at the mapping stage. + KeepAllAddedReferences ... keep all alignments to the extra reference sequences added with --genomeFastaFiles at the mapping stage. + + +outSAMmultNmax -1 + int: max number of multiple alignments for a read that will be output to the SAM/BAM files. Note that if this value is not equal to -1, the top scoring alignment will be output first + -1 ... all alignments (up to --outFilterMultimapNmax) will be output + +outSAMtlen 1 + int: calculation method for the TLEN field in the SAM/BAM files + 1 ... leftmost base of the (+)strand mate to rightmost base of the (-)mate. (+)sign for the (+)strand mate + 2 ... leftmost base of any mate to rightmost base of any mate. (+)sign for the mate with the leftmost base. This is different from 1 for overlapping mates with protruding ends + +outBAMcompression 1 + int: -1 to 10 BAM compression level, -1=default compression (6?), 0=no compression, 10=maximum compression + +outBAMsortingThreadN 0 + int: >=0: number of threads for BAM sorting. 0 will default to min(6,--runThreadN). + +outBAMsortingBinsN 50 + int: >0: number of genome bins for coordinate-sorting + +### BAM processing +bamRemoveDuplicatesType - + string: mark duplicates in the BAM file, for now only works with (i) sorted BAM fed with inputBAMfile, and (ii) for paired-end alignments only + - ... no duplicate removal/marking + UniqueIdentical ... mark all multimappers, and duplicate unique mappers. The coordinates, FLAG, CIGAR must be identical + UniqueIdenticalNotMulti ... mark duplicate unique mappers but not multimappers. + +bamRemoveDuplicatesMate2basesN 0 + int>0: number of bases from the 5' of mate 2 to use in collapsing (e.g. for RAMPAGE) + +### Output Wiggle +outWigType None + string(s): type of signal output, e.g. "bedGraph" OR "bedGraph read1_5p". Requires sorted BAM: --outSAMtype BAM SortedByCoordinate . + 1st word: + None ... no signal output + bedGraph ... bedGraph format + wiggle ... wiggle format + 2nd word: + read1_5p ... signal from only 5' of the 1st read, useful for CAGE/RAMPAGE etc + read2 ... signal from only 2nd read + +outWigStrand Stranded + string: strandedness of wiggle/bedGraph output + Stranded ... separate strands, str1 and str2 + Unstranded ... collapsed strands + +outWigReferencesPrefix - + string: prefix matching reference names to include in the output wiggle file, e.g. "chr", default "-" - include all references + +outWigNorm RPM + string: type of normalization for the signal + RPM ... reads per million of mapped reads + None ... no normalization, "raw" counts + +### Output Filtering +outFilterType Normal + string: type of filtering + Normal ... standard filtering using only current alignment + BySJout ... keep only those reads that contain junctions that passed filtering into SJ.out.tab + +outFilterMultimapScoreRange 1 + int: the score range below the maximum score for multimapping alignments + +outFilterMultimapNmax 10 + int: maximum number of loci the read is allowed to map to. Alignments (all of them) will be output only if the read maps to no more loci than this value. + Otherwise no alignments will be output, and the read will be counted as "mapped to too many loci" in the Log.final.out . + +outFilterMismatchNmax 10 + int: alignment will be output only if it has no more mismatches than this value. + +outFilterMismatchNoverLmax 0.3 + real: alignment will be output only if its ratio of mismatches to *mapped* length is less than or equal to this value. + +outFilterMismatchNoverReadLmax 1.0 + real: alignment will be output only if its ratio of mismatches to *read* length is less than or equal to this value. + + +outFilterScoreMin 0 + int: alignment will be output only if its score is higher than or equal to this value. + +outFilterScoreMinOverLread 0.66 + real: same as outFilterScoreMin, but normalized to read length (sum of mates' lengths for paired-end reads) + +outFilterMatchNmin 0 + int: alignment will be output only if the number of matched bases is higher than or equal to this value. + +outFilterMatchNminOverLread 0.66 + real: sam as outFilterMatchNmin, but normalized to the read length (sum of mates' lengths for paired-end reads). + +outFilterIntronMotifs None + string: filter alignment using their motifs + None ... no filtering + RemoveNoncanonical ... filter out alignments that contain non-canonical junctions + RemoveNoncanonicalUnannotated ... filter out alignments that contain non-canonical unannotated junctions when using annotated splice junctions database. The annotated non-canonical junctions will be kept. + +outFilterIntronStrands RemoveInconsistentStrands + string: filter alignments + RemoveInconsistentStrands ... remove alignments that have junctions with inconsistent strands + None ... no filtering + +### Output splice junctions (SJ.out.tab) +outSJtype Standard + string: type of splice junction output + Standard ... standard SJ.out.tab output + None ... no splice junction output + +### Output Filtering: Splice Junctions +outSJfilterReads All + string: which reads to consider for collapsed splice junctions output + All ... all reads, unique- and multi-mappers + Unique ... uniquely mapping reads only + +outSJfilterOverhangMin 30 12 12 12 + 4 integers: minimum overhang length for splice junctions on both sides for: (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. -1 means no output for that motif + does not apply to annotated junctions + +outSJfilterCountUniqueMin 3 1 1 1 + 4 integers: minimum uniquely mapping read count per junction for: (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. -1 means no output for that motif + Junctions are output if one of outSJfilterCountUniqueMin OR outSJfilterCountTotalMin conditions are satisfied + does not apply to annotated junctions + +outSJfilterCountTotalMin 3 1 1 1 + 4 integers: minimum total (multi-mapping+unique) read count per junction for: (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. -1 means no output for that motif + Junctions are output if one of outSJfilterCountUniqueMin OR outSJfilterCountTotalMin conditions are satisfied + does not apply to annotated junctions + +outSJfilterDistToOtherSJmin 10 0 5 10 + 4 integers>=0: minimum allowed distance to other junctions' donor/acceptor + does not apply to annotated junctions + +outSJfilterIntronMaxVsReadN 50000 100000 200000 + N integers>=0: maximum gap allowed for junctions supported by 1,2,3,,,N reads + i.e. by default junctions supported by 1 read can have gaps <=50000b, by 2 reads: <=100000b, by 3 reads: <=200000. by >=4 reads any gap <=alignIntronMax + does not apply to annotated junctions + +### Scoring +scoreGap 0 + int: splice junction penalty (independent on intron motif) + +scoreGapNoncan -8 + int: non-canonical junction penalty (in addition to scoreGap) + +scoreGapGCAG -4 + int: GC/AG and CT/GC junction penalty (in addition to scoreGap) + +scoreGapATAC -8 + int: AT/AC and GT/AT junction penalty (in addition to scoreGap) + +scoreGenomicLengthLog2scale -0.25 + int: extra score logarithmically scaled with genomic length of the alignment: scoreGenomicLengthLog2scale*log2(genomicLength) + +scoreDelOpen -2 + int: deletion open penalty + +scoreDelBase -2 + int: deletion extension penalty per base (in addition to scoreDelOpen) + +scoreInsOpen -2 + int: insertion open penalty + +scoreInsBase -2 + int: insertion extension penalty per base (in addition to scoreInsOpen) + +scoreStitchSJshift 1 + int: maximum score reduction while searching for SJ boundaries in the stitching step + + +### Alignments and Seeding + +seedSearchStartLmax 50 + int>0: defines the search start point through the read - the read is split into pieces no longer than this value + +seedSearchStartLmaxOverLread 1.0 + real: seedSearchStartLmax normalized to read length (sum of mates' lengths for paired-end reads) + +seedSearchLmax 0 + int>=0: defines the maximum length of the seeds, if =0 seed length is not limited + +seedMultimapNmax 10000 + int>0: only pieces that map fewer than this value are utilized in the stitching procedure + +seedPerReadNmax 1000 + int>0: max number of seeds per read + +seedPerWindowNmax 50 + int>0: max number of seeds per window + +seedNoneLociPerWindow 10 + int>0: max number of one seed loci per window + +seedSplitMin 12 + int>0: min length of the seed sequences split by Ns or mate gap + +seedMapMin 5 + int>0: min length of seeds to be mapped + +alignIntronMin 21 + int: minimum intron size, genomic gap is considered intron if its length>=alignIntronMin, otherwise it is considered Deletion + +alignIntronMax 0 + int: maximum intron size, if 0, max intron size will be determined by (2^winBinNbits)*winAnchorDistNbins + +alignMatesGapMax 0 + int: maximum gap between two mates, if 0, max intron gap will be determined by (2^winBinNbits)*winAnchorDistNbins + +alignSJoverhangMin 5 + int>0: minimum overhang (i.e. block size) for spliced alignments + +alignSJstitchMismatchNmax 0 -1 0 0 + 4*int>=0: maximum number of mismatches for stitching of the splice junctions (-1: no limit). + (1) non-canonical motifs, (2) GT/AG and CT/AC motif, (3) GC/AG and CT/GC motif, (4) AT/AC and GT/AT motif. + +alignSJDBoverhangMin 3 + int>0: minimum overhang (i.e. block size) for annotated (sjdb) spliced alignments + +alignSplicedMateMapLmin 0 + int>0: minimum mapped length for a read mate that is spliced + +alignSplicedMateMapLminOverLmate 0.66 + real>0: alignSplicedMateMapLmin normalized to mate length + +alignWindowsPerReadNmax 10000 + int>0: max number of windows per read + +alignTranscriptsPerWindowNmax 100 + int>0: max number of transcripts per window + +alignTranscriptsPerReadNmax 10000 + int>0: max number of different alignments per read to consider + +alignEndsType Local + string: type of read ends alignment + Local ... standard local alignment with soft-clipping allowed + EndToEnd ... force end-to-end read alignment, do not soft-clip + Extend5pOfRead1 ... fully extend only the 5p of the read1, all other ends: local alignment + Extend5pOfReads12 ... fully extend only the 5p of the both read1 and read2, all other ends: local alignment + +alignEndsProtrude 0 ConcordantPair + int, string: allow protrusion of alignment ends, i.e. start (end) of the +strand mate downstream of the start (end) of the -strand mate + 1st word: int: maximum number of protrusion bases allowed + 2nd word: string: + ConcordantPair ... report alignments with non-zero protrusion as concordant pairs + DiscordantPair ... report alignments with non-zero protrusion as discordant pairs + +alignSoftClipAtReferenceEnds Yes + string: allow the soft-clipping of the alignments past the end of the chromosomes + Yes ... allow + No ... prohibit, useful for compatibility with Cufflinks + +alignInsertionFlush None + string: how to flush ambiguous insertion positions + None ... insertions are not flushed + Right ... insertions are flushed to the right + +### Paired-End reads +peOverlapNbasesMin 0 + int>=0: minimum number of overlapping bases to trigger mates merging and realignment. Specify >0 value to switch on the "merginf of overlapping mates" algorithm. + +peOverlapMMp 0.01 + real, >=0 & <1: maximum proportion of mismatched bases in the overlap area + +### Windows, Anchors, Binning + +winAnchorMultimapNmax 50 + int>0: max number of loci anchors are allowed to map to + +winBinNbits 16 + int>0: =log2(winBin), where winBin is the size of the bin for the windows/clustering, each window will occupy an integer number of bins. + +winAnchorDistNbins 9 + int>0: max number of bins between two anchors that allows aggregation of anchors into one window + +winFlankNbins 4 + int>0: log2(winFlank), where win Flank is the size of the left and right flanking regions for each window + +winReadCoverageRelativeMin 0.5 + real>=0: minimum relative coverage of the read sequence by the seeds in a window, for STARlong algorithm only. + +winReadCoverageBasesMin 0 + int>0: minimum number of bases covered by the seeds in a window , for STARlong algorithm only. + +### Chimeric Alignments +chimOutType Junctions + string(s): type of chimeric output + Junctions ... Chimeric.out.junction + SeparateSAMold ... output old SAM into separate Chimeric.out.sam file + WithinBAM ... output into main aligned BAM files (Aligned.*.bam) + WithinBAM HardClip ... (default) hard-clipping in the CIGAR for supplemental chimeric alignments (default if no 2nd word is present) + WithinBAM SoftClip ... soft-clipping in the CIGAR for supplemental chimeric alignments + +chimSegmentMin 0 + int>=0: minimum length of chimeric segment length, if ==0, no chimeric output + +chimScoreMin 0 + int>=0: minimum total (summed) score of the chimeric segments + +chimScoreDropMax 20 + int>=0: max drop (difference) of chimeric score (the sum of scores of all chimeric segments) from the read length + +chimScoreSeparation 10 + int>=0: minimum difference (separation) between the best chimeric score and the next one + +chimScoreJunctionNonGTAG -1 + int: penalty for a non-GT/AG chimeric junction + +chimJunctionOverhangMin 20 + int>=0: minimum overhang for a chimeric junction + +chimSegmentReadGapMax 0 + int>=0: maximum gap in the read sequence between chimeric segments + +chimFilter banGenomicN + string(s): different filters for chimeric alignments + None ... no filtering + banGenomicN ... Ns are not allowed in the genome sequence around the chimeric junction + +chimMainSegmentMultNmax 10 + int>=1: maximum number of multi-alignments for the main chimeric segment. =1 will prohibit multimapping main segments. + +chimMultimapNmax 0 + int>=0: maximum number of chimeric multi-alignments + 0 ... use the old scheme for chimeric detection which only considered unique alignments + +chimMultimapScoreRange 1 + int>=0: the score range for multi-mapping chimeras below the best chimeric score. Only works with --chimMultimapNmax > 1 + +chimNonchimScoreDropMin 20 + int>=0: to trigger chimeric detection, the drop in the best non-chimeric alignment score with respect to the read length has to be greater than this value + +chimOutJunctionFormat 0 + int: formatting type for the Chimeric.out.junction file + 0 ... no comment lines/headers + 1 ... comment lines at the end of the file: command line and Nreads: total, unique/multi-mapping + +### Quantification of Annotations +quantMode - + string(s): types of quantification requested + - ... none + TranscriptomeSAM ... output SAM/BAM alignments to transcriptome into a separate file + GeneCounts ... count reads per gene + +quantTranscriptomeBAMcompression 1 + int: -2 to 10 transcriptome BAM compression level + -2 ... no BAM output + -1 ... default compression (6?) + 0 ... no compression + 10 ... maximum compression + +quantTranscriptomeSAMoutput BanSingleEnd_BanIndels_ExtendSoftclip + string: alignment filtering for TranscriptomeSAM output + BanSingleEnd_BanIndels_ExtendSoftclip ... prohibit indels and single-end alignments, extend softclips - compatible with RSEM + BanSingleEnd ... prohibit single-end alignments, allow indels and softclips + BanSingleEnd_ExtendSoftclip ... prohibit single-end alignments, extend softclips, allow indels + + +### 2-pass Mapping +twopassMode None + string: 2-pass mapping mode. + None ... 1-pass mapping + Basic ... basic 2-pass mapping, with all 1st pass junctions inserted into the genome indices on the fly + +twopass1readsN -1 + int: number of reads to process for the 1st step. Use very large number (or default -1) to map all reads in the first step. + + +### WASP parameters +waspOutputMode None + string: WASP allele-specific output type. This is re-implementation of the original WASP mappability filtering by Bryce van de Geijn, Graham McVicker, Yoav Gilad & Jonathan K Pritchard. Please cite the original WASP paper: Nature Methods 12, 1061–1063 (2015), https://www.nature.com/articles/nmeth.3582 . + SAMtag ... add WASP tags to the alignments that pass WASP filtering + +### STARsolo (single cell RNA-seq) parameters +soloType None + string(s): type of single-cell RNA-seq + CB_UMI_Simple ... (a.k.a. Droplet) one UMI and one Cell Barcode of fixed length in read2, e.g. Drop-seq and 10X Chromium. + CB_UMI_Complex ... multiple Cell Barcodes of varying length, one UMI of fixed length and one adapter sequence of fixed length are allowed in read2 only (e.g. inDrop, ddSeq). + CB_samTagOut ... output Cell Barcode as CR and/or CB SAm tag. No UMI counting. --readFilesIn cDNA_read1 [cDNA_read2 if paired-end] CellBarcode_read . Requires --outSAMtype BAM Unsorted [and/or SortedByCoordinate] + SmartSeq ... Smart-seq: each cell in a separate FASTQ (paired- or single-end), barcodes are corresponding read-groups, no UMI sequences, alignments deduplicated according to alignment start and end (after extending soft-clipped bases) + +soloCBtype Sequence + string: cell barcode type + Sequence: cell barcode is a sequence (standard option) + String: cell barcode is an arbitrary string + +soloCBwhitelist - + string(s): file(s) with whitelist(s) of cell barcodes. Only --soloType CB_UMI_Complex allows more than one whitelist file. + None ... no whitelist: all cell barcodes are allowed + +soloCBstart 1 + int>0: cell barcode start base + +soloCBlen 16 + int>0: cell barcode length + +soloUMIstart 17 + int>0: UMI start base + +soloUMIlen 10 + int>0: UMI length + +soloBarcodeReadLength 1 + int: length of the barcode read + 1 ... equal to sum of soloCBlen+soloUMIlen + 0 ... not defined, do not check + +soloBarcodeMate 0 + int: identifies which read mate contains the barcode (CB+UMI) sequence + 0 ... barcode sequence is on separate read, which should always be the last file in the --readFilesIn listed + 1 ... barcode sequence is a part of mate 1 + 2 ... barcode sequence is a part of mate 2 + +soloCBposition - + strings(s): position of Cell Barcode(s) on the barcode read. + Presently only works with --soloType CB_UMI_Complex, and barcodes are assumed to be on Read2. + Format for each barcode: startAnchor_startPosition_endAnchor_endPosition + start(end)Anchor defines the Anchor Base for the CB: 0: read start; 1: read end; 2: adapter start; 3: adapter end + start(end)Position is the 0-based position with of the CB start(end) with respect to the Anchor Base + String for different barcodes are separated by space. + Example: inDrop (Zilionis et al, Nat. Protocols, 2017): + --soloCBposition 0_0_2_-1 3_1_3_8 + +soloUMIposition - + string: position of the UMI on the barcode read, same as soloCBposition + Example: inDrop (Zilionis et al, Nat. Protocols, 2017): + --soloCBposition 3_9_3_14 + +soloAdapterSequence - + string: adapter sequence to anchor barcodes. Only one adapter sequence is allowed. + +soloAdapterMismatchesNmax 1 + int>0: maximum number of mismatches allowed in adapter sequence. + +soloCBmatchWLtype 1MM_multi + string: matching the Cell Barcodes to the WhiteList + Exact ... only exact matches allowed + 1MM ... only one match in whitelist with 1 mismatched base allowed. Allowed CBs have to have at least one read with exact match. + 1MM_multi ... multiple matches in whitelist with 1 mismatched base allowed, posterior probability calculation is used choose one of the matches. + Allowed CBs have to have at least one read with exact match. This option matches best with CellRanger 2.2.0 + 1MM_multi_pseudocounts ... same as 1MM_Multi, but pseudocounts of 1 are added to all whitelist barcodes. + 1MM_multi_Nbase_pseudocounts ... same as 1MM_multi_pseudocounts, multimatching to WL is allowed for CBs with N-bases. This option matches best with CellRanger >= 3.0.0 + EditDist_2 ... allow up to edit distance of 3 fpr each of the barcodes. May include one deletion + one insertion. Only works with --soloType CB_UMI_Complex. Matches to multiple passlist barcdoes are not allowed. Similar to ParseBio Split-seq pipeline. + +soloInputSAMattrBarcodeSeq - + string(s): when inputting reads from a SAM file (--readsFileType SAM SE/PE), these SAM attributes mark the barcode sequence (in proper order). + For instance, for 10X CellRanger or STARsolo BAMs, use --soloInputSAMattrBarcodeSeq CR UR . + This parameter is required when running STARsolo with input from SAM. + +soloInputSAMattrBarcodeQual - + string(s): when inputting reads from a SAM file (--readsFileType SAM SE/PE), these SAM attributes mark the barcode qualities (in proper order). + For instance, for 10X CellRanger or STARsolo BAMs, use --soloInputSAMattrBarcodeQual CY UY . + If this parameter is '-' (default), the quality 'H' will be assigned to all bases. + +soloStrand Forward + string: strandedness of the solo libraries: + Unstranded ... no strand information + Forward ... read strand same as the original RNA molecule + Reverse ... read strand opposite to the original RNA molecule + +soloFeatures Gene + string(s): genomic features for which the UMI counts per Cell Barcode are collected + Gene ... genes: reads match the gene transcript + SJ ... splice junctions: reported in SJ.out.tab + GeneFull ... full gene (pre-mRNA): count all reads overlapping genes' exons and introns + GeneFull_ExonOverIntron ... full gene (pre-mRNA): count all reads overlapping genes' exons and introns: prioritize 100% overlap with exons + GeneFull_Ex50pAS ... full gene (pre-RNA): count all reads overlapping genes' exons and introns: prioritize >50% overlap with exons. Do not count reads with 100% exonic overlap in the antisense direction. + +#####UnderDevelopment_begin : not supported - do not use + Transcript3p ... quantification of transcript for 3' protocols +#####UnderDevelopment_end + +soloMultiMappers Unique + string(s): counting method for reads mapping to multiple genes + Unique ... count only reads that map to unique genes + Uniform ... uniformly distribute multi-genic UMIs to all genes + Rescue ... distribute UMIs proportionally to unique+uniform counts (~ first iteration of EM) + PropUnique ... distribute UMIs proportionally to unique mappers, if present, and uniformly if not. + EM ... multi-gene UMIs are distributed using Expectation Maximization algorithm + +soloUMIdedup 1MM_All + string(s): type of UMI deduplication (collapsing) algorithm + 1MM_All ... all UMIs with 1 mismatch distance to each other are collapsed (i.e. counted once). + 1MM_Directional_UMItools ... follows the "directional" method from the UMI-tools by Smith, Heger and Sudbery (Genome Research 2017). + 1MM_Directional ... same as 1MM_Directional_UMItools, but with more stringent criteria for duplicate UMIs + Exact ... only exactly matching UMIs are collapsed. + NoDedup ... no deduplication of UMIs, count all reads. + 1MM_CR ... CellRanger2-4 algorithm for 1MM UMI collapsing. + +soloUMIfiltering - + string(s): type of UMI filtering (for reads uniquely mapping to genes) + - ... basic filtering: remove UMIs with N and homopolymers (similar to CellRanger 2.2.0). + MultiGeneUMI ... basic + remove lower-count UMIs that map to more than one gene. + MultiGeneUMI_All ... basic + remove all UMIs that map to more than one gene. + MultiGeneUMI_CR ... basic + remove lower-count UMIs that map to more than one gene, matching CellRanger > 3.0.0 . + Only works with --soloUMIdedup 1MM_CR + +soloOutFileNames Solo.out/ features.tsv barcodes.tsv matrix.mtx + string(s): file names for STARsolo output: + file_name_prefix gene_names barcode_sequences cell_feature_count_matrix + +soloCellFilter CellRanger2.2 3000 0.99 10 + string(s): cell filtering type and parameters + None ... do not output filtered cells + TopCells ... only report top cells by UMI count, followed by the exact number of cells + CellRanger2.2 ... simple filtering of CellRanger 2.2. + Can be followed by numbers: number of expected cells, robust maximum percentile for UMI count, maximum to minimum ratio for UMI count + The harcoded values are from CellRanger: nExpectedCells=3000; maxPercentile=0.99; maxMinRatio=10 + EmptyDrops_CR ... EmptyDrops filtering in CellRanger flavor. Please cite the original EmptyDrops paper: A.T.L Lun et al, Genome Biology, 20, 63 (2019): https://genomebiology.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13059-019-1662-y + Can be followed by 10 numeric parameters: nExpectedCells maxPercentile maxMinRatio indMin indMax umiMin umiMinFracMedian candMaxN FDR simN + The harcoded values are from CellRanger: 3000 0.99 10 45000 90000 500 0.01 20000 0.01 10000 + +soloOutFormatFeaturesGeneField3 "Gene Expression" + string(s): field 3 in the Gene features.tsv file. If "-", then no 3rd field is output. + +soloCellReadStats None + string: Output reads statistics for each CB + Standard ... standard output + +#####UnderDevelopment_begin : not supported - do not use +soloClusterCBfile - + string: file containing the cluster information for cell barcodes, two columns: CB cluster_index. Only used with --soloFeatures Transcript3p +#####UnderDevelopment_end diff --git a/src/star/star_genome_generate/script.sh b/src/star/star_genome_generate/script.sh new file mode 100644 index 00000000..cb3b906c --- /dev/null +++ b/src/star/star_genome_generate/script.sh @@ -0,0 +1,29 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +## VIASH START +## VIASH END + +mkdir -p $par_index + +STAR \ + --runMode genomeGenerate \ + --genomeDir $par_index \ + --genomeFastaFiles $par_genomeFastaFiles \ + ${meta_cpus:+--runThreadN "${meta_cpus}"} \ + ${par_sjdbGTFfile:+--sjdbGTFfile "${par_sjdbGTFfile}"} \ + ${par_sjdbOverhang:+--sjdbOverhang "${par_sjdbOverhang}"} \ + ${par_genomeSAindexNbases:+--genomeSAindexNbases "${par_genomeSAindexNbases}"} \ + ${par_sjdbGTFchrPrefix:+--sjdbGTFchrPrefix "${par_sjdbGTFchrPrefix}"} \ + ${par_sjdbGTFfeatureExon:+--sjdbGTFfeatureExon "${par_sjdbGTFfeatureExon}"} \ + ${par_sjdbGTFtagExonParentTranscript:+--sjdbGTFtagExonParentTranscript "${par_sjdbGTFtagExonParentTranscript}"} \ + ${par_sjdbGTFtagExonParentGene:+--sjdbGTFtagExonParentGene "${par_sjdbGTFtagExonParentGene}"} \ + ${par_sjdbGTFtagExonParentGeneName:+--sjdbGTFtagExonParentGeneName "${par_sjdbGTFtagExonParentGeneName}"} \ + ${par_sjdbGTFtagExonParentGeneType:+--sjdbGTFtagExonParentGeneType "${sjdbGTFtagExonParentGeneType}"} \ + ${par_limitGenomeGenerateRAM:+--limitGenomeGenerateRAM "${par_limitGenomeGenerateRAM}"} \ + ${par_genomeChrBinNbits:+--genomeChrBinNbits "${par_genomeChrBinNbits}"} \ + ${par_genomeSAsparseD:+--genomeSAsparseD "${par_genomeSAsparseD}"} \ + ${par_genomeSuffixLengthMax:+--genomeSuffixLengthMax "${par_genomeSuffixLengthMax}"} \ + ${par_genomeTransformType:+--genomeTransformType "${par_genomeTransformType}"} \ + ${par_genomeTransformVCF:+--genomeTransformVCF "${par_genomeTransformVCF}"} \ diff --git a/src/star/star_genome_generate/test.sh b/src/star/star_genome_generate/test.sh new file mode 100644 index 00000000..fd0e4775 --- /dev/null +++ b/src/star/star_genome_generate/test.sh @@ -0,0 +1,48 @@ +#!/bin/bash + +set -e + +## VIASH START +## VIASH END + +######################################################################################### + +echo "> Prepare test data" + +cat > genome.fasta <<'EOF' +>chr1 +TGGCATGAGCCAACGAACGCTGCCTCATAAGCCTCACACATCCGCGCCTATGTTGTGACTCTCTGTGAGCGTTCGTGGG +GCTCGTCACCACTATGGTTGGCCGGTTAGTAGTGTGACTCCTGGTTTTCTGGAGCTTCTTTAAACCGTAGTCCAGTCAA +TGCGAATGGCACTTCACGACGGACTGTCCTTAGCTCAGGGGA +EOF + +cat > genes.gtf <<'EOF' +chr1 example_source gene 0 50 . + . gene_id "gene1"; transcript_id "transcript1"; +chr1 example_source exon 20 40 . + . gene_id "gene1"; transcript_id "transcript1"; +EOF + +######################################################################################### + +echo "> Generate index" +"$meta_executable" \ + ${meta_cpus:+---cpus $meta_cpus} \ + --index "star_index/" \ + --genomeFastaFiles "genome.fasta" \ + --sjdbGTFfile "genes.gtf" \ + --genomeSAindexNbases 2 + +files=("Genome" "Log.out" "SA" "SAindex" "chrLength.txt" "chrName.txt" "chrNameLength.txt" "chrStart.txt" "exonGeTrInfo.tab" "exonInfo.tab" "geneInfo.tab" "genomeParameters.txt" "sjdbInfo.txt" "sjdbList.fromGTF.out.tab" "sjdbList.out.tab" "transcriptInfo.tab") + +echo ">> Check if output exists" +[ ! -d "star_index" ] && echo "Directory 'star_index' does not exist!" && exit 1 +for file in "${files[@]}"; do + [ ! -f "star_index/$file" ] && echo "File '$file' does not exist in 'star_index'." && exit 1 +done + +echo ">> Check contents of output files" +grep -q "200" "star_index/chrLength.txt" || (echo "Chromosome length in file 'chrLength.txt' is incorrect! " && exit 1) +grep -q "chr1" "star_index/chrName.txt" || (echo "Chromosome name in file 'chrName.txt' is incorrect! " && exit 1) +grep -q "chr1 200" "star_index/chrNameLength.txt" || (echo "Chromosome name in file 'chrNameLength.txt' is incorrect! " && exit 1) + +echo ">>> Test finished successfully" +exit 0 diff --git a/src/umi_tools/umi_tools_dedup/config.vsh.yaml b/src/umi_tools/umi_tools_dedup/config.vsh.yaml new file mode 100644 index 00000000..a02e70a1 --- /dev/null +++ b/src/umi_tools/umi_tools_dedup/config.vsh.yaml @@ -0,0 +1,303 @@ +name: umi_tools_dedup +namespace: umi_tools +description: | + Deduplicate reads based on the mapping co-ordinate and the UMI attached to the read. +keywords: [umi_tools, deduplication, dedup] +links: + homepage: https://umi-tools.readthedocs.io/en/latest/ + documentation: https://umi-tools.readthedocs.io/en/latest/reference/dedup.html + repository: https://github.com/CGATOxford/UMI-tools +references: + doi: 10.1101/gr.209601.116 +license: MIT + +argument_groups: + - name: Inputs + arguments: + - name: --input + alternatives: --stdin + type: file + description: Input BAM or SAM file. Use --in_sam to specify SAM format. + required: true + - name: --in_sam + type: boolean_true + description: | + By default, inputs are assumed to be in BAM format. Use this options to specify the use of SAM + format for input. + - name: --bai + type: file + description: BAM index + - name: --random_seed + type: integer + description: Random seed to initialize number generator with. + + - name: Outputs + arguments: + - name: --output + alternatives: --stdout + type: file + description: Deduplicated BAM file. + required: true + direction: output + - name: --out_sam + type: boolean_true + description: | + By default, outputa are written in BAM format. Use this options to specify the use of SAM format + for output. + - name: --paired + type: boolean_true + description: | + BAM is paired end - output both read pairs. This will also force the use of the template length + to determine reads with the same mapping coordinates. + - name: --output_stats + type: string + description: | + Generate files containing UMI based deduplication statistics files with this prefix in the file names. + - name: --extract_umi_method + type: string + choices: [read_id, tag, umis] + description: | + Specify the method by which the barcodes were encoded in the read. + The options are: + * read_id (default) + * tag + * umis + example: "read_id" + - name: --umi_tag + type: string + description: | + The tag containing the UMI sequence. This is only required if the extract_umi_method is set to tag. + - name: --umi_separator + type: string + description: | + The separator used to separate the UMI from the read sequence. This is only required if the + extract_umi_method is set to id_read. Default: `_`. + example: '_' + - name: --umi_tag_split + type: string + description: Separate the UMI in tag by and take the first element. + - name: --umi_tag_delimiter + type: string + description: Separate the UMI in by and concatenate the elements. + - name: --cell_tag + type: string + description: | + The tag containing the cell barcode sequence. This is only required if the extract_umi_method + is set to tag. + - name: --cell_tag_split + type: string + description: Separate the cell barcode in tag by and take the first element. + - name: --cell_tag_delimiter + type: string + description: Separate the cell barcode in by and concatenate the elements. + + - name: Grouping Options + arguments: + - name: --method + type: string + choices: [unique, percentile, cluster, adjacency, directional] + description: | + The method to use for grouping reads. + The options are: + * unique + * percentile + * cluster + * adjacency + * directional (default) + example: "directional" + - name: --edit_distance_threshold + type: integer + description: | + For the adjacency and cluster methods the threshold for the edit distance to connect two + UMIs in the network can be increased. The default value of 1 works best unless the UMI is + very long (>14bp). Default: `1`. + example: 1 + - name: --spliced_is_unique + type: boolean_true + description: | + Causes two reads that start in the same position on the same strand and having the same UMI + to be considered unique if one is spliced and the other is not. (Uses the 'N' cigar operation + to test for splicing). + - name: --soft_clip_threshold + type: integer + description: | + Mappers that soft clip will sometimes do so rather than mapping a spliced read if there is only + a small overhang over the exon junction. By setting this option, you can treat reads with at + least this many bases soft-clipped at the 3' end as spliced. Default: `4`. + example: 4 + - name: --multimapping_detection_method + type: string + description: | + If the sam/bam contains tags to identify multimapping reads, you can specify for use when selecting + the best read at a given loci. Supported tags are `NH`, `X0` and `XT`. If not specified, the read + with the highest mapping quality will be selected. + - name: --read_length + type: boolean_true + description: Use the read length as a criteria when deduping, for e.g. sRNA-Seq. + + - name: Single-cell RNA-Seq Options + arguments: + - name: --per_gene + type: boolean_true + description: | + Reads will be grouped together if they have the same gene. This is useful if your library prep + generates PCR duplicates with non identical alignment positions such as CEL-Seq. Note this option + is hardcoded to be on with the count command. I.e. counting is always performed per-gene. Must be + combined with either --gene_tag or --per_contig option. + - name: --gene_tag + type: string + description: | + Deduplicate per gene. The gene information is encoded in the bam read tag specified. + - name: --assigned_status_tag + type: string + description: | + BAM tag which describes whether a read is assigned to a gene. Defaults to the same value as given + for --gene_tag. + - name: --skip_tags_regex + type: string + description: | + Use in conjunction with the --assigned_status_tag option to skip any reads where the tag matches + this regex. Default ("^[__|Unassigned]") matches anything which starts with "__" or "Unassigned". + - name: --per_contig + type: boolean_true + description: | + Deduplicate per contig (field 3 in BAM; RNAME). All reads with the sam contig will be considered to + have the same alignment position. This is useful if you have aligned to a reference transcriptome + with one transcript per gene. If you have aligned to a transcriptome with more than one transcript + per gene, you can supply a map between transcripts and gene using the --gene_transcript_map option. + - name: --gene_transcript_map + type: file + description: | + A file containing a mapping between gene names and transcript names. The file should be tab + separated with the gene name in the first column and the transcript name in the second column. + - name: --per_cell + type: boolean_true + description: | + Reads will only be grouped together if they have the same cell barcode. Can be combined with + --per_gene. + + - name: SAM/BAM Options + arguments: + - name: --mapping_quality + type: integer + description: | + Minimium mapping quality (MAPQ) for a read to be retained. Default: `0`. + example: 0 + - name: --unmapped_reads + type: string + description: | + How unmapped reads should be handled. + The options are: + * "discard": Discard all unmapped reads. (default) + * "use": If read2 is unmapped, deduplicate using read1 only. Requires --paired. + * "output": Output unmapped reads/read pairs without UMI grouping/deduplication. Only available in umi_tools group. + example: "discard" + - name: --chimeric_pairs + type: string + choices: [discard, use, output] + description: | + How chimeric pairs should be handled. + The options are: + * "discard": Discard all chimeric read pairs. + * "use": Deduplicate using read1 only. (default) + * "output": Output chimeric pairs without UMI grouping/deduplication. Only available in + umi_tools group. + example: "use" + - name: --unpaired_reads + type: string + choices: [discard, use, output] + description: | + How unpaired reads should be handled. + The options are: + * "discard": Discard all unmapped reads. + * "use": If read2 is unmapped, deduplicate using read1 only. Requires --paired. (default) + * "output": Output unmapped reads/read pairs without UMI grouping/deduplication. Only available + in umi_tools group. + example: "use" + - name: --ignore_umi + type: boolean_true + description: Ignore the UMI and group reads using mapping coordinates only. + - name: --subset + type: double + description: | + Only consider a fraction of the reads, chosen at random. This is useful for doing saturation + analyses. + - name: --chrom + type: string + description: Only consider a single chromosome. This is useful for debugging/testing purposes. + + - name: Group/Dedup Options + arguments: + - name: --no_sort_output + type: boolean_true + description: | + By default, output is sorted. This involves the use of a temporary unsorted file (saved in + --temp_dir). Use this option to turn off sorting. + - name: --buffer_whole_contig + type: boolean_true + description: | + Forces dedup to parse an entire contig before yielding any reads for deduplication. This is the + only way to absolutely guarantee that all reads with the same start position are grouped together + for deduplication since dedup uses the start position of the read, not the alignment coordinate on + which the reads are sorted. However, by default, dedup reads for another 1000bp before outputting + read groups which will avoid any reads being missed with short read sequencing (<1000bp). + + - name: Common Options + arguments: + - name: --log + alternatives: -L + type: file + description: File with logging information. + - name: --log2stderr + type: boolean_true + description: Send logging information to stderr. + - name: --verbose + alternatives: -v + type: integer + description: | + Log level. The higher, the more output. Default: `0`. + example: 0 + - name: --error + alternatives: -E + type: file + description: File with error information. + - name: --temp_dir + type: string + description: | + Directory for temporary files. If not set, the bash environmental variable TMPDIR is used. + - name: --compresslevel + type: integer + description: | + Level of Gzip compression to use. Default=6 matches GNU gzip rather than python gzip default. + Default: `6`. + example: 6 + - name: --timeit + type: file + description: Store timing information in file. + - name: --timeit_name + type: string + description: | + Name in timing file for this class of jobs. Default: `all`. + example: "all" + - name: --timeit_header + type: string + description: Add header for timing information. + +resources: + - type: bash_script + path: script.sh +test_resources: + - type: bash_script + path: test.sh + - type: file + path: test_data +engines: + - type: docker + image: quay.io/biocontainers/umi_tools:1.1.5--py39hf95cd2a_1 + setup: + - type: docker + run: | + umi_tools -v | sed 's/ version//g' > /var/software_versions.txt +runners: +- type: executable +- type: nextflow \ No newline at end of file diff --git a/src/umi_tools/umi_tools_dedup/help.txt b/src/umi_tools/umi_tools_dedup/help.txt new file mode 100644 index 00000000..87baf322 --- /dev/null +++ b/src/umi_tools/umi_tools_dedup/help.txt @@ -0,0 +1,113 @@ +''' +Generated from the following UMI-tools documentation: + https://umi-tools.readthedocs.io/en/latest/common_options.html#common-options + https://umi-tools.readthedocs.io/en/latest/reference/dedup.html +''' + + +dedup - Deduplicate reads using UMI and mapping coordinates + +Usage: umi_tools dedup [OPTIONS] [--stdin=IN_BAM] [--stdout=OUT_BAM] + + note: If --stdout is ommited, standard out is output. To + generate a valid BAM file on standard out, please + redirect log with --log=LOGFILE or --log2stderr + +Common UMI-tools Options: + + -S, --stdout File where output is to go [default = stdout]. + -L, --log File with logging information [default = stdout]. + --log2stderr Send logging information to stderr [default = False]. + -v, --verbose Log level. The higher, the more output [default = 1]. + -E, --error File with error information [default = stderr]. + --temp-dir Directory for temporary files. If not set, the bash environmental variable TMPDIR is used[default = None]. + --compresslevel Level of Gzip compression to use. Default=6 matches GNU gzip rather than python gzip default (which is 9) + + profiling and debugging options: + --timeit Store timing information in file [default=none]. + --timeit-name Name in timing file for this class of jobs [default=all]. + --timeit-header Add header for timing information [default=none]. + --random-seed Random seed to initialize number generator with [default=none]. + +Dedup Options: + --output-stats= One can use the edit distance between UMIs at the same position as an quality control for the + deduplication process by comparing with a null expectation of random sampling. For the random + sampling, the observed frequency of UMIs is used to more reasonably model the null expectation. + Use this option to generate a stats outfiles called: + [PREFIX]_stats_edit_distance.tsv + Reports the (binned) average edit distance between the UMIs at each position. + In addition, this option will trigger reporting of further summary statistics for the UMIs which + may be informative for selecting the optimal deduplication method or debugging. + Each unique UMI sequence may be observed [0-many] times at multiple positions in the BAM. The + following files report the distribution for the frequencies of each UMI. + [PREFIX]_stats_per_umi_per_position.tsv + Tabulates the counts for unique combinations of UMI and position. + [PREFIX]_stats_per_umi_per.tsv + The _stats_per_umi_per.tsv table provides UMI-level summary statistics. + --extract-umi-method= How are the barcodes encoded in the read? + Options are: read_id (default), tag, umis + --umi-separator= Separator between read id and UMI. See --extract-umi-method above. Default=_ + --umi-tag= Tag which contains UMI. See --extract-umi-method above + --umi-tag-split= Separate the UMI in tag by SPLIT and take the first element + --umi-tag-delimiter= Separate the UMI in by DELIMITER and concatenate the elements + --cell-tag= Tag which contains cell barcode. See --extract-umi-method above + --cell-tag-split= Separate the cell barcode in tag by SPLIT and take the first element + --cell-tag-delimiter= Separate the cell barcode in by DELIMITER and concatenate the elements + --method= What method to use to identify group of reads with the same (or similar) UMI(s)? + All methods start by identifying the reads with the same mapping position. + The simplest methods, unique and percentile, group reads with the exact same UMI. + The network-based methods, cluster, adjacency and directional, build networks where + nodes are UMIs and edges connect UMIs with an edit distance <= threshold (usually 1). + The groups of reads are then defined from the network in a method-specific manner. + For all the network-based methods, each read group is equivalent to one read count for the gene. + --edit-distance-threshold= For the adjacency and cluster methods the threshold for the edit distance to connect + two UMIs in the network can be increased. The default value of 1 works best unless + the UMI is very long (>14bp). + --spliced-is-unique Causes two reads that start in the same position on the same strand and having the + same UMI to be considered unique if one is spliced and the other is not. + (Uses the 'N' cigar operation to test for splicing). + --soft-clip-threshold= Mappers that soft clip will sometimes do so rather than mapping a spliced read if + there is only a small overhang over the exon junction. By setting this option, you + can treat reads with at least this many bases soft-clipped at the 3' end as spliced. + Default=4. + --multimapping-detection-method= If the sam/bam contains tags to identify multimapping reads, you can specify + for use when selecting the best read at a given loci. Supported tags are "NH", + "X0" and "XT". If not specified, the read with the highest mapping quality will be selected. + --read-length Use the read length as a criteria when deduping, for e.g sRNA-Seq. + --per-gene Reads will be grouped together if they have the same gene. This is useful if your + library prep generates PCR duplicates with non identical alignment positions such as CEL-Seq. + Note this option is hardcoded to be on with the count command. I.e counting is always + performed per-gene. Must be combined with either --gene-tag or --per-contig option. + --gene-tag= Deduplicate per gene. The gene information is encoded in the bam read tag specified + --assigned-status-tag= BAM tag which describes whether a read is assigned to a gene. Defaults to the same value + as given for --gene-tag + --skip-tags-regex= Use in conjunction with the --assigned-status-tag option to skip any reads where the + tag matches this regex. Default ("^[__|Unassigned]") matches anything which starts with "__" + or "Unassigned": + --per-contig Deduplicate per contig (field 3 in BAM; RNAME). All reads with the same contig will be + considered to have the same alignment position. This is useful if you have aligned to a + reference transcriptome with one transcript per gene. If you have aligned to a transcriptome + with more than one transcript per gene, you can supply a map between transcripts and gene + using the --gene-transcript-map option + --gene-transcript-map= File mapping genes to transcripts (tab separated) + --per-cell Reads will only be grouped together if they have the same cell barcode. Can be combined with --per-gene. + --mapping-quality= Minimium mapping quality (MAPQ) for a read to be retained. Default is 0. + --unmapped-reads=